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稳定氮氧自由基TMPO和TMPRO的合成与应用 被引量:9
1
作者 张自义 魏陆林 《有机化学》 SCIE CAS 1988年第4期300-310,共11页
本文评述了近年来4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基(TMPO)和2,2,5,5-四甲基吡咯啉-1-氧自由基(TMPRO)及其衍生物在合成和应用方面的进展,着重讨论了这些氮氧自由基的合成方法和作为自旋标记试剂的应用。
关键词 氮氧自由基 tmpo TMPRO 自旋标记 自旋捕获
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LncRNA TMPO-AS1通过Nrf2/Keapl信号通路调控成骨细胞分化、增殖的分子机制 被引量:2
2
作者 苏亚 李小凤 李辉 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第2期318-322,共5页
目的:探讨LncRNA TMPO-AS1对成骨细胞分化、增殖的影响及其对Nrf2/Keapl信号通路的调控作用。方法:采用地塞米松(Dex)处理人成骨肉瘤细胞MG63建立骨质疏松症细胞模型(Dex组),分别将pcDNA-NC、pcDNA-TMPO-AS1、si-NC、siTMPO-AS1转染至M... 目的:探讨LncRNA TMPO-AS1对成骨细胞分化、增殖的影响及其对Nrf2/Keapl信号通路的调控作用。方法:采用地塞米松(Dex)处理人成骨肉瘤细胞MG63建立骨质疏松症细胞模型(Dex组),分别将pcDNA-NC、pcDNA-TMPO-AS1、si-NC、siTMPO-AS1转染至MG63细胞,分别将pcDNA-NC、pcDNA-TMPO-AS1转染至MG63细胞后加入Dex处理24 h,同时将正常培养的细胞作为NC组;采用RT-qPCR法检测TMPO-AS1、ALP、RUNX2、OCN mRNA的表达水平;采用CCK-8法检测细胞增殖;采用Western blotting法检测CyclinD1、ALP、RUNX2、OCN、Nrf2、Keapl蛋白相对表达量。结果:与NC组比较,Dex组TMPOAS1的表达水平降低(P<0.05),OD值降低(P<0.05),CyclinD1、ALP、RUNX2、OCN、Nrf2、Keapl的表达水平降低(P<0.05);与pcDNA-NC组比较,pcDNA-TMPO-AS1组OD值升高(P<0.05),CyclinD1、ALP、RUNX2、OCN、Nrf2、Keapl蛋白水平升高(P<0.05),而转染si-TMPO-AS1的作用与之相反;与pcDNA-NC+Dex组比较,pcDNA-TMPO-AS1+Dex组OD值升高(P<0.05),CyclinD1、ALP、RUNX2、OCN、Nrf2、Keapl蛋白水平升高(P<0.05)。结论:TMPO-AS1过表达可能通过激活Nrf2/Keapl信号通路从而促进成骨细胞增殖及分化。 展开更多
关键词 LncRNA tmpo-AS1 Nrf2/Keapl信号通路 成骨细胞 分化 增殖
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TMPO基因表达对肺癌患者临床预后的影响 被引量:1
3
作者 熊智 《武警医学》 CAS 2017年第8期764-768,共5页
目的探讨TMPO基因对肺癌患者预后的影响。方法检索并下载NCBI的肿瘤公共数据集,分析肺癌基因表达谱资料及临床信息,明确TMPO基因在正常肺组织和肺癌组织中的表达差异,并利用基因集富集分析方法(GSEA)进一步探讨TMPO基因对肺癌细胞的具... 目的探讨TMPO基因对肺癌患者预后的影响。方法检索并下载NCBI的肿瘤公共数据集,分析肺癌基因表达谱资料及临床信息,明确TMPO基因在正常肺组织和肺癌组织中的表达差异,并利用基因集富集分析方法(GSEA)进一步探讨TMPO基因对肺癌细胞的具体作用机制。结果 TMPO基因在肺癌组织中的相对表达值为0.254±0.594,明显高于在正常肺组织中的相对表达值-0.332±0.285(P<0.0001)。TMPO基因高表达肺癌患者的TNM分期明显高于TMPO低表达的肺癌患者(P<0.0001,P<0.0001,P=0.031),TMPO低表达组肺癌患者的无进展生存期(P<0.0001)、总生存期(P<0.0001)结果均优于TMPO高表达组的肺癌患者。TMPO高表达样本富集了与DNA修复、MYC信号通路1、有丝分裂、细胞周期G2M检查点、精子发生、E2F信号通路、MYC信号通路2、m TORC1信号通路相关的基因集。结论 TMPO基因在多种肿瘤中高表达,其通过多种途径来促使肿瘤细胞增殖,进而影响肿瘤患者的临床预后,因此TMPO基因可以作为诊疗肺癌的标志物和潜在靶点。 展开更多
关键词 tmpo基因 肺癌 临床预后
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lncRNA TMPO-AS1靶向miR-1224-5p调控肝癌细胞的增殖和凋亡 被引量:1
4
作者 金春英 《河北医药》 CAS 2021年第15期2250-2254,2259,共6页
目的研究长链非编码RNA(lncRNA)TMPO antisense RNA 1(TMPO-AS1)与微小RNA(miRNA)-1224-5p的靶向关系及对肝癌细胞的增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定lncRNA TMPO-AS1和miR-1224-5p在肝癌组织中的表达。生物信息学... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA)TMPO antisense RNA 1(TMPO-AS1)与微小RNA(miRNA)-1224-5p的靶向关系及对肝癌细胞的增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定lncRNA TMPO-AS1和miR-1224-5p在肝癌组织中的表达。生物信息学预测和双荧光素酶报告基因检测分析lncRNA TMPO-AS1对miR-1224-5p的靶向调控。在肝癌HCCLM3细胞中转染si-TMPO-AS1或miR-1224-3p或共转染si-TMPO-AS1和anti-miR-1224-5p。qRT-PCR测定lncRNA TMPO-AS1和miR-1224-5p表达,噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术和免疫印迹实验(western blot)分别测定肝癌HCCLM3细胞增殖、凋亡与细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和抗Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达。结果肝癌组织中lncRNA TMPO-AS1表达上调,miR-1224-5p表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。lncRNA TMPO-AS1靶向调控miR-1224-5p的表达。敲低lncRNA TMPO-AS1表达明显降低细胞增殖、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达,显著提高细胞凋亡、p21和Bax蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05),与miR-1224-5p过表达的结果一样。抑制miR-1224-5p表达后,敲低lncRNA TMPO-AS1表达对肝癌HCCLM3细胞增殖的抑制作用和对细胞凋亡的促进作用被逆转。结论lncRNA TMPO-AS1在肝癌组织表达上调,敲低其表达通过靶向miR-1224-5p抑制肝癌细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝癌 增殖 凋亡 lncRNA tmpo-AS1 miR-1224-5p
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LncRNA TMPO-AS1通过PI3K/Akt信号通路对多囊卵巢综合征大鼠性激素和卵巢功能的影响 被引量:2
5
作者 宋涛 许婷 崔永魁 《临床和实验医学杂志》 2023年第14期1457-1461,共5页
目的 探究LncRNA TMPO-AS1对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠的影响以及其对磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路相关分子的调控作用。方法 选取36只SPF级SD雌性大鼠,按照随机数字表法分为模型组(A组)、空白质粒组(B组)、TMPO-AS1过... 目的 探究LncRNA TMPO-AS1对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠的影响以及其对磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路相关分子的调控作用。方法 选取36只SPF级SD雌性大鼠,按照随机数字表法分为模型组(A组)、空白质粒组(B组)、TMPO-AS1过表达质粒组(C组)共3组,每组12只大鼠。采用来曲唑注射法制备大鼠PCOS模型,于造模第1天起,B、C组大鼠尾静脉注射空白质粒及TMPO-AS1过表达质粒,A组注射等量0.9%氯化钠溶液,连续注射21 d。比较各组大鼠的性激素[促黄体生成素(LH)、睾酮、卵泡刺激素(FSH)]水平、卵巢功能(卵巢重量/体重比例、成熟卵泡数量、黄体数量)、卵巢组织的PI3K、Akt mRNA和蛋白表达量以及子宫容受性[白血病抑制因子(LIF)蛋白和整合素β3(ITG β3)]、代谢功能[空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR]水平。结果 C组大鼠的性激素LH、睾酮水平、卵巢重量/体重比例、成熟卵泡数量、FBG、FINS、HOMA-IR水平均高于A、B组,FSH水平、黄体数量均低于A、B组,同时C组大鼠的PI3K、Akt mRNA及蛋白表达量、LIF、ITG β3水平均低于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05);但A组、B组间各项指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 LncRNA TMPO-AS1能够加重PCOS大鼠性激素水平和代谢功能紊乱和卵巢功能受损,降低子宫容受性,可能与下调PI3K、Akt mRNA和蛋白表达有关。 展开更多
关键词 大鼠 长链非编码RNA tmpo-AS1 多囊卵巢综合征 PI3K/AKT
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LncRNA TMPO-AS1通过调节miR-204-3p影响肺癌细胞的增殖、凋亡和侵袭 被引量:4
6
作者 邓俊亮 华美香 陈键腾 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期319-324,329,共7页
目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)TMPO-AS1通过调节miR-204-3p的表达对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:实时荧光定量PCR(qPCR)检测人肺癌细胞系A549、H1975、H1299和H1650和人正常支气管上皮细胞系HBE中TMPO-AS1的表达水平。采用... 目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)TMPO-AS1通过调节miR-204-3p的表达对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:实时荧光定量PCR(qPCR)检测人肺癌细胞系A549、H1975、H1299和H1650和人正常支气管上皮细胞系HBE中TMPO-AS1的表达水平。采用脂质体转染技术沉默A549细胞中TMPO-AS1,qPCR检测TMPO-AS1和miR-204-3p的表达情况,荧光素酶报告实验检测TMPO-AS1和miR-204-3p的靶向关系,噻唑蓝比色法(MTT)、流式细胞术和Transwell实验分别检测沉默TMPO-AS1对A549细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响,Western blot检测A549细胞中PCNA、Ki-67、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、MMP-2和MMP-9的表达。结果:人肺癌细胞系中TMPO-AS1的表达水平明显高于人正常支气管上皮细胞系(P<0.05),且肺癌A549细胞中TMPO-AS1的基础表达量最高,选择A549细胞用于后续实验。沉默TMPO-AS1可明显促进miR-204-3p的表达(P<0.05),荧光素酶报告实验显示,TMPO-AS1能够降低miR-204-3p野生型细胞的相对荧光素酶活性(P<0.05)。沉默TMPO-AS1能够明显抑制A549细胞增殖和侵袭能力(P<0.05),降低增殖相关蛋白PCNA、Ki-67及侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05);此外,沉默TMPO-AS1可促进A549细胞凋亡及Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9的表达(P<0.05)。结论:沉默TMPO-AS1能够通过靶向促进miR-204-3p的表达抑制肺癌细胞增殖和侵袭,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 LncRNA tmpo-AS1 miR-204-3p 肺癌细胞 增殖 凋亡 侵袭
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lncRNA TMPO-AS1通过PI3K/Akt信号通路对多囊卵巢综合征大鼠性激素和卵巢功能的影响 被引量:5
7
作者 何静子 穆其琛 +1 位作者 付东阁 王碧延 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第2期152-156,162,共6页
目的:分析长链非编码RNA(lncRNA)TMPO-AS1通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素和卵巢功能的影响。方法:随机将30只SD雌性大鼠分为模型组、si-NC组、TMPO-AS1-shRNA组,另选取健康大鼠... 目的:分析长链非编码RNA(lncRNA)TMPO-AS1通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素和卵巢功能的影响。方法:随机将30只SD雌性大鼠分为模型组、si-NC组、TMPO-AS1-shRNA组,另选取健康大鼠设空白对照组,每组10只,模型组、si-NC组、TMPO-AS1-shRNA组给予60%高脂饲料,皮下注射DHEA(60 mg/kg溶于0.2 ml芝麻油中),空白对照组给予普通饲料,皮下注射等量芝麻油,于10 d开始对大鼠进行为期10 d的阴道涂片,持续注射21 d后测量大鼠体重、卵巢重量,计算卵巢指数;并采用Western blot检测PI3K、P-PI3K、Akt、P-Akt蛋白水平;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测TMPO-AS1、PI3K、Akt mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附法检测血清性激素水平;于光学显微镜下观察卵巢形态学。结果:MPO-AS1、PI3K、Akt mRNA水平比较,模型组、si-NC组比空白对照组低(均P<0.05)。TMPO-AS1-shRNA组体重、卵巢重量、卵巢指数比空白对照组高,比模型组、si-NC组低(均P<0.05)。TMPO-AS1-shRNA组PI3K、Akt蛋白表达水平比空白对照组低,比模型组、si-NC组高(均P<0.05)。TMPO-AS1-shRNA组睾酮激素(T)、促黄体生成素(LH)水平比空白对照组高,比模型组、si-NC组低;雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)水平比空白对照组低,比模型组、si-NC组高(均P<0.05)。TMPO-AS1-shRNA组黄体数、成熟卵泡数、颗粒细胞厚层比空白对照组低,比模型组、si-NC组高(均P<0.05)。结论:lncRNA TMPO-AS1通过PI3K/Akt信号通路可有效降低PCOS大鼠性激素水平,并改善其卵巢功能。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 大鼠 长链非编码RNA tmpo-AS1 PI3K/AKT信号通路 性激素 卵巢功能
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LncRNA TMPO-AS1调节miR-340-5p/RUNX1轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:3
8
作者 许汉兵 韩建涛 张成鹏 《河北医药》 CAS 2024年第2期165-170,共6页
目的探讨长链非编码RNA TMPO反义RNA1(LncRNA TMPO-AS1)调控miR-340-5p/RUNT相关转录因子1(RUNX1)轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法qRT-PCR检测人正常结肠上皮细胞HCoEpiC、人CRC细胞SW480、HCT116、LOVO、HT-29中TMP... 目的探讨长链非编码RNA TMPO反义RNA1(LncRNA TMPO-AS1)调控miR-340-5p/RUNT相关转录因子1(RUNX1)轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法qRT-PCR检测人正常结肠上皮细胞HCoEpiC、人CRC细胞SW480、HCT116、LOVO、HT-29中TMPO-AS1、miR-340-5p、RUNX1表达;将HCT116细胞随机分为:si-ctrl组、si-TMPO-AS1组、mimics NC组、miR-340-5p组、si-TMPO-AS1+anti-miR-ctrl组、si-TMPO-AS1+anti-miR-340-5p组;qRT-PCR检测6组HCT116细胞TMPO-AS1、miR-340-5p、RUNX1水平;CCK-8法检测HCT116细胞活力;EDU法检测HCT116细胞增殖;Transwell检测HCT116细胞迁移和侵袭;western blot检测HCT116细胞RUNX1、PCNA、MMP-2表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证TMPO-AS1和miR-340-5p、miR-340-5p和RUNX1的关系。结果与HCoEpiC细胞比较,不同CRC细胞中TMPO-AS1、RUNX1表达显著性升高,miR-424-5p表达显著性降低(P<0.05),且HCT116细胞变化结果更显著,后续实验选择HCT116细胞。与si-ctrl组比较,si-TMPO-AS1组HCT116细胞TMPO-AS1、RUNX1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、RUNX1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性降低,miR-340-5p mRNA水平显著性升高(P<0.05);与mimics NC组比较,miR-340-5p组HCT116细胞RUNX1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、RUNX1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性降低,miR-340-5p mRNA水平显著性升高(P<0.05);与si-TMPO-AS1+anti-miR-ctrl组比较,si-TMPO-AS1+anti-miR-340-5p组HCT116细胞RUNX1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、RUNX1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性升高,miR-340-5p mRNA水平显著性降低(P<0.05);TMPO-AS1靶向负调控miR-340-5p表达,miR-340-5p靶向负调控RUNX1表达。结论沉默TMPO-AS1靶向上调miR-340-5p表达,从而下调RUNX1表达,抑制HCT116细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 LncRNA tmpo-AS1 miR-340-5p RUNX1 结直肠癌细胞
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基于生物信息学分析TMPO基因在肺癌中的表达及临床预测价值
9
作者 常文婧 张琦 《医学检验与临床》 2024年第4期39-44,共6页
目的:基于生物信息学研究方法分析TMPO基因在肺癌中的表达,评估其与肺癌诊断及预后评估方面的相关性。方法:以GTEx和TCGA数据库为发现数据库,获得健康人群以及肺癌患者的RNA-seq测序结果,绘制箱式图及配对点图展示TMPO基因在肺癌组织及... 目的:基于生物信息学研究方法分析TMPO基因在肺癌中的表达,评估其与肺癌诊断及预后评估方面的相关性。方法:以GTEx和TCGA数据库为发现数据库,获得健康人群以及肺癌患者的RNA-seq测序结果,绘制箱式图及配对点图展示TMPO基因在肺癌组织及正常组织中的差异化表达。绘制受试者曲线评估TMPO基因用于肺癌的诊断效能。根据TMPO基因表达水平的中位数将肺癌患者区分为TMPO低表达和高表达两组,研究患者的临床病理特征与TMPO基因表达水平的关系。使用Kaplan-MeierPlotter数据库绘制生存曲线,探究TMPO基因的高低表达与肺癌患者生存状况的关系。进一步通过单因素及多因素COX回归分析,筛选出TMPO表达水平为影响患者预后的独立危险因素。结果:肺癌患者的TMPO的表达水平为5.20(4.67~5.79),明显大于正常组织组中的4.29(4.04~4.63),差异具有统计学意义(P<0.05);同样的,在107对配对组织中,TMPO基因在肺癌组织中的表达水平5.50(4.78~6.16)也明显高于对应的癌旁正常组织TMPO的表达水平4.64(4.39~4.84),差异具有统计学意义(P<0.05);受试者曲线的结果表明TMPO用于诊断肺癌有着较高的敏感性[曲线下面积=0.842,95%置信区间为(0.822~0.862)];在针对TMPO基因表达和肺癌患者临床病理特征的关系研究中发现TMPO高表达的肺癌患者相比TMPO低表达的有着更晚的临床分期、T分期以及N分期,差异具有统计学意义(P<0.05);TMPO基因高表达的肺癌患者总体生存期以及无进展生存期也短于TMPO基因低表达的患者;此外,单因素及多因素COX回归分析,最终筛选出临床病理分期、T分期以及TMPO表达水平为影响患者预后的独立危险因素。结论:TMPO有潜力成为用于肺癌诊断和预后评估的新型生物学标志物。 展开更多
关键词 肺癌 tmpo基因 生物学标志物 生物信息学
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生长素自旋标记物的合成及生物活性 被引量:1
10
作者 司宗兴 杜晓华 +1 位作者 李景松 王学铭 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期63-65,共3页
将4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基(TMPO)与3种植物生长素拼接在一起,合成了相应的腙,以研究TMPO对生长素活性的影响.所得化合物的结构通过IR、ESR、元素分析或MS加以证实.初步生物活性测定表... 将4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基(TMPO)与3种植物生长素拼接在一起,合成了相应的腙,以研究TMPO对生长素活性的影响.所得化合物的结构通过IR、ESR、元素分析或MS加以证实.初步生物活性测定表明,与母体相比不仅对绿豆幼苗的生长促进作用无影响。 展开更多
关键词 生长素 自旋标记 生物活性 tmpo 植物生长素
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室温条件下4-OH-TEMPO体系高效选择催化氧化苄醇为醛的研究 被引量:1
11
作者 尚洁 赵文军 +2 位作者 王华 王旭 杨丹红 《应用化工》 CAS CSCD 2010年第7期997-1000,共4页
报道了以TMEDA(N,N,N’,N’-四甲基乙二胺)为促进剂,与4-OH-TEMPO(4-羟基-2,2,4,4,-四甲基-哌啶氮氧自由基)和CuC l组成催化体系,在室温条件下用空气为氧化剂高转化率、高选择性催化氧化苄醇为相应芳香醛的方法,氧化速率快。研究结果表... 报道了以TMEDA(N,N,N’,N’-四甲基乙二胺)为促进剂,与4-OH-TEMPO(4-羟基-2,2,4,4,-四甲基-哌啶氮氧自由基)和CuC l组成催化体系,在室温条件下用空气为氧化剂高转化率、高选择性催化氧化苄醇为相应芳香醛的方法,氧化速率快。研究结果表明,胺在4-O-TEMPO催化体系中起到重要作用,碱的促进作用与胺的碱性和空间位阻有关,TMEDAD的效果最佳。 展开更多
关键词 4-OH-TEMPO TMEDA 氯化亚铜 苄醇 选择氧化
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六氟硅酸铵后处理对H-ZSM-5分子筛酸性影响的固体NMR研究 被引量:3
12
作者 王永祥 王强 +2 位作者 徐君 夏清华 邓风 《波谱学杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期514-522,共9页
本文利用固体核磁共振(NMR)实验对六氟硅酸铵(AHFS)溶液洗涤前后H-ZSM-5分子筛上铝物种变化引起的酸性改变进行了研究.结果显示经AHFS洗涤处理后,分子筛上构成Brønsted酸的骨架四配位铝物种会部分减少;具有Lewis酸性的骨架三配位... 本文利用固体核磁共振(NMR)实验对六氟硅酸铵(AHFS)溶液洗涤前后H-ZSM-5分子筛上铝物种变化引起的酸性改变进行了研究.结果显示经AHFS洗涤处理后,分子筛上构成Brønsted酸的骨架四配位铝物种会部分减少;具有Lewis酸性的骨架三配位铝量在经AHFS脱铝处理后少量降低;同时AHFS温和脱铝的方式主要会引起分子筛上另一类具有Lewis酸性且含Al-OH的铝物种大量减少,从而导致处理后分子筛整体酸性的显著改变. 展开更多
关键词 六氟硅酸铵(AHFS) 三甲基氧膦(tmpo)探针分子 酸性 固体核磁共振
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小干扰RNA抑制胸腺生成素基因的表达对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 董向阳 李文静 翟波 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期742-747,共6页
目的探讨小干扰RNA(siRNA)抑制胸腺生成素(TMPO)基因的表达对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用脂质体转染法将TMPO siRNA转染至人肺癌A549细胞,将转染siRNA control作为阴性对照组。转染后48h,采用实时荧光定量聚合... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)抑制胸腺生成素(TMPO)基因的表达对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用脂质体转染法将TMPO siRNA转染至人肺癌A549细胞,将转染siRNA control作为阴性对照组。转染后48h,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot检测转染后细胞中TMPO的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞中PCNA、cleaved caspase-3、Notch1和mTOR的表达水平。结果RT-PCR检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组细胞中TMPO mRNA的表达水平分别为1.01±0.11、0.99±0.10和0.36±0.04。Western blot检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组细胞中TMPO蛋白的表达水平分别为0.27±0.02、0.29±0.03和0.08±0.10;转染组细胞中TMPO mRNA和蛋白的表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05)。MTT检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组细胞在转染24 h时的吸光度(A)值分别为0.35±0.04、0.37±0.04和0.34±0.03,转染48 h时A值分别为0.47±0.06、0.46±0.08和0.37±0.04,转染72 h时A值分别为0.75±0.08、0.73±0.07和0.49±0.05,转染96 h时A值分别为1.09±0.07、1.06±0.08和0.56±0.06;转染组细胞在转染48、72、96 h的A值均低于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染组中G0/G1期细胞比例分别为(62.55±2.03)%、(61.24±3.15)%和(47.35±2.44)%,S期细胞比例分别为(17.12±1.31)%、(17.70±2.01)%和(20.81±2.06)%,G2/M期细胞比例分别为(20.33±1.43)%、(21.06±1.52)%和(31.84±2.76)%,转染组G0/G1期细胞比例均低于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05),G2/M期细胞比例均高于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05)。转染组细胞的凋亡率为(34.10±2.69)%,明显高于空白对照组[(2.96±0.03)%]和阴性对照组[(3.01±0.04)%,均P<0.05]。Western blot检测结果显示,转染后A549细胞中PCNA、Notch1和mTOR蛋白的表达下调,cleaved caspase-3蛋白的表达上调。结论抑制TMPO基因的表达能够显著抑制肺癌A549细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制与抑制Notch1/mTOR信号通路激活有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 tmpo基因 细胞增殖 细胞凋亡 Notch1/mTOR信号通路
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