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茄子花青素合成中SmTTG1、SmGL3和SmTT8的表达及其蛋白质间的相互作用 被引量:22
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作者 刘新宇 韩洪强 +2 位作者 葛海燕 蒋明敏 陈火英 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2241-2249,共9页
采用同源克隆方法从茄子(Solanum melongena L.)中分离得到3个基因,分别命名为Sm TTG1、Sm GL3和Sm TT8。序列分析表明,Sm TTG1的c DNA全长1 220 bp,开放阅读框为1 029 bp,编码342个氨基酸,与马铃薯(S.tuberosum L.)TTG1基因序列同源性... 采用同源克隆方法从茄子(Solanum melongena L.)中分离得到3个基因,分别命名为Sm TTG1、Sm GL3和Sm TT8。序列分析表明,Sm TTG1的c DNA全长1 220 bp,开放阅读框为1 029 bp,编码342个氨基酸,与马铃薯(S.tuberosum L.)TTG1基因序列同源性达到94%,成熟蛋白等电点为4.90,具有典型的WD结构域;Sm GL3的c DNA全长2 329 bp,开放阅读框为1 887 bp,编码628个氨基酸,与马铃薯GL3基因序列相似性达到94%,蛋白等电点为5.61,有典型的HLH结构域;Sm TT8的c DNA全长2 242 bp,开放阅读框为1 896 bp,编码631个氨基酸,与马铃薯TT8基因序列同源性为85%,蛋白等电点为5.18,有典型的HLH结构域。荧光定量检测结果表明,Sm TTG1、Sm GL3和Sm TT8在茄子根、茎、叶、花、果皮和果肉中均有表达,但表达水平具有组织特异性。酵母双杂交结果表明,Sm TTG1与Sm TT8、Sm GL3之间有相互作用,并且Sm TTG1、Sm GL3和Sm TT8都与Sm MYB之间发生作用。推测Sm TTG1为WD40转录因子,Sm GL3和Sm TT8为b HLH转录因子,它们都参与调控茄子花青素的合成。 展开更多
关键词 茄子 花青素 SM TTG1 SM GL3 SM tt8 酵母双杂交
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芸薹属作物TT8基因鉴定与生物信息学分析 被引量:2
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作者 陈镇 何晓莹 +5 位作者 任静 俎峰 赵凯琴 李根泽 黄晓霞 程小毛 《西南林业大学学报(自然科学)》 CAS 北大核心 2022年第6期44-55,共12页
为探明芸薹属作物TT8基因的序列特征和基因组组成,以拟南芥TT8基因为种子序列,利用BLAST工具对芸薹属作物(白菜、甘蓝、甘蓝型油菜、芥菜、黑芥)TT8同源基因进行系统鉴定,对其核苷酸和氨基酸序列进行比较分析。结果表明:在芸薹属作物中... 为探明芸薹属作物TT8基因的序列特征和基因组组成,以拟南芥TT8基因为种子序列,利用BLAST工具对芸薹属作物(白菜、甘蓝、甘蓝型油菜、芥菜、黑芥)TT8同源基因进行系统鉴定,对其核苷酸和氨基酸序列进行比较分析。结果表明:在芸薹属作物中共鉴定出7个AtTT8同源基因,其中甘蓝型油菜2个、白菜1个、甘蓝1个、芥菜2个、黑芥1个。芸薹属作物7个TT8基因的基本理化性质、亚细胞定位和蛋白三级结构等均无明显差异;氨基酸序列高度相似,均属bHLH超家族,其中甘蓝型油菜两个TT8同源拷贝分别同白菜与甘蓝聚为一类,亲缘关系紧密;sgRNA分析获得了4条在7个AtTT8同源基因中均高度保守存在的sgRNA位点,推测与TT8基因功能高度相关。最后,本研究还分析43份甘蓝型油菜种质材料的重测序数据,在甘蓝型油菜TT8两个同源基因中共检测到11个多态性位点,包括4个SNP和7个InDel,总频率分别为0.00109和0.00199,均位于5’UTR区。 展开更多
关键词 芸薹属 tt8基因 生物信息学 sgRNA
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芥菜型油菜BjA09.TT8和BjB08.TT8基因调节类黄酮的合成 被引量:1
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作者 黄伟 高国应 +8 位作者 吴金锋 刘丽莉 张大为 周定港 成洪涛 张凯旋 周美亮 李莓 严明理 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1169-1180,共12页
bHLH类转录因子TT8具有调控植物类黄酮合成的功能。本研究采用同源克隆法,在芥菜型油菜紫叶芥中获得了2个TT8拷贝,分别命名为BjA09.TT8和BjB08.TT8,它们分别编码521和517个氨基酸。定量表达分析表明,这2个拷贝在叶中的表达量均显著高于... bHLH类转录因子TT8具有调控植物类黄酮合成的功能。本研究采用同源克隆法,在芥菜型油菜紫叶芥中获得了2个TT8拷贝,分别命名为BjA09.TT8和BjB08.TT8,它们分别编码521和517个氨基酸。定量表达分析表明,这2个拷贝在叶中的表达量均显著高于茎和根中,且都响应茉莉酸(JA)信号,在50μmol L^(–1)的茉莉酸甲酯处理0.5 h后表达量均达到峰值;利用毛状根体系过表达发现,BjA09.TT8和BjB08.TT8分别可使紫叶芥和绿叶芥菜型油菜四川黄籽的毛状根中总黄酮含量升高,同时对类黄酮合成基因Bj.CHS的表达具有促进作用,说明二者在功能上具有冗余性。分别在野生型拟南芥和拟南芥tt8突变体中过表达BjA09.TT8和BjB08.TT8发现,过表达拟南芥植株叶片颜色变紫,植株总黄酮和原花色素含量显著升高。本研究表明,BjA09.TT8和BjB08.TT8基因能够促进芥菜型油菜类黄酮的合成,为进一步解析芸薹属植物原花色素合成的调控机制提供了参考。 展开更多
关键词 芥菜型油菜 tt8 调节 类黄酮 原花色素
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滇水金凤转录因子TT8的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 李新艺 李洋 +3 位作者 向南星 李泽凤 黄美娟 黄海泉 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1813-1819,共7页
为探究滇水金凤(Impatiens uliginosa L.)TT8(TRANSPARENT TESTA 8)基因的功能和表达特性,并解析其对滇水金凤花色的影响,研究以滇水金凤花器官为材料,通过RT-PCR等技术克隆IuTT8基因,并对其进行生物信息学分析;利用qRT-PCR分析该基因... 为探究滇水金凤(Impatiens uliginosa L.)TT8(TRANSPARENT TESTA 8)基因的功能和表达特性,并解析其对滇水金凤花色的影响,研究以滇水金凤花器官为材料,通过RT-PCR等技术克隆IuTT8基因,并对其进行生物信息学分析;利用qRT-PCR分析该基因在不同花色和不同花发育阶段的表达模式。结果表明,(1)成功克隆得到滇水金凤IuTT8基因,其编码区全长为2136 bp,编码711 aa,为亲水性不稳定蛋白,gDNA全长为3938 bp,共有6个内含子;结构域分析发现该蛋白属于bHLH超家族成员,与喜马拉雅凤仙花、山茶等物种的TT8蛋白同源且Motif基序相似。(2)IuTT8与同属植物喜马拉雅凤仙花的聚在一支,相似性约86.34%;多序列比对和系统进化分析显示TT8蛋白的结构域高度保守。(3)IuTT8基因在4种不同花色滇水金凤及其4个不同发育阶段均有表达,除白色外,其表达量均随花发育的进行呈先升后降的趋势;且IuTT8基因的表达量与花色呈正相关,其中以深红色表达量最高,白色表达量最低,深红色S3的表达量约为白色S2时期的48倍。研究表明滇水金凤IuTT8基因与花色正相关,推测其在滇水金凤花色的调控中发挥重要作用。 展开更多
关键词 滇水金凤 花色 tt8基因 表达分析
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芸薹属TT8基因家族RNA干扰载体的构建
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作者 张瑞熙 柴友荣 殷家明 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第6期43-46,共4页
类黄酮是植物的重要次生代谢物质,拟南芥透明种皮8(TT8)是调控花青素苷、原花青素、种皮黏液生物合成的1个转录因子,参与决定植株彩色、种皮色泽、种皮黏液分泌等性状。本研究采用PCR法从甘蓝型油菜中克隆了592 bp(不计人工酶切位点)的... 类黄酮是植物的重要次生代谢物质,拟南芥透明种皮8(TT8)是调控花青素苷、原花青素、种皮黏液生物合成的1个转录因子,参与决定植株彩色、种皮色泽、种皮黏液分泌等性状。本研究采用PCR法从甘蓝型油菜中克隆了592 bp(不计人工酶切位点)的芸薹属TT8基因家族的RNA干扰片段,将其反义片段、正义片段采用NcoⅠ+SwaⅠ、BamHⅠ+XbaⅠ双酶切方式分别插入到改进型植物RNA干扰平台载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成了11 380 bp的重组载体pFGC5941M-BTT8Ⅰ(简称为pBTT8Ⅰ),多种PCR鉴定结果表明构建成功;然后转化根癌农杆菌,获得工程菌株,可用于芸薹属植物相关性状的分子机理研究和遗传修饰。 展开更多
关键词 芸薹属 甘蓝型油菜 RNAI 透明种皮8(tt8) 载体构建
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芥菜型油菜酵母单杂交系统的建立及调控BjTT8A表达的转录因子分离
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作者 袁玉辉 肖强 +2 位作者 唐武建 刘忠松 刘显军 《宜春学院学报》 2019年第12期10-16,共7页
BjTT8A基因是芥菜型油菜的类黄酮合成途径中重要的调控基因之一。为进一步分离调节BjTT8A基因表达的转录因子,建立了芥菜型油菜酵母单杂交cDNA文库,以BjTT8A的启动子构建诱饵融合载体,筛选cDNA文库,获得33个阳性克隆。序列分析结果表明... BjTT8A基因是芥菜型油菜的类黄酮合成途径中重要的调控基因之一。为进一步分离调节BjTT8A基因表达的转录因子,建立了芥菜型油菜酵母单杂交cDNA文库,以BjTT8A的启动子构建诱饵融合载体,筛选cDNA文库,获得33个阳性克隆。序列分析结果表明,31个克隆与十字花科植物甘蓝型油菜,白菜,萝卜,荠菜的蛋白具有高度同源性,对其氨基酸序列进行同源比对和功能结构域分析,发现涉及光调控的捕光叶绿素a/b结合蛋白cp29.2,蛋白质积累的锌金属蛋白酶egy2,谷胱甘肽S-转移酶蛋白GSTF9等。研究结果为分离调控BjTT8A基因表达的转录因子提供了候选基因。 展开更多
关键词 tt8A 芥菜型油菜 启动子 酵母单杂交 转录因子
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黄籽油菜高油积累“密码”被揭示
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《致富天地》 2025年第5期47-47,共1页
记者3月10日从湖南农业大学获悉,该校农学院教授刘忠松团队联合国内外相关单位,历经20余年攻关,揭示了黄籽油菜高油积累的“底层逻辑”,并根据基因演变过程阐明了我国西南地区是这类油菜的单一起源地。相关成果日前在线发表于国际学术... 记者3月10日从湖南农业大学获悉,该校农学院教授刘忠松团队联合国内外相关单位,历经20余年攻关,揭示了黄籽油菜高油积累的“底层逻辑”,并根据基因演变过程阐明了我国西南地区是这类油菜的单一起源地。相关成果日前在线发表于国际学术期刊《美国科学院院报》。通过全基因组关联分析,他们发现了另一个基因STKs,并证实它与基因TT8s协同调控了黄籽油菜的种子颜色、低皮壳率和高油分积累,进一步揭示了黄籽油菜高油积累的分子基础。种植一亩黄籽油菜,比种植黑籽油菜多产油10~20公斤,对保障我国食用油安全具有重要意义。 展开更多
关键词 高油积累 tt8s基因 黄籽油菜 基因STKs
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Effects of Transparent Testa8(TT8) gene and Homeobox12(HB12) gene silencing in alfalfa(Medicago sativa L.) on molecular structure spectral profile in relation to energy,degradation,and fermentation characteristics in ruminant systems
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作者 Yaogeng Lei Abdelali Hannoufa Peiqiang Yu 《Animal Nutrition》 SCIE CAS CSCD 2023年第3期79-87,共9页
Alfalfa(Medicago sativa L.) is a legume forage that is widely cultivated owing to its high biomass yield and favorable nutrient values. However, alfalfa contains relatively high lignin, which limits its utilization.Do... Alfalfa(Medicago sativa L.) is a legume forage that is widely cultivated owing to its high biomass yield and favorable nutrient values. However, alfalfa contains relatively high lignin, which limits its utilization.Downregulation of two transcriptional factors, Transparent Testa8(TT8) and Homeobox12(HB12), has been proposed to reduce lignin content in alfalfa. Therefore, silencing of TT8(TT8i) and HB12(HB12i) in alfalfa was achieved by RNAi technology. The objective of this project was to determine effect of gene modification through silencing of TT8 and HB12 genes in alfalfa plants on lignin and phenolic content,bioenergic value, nutrient supply from rumen degradable and undegradable fractions, and in vitro ammonia production in response to the silencing of TT8 and HB12 genes in alfalfa. All gene silenced alfalfa plants(5 TT8i and 11 HB12i) were grown under greenhouse conditions with wild type as a control.Samples were analyzed for bioactive compounds, degradation fractions, truly digestible nutrients, energetic values and in vitro ammonia productions in ruminant systems. Furthermore, relationships between physiochemical, metabolic and fermentation characteristics and molecular spectral parameters were determined using vibrational molecular spectroscopy. Results showed that the HB12i had higher lignin, while TT8i had higher phenolics. Both silenced genotypes had higher rumen slowly degraded carbohydrate fractions and truly digestible neutral detergent fiber, but lower rumen degradable protein fractions. Moreover, the HB12i had lower truly digestible crude protein, energetic values and ammonia production compared with other silenced genotypes. In addition, in relation to the nutritive values of alfalfa, structural carbohydrate parameters were negatively correlated, whereas alpha/beta ratio in protein structure was positively correlated. Furthermore, good predictions were obtained for degradation of protein and carbohydrate fractions and energy values from molecular spectral parameters. In conclusion, silencing of the TT8 and HB12 genes decreased protein availability and increased fiber availability. Silencing of the HB12 gene also increased lignin and decreased energy and rumen ammonia production. Moreover, nutritional alterations were closely correlated with molecular spectral parameters. Therefore, gene modification through silencing the TT8 and HB12 genes in alfalfa influenced physiochemical, metabolic and fermentation characteristics. 展开更多
关键词 Gene silencing Homeobox12(HB12)gene Transparent Testa8(tt8)gene Alfalfa(Medicago sativa L.) Ruminant system Fermentation and degradation
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