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TSSC3通过调控PI3K/Akt-细胞失巢凋亡途径抑制肾小管上皮的纤维化表型
被引量：
6
1
作者
刘兴红
陈雁
+1 位作者
肖菲
戴欢子
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第5期421-431,共11页
目的研究印记基因STF cDNA 3(TSSC3)对肾脏来源的肌成纤维细胞(myofibroblast,MyoFb)抗失巢凋亡和促纤维化能力的影响及其相关机制。方法使用TGF-β1处理人肾近曲小管上皮细胞系HK-2诱导其成为MyoFb,并采用超低粘附板悬浮培养法以及外源...
目的研究印记基因STF cDNA 3(TSSC3)对肾脏来源的肌成纤维细胞(myofibroblast,MyoFb)抗失巢凋亡和促纤维化能力的影响及其相关机制。方法使用TGF-β1处理人肾近曲小管上皮细胞系HK-2诱导其成为MyoFb,并采用超低粘附板悬浮培养法以及外源性RGD多肽培养法建立失巢凋亡模型;使用含或不含TGF-β1的细胞培养基处理稳定转染过表达TSSC3慢病毒的HK-2细胞,采用流式细胞术及CCK-8检测TSSC3对MyoFb及HK-2细胞失巢凋亡、增殖的影响;qRT-PCR及Western blot检测PI3K/AKT介导的凋亡途径以及纤维化相关分子mRNA及蛋白表达情况。结果TGF-β1明显增加HK-2中α-SMA的表达、降低Villin的表达(P<0.05),且具有时间依赖性,表明TGF-β1成功诱导HK-2细胞成为MyoFb,且MyoFb的失巢凋亡率明显低于HK-2细胞(P<0.01),表明TGF-β1诱导的MyoFb具有失巢凋亡抵抗的能力。相对于HK-2细胞,MyoFb增殖率明显增加、失巢凋亡率明显降低(P<0.01),PI3K/AKT通路抑制剂LY204002则部分逆转了上述改变。过表达TSSC3明显抑制失巢凋亡模型中MyoFb中p-PI3K、p-AKT的表达,增加cleaved-caspase 3的表达。过表达TSSC3明显抑制MyoFb和HK-2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤连蛋白、PAI-1、MMP-2、MMP-9的mRNA及蛋白的表达。结论TSSC3通过下调PI3K/Akt途径抑制肾脏来源MyoFb的失巢凋亡抵抗及促纤维化的能力。
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关键词
肾纤维化
tssc3
TGF-Β1
HK-2细胞
PI3K/AKT信号通路
原文传递
印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响
被引量：
2
2
作者
高自然
赵郭盛
+2 位作者
彭动斌
吕杨帆
郭乔楠
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期855-861,共7页
目的通过体内外实验观察印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响。方法利用慢病毒建立稳定过表达TSSC3的骨肉瘤MTH细胞株,收集骨肉瘤细胞上清制备条件培养基(conditional medium,CM);通过划痕实验、Transwell实验及小管形成实验观察CM对...
目的通过体内外实验观察印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响。方法利用慢病毒建立稳定过表达TSSC3的骨肉瘤MTH细胞株,收集骨肉瘤细胞上清制备条件培养基(conditional medium,CM);通过划痕实验、Transwell实验及小管形成实验观察CM对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的迁移和小管形成能力的影响;RT-PCR、Western blot及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨肉瘤细胞中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)mRNA及蛋白水平变化;建立裸鼠移植瘤模型,免疫组化检测肿瘤组织中VEGFA蛋白及微血管密度(microvessel density,MVD)的表达情况。结果过表达TSSC3(over TSSC3)组CM抑制内皮细胞迁移和小管形成,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR、Western blot及ELISA检测结果显示,overTSSC3组细胞较对照组VEGFA mRNA和蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);裸鼠移植瘤免疫组化检测结果显示,overTSSC3组肿瘤中VEGFA蛋白表达量及MVD明显低于对照组。结论印记基因TSSC3可能通过下调VEGFA的表达进而抑制骨肉瘤血管生成。
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关键词
tssc3
骨肉瘤
血管生成
血管内皮生长因子A
原文传递
题名
TSSC3通过调控PI3K/Akt-细胞失巢凋亡途径抑制肾小管上皮的纤维化表型
被引量：
6
1
作者
刘兴红
陈雁
肖菲
戴欢子
机构
陆军特色医学中心肾脏内科
出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第5期421-431,共11页
基金
重庆市自然科学基金面上项目(cstc2020jcyj-msxmX0013)。
文摘
目的研究印记基因STF cDNA 3(TSSC3)对肾脏来源的肌成纤维细胞(myofibroblast,MyoFb)抗失巢凋亡和促纤维化能力的影响及其相关机制。方法使用TGF-β1处理人肾近曲小管上皮细胞系HK-2诱导其成为MyoFb,并采用超低粘附板悬浮培养法以及外源性RGD多肽培养法建立失巢凋亡模型;使用含或不含TGF-β1的细胞培养基处理稳定转染过表达TSSC3慢病毒的HK-2细胞,采用流式细胞术及CCK-8检测TSSC3对MyoFb及HK-2细胞失巢凋亡、增殖的影响;qRT-PCR及Western blot检测PI3K/AKT介导的凋亡途径以及纤维化相关分子mRNA及蛋白表达情况。结果TGF-β1明显增加HK-2中α-SMA的表达、降低Villin的表达(P<0.05),且具有时间依赖性,表明TGF-β1成功诱导HK-2细胞成为MyoFb,且MyoFb的失巢凋亡率明显低于HK-2细胞(P<0.01),表明TGF-β1诱导的MyoFb具有失巢凋亡抵抗的能力。相对于HK-2细胞,MyoFb增殖率明显增加、失巢凋亡率明显降低(P<0.01),PI3K/AKT通路抑制剂LY204002则部分逆转了上述改变。过表达TSSC3明显抑制失巢凋亡模型中MyoFb中p-PI3K、p-AKT的表达,增加cleaved-caspase 3的表达。过表达TSSC3明显抑制MyoFb和HK-2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤连蛋白、PAI-1、MMP-2、MMP-9的mRNA及蛋白的表达。结论TSSC3通过下调PI3K/Akt途径抑制肾脏来源MyoFb的失巢凋亡抵抗及促纤维化的能力。
关键词
肾纤维化
tssc3
TGF-Β1
HK-2细胞
PI3K/AKT信号通路
Keywords
renal fibrosis
tssc3
TGF-β1
HK-2 cells
PI3K/Akt signaling pathway
分类号
R163 [医药卫生—公共卫生与预防医学]
R322.12 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
原文传递
题名
印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响
被引量：
2
2
作者
高自然
赵郭盛
彭动斌
吕杨帆
郭乔楠
机构
陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院病理科
重庆医科大学第一附属医院骨科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期855-861,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(81602591)
重庆市基础科学与前沿技术研究重点项目(CSTC2015jcyjBX0067)~~
文摘
目的通过体内外实验观察印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响。方法利用慢病毒建立稳定过表达TSSC3的骨肉瘤MTH细胞株,收集骨肉瘤细胞上清制备条件培养基(conditional medium,CM);通过划痕实验、Transwell实验及小管形成实验观察CM对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的迁移和小管形成能力的影响;RT-PCR、Western blot及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨肉瘤细胞中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)mRNA及蛋白水平变化;建立裸鼠移植瘤模型,免疫组化检测肿瘤组织中VEGFA蛋白及微血管密度(microvessel density,MVD)的表达情况。结果过表达TSSC3(over TSSC3)组CM抑制内皮细胞迁移和小管形成,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR、Western blot及ELISA检测结果显示,overTSSC3组细胞较对照组VEGFA mRNA和蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);裸鼠移植瘤免疫组化检测结果显示,overTSSC3组肿瘤中VEGFA蛋白表达量及MVD明显低于对照组。结论印记基因TSSC3可能通过下调VEGFA的表达进而抑制骨肉瘤血管生成。
关键词
tssc3
骨肉瘤
血管生成
血管内皮生长因子A
Keywords
tssc3
osteosarcoma
angiogenesis
vascular endothelial growth factor A
分类号
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
R364.3 [医药卫生—病理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TSSC3通过调控PI3K/Akt-细胞失巢凋亡途径抑制肾小管上皮的纤维化表型
刘兴红
陈雁
肖菲
戴欢子
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
6
原文传递
2
印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响
高自然
赵郭盛
彭动斌
吕杨帆
郭乔楠
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
原文传递
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