脱氢胆酸调控OPG/RANK和TRAF3抑制破骨细胞分化 被引量：2

1

作者 朱禹潼 张晓楠 +1 位作者 关溪 尚东 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期12-16,共5页

目的探讨脱氢胆酸(dehydrocholic acid,DHCA)对破骨细胞(osteoclasts,OCs)分化及功能的影响。方法采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B(NF-κB)-ligand,RANKL)... 目的探讨脱氢胆酸(dehydrocholic acid,DHCA)对破骨细胞(osteoclasts,OCs)分化及功能的影响。方法采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B(NF-κB)-ligand,RANKL)诱导成熟骨髓来源的巨噬细胞分化为OCs。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP/ACP5)染色,确定DHCA抑制OCs形成的最佳浓度。qRT-PCR检测OCs分化和功能相关基因TRAP/ACP5、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)的基因表达。Western blot检测OCs中TNF受体相关因子3(TNF receptor-associated factor 3,TRAF3)、NF-κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的蛋白水平。结果DHCA浓度为200μmol/L是抑制OCs形成的最佳剂量(P<0.01)。DHCA抑制OCs分化和功能相关基因ACP5、CTSK和MMP9的表达(P<0.01)。DHCA通过下调RANK蛋白和增加TRAF3和OPG蛋白的表达来抑制OCs的分化(P<0.01)。结论DHCA通过调控OPG/RANK和TRAF3抑制OCs分化,这可能是一种有效的骨质疏松前体药物。 展开更多

关键词 脱氢胆酸 破骨细胞 OPG/RANK traf3 骨质疏松

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藤莓汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜TRAF3/NF-κB信号途径的影响 被引量：5

2

作者 卜祥伟 张红红 +8 位作者 张建萍 王康 何毓玺 张笑栩 王达利 张正菊 杨蕾 相瑞阳 孟凤仙 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1467-1473,共7页

目的观察藤莓汤对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠关节滑膜及血清肿瘤坏死因子受体作用因子3(tumor necrosis factor receptor-associated factor 3, TRAF3)、白细胞介素-23(interleukin-23, IL-23)、白细胞介素-... 目的观察藤莓汤对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠关节滑膜及血清肿瘤坏死因子受体作用因子3(tumor necrosis factor receptor-associated factor 3, TRAF3)、白细胞介素-23(interleukin-23, IL-23)、白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)、核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达及踝关节病理的影响,探讨该方抑制类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜免疫炎性损伤的分子机制。方法建立CIA大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,阳性对照组,藤莓汤大、中、小剂量组,每组各6只,另设正常组6只。正常组与模型组予去离子水10 mL/(kg·d)灌胃,阳性对照组予来氟米特1. 87 mg/(kg·d)灌胃,藤莓汤大、中、小剂量组分别按照含生药量28、14、7 g/(kg·d)藤莓汤制剂灌胃,连续干预12周。分别采用Real-time PCR、Western blot、ELISA技术检测TRAF3、IL-23、IL-17、NF-κB、TNF-αmRNA及蛋白表达水平,采用光镜观察踝关节病理改变。结果与正常组比较,模型组TRAF3 mRNA转录及蛋白表达水平下调(P<0.01),IL-23、IL-17、NF-κB及TNF-αmRNA转录及蛋白表达水平上调(P<0.01)。与模型组比较,藤莓汤中剂量组TRAF3 mRNA转录及蛋白表达水平上调(P<0.01,P<0.05),藤莓汤大、中剂量组IL-23、NF-κB、IL-17、TNF-αmRNA转录及蛋白表达水平下调(P<0.01),藤莓汤小剂量组NF-κB、IL-17、TNF-α蛋白表达水平下调(P<0.01)。藤莓汤各剂量组CIA大鼠踝关节病理改变有不同程度改善。结论藤莓汤改善CIA模型大鼠滑膜免疫炎性损伤的机制可能与调节TRAF3/NF-κB信号通路相关。 展开更多

关键词 藤莓汤 胶原诱导性关节炎 traf3/NF—κB信号途径

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人类组织中TRAF3IP3基因表达的检测及转染胚肾HEK293细胞后的亚细胞定位 被引量：1

3

作者 王洋 王沂 +4 位作者 余源 刘青 毛焕 熊艳杰 张秀军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期1447-1450,共4页

目的克隆TRAF3IP3基因,明确TRAF3IP3在部分人类组织中的表达谱并鉴定其表达产物的亚细胞定位。方法采用实时定量PCR检测TRAF3IP3基因在人体各组织中的表达情况;克隆TRAF3IP3基因开放读码框区(ORF)并构建真核亚细胞定位质粒。转染人胚肾H... 目的克隆TRAF3IP3基因,明确TRAF3IP3在部分人类组织中的表达谱并鉴定其表达产物的亚细胞定位。方法采用实时定量PCR检测TRAF3IP3基因在人体各组织中的表达情况;克隆TRAF3IP3基因开放读码框区(ORF)并构建真核亚细胞定位质粒。转染人胚肾HEK 293细胞,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的亚细胞定位。结果实时定量PCR证实TRAF3IP3基因在被检测的11种组织中均有表达,其中在淋巴结、脾、骨髓、胃和睾丸中的表达水平较高;成功克隆了TRAF3IP3基因ORF区并构建成为荧光定位质粒,激光共聚焦显微镜观察证实TRAF3IP3蛋白主要定位于核膜,在核周呈颗粒状分布。结论 TRAF3IP3基因在淋巴细胞富集的器官呈高表达,可能参与免疫系统的发育、成熟及调控,其表达产物在细胞内主要定位于核膜及核周胞浆。 展开更多

关键词 traf3IP3 组织表达谱 亚细胞定位

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人TRAF3IP3基因的克隆及真核表达 被引量：1

4

作者 王沂 张秀军 +3 位作者 刘青 余源 慈雅丽 王洋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期465-468,共4页

目的构建人肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法 RT-PCR扩增获得TRAF3IP3开放读码框区基因,双酶切连入真核表达载体pIRES2-EGFP,双酶切和测序鉴定阳性克隆;重组质粒磷酸钙法... 目的构建人肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法 RT-PCR扩增获得TRAF3IP3开放读码框区基因,双酶切连入真核表达载体pIRES2-EGFP,双酶切和测序鉴定阳性克隆;重组质粒磷酸钙法转染HEK293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot法鉴定TRAF3IP3基因的表达情况。结果经限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,成功构建了TRAF3IP3真核表达质粒,荧光显微镜观察可见转染了重组质粒的HEK293细胞有绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot结果证实TRAF3IP3蛋白高水平表达。结论成功构建了pIRES-EGFP-TRAF3IP3真核表达质粒,为TRAF3IP3基因功能的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 traf3IP3 真核表达 转染 HEK293细胞

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人TRAF3IP3基因剪接异构体2的克隆表达和生物信息学分析

5

作者 王沂 杨文思 +5 位作者 赵俊暕 石峻 戚晓渊 郑永强 牛艳艳 王洋 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期119-123,共5页

[目的]克隆、原核表达并纯化人类TRAF3IP3基因剪接异构体2(TRAF3IP3iso2),对TRAF3IP3iso2蛋白进行生物信息学分析。[方法]从人骨髓单个核细胞c DNA中扩增TRAF3IP3iso2开放阅读框区,双酶切连入原核表达载体p ET-28a(+),重组质粒转化E.col... [目的]克隆、原核表达并纯化人类TRAF3IP3基因剪接异构体2(TRAF3IP3iso2),对TRAF3IP3iso2蛋白进行生物信息学分析。[方法]从人骨髓单个核细胞c DNA中扩增TRAF3IP3iso2开放阅读框区,双酶切连入原核表达载体p ET-28a(+),重组质粒转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达效果,Ni-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白;根据测序结果对TRAF3IP3iso2蛋白进行生物信息学分析。[结果]成功克隆了人类TRAF3IP3iso2编码区并构建了原核表达载体p ET-28a(+)-TRAF3IP3iso2,在大肠杆菌中诱导表达、纯化获得了相对分子量约22.7k Da的融合蛋白;生物信息学分析显示TRAF3IP3iso2蛋白二级结构以α螺旋为主,无TRAF3IP3iso1蛋白的跨膜区结构。[结论]证明了人类TRAF3IP3iso2的存在,为TRAF3IP3功能的研究提供了实验依据。 展开更多

关键词 traf3IP3 剪接异构体 原核表达 生物信息学

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BAFF-R胞内区与TRAF3相结合关键分子结合域的确定

6

作者 田侠 徐东刚 杜建芳 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第8期1444-1448,共5页

目的:研究BAFF-R胞内区与TRAF3相互作用的关键结合域。方法:分别钓取BAFF-R胞内区和TRAF3的c DNA片段,克隆到酵母双杂交系统中,验证两者之间的相互作用。利用缺失PCR和重叠PCR的方法获取11个TRAF3的突变体,验证TRAF3的11个突变体和BAFF-... 目的:研究BAFF-R胞内区与TRAF3相互作用的关键结合域。方法:分别钓取BAFF-R胞内区和TRAF3的c DNA片段,克隆到酵母双杂交系统中,验证两者之间的相互作用。利用缺失PCR和重叠PCR的方法获取11个TRAF3的突变体,验证TRAF3的11个突变体和BAFF-R胞内区的相互作用。结果:TRAF3与BAFF-R胞内区发生相互作用时,有三个关键的分子结合域,分别是N端的螺旋结构382-400位氨基酸、中间的428-463位氨基酸以及TRAF3 C端的543-560位氨基酸。结论:在体内得到了BAFF-R胞内区与TRAF3相互作用的三个关键分子结合域,有助于展开对BAFF-R胞内区与TRAF3相互作用的进一步研究。 展开更多

关键词 BAFF-R traf3 突变体

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凋亡蛋白Daxx与TRAF3相互作用的筛选及相互作用位点的鉴定

7

作者 张翠莉 成海恩 王应雄 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第9期826-830,共5页

目的:利用酵母双杂交技术在成人肝文库中筛选能与死亡结构域相关蛋白(Daxx)相互作用的蛋白,并用哺乳动物细胞中进行了免疫共沉淀验证,以进一步了解Daxx的功能.方法:利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增Daxx全长ORF,构建pDBLeu-Daxx载体.转化M... 目的:利用酵母双杂交技术在成人肝文库中筛选能与死亡结构域相关蛋白(Daxx)相互作用的蛋白,并用哺乳动物细胞中进行了免疫共沉淀验证,以进一步了解Daxx的功能.方法:利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增Daxx全长ORF,构建pDBLeu-Daxx载体.转化MaV203,检测细胞毒性和自激活作用,确定His基础表达的3AT浓度.依次转化成人肝cDNA文库.在营养缺陷型培养基上挑取三阳性克隆.进行回转实验和免疫共沉淀验证,并利用β-gal分析进行了相互作用结构域的鉴定.结果:筛库转化效率达到5.8×106个克隆.筛选到了一株能与Daxx相互作用的阳性克隆,DNA序列分析和同源检索表明该阳性克隆为肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3).通过回转及co-IP证实了TRAF3能与Daxx相互作用,β-gal分析发现TRAF3通过TRAFDomain与Daxx相互作用.结论:TRAF3通过TRAFDomain与Daxx相互作用,可能参与了Daxx的调控和功能,为进一步了解Daxx作用的分子机制奠定了基础. 展开更多

关键词 凋亡 死亡结构域相关蛋白 traf3 酵母双杂交

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罗非鱼TRAF3基因的表达及功能研究 被引量：1

8

作者 夏洪丽 汪志文 +6 位作者 黎源 陈文捷 龙梦 喻大鹏 程俊 夏立群 鲁义善 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期308-315,共8页

肿瘤坏死因子受体(TNFR)相关因子3(TRAF3)是多种免疫途径中的关键调控因子。从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)中克隆获得了TRAF3基因,命名为OnTRAF3(GeneBank No.MN258118),该基因包含1个环指结构域、1个锌指结构域、1个卷曲螺旋和M... 肿瘤坏死因子受体(TNFR)相关因子3(TRAF3)是多种免疫途径中的关键调控因子。从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)中克隆获得了TRAF3基因,命名为OnTRAF3(GeneBank No.MN258118),该基因包含1个环指结构域、1个锌指结构域、1个卷曲螺旋和MATH结构域。多序列比对表明,OnTRAF3与其他已知的TRAF3蛋白具有高度的相似性,尤其是MATH结构域。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析显示,OnTRAF3在各组织中广泛分布,且在脑、皮肤、肠和鳃中表达量较高。在无乳链球菌诱导后,多个组织中的OnTRAF3表达量出现了不同程度的上调,说明OnTRAF3参与了罗非鱼的抗菌免疫应答。亚细胞定位实验显示,OnTRAF3分布在HEK293的细胞质和细胞核中。此外,荧光素酶报告基因实验结果显示,野生型(WT)OnTRAF3可显著激活NF-κB信号,而coiled-coil和MATH结构域缺失后,依然能够显著激活NF-κB活性,而RING和Zinc缺失后,该激活作用则明显减弱,表明RING和Zinc结构域是OnTRAF3在免疫信号通路中行使功能的关键结构域。研究为探索TRAF3在罗非鱼免疫应答中的功能提供了重要的基础。 展开更多

关键词 traf3 免疫反应 NF-κB信号 尼罗罗非鱼

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日本鳗鲡TRAF3基因的克隆及功能研究 被引量：1

9

作者 凌露露 梁英 +2 位作者 黄文树 聂品 黄贝 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期143-154,共12页

为探究鱼类TRAF3在鱼类抗病毒免疫应答中的功能及作用机制,实验利用逆转录PCR克隆获得了日本鳗鲡TRAF3转录本(AjTRAF3),利用生物信息学软件分析了AjTRAF3的结构特征,利用实时荧光定量PCR(qPCR)、双荧光素酶报告系统以及免疫共沉淀等方... 为探究鱼类TRAF3在鱼类抗病毒免疫应答中的功能及作用机制,实验利用逆转录PCR克隆获得了日本鳗鲡TRAF3转录本(AjTRAF3),利用生物信息学软件分析了AjTRAF3的结构特征,利用实时荧光定量PCR(qPCR)、双荧光素酶报告系统以及免疫共沉淀等方法对其表达规律、功能及作用机理进行了初步分析。AjTRAF3的开放阅读框长度为1707 bp,编码568个氨基酸。序列结构分析结果显示,AjTRAF3由N端的环结构域2个锌指结构域以及1个螺旋结构域和C端高度保守的TRAF-C(MATH)结构域组成。qPCR结果显示,AjTRAF3在日本鳗鲡各组织中均有表达,脑组织中表达量最高,其次为头肾,心脏中的表达量最低。Poly I:C刺激6 h后,日本鳗鲡脾脏组织中AjTRAF3上调倍数最高,为对照组的15.83倍。迟缓爱德华氏菌感染24 h后,日本鳗鲡脾脏组织中AjTRAF3上调倍数最高,为对照组的31.47倍。此外,本研究构建了AjTRAF3真核表达质粒,发现过表达AjTRAF3能显著上调炎症及抗病毒相关基因的表达,可显著增强AjIFN2、AjIFN4和NF-κB启动子荧光素酶活性。并能显著上调由AjRIG-IN、AjMAVS、AjIRF3诱导的AjIFN2、AjIFN4和NF-κB启动子活性。免疫荧光结果显示,AjTRAF3主要定位于细胞质中,且与AjMAVS存在共定位。免疫共沉淀结果显示,AjTRAF3通过MATH结构域与AjMAVS相互结合,缺失该结构域后,其与AjMAVS的相互作用消失,推测AjTRAF3可通过介导RIG-I/MAVS信号转导途径调控鱼类的抗病毒免疫应答。本研究结果为进一步揭示鱼类TRAF3的生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 日本鳗鲡 traf3 MAVS 共定位 启动子

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鸡TRAF3基因的克隆表达及多克隆抗体的制备 被引量：1

10

作者 李春平 李拓凡 +3 位作者 万志敏 邵红霞 秦爱建 叶建强 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS 北大核心 2022年第4期45-50,共6页

为探究鸡源肿瘤坏死因子受体相关因子3 (TRAF3)的生物学功能,对鸡源TRAF3基因进行克隆表达并制备其多克隆抗体。将鸡TRAF3基因分别克隆入原核表达载体pGEX-6P-1和真核表达载体pcDNA3.1中构建出重组原核表达载体pGEX-6P-1-TRAF3和重组真... 为探究鸡源肿瘤坏死因子受体相关因子3 (TRAF3)的生物学功能,对鸡源TRAF3基因进行克隆表达并制备其多克隆抗体。将鸡TRAF3基因分别克隆入原核表达载体pGEX-6P-1和真核表达载体pcDNA3.1中构建出重组原核表达载体pGEX-6P-1-TRAF3和重组真核表达载体pcDNA3.1-TRAF3。构建的原核表达载体转化入大肠埃希菌BL21后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明获得GST-TRAF3的融合表达蛋白,且融合蛋白主要表达于包涵体中。将纯化的GST-TRAF3蛋白免疫小鼠制备抗GST-TRAF3多克隆抗体。间接免疫荧光及Western blot试验表明,所制备的抗TRAF3多克隆抗体不仅能与转染pcDNA3.1-TRAF3的DF-1及LMH细胞中表达的外源性TRAF3反应,而且能有效识别LMH细胞内源性的鸡源TRAF3蛋白。该研究中鸡TRAF3基因的克隆、表达及其多克隆抗体制备为后续研究鸡TRAF3的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡源traf3 原核表达 真核表达 多克隆抗体

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TRAF3IP2/IKK/NF-κB信号通路在动脉粥样硬化中的研究进展 被引量：3

11

作者 刘依侬 徐立 《中国实验诊断学》 2019年第9期1659-1661,共3页

动脉粥样硬化是多因素共同引起的慢性炎症疾病,病变从内膜开始,脂质和复合物积聚、血栓形成,进而纤维组织增生及钙质沉着,动脉中层的逐渐蜕变和钙化,导致动脉壁增厚变硬、血管腔狭窄。AS发生机制包括脂质浸润学说、血栓形成学说、平滑... 动脉粥样硬化是多因素共同引起的慢性炎症疾病,病变从内膜开始,脂质和复合物积聚、血栓形成,进而纤维组织增生及钙质沉着,动脉中层的逐渐蜕变和钙化,导致动脉壁增厚变硬、血管腔狭窄。AS发生机制包括脂质浸润学说、血栓形成学说、平滑肌细胞克隆学说、损伤反应学说、炎症学说等[1,2]。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 traf3IP2/IKK/NF IKK 信号通路

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肿瘤坏死因子受体作用因子3(TRAF3)结构及生物学功能 被引量：6

12

作者 王新禹 黄懿 +1 位作者 李礼 魏群 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期489-495,共7页

目前在哺乳动物中发现6个肿瘤坏死因子受体作用因子(TNF receptor associated factors,TRAFs)家族成员,它们主要参与TNF受体家族信号通路.这些TRAF成员在C末端有螺旋卷曲结构和保守的TRAF结构域.TRAF3是TRAF家族中功能最为多样化的成员... 目前在哺乳动物中发现6个肿瘤坏死因子受体作用因子(TNF receptor associated factors,TRAFs)家族成员,它们主要参与TNF受体家族信号通路.这些TRAF成员在C末端有螺旋卷曲结构和保守的TRAF结构域.TRAF3是TRAF家族中功能最为多样化的成员之一.1996年对TRAF3基因敲除小鼠进行研究发现,小鼠在出生早期死亡,这阻碍了TRAF3的生物学功能进一步研究,另一方面也证实了TRAF3在出生后发育以及维持正常的免疫系统功能方面有着重要生物学功能.10年后研究发现,TRAF3的缺失能够导致非经典NF-κB信号通路激活,这使得TRAF3在该信号通路中的功能得到了进一步的阐述.最近研究表明,TRAF3不仅能够负向调节NF-κB和MAPK信号通路,还能够正向调节Ⅰ型干扰素的产生.通过研究还发现,TRAF3可能存在着负向调节钙调蛋白磷酸酶活性的新功能.因此,研究TRAF3在免疫信号通路中的作用以及与之相关的病毒疾病具有重要的意义. 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子受体作用因子3 抗病毒 先天免疫 TOLL样受体

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大肠杆菌麦芽糖结合蛋白激活TLR2介导的MyD88依赖途径和TLR4介导的TRIF/TRAF3依赖途径诱导Th1活化

13

作者 刘果木 翟晓玉 +5 位作者 孙敏英 张楠楠 倪伟华 接晶 台桂香 蒋丽娜 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期23-28,共6页

目的探讨TLR2/TLR4介导的信号通路在大肠杆菌麦芽糖结合蛋白诱导Th1活化中的调控作用。方法免疫磁珠分选方法获取纯的CD4+T细胞,经CD3/CD28抗体活化后的CD4+T细胞分别用MBP、MBP+anti-TLR2、MBP+anti-TLR4刺激。ELISA检测培养上清中IFN... 目的探讨TLR2/TLR4介导的信号通路在大肠杆菌麦芽糖结合蛋白诱导Th1活化中的调控作用。方法免疫磁珠分选方法获取纯的CD4+T细胞,经CD3/CD28抗体活化后的CD4+T细胞分别用MBP、MBP+anti-TLR2、MBP+anti-TLR4刺激。ELISA检测培养上清中IFN-γ和IL-4的分泌;RT-PCR检测CD4+T细胞IFN-γ、MyD88、TRIF、TRAF3和TRAF6的mRNA表达;Western blotting方法检测CD4+T细胞MyD88、TRIF、TRAF3和TRAF6的蛋白表达。结果 MBP组IFN-γ水平升高、IFN-γ、MyD88、TRIF、TRAF3的mRNA上调、TRAF6的mRNA下调;MBP+anti-TLR2组IFN-γ水平降低、TRAF6的mRNA上调、MyD88的mRNA下调、TRIF、TRAF3的mRNA无影响;MBP+anti-TLR4组IFN-γ水平升高、TRAF6的mRNA上调、MyD88、TRIF、TRAF3的mRNA下调,Western blotting实验也出现了相似的结果。结论 TLR2介导的MyD88依赖途径和TLR4介导的TRIF/TRAF3依赖途径在MBP诱导的Th1活化过程中发挥了重要的调控作用。 展开更多

关键词 麦芽糖结合蛋白 MYD88 TRIF traf3 TRAF6

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TRAF3和TRAF6在天然免疫中的作用 被引量：2

14

作者 王桂芹 邓国华 李书华 《畜牧兽医科技信息》 2006年第4期4-6,共3页

近年来,人们发现肿瘤坏死因子受体相关蛋白是肿瘤坏死因子受体(TNF)超家族和白细胞介素-1受体/Toll样受体(IL-1R/TLR)超家族重要信号转导分子。迄今为止,已发现六种不同的TRAFs,分别是TRAF1、TRAF2、TRAF3、TRAF4、TRAF5、TRAF6,其中TR... 近年来,人们发现肿瘤坏死因子受体相关蛋白是肿瘤坏死因子受体(TNF)超家族和白细胞介素-1受体/Toll样受体(IL-1R/TLR)超家族重要信号转导分子。迄今为止,已发现六种不同的TRAFs,分别是TRAF1、TRAF2、TRAF3、TRAF4、TRAF5、TRAF6,其中TRAF3和TRAF6在天然免疫中有重要作用。尽管二者的结构相似,但TRAF3和TRAF6在功能上有很大区别。 展开更多

关键词 traf3 TRAF6 天然免疫 获得性免疫

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银杏素促进成纤维样滑膜细胞中TRAF3蛋白的表达缓解类风湿关节炎 被引量：7

15

作者 吕昌伟 张静涛 +2 位作者 郗海涛 强毅 张乾 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期178-184,共7页

目的探究银杏素(ginkgetin)治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的潜在机制。方法通过TNF-α刺激成纤维样滑膜MH7A细胞建立炎性细胞模型,用银杏素单独处理或分别与TNF受体相关因子3(tumor necrosis factor receptor-associated f... 目的探究银杏素(ginkgetin)治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的潜在机制。方法通过TNF-α刺激成纤维样滑膜MH7A细胞建立炎性细胞模型,用银杏素单独处理或分别与TNF受体相关因子3(tumor necrosis factor receptor-associated factor 3,TRAF3)的小干扰RNA(si-TRAF3)和p38激动剂茴香霉素共同处理,检测细胞增殖、凋亡、炎症因子白介素(interleukin,IL)-6、IL-1β分泌、TRAF3蛋白表达和p38蛋白磷酸化水平。此外,建立CIA大鼠模型并给予口服银杏素,评估大鼠关节炎指数,足爪肿胀度和滑膜组织病理学,检测滑膜组织TRAF3表达以及TNF-α、IL-6和IL-1β水平。结果银杏素上调了TRAF3表达,抑制了MH7A细胞增殖及炎症因子分泌,促进凋亡,阻断p38 MAPK信号通路。而转染si-TRAF3或添加茴香霉素处理,可逆转银杏素对MH7A细胞增殖、凋亡和炎症因子分泌以及p38 MAPK信号通路的调节作用。此外,银杏素治疗降低了CIA大鼠关节炎指数、足爪肿胀度以及TNF-α,IL-6和IL-1β分泌。结论银杏素能够上调TRAF3表达,阻断p38 MAPK信号通路,抑制MH7A细胞增殖和炎症因子分泌,促进凋亡,进而减轻CIA大鼠的关节症状。 展开更多

关键词 银杏素 traf3 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 CIA大鼠 p38 MAPK信号通路

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ROCK1,TRAF3 mRNA在耐药性癫痫患者海马组织中的表达及意义 被引量：4

16

作者 杨柳 王学峰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期670-672,共3页

目的:观察耐药性癫痫患者脑组织中与锌离子相关的RhoA蛋白1(Rho-associatedc,oiled-coil containing protein ki-nase 1,ROCK1)和肿瘤坏死因子受体相关因子3(TNF receptor-associated factor 3,TRAF3)mRNA的表达,探讨其在耐药性癫痫发... 目的:观察耐药性癫痫患者脑组织中与锌离子相关的RhoA蛋白1(Rho-associatedc,oiled-coil containing protein ki-nase 1,ROCK1)和肿瘤坏死因子受体相关因子3(TNF receptor-associated factor 3,TRAF3)mRNA的表达,探讨其在耐药性癫痫发病中的作用。方法:收集耐药性癫痫患者术后的海马脑组织,首先用基因芯片进行差异基因表达的筛选,然后用RT-PCR从基因水平上进行验证,并与正常对照组进行比较。结果:基因芯片检测中发现与锌离子连接相关的基因ROCK1和TRAF3在耐药性癫痫患者中表达上调。目的基因ROCK1和TRAF3 mRNA在耐药性患者脑组织中的表达明显增加(P<0.05),变化趋势与芯片扫描结果一致。结论:与锌离子相关的基因ROCK1和TRAF3可能参与了耐药性癫痫的形成,并在耐药性癫痫的发病机制中起着一定的作用。 展开更多

关键词 耐药性癫痫 与锌离子相关的RhoA蛋白1 肿瘤坏死因子受体相关因子3 锌离子

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TRAF3交互蛋白2介导雄性小鼠肥胖相关血管胰岛素抵抗与功能异常 被引量：1

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作者 赵狄(摘译) 刘莉(审校) +9 位作者 Grunewald ZI Ramirez-Perez FI Woodford ML Morales-Quinones M Mejia S Manrique-Acevedo C Siebenlist U Martinez-Lemus LA Chandrasekar B Padilla J 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1133-1133,共1页

血管胰岛素抵抗是肥胖的一个特点,可导致血管异常与疾病的发生。然而,目前对肥胖相关的血管胰岛素抵抗及功能异常的潜在分子机制仍了解很少。该文假设TRAF3交互蛋白2(TRAF3 interacting protein 2,TRAF3IP2),一个已知在心血管病激活病... 血管胰岛素抵抗是肥胖的一个特点,可导致血管异常与疾病的发生。然而,目前对肥胖相关的血管胰岛素抵抗及功能异常的潜在分子机制仍了解很少。该文假设TRAF3交互蛋白2(TRAF3 interacting protein 2,TRAF3IP2),一个已知在心血管病激活病理应激通路的促炎症接头分子,与肥胖相关的血管胰岛素抵抗与功能异常有因果联系。研究人员通过体外在内皮细胞、离体动脉中,体内在喂食诱发肥胖的TRAF3IP2敲除小鼠模型中进行基因调控. 展开更多

关键词 功能异常 血管胰岛素抵抗 traf3 心血管病 内皮细胞 血管异常 肥胖 雄性小鼠

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TRAF3在肝细胞肝癌中的表达及意义 被引量：3

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作者 查欣 王晓辉 +5 位作者 唐刘君 李娟 邢小翠 胡中倩 杨晓明 汪思应 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第8期952-955,共4页

目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)在肝细胞癌(简称肝癌)发生、发展中的意义。方法采用免疫组化方法检测50例原发性肝癌组织、12例癌旁肝组织及10例正常肝组织中TRAF3蛋白的表达,分析其与肝癌的临床病理参数的关系。Western blo... 目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)在肝细胞癌(简称肝癌)发生、发展中的意义。方法采用免疫组化方法检测50例原发性肝癌组织、12例癌旁肝组织及10例正常肝组织中TRAF3蛋白的表达,分析其与肝癌的临床病理参数的关系。Western blot法检测TRAF3在肝癌高分化细胞系HepG2、低分化细胞系SMMC7721和人正常肝细胞系L-02中的表达差异。结果 TRAF3主要定位于细胞质,其阳性率在正常肝组织(100%)及癌旁组织(91%)明显高于肝细胞癌组织(52%)。TRAF3在肝癌的表达与临床分期相关,与患者性别、年龄、癌灶数目、肿瘤大小、瘤栓有无、乙肝表面抗原(HBsAg)阴阳性、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤包膜是否完整均无关。TRAF3总蛋白在正常肝细胞系中的表达量明显高于肝癌细胞系,且在肝癌高分化的细胞系中表达量高于低分化细胞系。结论 TRAF3在肝癌中的表达明显下调,且在肝癌中的表达水平与肝癌的侵袭程度相关,提示TRAF3可能抑制肝癌的浸润和转移。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子3 原发性肝细胞癌 侵袭转移

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过表达pellino-1在Kupffer细胞内毒素耐受时对TRAF3泛素化及MAPK信号通路的调控 被引量：1

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作者 张译尹 李培志 +1 位作者 廖锐 龚建平 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期658-664,共7页

【目的】探讨上调pellino-1在Kupffer细胞(KC)内毒素耐受时对肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)泛素化、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路及下游细胞因子分泌情况的影响。【方法】分离、培养C57BL/6小鼠KC,随机分为2组:(1)空载对照组... 【目的】探讨上调pellino-1在Kupffer细胞(KC)内毒素耐受时对肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)泛素化、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路及下游细胞因子分泌情况的影响。【方法】分离、培养C57BL/6小鼠KC,随机分为2组:(1)空载对照组:转染空载质粒48 h后,先给予小剂量LPS(10 ng/mL)刺激24 h,再给予大剂量LPS(300 ng/mL)刺激。(2)过表达组:过表达pellino-1慢病毒转染48 h后,先给予小剂量LPS(10 ng/mL)刺激24 h,再给予大剂量LPS(300 ng/mL)刺激。两组分别于处理后0、5、10、30、60 min收获细胞,蛋白质免疫印迹试验(Western blot)检测pellino-1、K48泛素化(K48ubiquitin,K48-Ub)、TRAF3、JNK、p-JNK、p38、p-p38蛋白水平表达变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α及IL-10的分泌情况。【结果】与空载对照组相比,过表达组pellino-1蛋白表达量在各个时间点均明显升高;K48-Ub水平明显升高;TRAF3蛋白表达量明显降低;JNK、p38蛋白表达量没有明显变化,但p-JNK及p-p38蛋白表达量显著升高;过表达组细胞上清中IL-1β及TNF-α的量明显升高(P<0.05),而IL-10的量则明显降低(P<0.05)。【结论】过表达pellino-1可促进TRAF3蛋白K-48泛素化降解,导致TRAF3蛋白表达量降低,激活下游的MAPK信号,从而抑制内毒素耐受的形成。 展开更多

关键词 KUPFFER细胞 内毒素耐受 pellino-1 肿瘤坏死因子受体相关因子3

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TRAF3在免疫应答中的研究进展 被引量：4

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作者 林梦姣 季晓丽 陈玮 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期119-125,共7页

目前在哺乳动物中已经发现了7个肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAFs),主要参与肿瘤坏死因子受体超家族(TNFR)、Toll样/白细胞介素-1受体(TIR)、维甲酸诱导基因Ⅰ样受体(RLRs)的信号转导。TRAF3是TRAF家族中功能最为多样的成员之一。它能够... 目前在哺乳动物中已经发现了7个肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAFs),主要参与肿瘤坏死因子受体超家族(TNFR)、Toll样/白细胞介素-1受体(TIR)、维甲酸诱导基因Ⅰ样受体(RLRs)的信号转导。TRAF3是TRAF家族中功能最为多样的成员之一。它能够正性调节Ⅰ型干扰素(IRFs)的产生,负性调节经典NF-κB、非经典NF-κB和丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号的激活。研究TRAF3在免疫信号通路中的作用、调控机制以及相关疾病具有重要的意义。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子3 Ⅰ型干扰素 信号通路

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