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神经特异性跨膜蛋白240与过氧化物酶体共定位并激活RhoGDP解离抑制因子β
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作者 胡琼琼 李文沛 +5 位作者 胥丽霞 官瑞磊 张东亚 蒋胶胶 王宁 杨改清 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1260-1269,共10页
目的 探究跨膜蛋白240(TMEM240)的亚细胞定位及其生物学功能。方法 用NCBI的BLAST工具对蛋白质序列分析,TMHMM生物信息学软件对TMEM240跨膜结构进行分析;体内实验:取18~20 d的雄性C57BL/6小鼠脑组织,设置TMEM240探针组和对照组(3只/组)... 目的 探究跨膜蛋白240(TMEM240)的亚细胞定位及其生物学功能。方法 用NCBI的BLAST工具对蛋白质序列分析,TMHMM生物信息学软件对TMEM240跨膜结构进行分析;体内实验:取18~20 d的雄性C57BL/6小鼠脑组织,设置TMEM240探针组和对照组(3只/组),采用原位杂交技术验证TMEM240在脑组织中的表达分布;采用qPCR、Western blotting检测小鼠不同组织、不同时间皮层神经元TMEM240的表达情况(3只/组);体外实验:采用质粒转染完成Tmem240过表达体系的构建及稳定克隆的筛选,采用细胞成像技术对TMEM240的亚细胞定位进行研究,确定TMEM240在细胞内的形态和分布,采用qPCR,Western blotting,免疫荧光检测TMEM240在细胞内表达情况并验证其生物学功能;结果 人源和鼠源TMEM240蛋白质序列相似性达97.69%,TMEM240为含有两个跨膜结构的跨膜蛋白;体内实验:TMEM240的mRNA和蛋白在脑组织及神经元中特异性高表达(P<0.001),原代神经元培养9 d时TMEM240表达水平最高(P<0.001);体外实验:TMEM240在细胞内呈点状分布,属于细胞内膜性结构,并与过氧化物酶体具有80%共定位;过表达Tmem240的Neuro-2a细胞Rho GDP解离抑制因子β(ARHGDIB)的mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05)。结论 TMEM240是一种定位于细胞内的新型亚细胞结构,在神经元中特异性表达,在靶向细胞功能调控方面具有巨大的潜力。 展开更多
关键词 跨膜蛋白240 神经元 亚细胞定位 过氧化物酶体 Rho GDP解离抑制因子β
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