人源抗Trop-2抗体Fab的制备及条件优化 被引量：5

1

作者 王小英 林红 +8 位作者 张慧林 仇金荣 丁贵鹏 唐小军 陈汐敏 唐甜 刘琼琼 冯振卿 朱进 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期35-39,共5页

目的 :探讨人源抗Trop-2抗体片段Fab在大肠杆菌中的诱导表达,优化蛋白表达及纯化的条件。方法 :将含有抗Trop-2 Fab抗体基因的质粒转化宿主菌E.coli TOP10F′大肠杆菌,比较诱导前培养液更换对抗Trop-2 Fab片段表达量的影响;比较不同诱... 目的 :探讨人源抗Trop-2抗体片段Fab在大肠杆菌中的诱导表达,优化蛋白表达及纯化的条件。方法 :将含有抗Trop-2 Fab抗体基因的质粒转化宿主菌E.coli TOP10F′大肠杆菌,比较诱导前培养液更换对抗Trop-2 Fab片段表达量的影响;比较不同诱导温度、诱导时间及诱导前加入葡萄糖对蛋白表达的影响;大量表达的抗Trop-2 Fab经亲和层析纯化后,用免疫荧光和流式细胞术检测其免疫学特性。结果:在培养液中加入5 g/L的葡萄糖,人源抗Trop-2抗体Fab片段的表达产量明显增加;16℃的诱导温度比其它温度能表达更多的Fab分子;加诱导剂12 h,目的蛋白的表达量至峰值。结论:本实验结果为在原核系统中大量制备抗Trop-2抗体片段及后续的肿瘤靶向治疗提供了基础。 展开更多

关键词 人源抗trop-2抗体片段 原核表达 免疫学检测

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稳定表达Trop-2基因的NIH3T3细胞系的构建和特性分析 被引量：1

2

作者 刘玉 唐小军 +6 位作者 曹清 丁贵鹏 张慧林 王欢 郑峰 徐凛锋 林红 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期867-872,共6页

目的:建立稳定表达人滋养层细胞表面抗原(Trop-2)NIH3T3细胞,分析过表达Trop-2对NIH3T3细胞的生长、增殖和侵袭特性的影响。方法:将Trop-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,转染NIH3T3细胞,通过G418筛选及RT-PCR鉴定获得稳定表达Trop-2的... 目的:建立稳定表达人滋养层细胞表面抗原(Trop-2)NIH3T3细胞,分析过表达Trop-2对NIH3T3细胞的生长、增殖和侵袭特性的影响。方法:将Trop-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,转染NIH3T3细胞,通过G418筛选及RT-PCR鉴定获得稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞(NIH3T3-Trop-2)。用MTS法检测NIH3T3-Trop-2细胞的增殖能力,软琼脂集落形成实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的克隆形成能力,明胶酶谱法检测NIH3T3-Trop-2细胞的基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的分泌及细胞划痕实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的迁移能力。结果:稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞在生长增殖、克隆形成及侵袭能力均较NIH3T3细胞强,细胞培养上清中的MMP-2和MMP-9增多。结论:Trop-2对细胞的增殖与迁移能力具有明显的促进作用。 展开更多

关键词 trop-2 NIH3T3 真核表达 增殖与迁移

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siRNA下调TROP-2基因表达对人胰腺癌细胞迁移和侵袭的影响 被引量：1

3

作者 瞿彩兴 马圭 范钰 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2011年第4期201-203,223,共4页

目的探讨TROP-2基因小干扰RNA对胰腺癌细胞迁移、侵袭的影响。方法培养人胰腺癌CFPAC-1细胞株,采用TROP-2基因小干扰RNA转染胰腺癌细胞株,分别以荧光实时定量PCR和免疫荧光方法观察TROP-2基因的mRNA和蛋白水平,随后以划痕法观察癌细胞... 目的探讨TROP-2基因小干扰RNA对胰腺癌细胞迁移、侵袭的影响。方法培养人胰腺癌CFPAC-1细胞株,采用TROP-2基因小干扰RNA转染胰腺癌细胞株,分别以荧光实时定量PCR和免疫荧光方法观察TROP-2基因的mRNA和蛋白水平,随后以划痕法观察癌细胞迁移、以Boyden法检测癌细胞侵袭力。结果以TROP-2 siRNA转染胰腺癌CFPAC-1细胞后,癌细胞TROP-2基因mRNA和蛋白含量明显下降,且呈时间和浓度依赖性(P<0.001;P<0.001);划痕试验和Boyden试验结果显示,细胞迁移和侵袭力均明显下降,且呈浓度依赖性(P<0.001;P<0.001)。结论 TROP-2基因可能在胰腺癌细胞迁移和侵袭中发挥着重要作用;以siRNA转染胰腺癌细胞,可抑制胰腺癌细胞的迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 胰腺癌 癌细胞迁移 trop-2 小干扰RNA 癌细胞侵袭 基因表达

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Trop-2在结直肠癌组织中的表达及其意义 被引量：1

4

作者 乔宇 赵鹏 +2 位作者 陈适 刘春辉 张国志 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第6期802-806,共5页

目的探讨人滋养层细胞表面抗原-2(Trop-2)在结直肠癌中的表达及其意义。方法用免疫组化法检测84例结直肠癌组织标本及其相对应的癌旁正常组织中的Trop-2表达情况,分析其表达与临床病理特点的关系,进一步采用Western blot检测34例手术标... 目的探讨人滋养层细胞表面抗原-2(Trop-2)在结直肠癌中的表达及其意义。方法用免疫组化法检测84例结直肠癌组织标本及其相对应的癌旁正常组织中的Trop-2表达情况,分析其表达与临床病理特点的关系,进一步采用Western blot检测34例手术标本的Trop-2表达情况。结果 Trop-2在结直肠癌组织中的表达高于癌旁正常组织(P<0.05);Trop-2表达量:直肠癌(RC)组﹥左半结肠癌(LSCC)组﹥右半结肠癌(RSCC)组(P<0.05),Dukes'C+D组﹥A+B组(P<0.05),淋巴结转移组﹥无淋巴结转移组(P<0.05),远处转移组﹥无远处转移组(P<0.05);与性别、年龄、分化程度无关。结论 Trop-2在结直肠癌组织中高表达,与Dukes分期、淋巴结转移、远处转移和肿瘤所在部位有关。 展开更多

关键词 结直肠癌 trop-2

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人肺腺癌组织和细胞系TROP-2表达的初步研究

5

作者 顾宇平 赵云根 +2 位作者 朱一蓓 张光波 黄建安 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第5期342-346,共5页

目的:检测人滋养层细胞表面抗原-2(TROP-2)在人肺腺癌组织和细胞系中的表达,探讨其与临床病理因素和预后的关系。方法:流式细胞术检测5株人肺腺癌细胞系、1株永生化正常人支气管上皮细胞系中TROP-2的表达,RT-PCR检测11例、免疫组化检测4... 目的:检测人滋养层细胞表面抗原-2(TROP-2)在人肺腺癌组织和细胞系中的表达,探讨其与临床病理因素和预后的关系。方法:流式细胞术检测5株人肺腺癌细胞系、1株永生化正常人支气管上皮细胞系中TROP-2的表达,RT-PCR检测11例、免疫组化检测46例肺腺癌组织中TROP-2的表达,并结合临床病理因素及预后进行分析。结果:人肺腺癌细胞系中H1975、SPCA-1和PC-9有TROP-2表达,表达阳性率分别为(45.3±5.4)%、(91.4±4.6)%和(97.2±2.1)%,而在A549、H1299及正常人支气管上皮细胞系HBE中无表达。TROP-2 mRNA的表达阳性率为72.7%(8/11)。TROP-2蛋白在肺腺癌组织中的阳性率(43.5%,20/46)明显高于癌旁正常肺组织(0,0/11)和肺良性病变组织(9.5%,2/21),P=0.001。肺腺癌TROP-2的表达与肿瘤淋巴结转移(P=0.02)和TNM分期(P=0.02)相关,与患者术后生存期呈负相关趋势,但差异无统计学意义,P=0.068。结论:TROP-2在肺腺癌组织及肺腺癌细胞系中均有较高表达,可能在肺腺癌发生发展中发挥重要作用。 展开更多

关键词 肺腺癌 trop-2 流式细胞术 RT-PCR 免疫组化

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肿瘤相关抗原Trop-2胞外区片段蛋白的表达及其特性分析

6

作者 林红 张慧林 +5 位作者 梁洁 朱进 唐奇 苏亦平 冯振卿 管晓红 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期312-315,共4页

目的:从临床乳腺癌组织中扩增肿瘤相关抗原Trop-2胞外肽段基因,在大肠杆菌中表达重组蛋白,并对该蛋白的生物学特性进行鉴定。方法:RT-PCR扩增Trop-2胞外肽段基因并克隆于pMD18-T载体中进行测序分析,用NcoⅠ和EcoRⅠ将含Trop-2胞外区重... 目的:从临床乳腺癌组织中扩增肿瘤相关抗原Trop-2胞外肽段基因,在大肠杆菌中表达重组蛋白,并对该蛋白的生物学特性进行鉴定。方法:RT-PCR扩增Trop-2胞外肽段基因并克隆于pMD18-T载体中进行测序分析,用NcoⅠ和EcoRⅠ将含Trop-2胞外区重组基因的质粒双酶切后,克隆到pBAD-gⅢ中。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌TOP10,以L-阿拉伯糖诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经后His柱亲和层析纯化后,用Western blot、ELISA检测鉴定。结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确。SDS-PAGE和Western blot显示,表达的重组蛋白分子质量约为38ku,此抗原能够与商业化抗体特异性结合。结论:成功制备Trop-2胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的Trop-2胞外肽段保持了原有的抗原性。 展开更多

关键词 trop-2基因 胞外区 原核表达

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乳腺癌组织中Trop-2蛋白的表达及意义 被引量：1

7

作者 陆莉 崔飞伦 +1 位作者 肖秀娣 徐雪松 《医学信息（医学与计算机应用）》 2014年第1期98-99,共2页

目的:探讨Trop-2在乳腺癌组织中的表达水平及临床意义。方法选择125例乳腺癌组织、30例正常乳腺组织和30例乳腺良性增生组织,应用免疫组织化学SABC法检测Trop-2的表达水平。结果125例乳腺癌中Trop-2阳性者84例(67.2%);30例乳腺良性增生... 目的:探讨Trop-2在乳腺癌组织中的表达水平及临床意义。方法选择125例乳腺癌组织、30例正常乳腺组织和30例乳腺良性增生组织,应用免疫组织化学SABC法检测Trop-2的表达水平。结果125例乳腺癌中Trop-2阳性者84例(67.2%);30例乳腺良性增生组织 Trop-2阳性者11例(36.7%);30例正常乳腺组织Trop-2阳性者8例(26.7%);Trop-2阳性表达率与乳腺癌的分化程度、淋巴结转移、临床分期有关,而与患者年龄、肿瘤大小无显著相关性。结论乳腺癌高表达Trop-2。 Trop-2的异常表达可能参与了乳腺癌的发生、发展过程,Trop-2有望成为乳腺癌治疗的分子靶点。 展开更多

关键词 乳腺癌 trop-2

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Trop-2靶点药物戈沙妥珠单抗的全球专利分析

8

作者 王蕾 杨大为 曹辉 《肿瘤药学》 CAS 2024年第5期635-640,共6页

目的分析戈沙妥珠单抗全球专利情况,为国内关注戈沙妥珠单抗的企业和研究机构提供有价值的专利信息。方法以HimmPat数据库全球专利数据为基础,从专利申请量、申请人、主要申请国、技术主题、原研企业布局及关键专利等维度,对戈沙妥珠单... 目的分析戈沙妥珠单抗全球专利情况,为国内关注戈沙妥珠单抗的企业和研究机构提供有价值的专利信息。方法以HimmPat数据库全球专利数据为基础,从专利申请量、申请人、主要申请国、技术主题、原研企业布局及关键专利等维度,对戈沙妥珠单抗的专利布局情况进行统计和分析。结果合并同族后共得到戈沙妥珠单抗全球专利102项,主要集中于原研企业Immunomedics,Inc.,其掌握了化合物、制备方法、治疗方法、联合用药领域的关键技术,并在全球进行了相应布局。随着药物的上市,更多用途类研究受到关注。越来越多的研究者将在戈沙妥珠单抗研究领域提出更多的申请。结论国内关注戈沙妥珠单抗的研究机构和药企可从药物治疗方法和联合用药,以及化合物制备方法、合成工艺,药物新用途等角度展开研究,一方面为仿制药做准备,另一方面形成具有核心价值的自主知识产权。 展开更多

关键词 戈沙妥珠单抗 trop-2 专利分析

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甲状腺乳头状癌中TROP-2表达的临床意义及其诊断价值 被引量：7

9

作者 章萍萍 黄悦 +3 位作者 黄文斌 王劲松 吕倩 赵有财 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期38-42,共5页

目的观察人类滋养层细胞表面抗原2(TROP-2)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,探讨TROP-2在PTC中表达的临床意义及其诊断价值。方法采用免疫组化EnVision法检测100例甲状腺恶性病变(PTC 75例、滤泡性癌10例、... 目的观察人类滋养层细胞表面抗原2(TROP-2)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,探讨TROP-2在PTC中表达的临床意义及其诊断价值。方法采用免疫组化EnVision法检测100例甲状腺恶性病变(PTC 75例、滤泡性癌10例、髓样癌10例、差分化癌5例)、45例良性病变(正常甲状腺10例、结节性甲状腺肿10例、桥本甲状腺炎15例、滤泡性腺瘤10例),5例具有乳头样核特征的非浸润性甲状腺滤泡性肿瘤(non-invasive folliculaRthyroid neoplasms with papillary-like nucleaRfeatures,NIFTP)中TROP-2的表达;ARMS法检测PTC中BRAF V600E基因突变。分析TROP-2对PTC诊断的敏感性和特异性,及其与PTC临床病理特征以及BRAF V600E基因突变的关系。结果TROP-2在PTC中的阳性率为81.3%(61/75),在其他甲状腺恶性肿瘤和良性病变中均阴性,TROP-2对PTC诊断的敏感性为81.3%,特异性为100%。TROP-2表达与PTC淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤部位及临床分期无关(P>0.05),经典型PTC中TROP-2表达高于滤泡亚型PTC(P<0.05)。PTC中TROP-2表达与BRAF V600E基因突变呈正相关(P<0.05)。结论TROP-2是一种具有高度特异性和敏感性的诊断PTC的标志物,TROP-2检测可预测PTC的临床生物学行为和BRAF V600E基因突变状态,并对于形态学变形的PTC、微小型PTC和PTC的甲状腺内扩散的诊断和识别具有重要价值。 展开更多

关键词 甲状腺肿瘤 甲状腺乳头状癌 trop-2 BRAF V600E 免疫组织化学

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全人源抗Trop-2 IgG的制备及对卵巢癌细胞生物特性的影响 被引量：4

10

作者 刘金荣 白璐月 +7 位作者 唐奇 王一荃 叶春萍 殷郑娜 朱进 冯振卿 童华 张慧林 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期280-286,共7页

目的 :构建全人源抗人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2,Trop-2)抗体Ig G真核表达系统,表达并纯化该抗体,并检测其对卵巢癌细胞生物特性的影响。方法:构建全人源抗Trop-2抗体Ig G的重组表达载体;在293Free... 目的 :构建全人源抗人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2,Trop-2)抗体Ig G真核表达系统,表达并纯化该抗体,并检测其对卵巢癌细胞生物特性的影响。方法:构建全人源抗Trop-2抗体Ig G的重组表达载体;在293Free Style(293F)真核表达体系中表达并纯化该抗体。使用SDS-PAGE、ELISA、亲和力测定、免疫荧光等方法鉴定该抗体并分析其免疫学活性;使用cell counting kit-8(CCK-8)法、划痕实验、Transwell实验和细胞凋亡实验分析其对卵巢癌细胞特性的影响。结果:成功制备出全人源抗Trop-2 Ig G;经多种方法检测,该抗体能与Trop-2蛋白特异性结合;对表达Trop-2的卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡有明显影响。当抗体浓度为400μg/m L时,卵巢癌细胞HO8910的生存率仅为55.95%(P<0.01),划痕愈合率仅为24.71%(对照组为70.80%,P<0.01),侵袭细胞数是对照组的32.11%(P<0.05),细胞凋亡率是对照组的2倍(P<0.05)。结论 :全人源抗Trop-2 Ig G可特异性识别卵巢癌细胞表面的Trop-2蛋白,对卵巢癌细胞的恶性行为具有明显的抑制作用。因此,全人源抗Trop-2 Ig G在卵巢癌的靶向治疗中有潜在应用价值。 展开更多

关键词 trop-2 全人源IgG 卵巢癌

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靶向Trop-2 CAR-T细胞的制备及其体外对卵巢癌细胞杀伤作用的研究 被引量：3

11

作者 徐亚如 周荧 +9 位作者 唐奇 刘振云 黄骁辰 杨婷婷 张慧林 赵薇 蒯兴旺 仇镇宁 朱进 冯振卿 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第6期653-658,共6页

目的:制备靶向人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2,Trop-2)的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T),观察Trop-2 CAR-T细胞在体外对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:运用分子克隆及基因... 目的:制备靶向人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2,Trop-2)的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T),观察Trop-2 CAR-T细胞在体外对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:运用分子克隆及基因重组技术构建Trop-2 CAR;采用Western blot检测Trop-2 CAR在293T细胞中的表达;CCK-8法检测Trop-2 CAR-T细胞对卵巢癌细胞增殖的影响;ELISA检测细胞因子分泌的变化。结果:酶切鉴定及测序分析结果表明,Trop-2 CAR各基因片段连接正确;Western blot检测结果显示,该质粒能够在293T细胞中有效表达;CCK-8结果显示,制备的Trop-2 CAR-T细胞在体外能明显抑制表达Trop-2的卵巢癌细胞的增殖(P<0.05);ELISA检测结果表明Trop-2 CAR-T细胞与表达Trop-2的卵巢癌细胞共培养后,干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白介素(interleukin-2,IL-2)细胞因子分泌增加(P<0.01)。结论:该研究成功制备了Trop-2 CAR-T细胞,可有效抑制Trop-2表达阳性的卵巢癌细胞的增殖。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体 trop-2 卵巢癌

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甲状腺乳头状癌细针穿刺吸取细胞学中TROP-2表达及其临床意义 被引量：5

12

作者 杨路路 田智丹 +2 位作者 王粮 王劲松 赵有财 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期223-226,共4页

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)细针穿刺吸取细胞学中TROP-2的表达及其临床意义。方法 收集86例PTC和19例良性甲状腺结节(benign thyroid nodules, BTN)临床资料,采用免疫组化法检测TROP-2的表达,并与常规... 目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)细针穿刺吸取细胞学中TROP-2的表达及其临床意义。方法 收集86例PTC和19例良性甲状腺结节(benign thyroid nodules, BTN)临床资料,采用免疫组化法检测TROP-2的表达,并与常规标志物Galectin-3、HBME-1、CK19进行比较,分析TROP-2在甲状腺细胞学中诊断PTC的价值及其与PTC淋巴结转移的关系。结果 86例PTC组中TROP-2、Galectin-3、HBME-1、CK19阳性率分别为95.3%、82.6%、81.4%、90.7%,在BTN中仅个别表达,差异有统计学意义(P<0.05);结果显示TROP-2阳性率最高,且灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确度均高于Galectin-3、HBME-1、CK19。TROP-2、Galectin-3、HBME-1、CK19诊断PTC的AUC分别为0.950、0.886、0.828、0.848,结果显示TROP-2对于诊断PTC效能最高;PTC细胞学中TROP-2表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论 TROP-2是诊断PTC高度敏感性和特异性的标志物,有助于提高细胞学诊断的准确性,对PTC早期正确诊断和有效治疗具有一定价值。 展开更多

关键词 甲状腺肿瘤 乳头状癌 细针穿刺吸取细胞学 trop-2

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Trop-2基因在膀胱尿路上皮癌中的遗传表达和临床意义 被引量：1

13

作者 付婷婷 林逸飞 +4 位作者 廖邦华 杨勇 陈正龙 刘悦丹 黄进 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第6期487-493,共7页

目的通过对癌症基因组图谱(TCGA)数据库中膀胱尿路上皮癌(BLCA)的数据挖掘,探讨Trop-2基因的表达及其临床意义,为Trop-2作为临床治疗靶点提供理论依据。方法利用GEPIA2、cBioPortal等在线工具分析Trop-2在泛癌中的表达情况。采用HPA数... 目的通过对癌症基因组图谱(TCGA)数据库中膀胱尿路上皮癌(BLCA)的数据挖掘,探讨Trop-2基因的表达及其临床意义,为Trop-2作为临床治疗靶点提供理论依据。方法利用GEPIA2、cBioPortal等在线工具分析Trop-2在泛癌中的表达情况。采用HPA数据库比较正常膀胱组织与BLCA组织Trop-2的免疫组织化学染色结果,分析其蛋白表达差异。利用R4.1.2对从TCGA数据库中提取的BLCA的基因表达信息进行富集分析,以发现潜在通路。采用共表达基因分析和肿瘤免疫浸润分析,研究Trop-2在BLCA发生中的可能作用。结果免疫组织化学染色结果证实,BLCA组织中Trop-2表达呈上调趋势,且通过参与细胞周期、p53信号通路等过程促进BLCA细胞生长、增殖和转移。肿瘤免疫浸润分析显示,Trop-2及共表达基因与B细胞呈显著正相关,而与T细胞(CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞)呈显著负相关,一定程度上说明了免疫过程在肿瘤发生中的作用。结论Trop-2在BLCA中呈高表达,同时通过多种通路和免疫过程调控肿瘤的发生,因此可能成为BLCA诊断和治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 trop-2基因 免疫浸润分析 富集分析 共表达分析

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抗Trop-2 IgG抗体联合顺铂对卵巢癌细胞特性的影响 被引量：1

14

作者 姚雪 刘金荣 +2 位作者 殷郑娜 张慧林 童华 《临床和实验医学杂志》 2022年第18期1949-1953,共5页

目的探讨抗Trop-2 IgG抗体联合顺铂对卵巢癌上皮细胞的影响。方法转染Trop-2质粒至293F细胞,利用Protein A亲和柱纯化,获得人源抗Trop-2 IgG抗体。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Trop-2质粒转染效率;聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)鉴定抗Trop-2 Ig... 目的探讨抗Trop-2 IgG抗体联合顺铂对卵巢癌上皮细胞的影响。方法转染Trop-2质粒至293F细胞,利用Protein A亲和柱纯化,获得人源抗Trop-2 IgG抗体。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Trop-2质粒转染效率;聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)鉴定抗Trop-2 IgG抗体纯化效率;分子互作Biacore T100检测抗Trop-2 IgG抗体与Trop-2抗原的亲和力。蛋白免疫印迹、流式细胞术和免疫荧光检测HO8910细胞和Iose 386细胞中Trop-2蛋白表达水平。实验分为4组:磷酸盐缓冲液(PBS)组、Trop-2 IgG组、cisplatin组、Trop-2 IgG+cisplatin组。CCK8检测卵巢癌细胞存活率,Transwell检测卵巢癌细胞迁移和侵袭能力。结果成功转染并纯化人源抗Trop-2 IgG抗体,并且其与Trop-2具有较高的结合力和免疫活性。抗Trop-2 IgG抗体在HO8910细胞中高表达,在Iose 386细胞中不表达。当顺铂存在时,Trop-2蛋白表达水平在HO8910细胞中高于Iose 386细胞,差异有统计学意义(P<0.05),并且Iose 386细胞中Trop-2蛋白表达水平不受影响。在HO8910细胞中,与PBS组相比,Trop-2组细胞存活率显著降低,且随着时间的增加,存活率逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与cisplatin组相比,Trop-2 IgG+cisplatin组中HO8910细胞和Iose 386细胞存活率都降低,差异有统计学意义(P<0.05)。在HO8910细胞中,与PBS组相比,其余3组细胞迁移和侵袭能力降低,并且Trop-2 IgG+cisplatin组中迁移和侵袭细胞数量少于cisplatin组,差异均有统计学意义(P<0.05);而在Iose 386细胞中无效果。结论抗Trop-2 IgG联合顺铂后可特异性识别卵巢癌细胞表面的Trop-2抗原,且能加强顺铂对HO8910细胞的抑制效果,为卵巢癌抗体-药物偶联物的开发和靶向治疗提供了思路。 展开更多

关键词 卵巢癌 trop-2 顺铂

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CD133、TROP-2在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究初探 被引量：2

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作者 顾宇平 朱一蓓 +2 位作者 张光波 赵云根 黄建安 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1396-1400,共5页

目的:探讨肿瘤干细胞标志物CD133、人滋养层细胞表面抗原-2(trophoblast cell-surface antigens 2,TROP-2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义。方法:用免疫组化、免疫荧光法检测CD133、TROP-2在NSCLC中... 目的:探讨肿瘤干细胞标志物CD133、人滋养层细胞表面抗原-2(trophoblast cell-surface antigens 2,TROP-2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义。方法:用免疫组化、免疫荧光法检测CD133、TROP-2在NSCLC中的表达,激光共聚焦显微镜观察其定位和共定位。结果:①CD133、TROP-2在NSCLC组织中的阳性表达率分别为30.00%和41.25%,均明显高于癌周正常肺组织及肺良性病变组织(P<0.01);②细胞分化程度越低,CD133表达阳性率越高(P=0.024);③CD133、TROP-2在有淋巴结转移组的阳性表达率高于无淋巴结转移组(P<0.05),TROP-2的阳性表达率随着TNM分期的升高而升高(P<0.05);④CD133、TROP-2在NSCLC中的表达具有密切相关性(P<0.001),且两种蛋白有共定位现象。结论:CD133、TROP-2的阳性表达均与NSCLC的侵袭、转移密切相关,初步证实二者在NSCLC组织中存在共定位关系,CD133联合TROP-2或许能成为NSCLC的肿瘤干细胞筛选标记物。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 肿瘤干细胞 CD133 人滋养层细胞表面抗原-2

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人滋养细胞表面抗原(Trop-2)在病变子宫内膜中表达的研究 被引量：2

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作者 龙腾飞 程玲慧 +2 位作者 王彦 庞秋实 李文文 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第24期4793-4796,共4页

目的:探讨人滋养细胞表面抗原(trophoblast cell-surface antigens2,Trop-2)在病变子宫内膜中的表达及其临床相关性。方法:采用免疫组化法检测100例正常子宫内膜或病变子宫内膜组织中Trop-2蛋白的表达,其中单纯增生子宫内膜患者26例,复... 目的:探讨人滋养细胞表面抗原(trophoblast cell-surface antigens2,Trop-2)在病变子宫内膜中的表达及其临床相关性。方法:采用免疫组化法检测100例正常子宫内膜或病变子宫内膜组织中Trop-2蛋白的表达,其中单纯增生子宫内膜患者26例,复杂或不典型增生子宫内膜患者34例,子宫内膜腺癌患者20例,对照组为20例增生期子宫内膜患者。结果:免疫组织化学法研究结果显示,Trop-2蛋白在正常增生子宫内膜和单纯性增生子宫内膜中几乎不表达,在复杂或不典型增生子宫内膜组织中以及子宫内膜腺癌呈阳性表达。主要分布在细胞膜上,阳性率分别为35.29%和65.00%,经过对比子宫内膜癌组的阳性表达率显著高于复杂型或伴不典型增生子宫内膜组的阳性表达率(P<0.05),且复杂型或伴不典型增生子宫内膜组的阳性表达率显著高于单纯性增生子宫内膜组(P<0.05),其表达水平随内膜病变程度的加重而升高,呈正相关关系(P<0.05)。结论:Trop-2蛋白在子宫内膜病变中的表达与其严重程度一致,可反映子宫内膜病变的发生发展,或可作为判断其严重程度的指标。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 子宫内膜病变 子宫内膜复杂型增生 子宫内膜不典型增生 人滋养细胞表面抗原

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TROP-2在结肠癌中表达及临床意义 被引量：1

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作者 罗超元 黄南祺 +2 位作者 吴小兵 刘文明 李志发 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2021年第2期159-162,共4页

目的探讨结肠癌组织中人滋养层细胞表面抗原2(TROP-2)蛋白表达及临床意义。方法收集2017年3月至2018年12月行手术切除并经病理组织学确诊的结肠癌组织及相应的癌旁组织85例,采用免疫组化染色法检测组织TROP-2蛋白表达;分析其表达与结肠... 目的探讨结肠癌组织中人滋养层细胞表面抗原2(TROP-2)蛋白表达及临床意义。方法收集2017年3月至2018年12月行手术切除并经病理组织学确诊的结肠癌组织及相应的癌旁组织85例,采用免疫组化染色法检测组织TROP-2蛋白表达;分析其表达与结肠癌临床病理特征的关系。采用Logistic回归模型分析影响术后复发转移的因素。结果结肠癌组织中TROP-2蛋白阳性表达率为67.06%(57/85),高于癌旁正常组织的24.71%(21/85),差异有统计学意义(P<0.001);其表达与肿瘤直径、病灶位置、Dukes分期、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05)。39例Dukes'B+C期患者发生术后复发转移,复发转移组TROP-2蛋白阳性表达率高于未复发转移组[79.49%(31/39)vs.39.39%(13/33)],差异具有统计学意义(P<0.001)。Logistic回归模型分析,TROP-2蛋白阳性表达(HR=5.633,95%CI:2.886~9.161)是术后复发转移的独立危险因素(P<0.05)。结论TROP-2蛋白在结肠癌组织中高表达,也是结肠癌患者术后复发转移的独立危险因素。 展开更多

关键词 结肠癌 人滋养层细胞表面抗原2 术后复发转移 危险因素

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Trop-2基因在肝癌组织中的表达及对HepG2细胞增殖的影响 被引量：4

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作者 张健 马海 +2 位作者 杨柳 杨红春 何振兴 《癌症进展》 2019年第16期1902-1906,共5页

目的探讨肿瘤相关钙信号转导蛋白2(Trop-2)基因对肝癌发生发展的影响及作用机制。方法收集10例肝癌患者的肝癌组织标本和癌旁正常组织标本,免疫组织化学染色法和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法分别检测不同组织中Trop-2蛋白和mRN... 目的探讨肿瘤相关钙信号转导蛋白2(Trop-2)基因对肝癌发生发展的影响及作用机制。方法收集10例肝癌患者的肝癌组织标本和癌旁正常组织标本,免疫组织化学染色法和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法分别检测不同组织中Trop-2蛋白和mRNA的表达情况;流式细胞术和蛋白质印迹法(Western blot)检测HepG2、HCCLM3、HL-7702细胞中Trop-2蛋白的表达情况;Western blot法检测不同组织和转染后HepG2细胞中Trop-2、蛋白激酶C-α(PKC-α)、磷酸化蛋白激酶C-α(p-PKC-α)和核因子-κB(NF-κB)的表达情况;CCK-8法检测转染后HepG2细胞的增殖率。结果肝癌组织中p-PKC-α、NF-κB、Trop-2蛋白及Trop-2 mRNA的相对表达量均明显高于癌旁正常组织(P﹤0.01);HCCLM3细胞和HepG2细胞中Trop-2蛋白的相对表达量均明显高于HL-7702细胞(P﹤0.01);Trop-2 siRNA组HepG2细胞中Trop-2、p-PKC-α、PKC-α和NF-κB蛋白的相对表达量均低于空白对照组和阴性对照组(P﹤0.05);Trop-2 siRNA组HepG2细胞的增殖率低于阴性对照组(P﹤0.05)。结论Trop-2基因在肝癌组织和肝癌细胞株中均有较高水平的表达,提示其可能是肝癌潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 trop-2 肝癌 预后 细胞增殖 HEPG2细胞

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以Trop-2为靶标的抗肿瘤研究进展 被引量：2

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作者 杨黎娜 姚雪静 《中外医学研究》 2021年第2期189-191,共3页

Trop-2是一种跨膜糖蛋白,在多种肿瘤细胞中异常表达,作为细胞内钙信号的传递者参与多种肿瘤发生相关的细胞信号传导途径。以Trop-2为靶点的抗肿瘤药物主要是抗体药物偶联物,具有广阔的研究前景。本文针对Trop-2的作用机制、在不同肿瘤... Trop-2是一种跨膜糖蛋白,在多种肿瘤细胞中异常表达,作为细胞内钙信号的传递者参与多种肿瘤发生相关的细胞信号传导途径。以Trop-2为靶点的抗肿瘤药物主要是抗体药物偶联物,具有广阔的研究前景。本文针对Trop-2的作用机制、在不同肿瘤中的表达与功能,以及以Trop-2为靶标的抗肿瘤药物研究进行了综述。 展开更多

关键词 trop-2 靶向药 抗肿瘤 抗体-药物偶联物

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靶向Trop-2蛋白的抗体药物

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作者 吴雨轩 卢洲 +2 位作者 郑雪婷 石明松 李小安 《广东化工》 CAS 2024年第3期84-86,共3页

Trop-2(Trophoblast surface antigen 2,滋养层细胞表面抗原2)蛋白是一种位于细胞膜上的膜糖蛋白,在胚胎发育和组织再生中起着重要的调节作用。Trop-2蛋白在正常组织中几乎不表达,而在肿瘤细胞中高表达。Trop-2蛋白是抗肿瘤药物的一种... Trop-2(Trophoblast surface antigen 2,滋养层细胞表面抗原2)蛋白是一种位于细胞膜上的膜糖蛋白,在胚胎发育和组织再生中起着重要的调节作用。Trop-2蛋白在正常组织中几乎不表达,而在肿瘤细胞中高表达。Trop-2蛋白是抗肿瘤药物的一种理想靶点,正在广泛开发靶向Trop-2的相关药物,其中抗体靶向药物是重要的研究方向。本文主要综述了当前在研发的靶向Trop-2的抗体药物,如h RS7、Sacituzumab govitecan、Datopotamab Deruxtecan、RN927C、Trop-2 IgG Rap、SHR-A1921、DB-1305、BAT8003等。靶向Trop-2的抗体药物有着广泛的应用前景,不过也存在复杂的药代动力学特性和肿瘤渗透性较差等不足,有待开发更优的靶向Trop-2抗体药物。 展开更多

关键词 trop-2 抗体 药物 肿瘤 治疗

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