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TT病毒ORF_2在Cos7细胞中的表达及蛋白质定位
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作者 何燕 叶林柏 +5 位作者 李礼 廖庆姣 特马力 佘应龙 叶力 吴正辉 《中国病毒学》 CSCD 2004年第5期431-434,F002,共5页
应用PCR方法从含有TTVirusORF2的质粒pET-His-TTV2中扩增出606bp的蛋白质编码区,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1中以表达成GFP-VP2融合蛋白。构建出的重组质粒pEGFPTTV2经过酶切分析和PCR鉴定。用脂质体介导法将pEGFPTTV2质粒DNA转染... 应用PCR方法从含有TTVirusORF2的质粒pET-His-TTV2中扩增出606bp的蛋白质编码区,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1中以表达成GFP-VP2融合蛋白。构建出的重组质粒pEGFPTTV2经过酶切分析和PCR鉴定。用脂质体介导法将pEGFPTTV2质粒DNA转染Cos7细胞,通过RT-PCR分析,证实细胞中存在ORF2基因的转录产物。用共聚焦显微镜结合PI染色技术研究TTVVP2蛋白在细胞中的分布情况。结果表明,TTVVP2分布在细胞质中和细胞核膜内侧。因此推测VP2作为一种非结构蛋白,功能可能是参与病毒DNA的复制或转录。 展开更多
关键词 输血传播病毒(ttv)orf2 GFP VP2 PI 蛋白质定位
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