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LncRNA KCNQ1OT1经miR-181a-5p/TRIM71通路对人胶质瘤细胞增殖及放疗敏感性的影响
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作者 卑源琪 钱霞 《解剖学杂志》 2025年第3期215-220,共6页
目的 :探究长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)对胶质瘤细胞增殖及放疗敏感性的影响以及对miR-181a-5p/TRIM71通路的调控机制。方法 :将人胶质瘤细胞U251分为NC组(未转染质粒)、si-NC组(转染KCNQ1OT1阴性对照)、si-KCNQ1... 目的 :探究长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)对胶质瘤细胞增殖及放疗敏感性的影响以及对miR-181a-5p/TRIM71通路的调控机制。方法 :将人胶质瘤细胞U251分为NC组(未转染质粒)、si-NC组(转染KCNQ1OT1阴性对照)、si-KCNQ1OT1组(转染si-KCNQ1OT1)、si-KCNQ1OT1+miRNC组(共转染si-KCNQ1OT1和miR-181a-5p阴性对照)、si-KCNQ1OT1+miR-181a-5p inhibitor组(共转染siKCNQ1OT1和miR-181a-5p inhibitor),转染培养48 h后,利用6 Gy射线照射各组部分细胞。采用RT-qPCR检测各组细胞中KCNQ1OT1、miR-181a-5p和TRIM71 mRNA水平;采用CKK-8和克隆形成实验检测各组转染细胞的增殖活性,采用流式细胞术检测各组转染细胞的凋亡情况;采用免疫印迹检测各组转染细胞中TRIM71蛋白表达相对水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-181a-5p与KCNQ1OT1、TRIM71的靶向关系。结果 :与si-NC组相比,si-KCNQ1OT1组KCNQ1OT1和TRIM71 mRNA表达水平、细胞存活率以及克隆形成数量均降低,miR-181a-5p表达水平升高;而经6 Gy射线垂直照射后,各组转染细胞存活率均降低,细胞凋亡率均升高,其中si-KCNQ1OT1+6Gy组细胞存活率低于si-NC+6Gy组,细胞凋亡率则高于si-NC+6Gy组;回补实验显示,miR-181a-5p inhibitor逆转了敲低KCNQ1OT1对细胞增殖及放疗敏感性所造成的影响;双荧光素酶活性验证了miR-181a-5p与KCNQ1OT1及TRIM71均存在靶向关系。结论 :通过敲低KCNQ1OT1能够引起上调miR-181a-5p、下调TRIM71的表达,抑制胶质瘤细胞的增殖,提高其放疗敏感性。 展开更多
关键词 胶质瘤 长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1 miR-181a-5p trim71
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miR-181c-5p靶向TRIM71调控非小细胞肺癌细胞A549的凋亡研究 被引量：1
2
作者 边红芝 韩俊垒 +1 位作者 胡建平 丁成智 《实用癌症杂志》 2022年第1期16-21,共6页
目的探讨miR-181c-5p调控非小细胞肺癌细胞A549的潜在机制。方法检测非小细胞肺癌细胞A549和人正常肺细胞HLF-a中miR-181c-5p的表达水平。过表达或敲低miR-181c-5p后,检测非小细胞肺癌细胞A549的凋亡水平。通过miRDB在线分析miR-181c-5... 目的探讨miR-181c-5p调控非小细胞肺癌细胞A549的潜在机制。方法检测非小细胞肺癌细胞A549和人正常肺细胞HLF-a中miR-181c-5p的表达水平。过表达或敲低miR-181c-5p后,检测非小细胞肺癌细胞A549的凋亡水平。通过miRDB在线分析miR-181c-5p潜在底物,过表达miR-181c-5p后,通过实时荧光定量PCR检测潜在底物的表达水平。敲低潜在底物后,检测非小细胞肺癌细胞A549的凋亡水平。结果miR-181c-5p在非小细胞肺癌细胞A549中的表达水平低于人正常肺细胞HLF-a(P<0.05)。过表达miR-181c-5p后,非小细胞肺癌细胞A549的凋亡上升(P<0.05);敲低miR-181c-5p后,非小细胞肺癌细胞A549的凋亡下降(P<0.05)。敲低TRIM71时,非小细胞肺癌细胞A549的凋亡水平上升(P<0.05)。过表达TRIM71后,非小细胞肺癌细胞A549的凋亡水平下降(P<0.05)。过表达miR-181c-5p后,TRIM71的蛋白水平下降;而敲低miR-181c-5p后,TRIM71的蛋白水平上升。敲低TRIM71后,非小细胞肺癌细胞A549的P53水平上升;而过表达TRIM71后,非小细胞肺癌细胞A549的p53水平下降。过表达miR-181c-5p后,非小细胞肺癌细胞A549的p53水平上升;而敲低miR-181c-5p后,非小细胞肺癌细胞A549的p53水平下降。结论miR-181c-5p通过靶向TRIM71 mRNA的3端非编码区后降低了TRIM71的表达水平,随后凋亡活化基因p53的蛋白水平上升,最后促进了非小细胞肺癌细胞A549的凋亡。 展开更多
关键词 miR-181c-5p trim71 非小细胞肺癌 A549 P53 凋亡
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