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基于玄府理论探究麻黄附子甘草汤及其辛味单药成分干预原发性足细胞病TRPC5-RAC1前馈循环的机制
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作者 贾蒙 王怡 韩世盛 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第21期205-214,共10页
目的:基于玄府学说,以足细胞骨架瞬时受体电位通道蛋白5(TRPC5)-Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(RAC1)前馈循环为研究靶点,分析麻黄附子甘草汤及其辛味单药麻黄、附子修复足细胞损伤作用的分子机制。方法:通过嘌呤霉素氨基核苷(PAN)构建TRPC... 目的:基于玄府学说,以足细胞骨架瞬时受体电位通道蛋白5(TRPC5)-Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(RAC1)前馈循环为研究靶点,分析麻黄附子甘草汤及其辛味单药麻黄、附子修复足细胞损伤作用的分子机制。方法:通过嘌呤霉素氨基核苷(PAN)构建TRPC5高表达动物模型,以麻黄附子甘草汤(2.468 g·kg^(-1))及麻黄单药(1.851 g·kg^(-1))、附子单药(1.234 g·kg^(-1))为干预,分析血尿生化学、组织病理学、足突超微结构;蛋白免疫印迹法检测肾脏组织中骨架蛋白突触足蛋白(Synaptopodin)和机制蛋白TRPC5、RAC1-GTP、RAC1的表达。提取并培养原代足细胞,分析足突三维成像及细胞骨架荧光,检测TRPC5、RAC1免疫荧光共染表达。结果:与模型组比较,麻黄附子甘草汤组、麻黄组、附子组大鼠的血清白蛋白(ALB)明显增加(P<0.05,P<0.01)、尿蛋白肌酐比明显降低(P<0.05);肾脏组织中足突融合率明显降低(P<0.05)、骨架蛋白Synaptopodin表达明显增加、机制蛋白TRPC5、RAC1-GTP、RAC1表达明显降低(P<0.05);原代足细胞中鬼笔环肽荧光面积/视野面积占比显著增加(P<0.01),平均荧光强度明显增加(P<0.05),TRPC5-RAC1免疫荧光共染双阳细胞数/视野总细胞数占比显著降低(P<0.01)。结论:麻黄附子甘草汤及其辛味单药成分麻黄、附子均能够改善PAN诱导的TRPC5高表达足细胞损伤肾病综合征模型,减少蛋白尿,抑制足细胞骨架TRPC5-RAC1前馈循环损伤。 展开更多
关键词 玄府理论 辛味中药 足细胞损伤 足细胞骨架瞬时受体电位通道蛋白5-Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(trpc5-RAC1)前馈循环
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基于miR⁃26a/TRPC6轴探究六味地黄汤对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用机制 被引量:1
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作者 李杨 温伟波 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第3期185-192,共8页
目的:探讨六味地黄汤改善糖尿病肾病大鼠的作用机制。方法:八周龄雄性SD大鼠60只,体质量180~220 g,随机分为6组(n=10),即正常组、模型组、六味地黄汤低剂量组,六味地黄汤中剂量组,六味地黄汤高剂量组以及厄贝沙坦处理组。正常组常规饲... 目的:探讨六味地黄汤改善糖尿病肾病大鼠的作用机制。方法:八周龄雄性SD大鼠60只,体质量180~220 g,随机分为6组(n=10),即正常组、模型组、六味地黄汤低剂量组,六味地黄汤中剂量组,六味地黄汤高剂量组以及厄贝沙坦处理组。正常组常规饲料喂养,联合一次性等剂量枸橼酸缓冲液腹腔注射。其余50只采用高脂饲养加一次性注射链脲佐菌素造模。造模成功后,给予六味地黄汤灌胃治疗,阳性对照使用厄贝沙坦处理。给药结束后先收集24 h尿液,生化法检测尿蛋白含量;ELISA检测空腹血糖、肌酐含量,检测大鼠血清中炎性因子白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)水平。大鼠称重,处死,分离双肾组织,苏木素-伊红(H&E)染色观察各组大鼠肾脏组织变化;qPCR检测miR-26a表达水平;Western blot和免疫组化检测肾脏组织中TRPC6表达。结果:与正常组比较,模型组中空腹血糖、24 h尿蛋白、肌酐水平明显升高,体重降低,肾指数升高,炎性因子IL-6和IL-1β表达显著升高,miR-26a表达降低,TRPC6表达水平升高(P<0.05),模型组大鼠中肾组织损伤严重;与模型组比较,六味地黄汤灌胃处理后,空腹血糖、24 h尿蛋白、肌酐水平降低,体重升高,肾指数降低,炎性因子IL-6和IL-1β表达降低,miR-26a表达增强,TRPC6表达受到抑制(P<0.05),大鼠肾组织损伤得到改善,且高剂量组改善效果优于低剂量组。结论:六味地黄汤可能通过miR-26a/TRPC6分子轴改善大鼠糖尿病肾病。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 六味地黄汤 miR-26a trpc6
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结核分枝杆菌TrpC蛋白生物信息学分析
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作者 高岩 彭英杰 牟莹莹 《现代诊断与治疗》 2025年第9期1265-1268,1289,共5页
目的 应用生物信息学的方法 预测结核分枝杆菌TrpC蛋白结构和功能。方法 从GenBank数据库中获取TrpC全部基因信息,利用Prot Param、ExPASy、ABCpred、NetNGlyc 1.0、SignalP、NetOGlyc 4.0等软件分析TrpC蛋白理化性质、信号肽、磷酸化位... 目的 应用生物信息学的方法 预测结核分枝杆菌TrpC蛋白结构和功能。方法 从GenBank数据库中获取TrpC全部基因信息,利用Prot Param、ExPASy、ABCpred、NetNGlyc 1.0、SignalP、NetOGlyc 4.0等软件分析TrpC蛋白理化性质、信号肽、磷酸化位点,利用SOPMA、SWISS-MODEL等软件分析TrpC蛋白二级结构并建立三级结构模型,利用MEGA7.0和STRING对TrpC蛋白进行系统进化树分析和蛋白相互作用预测。结果 Rv1611基因全长819 bp,其编码的TrpC蛋白含有272个氨基酸,稳定性指数为33.40,定义其为稳定蛋白位,无信号肽含有大量潜在磷酸化位点;TrpC蛋白二级结构以α-螺旋为主;TrpC可以与TrpD、TrpG、TrpA、TrpB等蛋白相互作用。结论 生物信息学分析表明,TrpC蛋白是一种具有多种潜在表位的亲水性蛋白,可作为开发结核病疫苗的候选蛋白。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 Rv1611 trpc 生物信息学分析
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TRPC6激动剂介导Calpain-1改善丙泊酚诱发的大鼠认知功能障碍
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作者 张道正 司敬栋 +3 位作者 井绪东 张延海 张艺 潘振国 《解剖科学进展》 2025年第4期458-461,466,共5页
目的探究TRPC6激动剂对丙泊酚诱发的大鼠认知功能障碍的改善作用及作用机制。方法SD大鼠随机分为对照组(Control组)、丙泊酚组(Propofol组)和TRPC6激动剂组(Hyp9组),每组10只。Morris水迷宫实验评价各组大鼠的学习记忆能力;旷场实验评... 目的探究TRPC6激动剂对丙泊酚诱发的大鼠认知功能障碍的改善作用及作用机制。方法SD大鼠随机分为对照组(Control组)、丙泊酚组(Propofol组)和TRPC6激动剂组(Hyp9组),每组10只。Morris水迷宫实验评价各组大鼠的学习记忆能力;旷场实验评价各组大鼠的运动行为;HE染色和尼氏染色观察各种大鼠海马组织神经损伤;高尔基染色检测各组大鼠海马组织树突棘密度;免疫荧光检测各组大鼠海马组织中PSD95蛋白表达;Western blot检测各组大鼠海马组织中TRPC6和Calpain-1蛋白表达。结果给予TRPC6激动剂能降低丙泊酚麻醉致认知功能障碍大鼠逃避潜伏期以及中央格停留时间,增加大鼠穿越平台次数和目的象限停留时间以及理毛次数、跨格次数和站立次数,改善大鼠海马组织病理损伤和神经元损伤,增加大鼠海马组织树突棘密度,上调大鼠海马组织PSD95阳性率以及TRPC6和Calpain-1蛋白表达水平。结论TRPC6激动剂改善丙泊酚麻醉致认知功能障碍大鼠海马损伤和认知功能障碍,其机制可能与上调海马中TRPC6诱导的Calpain-1表达并维持海马突触可塑性有关。 展开更多
关键词 trpc6激动剂 丙泊酚 认知功能障碍 钙蛋白酶-1 突触可塑性 大鼠
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一种TRPC5抑制剂AC1903衍生物的合成与结构表征
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作者 张锐锋 桂腾摇 杨鸿均 《云南化工》 2025年第8期38-42,共5页
以2-氨基苯并咪唑为原料,对其胺基进行保护后通过碳氮偶联、卤代烃反应制备TRPC5抑制剂AC1903衍生物。采用核磁共振氢谱和高分辨质谱确认目标化合物结构,最终成功得到AC1903衍生物4a~c。此合成路线的反应条件温和可控,收率较高,为后续... 以2-氨基苯并咪唑为原料,对其胺基进行保护后通过碳氮偶联、卤代烃反应制备TRPC5抑制剂AC1903衍生物。采用核磁共振氢谱和高分辨质谱确认目标化合物结构,最终成功得到AC1903衍生物4a~c。此合成路线的反应条件温和可控,收率较高,为后续治疗慢性肾脏疾病的相关实验研究奠定基础。 展开更多
关键词 AC1903 trpc5抑制剂 慢性肾脏病 苯并咪唑 局灶节段性肾小球硬化症
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养肝益水颗粒对AngⅡ介导肾足细胞损伤及TRPC6/NFAT通路的影响
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作者 陆婷 周健坤 +1 位作者 张俊 戴小华 《铜陵职业技术学院学报》 2025年第3期63-68,共6页
目的:观察养肝益水颗粒对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导小鼠肾足细胞珠(MPC-5)损伤的抑制作用及对瞬时受体电位阳离子通道6/活化的T细胞核因子(TRPC6/NFAT)通路的影响。方法:SD大鼠药物干预2周后制备养肝益水颗粒含药血清、空白血清和贝那普... 目的:观察养肝益水颗粒对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导小鼠肾足细胞珠(MPC-5)损伤的抑制作用及对瞬时受体电位阳离子通道6/活化的T细胞核因子(TRPC6/NFAT)通路的影响。方法:SD大鼠药物干预2周后制备养肝益水颗粒含药血清、空白血清和贝那普利含药血清,用细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测了不同浓度养肝益水颗粒含药血清(5%,10%,15%,20%)MPC-5的生存活力,并确定最佳含药血清浓度;体外培养MPC-5细胞,通过选取10-6mmol·L-1的AngⅡ诱导MPC-5细胞制备足细胞损伤模型,将MPC-5分为空白、AngⅡ刺激组(模型组)、AngⅡ刺激+最佳养肝益水颗粒含药血清组(YGYS组)、AngⅡ刺激+贝那普利含药血清组(BNPL组)、AngⅡ刺激+最佳养肝益水颗粒含药血清+TRPC6抑制剂组(TRPC6抑制剂组)、AngⅡ刺激+最佳养肝益水颗粒含药血清+NFAT抑制剂组(NFAT抑制剂组),CCK-8法检测各处理组对MPC-5细胞的影响,流式细胞仪检测各处理组MPC-5细胞凋亡率,ELISA法检测各处理组肾病蛋白(Nephrin)、足突蛋白(Podocin)、足盂蛋白(Podocalyxin)含量,Western blot法测定各处理组TRPC6、NFAT蛋白表达情况。结果:5%中剂量养肝益水颗粒含药血清组的MPC-5细胞活力较其他浓度养肝益水颗粒含药血清组细胞活力显著增强;模型组、YGYS组、BNPL组、TRPC6组、NFAT组细胞活力比空白组显著下降(P<0.01),与模型组比较,YGYS组、BNPL组、TRPC6组、NFAT组显著增强(P<0.01)。模型组的凋亡率比空白组增高(P<0.01),与模型组相比,YGYS组、BNPL、TRPC6抑制剂组、NFAT抑制组凋亡率明显降低(P<0.01)。模型组Nephrin、Podocin、Podocalyxin表达水平较空白组显著降低(P<0.01),与模型组相比,YGYS组、BNPL组、TRPC6抑制剂组、NFAT抑制剂组中Nephrin、Podocin、Podocalyxin表达水平显著升高(P<0.01)。模型组TRPC6、NFAT表达与空白组相比显著升高(P<0.01),与模型组比较,YGYS组、BNPL组、TRPC6抑制剂组、NFAT抑制剂组TRPC6、NFAT表达水平显著下降(P<0.01),与YGYS组相比,TRPC6抑制剂组、NFAT抑制剂组TRPC6、NFAT表达水平下降(P<0.05)。结论:养肝益水颗粒可通过上调Nephrin、Podocin、Podocalyxin表达,抑制TRPC6、NFAT表达,从而抑制AngⅡ介导的肾足细胞损伤,提示养肝益水颗粒的肾脏保护作用与调节AngⅡ/TRPC6/NFAT信号通路有关。 展开更多
关键词 养肝益水颗粒 足细胞 高血压肾损害 AngⅡ/trpc6/NFAT信号通路
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TRPC广谱抑制剂SKF96365协同顺铂对人胃癌HGC-27细胞的作用及相关机制的研究
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作者 冯娜 董升 +4 位作者 史丹丹 黄晓敏 亢鹏举 李文春 贺细菊 《中国临床解剖学杂志》 北大核心 2025年第4期426-435,共10页
目的探讨SKF96365联合顺铂对HGC-27细胞抑制作用及其分子机制的研究。方法采用2.5、5、7.5、10μmol/L SKF96365与顺铂联合作用HGC-27细胞;CCK-8、划痕实验检测细胞活力和迁移;JC-1、MitoROS、Rhod-2/AM荧光探针检测细胞线粒体膜电位、... 目的探讨SKF96365联合顺铂对HGC-27细胞抑制作用及其分子机制的研究。方法采用2.5、5、7.5、10μmol/L SKF96365与顺铂联合作用HGC-27细胞;CCK-8、划痕实验检测细胞活力和迁移;JC-1、MitoROS、Rhod-2/AM荧光探针检测细胞线粒体膜电位、活性氧及钙离子浓度的变化;Hoechst染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞凋亡、自噬蛋白及PI3K/AKT/BAD信号通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,联合用药组能够显著抑制HGC-27细胞的增殖与迁移,诱导细胞线粒体功能受损,促使细胞凋亡率增加(P<0.05)。Western blot结果显示联合用药可促进胃癌细胞凋亡、自噬相关蛋白的表达,且显著抑制了细胞中PI3K/AKT/BAD信号通路磷酸化水平。结论SKF96365联合顺铂通过抑制PI3K/AKT/BAD通路的磷酸化水平诱导胃癌细胞启动线粒体凋亡途径和细胞自噬,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 trpc SKF96365 顺铂 钙超载 凋亡
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苍艾挥发油调节TRPC1信号通路对哮喘小鼠内质网应激与气道重塑的影响
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作者 王天资 郑佳琳 +7 位作者 黄会惠 卢盈竹 李卓群 司曼真 贺喜盈 王紫薇 边际 明溪 《中草药》 北大核心 2025年第3期895-904,共10页
目的探讨苍艾挥发油(Cangai volatile oil,CAVO)干预哮喘小鼠经典瞬时受体电位通道1(transient receptor potential canonical channel 1,TRPC1)信号通路介导内质网应激对气道重塑的影响。方法将36只Balb/c小鼠随机分对照组、模型组、... 目的探讨苍艾挥发油(Cangai volatile oil,CAVO)干预哮喘小鼠经典瞬时受体电位通道1(transient receptor potential canonical channel 1,TRPC1)信号通路介导内质网应激对气道重塑的影响。方法将36只Balb/c小鼠随机分对照组、模型组、地塞米松(1.50 mg/kg)组及CAVO高、中、低剂量(3.86、1.93、0.97 mg/kg)组。除对照组外,其余各组小鼠采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏、激活建立小鼠哮喘模型,各给药组分别ig相应药物(20 m L/kg),对照组、模型组ig等体积生理盐水,1次/d,连续给药6周后,处死小鼠剖取肺组织,Western blotting检测蛋白激活转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)、蛋白激酶RNA样内质网激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen type Ⅰ,CollagenⅠ)、CollagenⅢ的表达水平。选取SD大鼠20只制备含药血清,按照体表面积计算给药剂量,2次/d,连续给药7 d,于末次给药1 h后处死大鼠,取血、处理备用;收集哮喘小鼠肺泡灌洗液并纯化分离肺泡巨噬细胞,随机分为对照组、5%CAVO含药血清组、5%CAVO含药血清+空载组、5%CAVO含药血清+TRPC1过表达组,与人支气管上皮样细胞16HBE共培养,收集细胞,采用Western blotting检测各组细胞ATF6、PERK、CHOP、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TRPC1的蛋白表达,采用定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)比较各组Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TRPC1的表达。结果体内实验发现,与对照组比较,模型组的ATF6、PERK、CHOP、Collagen Ⅰ及Collagen Ⅲ的表达显著上升(P<0.01);与模型组比较,CAVO高、中、低剂量组ATF6、PERK、CHOP、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。体外实验发现,与对照组比较,5%CAVO含药血清组、5%CAVO含药血清+空载组中的ATF6、PERK、CHOP、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TRPC1的表达水平显著下降(P<0.01);与5%CAVO含药血清+空载组比较,5%CAVO含药血清+TRPC1过表达组中的ATF6、PERK、CHOP、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TRPC1的表达水平显著上升(P<0.05)。结论CAVO对哮喘小鼠气道重塑和气道炎症有改善作用,这可能与调节TRPC1信号通路,影响内质网应激反应,改善哮喘气道重塑有关。 展开更多
关键词 苍艾挥发油 支气管哮喘 内质网应激反应 trpc1信号通路 气道重塑 丁香酚 1 8-桉叶素 β-石竹烯 乙酸丁香酚酯
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慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为和前扣带回TRPC3和TRPC6通道的表达上调 被引量:4
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作者 王旭 杜祎康 +3 位作者 吴文斌 王福东 罗层 白占涛 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期283-289,共7页
目的:探讨慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为情况下前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)TRPC 3/6通道的表达改变。方法:采用小鼠痛行为检测方法、旷场行为检测方法和免疫印迹实验(Western Blot)。结果:小鼠后肢足底皮下注射完全弗氏佐... 目的:探讨慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为情况下前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)TRPC 3/6通道的表达改变。方法:采用小鼠痛行为检测方法、旷场行为检测方法和免疫印迹实验(Western Blot)。结果:小鼠后肢足底皮下注射完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)建立慢性炎性痛模型。痛行为检测结果显示足底皮下注射CFA可以诱致小鼠产生长时程的机械性和热痛觉过敏现象。旷场实验可见CFA致炎致痛后的小鼠较正常小鼠在旷场中央区活动距离明显降低,停留时间明显减少,提示慢性炎性痛小鼠表现为显著的焦虑样行为。进一步采用Western Blot实验发现炎性痛焦虑样小鼠前扣带回脑区的TRPC3和TRPC6通道蛋白表达水平较对照组动物显著上调。结论:CFA引发的慢性炎性痛模型中,小鼠产生焦虑样情绪,TRPC3和TRPC6通道蛋白在ACC部位的蛋白表达水平明显升高。提示这些焦虑样痛情绪的发生与疼痛痛觉通路中ACC脑区的TRPC3及TRPC6表达密切相关。 展开更多
关键词 CFA 慢性炎性痛 焦虑样行为 ACC trpc3 trpc6 小鼠
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老年CHF患者血清sVEGFR-2、TRPC1、Nesfatin-1水平变化及临床意义
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作者 左彦超 武永华 +1 位作者 陈鲜 季会娟 《华夏医学》 2025年第2期116-121,共6页
目的探讨老年慢性心力衰竭(CHF)患者血清可溶性血管内皮生长因子受体-2(sVEGFR-2)、瞬时受体电位通道1(TRPC1)、摄食抑制因子1(Nesfatin-1)水平的变化及临床意义。方法回顾性选取我院126例CHF患者,依据纽约心脏病协会(NYHA)分级,分别纳... 目的探讨老年慢性心力衰竭(CHF)患者血清可溶性血管内皮生长因子受体-2(sVEGFR-2)、瞬时受体电位通道1(TRPC1)、摄食抑制因子1(Nesfatin-1)水平的变化及临床意义。方法回顾性选取我院126例CHF患者,依据纽约心脏病协会(NYHA)分级,分别纳入Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组。比较3组sVEGFR-2、TRPC1、Nesfatin-1及左房内径(LAD)、左心室舒张末内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)并分析相关性,比较不同预后患者sVEGFR-2、TRPC1、Nesfatin-1及联合检测对老年CHF患者预后的预测价值。结果Ⅱ级组sVEGFR-2、TRPC1、LAD、LVEDD<Ⅲ级组<Ⅳ级组,Nesfatin-1、LVEF>Ⅲ级组>Ⅳ级组,差异有统计学意义(P<0.05);sVEGFR-2、TRPC1与NYHA分级、LAD、LVEDD呈正相关,与LVEF呈负相关,Nesfatin-1与LAD、LVEDD、NYHA分级呈负相关,与LVEF呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);预后不良患者sVEGFR-2、TRPC1高于预后良好患者,Nesfatin-1低于预后良好患者(P<0.05);sVEGFR-2、TRPC1、Nesfatin-1联合预测预后不良的AUC高于各指标单独检测(P<0.05)。结论sVEGFR-2、TRPC1、Nesfatin-1随着NYHA分级、心脏功能异常而改变,三者联合可为预测老年CHF患者预后提供参考价值。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 sVEGFR-2 trpc1 NESFATIN-1 老年人
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TRPC6基因对过氧化氢诱导大鼠脑血管平滑肌细胞炎症反应、氧化应激损伤的影响
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作者 高寒冰 张开创 +1 位作者 黄林轲 郑静 《安徽医药》 2025年第3期541-545,共5页
目的探究瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)基因对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导大鼠脑血管平滑肌细胞(VSMCs)损伤的影响。方法于2022年3—12月完成研究。分离大鼠脑基底动脉VSMCs,采用随机数字表法分为五组:空白组、H_(2)O_(2)组(500μmo... 目的探究瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)基因对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导大鼠脑血管平滑肌细胞(VSMCs)损伤的影响。方法于2022年3—12月完成研究。分离大鼠脑基底动脉VSMCs,采用随机数字表法分为五组:空白组、H_(2)O_(2)组(500μmol/L H_(2)O_(2)处理6 h)、H_(2)O_(2)+空转染组(500μmol/L H_(2)O_(2)处理6 h,并转染空载脂质体)、H_(2)O_(2)+TRPC6 siRNA组(500μmol/L H_(2)O_(2)处理6 h,并转染TRPC6 siRNA)和H_(2)O_(2)+pcDNA3.1 TRPC6组(500μmol/L H_(2)O_(2)处理6 h,并转染pcDNA3.1 TRPC6)。采用人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附测定检测细胞中白细胞介素(IL)-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛,DCFH-DA荧光探针法检测细胞中活性氧水平。结果与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+TRPC6 siRNA组D(λ)450 nm值明显升高,细胞凋亡率明显降低(P<0.05),H_(2)O_(2)+pcDNA3.1 TRPC6组D(λ)450 nm值明显降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+TRPC6 siRNA组、H_(2)O_(2)+pcDNA3.1 TRPC6组细胞中IL-6含量分别为(159.24±21.65)ng/L、(52.95±12.43)ng/L、(257.48±23.44)ng/L,IL-1β含量分别为(126.09±19.85)ng/L、(41.67±9.06)ng/L、(248.77±23.32)ng/L,MCP-1含量分别为(89.25±11.73)ng/L、(27.73±5.18)ng/L、(187.61±15.42)ng/L,SOD活性分别为(53.40±8.92)U/mL、(172.33±14.52)U/mL、(23.75±5.63)U/mL,丙二醛含量分别为(91.35±10.41)nmol/mL、(8.29±2.17)nmol/mL、(169.37±14.37)nmol/mL,活性氧水平分别为2.68±0.27、0.76±0.18、5.89±0.34;与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+TRPC6 siRNA组IL-6、IL-1β、MCP-1、丙二醛和活性氧明显降低、SOD活性明显升高(P<0.05),H_(2)O_(2)+pcDNA3.1 TRPC6组与之相反。结论TRPC6基因低/过表达可促进/抑制H_(2)O_(2)诱导VSMCs增殖活性和抑制/促进细胞凋亡,可能与调节炎症反应和氧化应激损伤有关。 展开更多
关键词 颅内动脉瘤 脑血管平滑肌细胞 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(trpc6)基因 炎症反应 氧化应激
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实时定量PCR检测镉对人肝癌细胞SMMC-7721中TRPC1和TRPC4 mRNA表达的影响
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作者 刘颖 孙世龙 +5 位作者 刘晓梅 杜海英 金明华 李鹏 凌翎 孙志伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期584-586,共3页
目的:观察氯化镉(CdCl2)处理后人肝癌SMMC-7721细胞中TRPC1和TRPC4 mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨镉对肝癌细胞钙通道的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究模型,细胞暴露于氯化镉终浓度为0、5、10、20、30及40μmol.L-1的培养液... 目的:观察氯化镉(CdCl2)处理后人肝癌SMMC-7721细胞中TRPC1和TRPC4 mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨镉对肝癌细胞钙通道的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究模型,细胞暴露于氯化镉终浓度为0、5、10、20、30及40μmol.L-1的培养液中24 h。采用SYBR荧光实时定量PCR法检测TRPC1和TRPC4 mRNA表达,相对定量采用比较CT值法。结果:随着剂量的增加,TRPC1 mRNA表达有降低的趋势,除20μmol.L-1组外,各组mRNA表达均高于对照组(P<0.01);TRPC4 mRNA表达有先增高后降低的趋势,5、10和30μmol.L-1组mRNA表达均高于对照组(P<0.01)。2个基因均在低剂量(5和10μmol.L-1)组表达增加幅度较大(P<0.01)。结论:低剂量镉可显著增加人肝癌SMMC-7721细胞中TRPC1和TRPC4的表达,镉可在mRNA水平对SMMC-7721细胞钙通道产生影响。 展开更多
关键词 SMMC-7721 trpc1 trpc4
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芪参益气滴丸通过TRPC1/STIM1通路调节Ca^(2+)稳态发挥抗动脉粥样硬化作用 被引量:18
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作者 胡武明 施振华 +2 位作者 叶士勇 向贻佳 曾春来 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期686-691,共6页
目的:探究芪参益气滴丸(Qishen-Yiqi dropping pills,QS)治疗动脉粥样硬化(artherosclerosis,AS)的作用机制。方法:利用高脂饮食建立SD大鼠AS模型,随机分为:正常对照组,模型组,芪参益气滴丸低、中、高剂量组,阳性对照组,每组6只。处理1... 目的:探究芪参益气滴丸(Qishen-Yiqi dropping pills,QS)治疗动脉粥样硬化(artherosclerosis,AS)的作用机制。方法:利用高脂饮食建立SD大鼠AS模型,随机分为:正常对照组,模型组,芪参益气滴丸低、中、高剂量组,阳性对照组,每组6只。处理12周后收集血清检测各组大鼠血脂及Ca^(2+)水平;HE染色观察动脉组织形态学变化;ELISA法检测血清炎症因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;硝酸还原酶法检测动脉组织中一氧化氮(nitric oxide,NO)水平;Western blot检测动脉组织中瞬时受体电位通道蛋白1(transient receptor potential channel protein 1,TRPC1)、基质交互分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达水平。结果:芪参益气滴丸能减轻AS大鼠动脉内膜增厚及血管狭窄,抑制AS斑块形成;与模型组相比,芪参益气滴丸能显著降低大鼠血液中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,提高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平(P<0.05);芪参益气滴丸治疗组大鼠血清炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平与AS大鼠相比显著降低(P<0.05);芪参益气滴丸治疗组大鼠血清Ca^(2+)水平显著低于且动脉组织中NO水平显著高于AS大鼠(P<0.05);与AS大鼠相比,芪参益气滴丸治疗组大鼠动脉组织中TRPC1和STIM1蛋白水平显著降低,且eNOS蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:芪参益气滴丸可以通过TRPC1/STIM1通路调节钙稳态,促进血管舒张因子NO的合成释放,抑制炎症反应,从而发挥抗AS作用。 展开更多
关键词 trpc1/STIM1通路 钙稳态 动脉粥样硬化 炎症 芪参益气滴丸
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抗TRPC6多肽单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:7
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作者 张萃 卢文菊 +3 位作者 梅俪凡 黄超贤 李红枝 刘晓波 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期318-321,共4页
目的制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其免疫学和生物学特性进行鉴定。方法采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫Balb/c小鼠,取血清效价高者脾细胞与Ag8.653骨髓瘤细胞进行融合。采用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,以及测定单克... 目的制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其免疫学和生物学特性进行鉴定。方法采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫Balb/c小鼠,取血清效价高者脾细胞与Ag8.653骨髓瘤细胞进行融合。采用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,以及测定单克隆抗体的特性、效价及其相对亲和力;采用单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定Ig亚型;并经有限稀释法克隆化培养获得杂交瘤细胞株;采用秋水仙素阻断法鉴定杂交瘤细胞株染色体。结果获得3株能稳定分泌抗TRPC6多肽的单克隆抗体,分别命名为A2、F11和H8;抗体Ig亚类均为IgG1型,染色体均在89±7条的范围内;相对亲和力结果 F11为6μg/ml,A2、H8为12.5μg/ml。结论抗TRPC6多肽单克隆抗体的成功制备,为TRPC6的免疫学检测方法的建立奠定基础。 展开更多
关键词 trpc6 多肽 单克隆抗体 杂交瘤
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膜性肾病肾活检组织中TRPC6和podocalyxin表达改变及其意义 被引量:5
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作者 李大勇 曹海霞 +3 位作者 范亚平 王锋 达展云 张天一 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期486-489,共4页
目的检测膜性肾病(membranous nephropathy,MN)患者肾活检组织中肾小球足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)和podocalyxin的表达和分布,探讨足细胞蛋白TRPC6和podocalyxin在MN蛋... 目的检测膜性肾病(membranous nephropathy,MN)患者肾活检组织中肾小球足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)和podocalyxin的表达和分布,探讨足细胞蛋白TRPC6和podocalyxin在MN蛋白尿发生中的作用。方法采用常规组织病理以及免疫组化检查,并行免疫荧光双套色染色于激光共聚焦显微镜下观察TRPC6、podocalyxin在各组肾组织中表达及分布的改变,以计算机图像分析系统进行半定量分析。结果对照组肾组织podocalyxin沿肾小球毛细血管壁连续均匀分布,阳性荧光信号表达强,MN组表达减弱,且分布不均或节段性缺失,部分呈点状、短线状不连续分布,肾病综合征组较非肾病综合征组减弱更明显;TRPC6在对照组肾小球有一定的表达,沿肾小球基膜呈均匀连续线型分布,MN组TRPC6荧光强度有不同程度增强,且呈点状、团块状不均匀分布,肾病综合征组较非肾病综合征组更明显。结论 TRPC6和podocalyxin在正常肾组织沿肾小球基膜呈连续线状均匀分布;MN患者肾小球内TRPC6表达增加,podocalyxin表达减少,且分布形式亦发生变化,提示TRPC6和podocalyxin等足细胞相关蛋白表达改变及分布异常可能是MN蛋白尿发生的重要病理机制。 展开更多
关键词 膜性肾病 蛋白尿 trpc6 PODOCALYXIN
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带TrpC启动子的质粒pYG715/Vgb对顶头孢霉的转化 被引量:4
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作者 郑荣 朱春宝 +1 位作者 赵文杰 朱宝泉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期269-272,共4页
分别以来自于构巢曲霉和酿酒酵母的启动子TrpC和TEF1来构建质粒pYG715/TrpC和pZR333并转化头孢菌素C工业生产菌种顶头孢霉,结果发现只有pYG715/TrpC产生转化子。
关键词 顶头孢霉 启动子 质粒 Β-内酰胺 trpc 转化
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阿托伐他汀对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变中TRPC5表达的影响 被引量:4
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作者 齐洁 徐芳 +2 位作者 马慧 崔建国 张清潭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期457-462,共6页
目的:观察载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中血管平滑肌细胞瞬时受体电位通道5(TRPC5)蛋白的表达变化,以及阿托伐他汀药物干预对TRPC5的影响并探讨其作用机制。方法:将40只6周龄雄性Apo E-/-小鼠随机分为模型... 目的:观察载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中血管平滑肌细胞瞬时受体电位通道5(TRPC5)蛋白的表达变化,以及阿托伐他汀药物干预对TRPC5的影响并探讨其作用机制。方法:将40只6周龄雄性Apo E-/-小鼠随机分为模型组和他汀干预组,高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化模型。他汀干预组给予阿托伐他汀(20 mg·kg-1·d-1)灌胃,模型组给予等量生理盐水灌胃。20只同龄雄性野生型C57BL/6J小鼠给予普通饲料喂养作为正常对照组。各组小鼠分别喂养至20和30周龄,分别取10只取血并处死。取主动脉根部做石蜡切片行HE染色形态学观察,测量并计算斑块相对面积;免疫组织化学染色检测各组小鼠TRPC5蛋白表达变化。取胸腹段主动脉行实时荧光定量PCR,检测主动脉中TRPC5通道蛋白mRNA的表达水平。结果:与模型组相比,阿托伐他汀干预组的血脂明显下降,斑块总面积明显减小,TRPC5蛋白水平及mRNA含量明显下降;30周龄模型组的TRPC5蛋白表达稍高于20周龄模型组,但差异无统计学意义;30周干预组较20周干预组相比,TRPC5水平有降低趋势且差异有统计学意义。结论:阿托伐他汀可能通过下调TRPC5蛋白表达从而延缓动脉粥样硬化进程。 展开更多
关键词 trpc5 载脂蛋白E 动脉粥样硬化 血管平滑肌细胞 阿托伐他汀
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抗TRPC6多肽单克隆抗体的制备及其识别抗原表位分析 被引量:3
18
作者 张萃 卢文菊 +4 位作者 李红枝 黄超贤 王华妹 丘世龙 梅俪凡 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期741-744,共4页
目的:制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫小鼠后经细胞融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞;单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定Ig亚型;间接ELISA法鉴定该单克隆抗体的特... 目的:制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫小鼠后经细胞融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞;单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定Ig亚型;间接ELISA法鉴定该单克隆抗体的特性、效价及其相对亲和力;采用生物信息学进行抗原表位预测,并通过ELISA单抗相加试验分析单抗识别抗原位点的差异性。结果:获得3株能稳定分泌抗TRPC6多肽的单抗杂交瘤细胞株,分别命名为A2、F11和H8;抗体Ig亚类均为IgG1型;染色体鉴定符合杂交瘤细胞的特性;3株单抗相对亲和力比较F11较强,A2和H8接近;抗体识别位点分析结果表明A2与H8、A2与F11的相加指数分别大于50%,可能识别的是不同位点;而F11与H8的相加指数小于50%,可能识别的是同一位点。结论:抗TRPC6多肽单克隆抗体的成功制备及其识别抗原表位分析,为TRPC6蛋白的相关研究提供物质基础。 展开更多
关键词 trpc6 单克隆抗体 抗原表位
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全反式维甲酸对肾小球硬化大鼠肾小球TRPC6表达的影响 被引量:4
19
作者 张磊 陈秀萍 +3 位作者 蒋玲 覃荷 于海绍 覃远汉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第23期3827-3831,共5页
目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠肾小球瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠60只,随机分成假手术组、GS组、ATRA组,每组20只,干预12周后处死大鼠。电镜下观察肾小球超微结构改变。免疫组织化学方法检测... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠肾小球瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠60只,随机分成假手术组、GS组、ATRA组,每组20只,干预12周后处死大鼠。电镜下观察肾小球超微结构改变。免疫组织化学方法检测肾脏组织TRPC6、TGF-β1、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的蛋白分布及表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肾脏组织TRPC6 mRNA的表达,免疫印迹法(WB)方法检测肾小球TRPC6的蛋白表达。结果 :与GS组相比,ATRA组大鼠GSI显著下降(P<0.01),肾小球TRPC6、TGF-β1、Col-Ⅳ的蛋白表达量显著下降,TRPC6的mRNA表达量显著下降(P<0.05)。结论:ATRA可能通过抑制肾小球TRPC6的表达而减轻GS进展。 展开更多
关键词 肾小球硬化 全反式维甲酸 trpc6 大鼠 阿霉素
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中枢神经系统内的TRPC6离子通道 被引量:4
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作者 崔龙彪 金晓航 史娟 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期565-570,共6页
TRPC6是TRP(transient receptor potential,TRP)基因超家族C亚家族(canonical)的成员之一,编码钙可通透的非选择性阳离子通道[1,2]。十余年来的研究证明TRPC6分子参与动物体内许多重要的生理和病理调节过程,如血管与气道平滑肌收缩... TRPC6是TRP(transient receptor potential,TRP)基因超家族C亚家族(canonical)的成员之一,编码钙可通透的非选择性阳离子通道[1,2]。十余年来的研究证明TRPC6分子参与动物体内许多重要的生理和病理调节过程,如血管与气道平滑肌收缩、肾小球滤过膜滤过功能、免疫和血液细胞调节等[3];该分子功能异常会导致高血压和局灶性节段性肾小球硬化[4,5]。 展开更多
关键词 trpc6 中枢神经系统 分布 功能
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