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miR-185-5p靶向负调控TM9SF1对肺腺癌细胞增殖、迁移和自噬能力的影响
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作者 王晓娜 龚秀莹 +5 位作者 赵苗苗 刘清华 李勇 王坤 尹崇高 李洪利 《解放军医学杂志》 北大核心 2025年第5期566-574,共9页
目的 探讨miR-185-5p靶向负调控跨膜9超家族蛋白1(TM9SF1)对肺腺癌细胞增殖、迁移和自噬能力的影响。方法 在基因表达综合数据库(GEO)中下载数据集GSE51853,分析miR-185-5p在肺腺癌组织中的表达情况。采用在线数据库miRTargetLink、miRT... 目的 探讨miR-185-5p靶向负调控跨膜9超家族蛋白1(TM9SF1)对肺腺癌细胞增殖、迁移和自噬能力的影响。方法 在基因表达综合数据库(GEO)中下载数据集GSE51853,分析miR-185-5p在肺腺癌组织中的表达情况。采用在线数据库miRTargetLink、miRTarbase和DIANA-microT-CD预测miR-185-5p靶向结合的蛋白,使用HADb网站下载自噬相关蛋白,将4个数据库所得结果取交集,通过StarBase数据库分析交集结果VEGFA和TM9SF1的生存曲线。分别将TM9SF13'UTR(WT)或TM9SF1 3'UTR(MUT)报告质粒与miR-185-5p对照质粒(CON)或miR-185-5p过表达质粒(over-miR-185-5p)共转染HEK-293T细胞,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-185-5p与TM9SF1的结合位点及荧光素酶活性。采用Western blotting检测转染miR-185-5p过表达质粒后A549细胞中TM9SF1蛋白的表达情况。将A549细胞分为3组:(1)CON+NC组,转染miR-185-5p对照质粒和TM9SF1对照质粒;(2)over-miR-185-5p+NC组,转染miR-185-5p过表达质粒和TM9SF1对照质粒;(3)over-miR-185-5p+over-TM9SF1组,转染miR-185-5p过表达质粒和TM9SF1过表达质粒。采用EdU细胞增殖实验、划痕实验和Transwell迁移实验验证miR-185-5p靶向结合TM9SF1对肺腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。分别采用stubRFPsensGFP-LC3自噬流检测慢病毒和JC-1实验检测肺腺癌细胞自噬流和线粒体膜电位(MMP)的改变。结果 GSE51853数据集中,miR-185-5p在肺腺癌组织中的表达水平明显低于正常肺组织(P<0.01);qRT-PCR检测结果显示,miR-185-5p在肺腺癌细胞NCI-H1299、A549中的表达水平低于正常肺上皮细胞BEAS-2B(P<0.01)。在线数据库miRTargetLink、miRTarbase、DIANA-microT-CD和HADb预测结果显示,miR-185-5p可靶向调控自噬相关蛋白TM9SF1。双荧光素酶报告基因实验和Western blotting检测结果分别显示,miR-185-5p可直接与TM9SF1 mRNA的3'UTR区结合,过表达miR-185-5p后靶蛋白TM9SF1的表达水平降低(P<0.05)。EdU细胞增殖实验、划痕实验和Transwell迁移实验结果显示,过表达miR-185-5p可抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移能力,过表达TM9SF1能够削弱miR-185-5p对肺腺癌细胞增殖、迁移能力的抑制作用(P<0.05)。stub RFP-sens GFP-LC3自噬流检测慢病毒结果显示,过表达mi R-185-5p后A549细胞中自噬流加快,而同时过表达mi R-185-5p和TM9SF1后A549细胞中自噬流减慢;JC-1实验结果显示,过表达miR-185-5p后A549细胞中MMP水平降低,同时过表达miR-185-5p和TM9SF1后A549细胞中MMP水平升高。结论 miR-185-5p可能通过靶向负调控TM9SF1的表达影响肺腺癌细胞的增殖、迁移和自噬能力。 展开更多
关键词 肺腺癌 miR-185-5p tm9sf1 增殖 迁移 自噬
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TM9SF1 is implicated in promoting the proliferation and invasion of bladder cancer cells 被引量:1
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作者 Shu-Qing Zhou Lian-Xiang Luo 《World Journal of Clinical Oncology》 2024年第2期175-177,共3页
Zhuo et al looked into the part of transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)in bladder cancer(BC),and evaluated if it can be used as a therapeutic target.They created a permanent BC cell line and tested the effects... Zhuo et al looked into the part of transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)in bladder cancer(BC),and evaluated if it can be used as a therapeutic target.They created a permanent BC cell line and tested the effects of TM9SF1 overexpression and suppression on BC cell growth,movement,invasion,and cell cycle advancement.Their results show that TM9SF1 can boost the growth,movement,and invasion of BC cells and their access into the G2/M stage of the cell cycle.This research gives a novel direction and concept for targeted therapy of BC. 展开更多
关键词 Bladder cancer tm9sf1 Cell proliferation Migration INVASION tm9sf1 overexpression tm9sf1 silencing inhibits
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TM9SF1 promotes bladder cancer cell growth and infiltration 被引量:3
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作者 Long Wei Shi-Shuo Wang +9 位作者 Zhi-Guang Huang Rong-Quan He Jia-Yuan Luo Bin Li Ji-Wen Cheng Kun-Jun Wu Yu-Hong Zhou Shi Liu Sheng-Hua Li Gang Chen 《World Journal of Clinical Oncology》 2024年第2期302-316,共15页
BACKGROUND Bladder cancer(BC)is the most common urological tumor.It has a high recur-rence rate,displays tutor heterogeneity,and resists chemotherapy.Furthermore,the long-term survival rate of BC patients has remained... BACKGROUND Bladder cancer(BC)is the most common urological tumor.It has a high recur-rence rate,displays tutor heterogeneity,and resists chemotherapy.Furthermore,the long-term survival rate of BC patients has remained unchanged for decades,which seriously affects the quality of patient survival.To improve the survival rate and prognosis of BC patients,it is necessary to explore the molecular mechanisms of BC development and progression and identify targets for treatment and intervention.Transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1),also known as MP70 and HMP70,is a member of a family of nine transmembrane superfamily proteins,which was first identified in 1997.TM9SF1 can be expressed in BC,but its biological function and mechanism in BC are not clear.AIM To investigate the biological function and mechanism of TM9SF1 in BC.Overexpression of TM9SF1 increased the in vitro proliferation,migration,and invasion of BC cells by promoting the entry of BC cells into the G2/M phase.Silencing of TM9SF1 inhibited in vitro proliferation,migration,and invasion of BC cells and blocked BC cells in the G1 phase.CONCLUSION TM9SF1 may be an oncogene in BC. 展开更多
关键词 tm9sf1 Bladder cancer Biological function Cell function assay ONCOGENE
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氟对人成骨细胞TM9SF1和Ras mRNA表达的影响 被引量:5
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作者 李良忠 张宏印 +3 位作者 钟近洁 周婷婷 刘岳强 刘开泰 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期386-389,共4页
目的探讨氟对体外培养人成骨细胞中TM9SF1、RasmRNA表达的影响。方法采用原代细胞培养的方法培养人成骨细胞。取早期引产胎儿的骨组织,胶原酶消化、分离成骨细胞,加入DMEM培养液进行传代培养。将传代后的人成骨细胞按染氟剂量不同分为... 目的探讨氟对体外培养人成骨细胞中TM9SF1、RasmRNA表达的影响。方法采用原代细胞培养的方法培养人成骨细胞。取早期引产胎儿的骨组织,胶原酶消化、分离成骨细胞,加入DMEM培养液进行传代培养。将传代后的人成骨细胞按染氟剂量不同分为0(对照)、2.5、5.0、10.0、20.0mg/L组。染氟培养10d后,光镜下观察氟对人成骨细胞形态的影响;实时定量(RT)PCR法检测不同染氟剂量对体外培养人成骨细胞TM9SFI、Ras mRNA的表达影响。结果光镜下对照组和2.5mg/L组人成骨细胞呈长梭形、三角形或不规则多边形,有突起伸出,胞质透亮、饱满,相邻细胞彼此贴靠;20.0mg/L组人成骨细胞呈长梭形或不规则多边形,细胞数目明显减少、体积变大,一些细胞胞质出现了多个小空泡及颗粒样物质。不同染氟剂量对人成骨细胞TM9SF1 mRNA表达的影响,组间比较差异有统计学意义(F=322.82,P〈0.01);其中2.5mg/L组(9326.0+115.97)表达最高,随着染氟剂量增加,TM9SFImRNA表达降低,5.0、10.0、20.0mg/L组(6495.0±323.9、4387.5+545.2、5962.5+536.7)与对照组(9221.0+107.5)比较,差异有统计学意义(P均〈0.01)。不同染氟剂量对人成骨细胞RasmRNA表达的影响,组间比较差异有统计学意义(F=703.28,P〈0.01);其中对照组表达最高,随着染毒剂量的增加,RasmRNA表达减少,2.5、5.0、10.0、20.0mg/L组(6144.5±270.82、5603.5+88.39、3181.0±159.81、4067.5±37.4)与对照组(6571.0±196.58)比较,差异有统计学意义(P均〈0.01)。结论氟影响人成骨细胞TM9SF1、RasmRNA的表达,表达量的高低与染氟剂量有关。 展开更多
关键词 氟化钠 成骨细胞 tm9sf1 MRNA RAS MRNA
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荧光定量PCR检测TM9SF1在氟中毒暴露者外周血中的表达 被引量:3
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作者 张丽 张亚楼 +4 位作者 唐莉 刘开泰 白生宾 范淑玲 钟近洁 《新疆医科大学学报》 CAS 2011年第9期941-943,948,共4页
目的探讨氟中毒患者与对照人群外周血中transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)表达的差别。方法选取饮水型氟中毒轻度患者(暴露组)、对照人群(非暴露组)各11例,采用SYBRGreen1嵌合荧光法进行实时定量PCR的方法,检测并比较氟暴... 目的探讨氟中毒患者与对照人群外周血中transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)表达的差别。方法选取饮水型氟中毒轻度患者(暴露组)、对照人群(非暴露组)各11例,采用SYBRGreen1嵌合荧光法进行实时定量PCR的方法,检测并比较氟暴露组和非暴露组外周血淋巴细胞中TM9SF1 mRNA的表达水平。结果暴露组人群TM9SF1 mRNA表达水平(1.33±0.22)高于非暴露组人群(1.20±0.24),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论氟暴露可以使患者外周血中TM9SF1 mRNA表达轻度上调,其诊断价值有待进一步研究。 展开更多
关键词 tm9sf1基因 定量逆转录聚合酶链反应
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siRNA干扰内源性TM9SF1基因对人脐静脉内皮细胞炎症因子及血管紧张素转化酶1表达的影响 被引量:3
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作者 张国英 杨朵 +4 位作者 高娜娜 唐子华 李娜 仝永娟 肖娟 《广西医科大学学报》 CAS 2017年第8期1127-1130,共4页
目的:探讨siRNA干扰内源性TM9SF1基因对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症因子及血管紧张素转化酶1(ACE1)表达的影响。方法:将HUVEC分为阴性对照组(si-NC组)和转染组(si-TM9SF1组)。以脂质体Lipofectamine 3000将TM9SF1基因特异性siRNA转染至... 目的:探讨siRNA干扰内源性TM9SF1基因对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症因子及血管紧张素转化酶1(ACE1)表达的影响。方法:将HUVEC分为阴性对照组(si-NC组)和转染组(si-TM9SF1组)。以脂质体Lipofectamine 3000将TM9SF1基因特异性siRNA转染至HUVEC细胞,采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测特异性siRNA对TM9SF1基因的干扰效果,并比较两组白介素(IL)-1β、IL-8和ACE1基因的相对表达量。结果:转染TM9SF1基因特异性siRNA 48h后,si-TM9SF1组细胞中TM9SF1基因相对表达量明显低于si-NC组(P<0.05),且si-TM9SF1组IL-1β、IL-8和ACE1基因相对表达量亦明显低于si-NC组(P<0.05或P<0.001)。结论:干扰内源性TM9SF1可明显抑制HUVEC中炎症因子IL-1β、IL-8及血管收缩相关基因ACE1的表达。 展开更多
关键词 tm9sf1 内皮细胞 RNA干扰 炎症相关基因 ACE1
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慢病毒介导的重组TM9SF1蛋白通过诱导自噬和内质网应激抑制293T细胞生长 被引量:5
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作者 张国英 杨朵 +5 位作者 高娜娜 唐子华 李娜 仝永娟 商婷 肖娟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期600-606,共7页
九次跨膜超家族蛋白成员1(transmembrane 9 superfamily protein member 1,TM9SF1)在进化过程中高度保守,在人体组织和多种细胞系广泛表达。目前,关于该蛋白质的功能研究十分有限和初步。本研究采用慢病毒介导的TM9SF1表达系统,研究了重... 九次跨膜超家族蛋白成员1(transmembrane 9 superfamily protein member 1,TM9SF1)在进化过程中高度保守,在人体组织和多种细胞系广泛表达。目前,关于该蛋白质的功能研究十分有限和初步。本研究采用慢病毒介导的TM9SF1表达系统,研究了重组TM9SF1蛋白的生化特点及其对细胞生长的调控作用。慢病毒感染的293T全细胞裂解液的蛋白质免疫印迹结果揭示,TM9SF1蛋白具有表观分子质量约为70 k D的单体及寡聚体两种主要形式;在室温及加热37℃时蛋白质相对稳定,随变性温度升高(56℃以上)逐渐失去其稳定性。CCK8法显示,与慢病毒空载体感染的293T细胞比较,TM9SF1慢病毒表达载体感染的293T细胞在感染2 d后增殖明显减缓(P<0.001)。Western印迹结果证明,过表达TM9SF1引起LC3Ⅱ表达明显上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例升高,说明TM9SF1可引起293T细胞发生自噬。荧光实时定量PCR结果显示,过表达TM9SF1的293T细胞内质网应激标志分子CHOP、GADD34和XBP1(S)表达水平是对照细胞的3~4倍,提示发生了内质网应激反应。以上结果提示,TM9SF1具有抑制293T细胞生长的功能,该功能可能与其引起的内质网应激和自噬有关。这一结论将进一步加深对TM9SF1在细胞生长调控中的功能的认识。 展开更多
关键词 九次跨膜超家族蛋白1 慢病毒 内质网应激 自噬
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人TM9SF1基因的生物信息学分析
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作者 沈小芳 王晓军 +5 位作者 赵鑫 梁炜耀 姚劲松 周兰庭 翟立红 肖娟 《科学技术创新》 2021年第4期26-27,共2页
TM9SF1为9次跨膜蛋白,属TM9超家族成员,在人组织中广泛表达。本研究为了对人TM9SF1基因进行生物信息学方面的深入分析,以TM9SF1基因序列及编码蛋白序列为研究对象,采用生物信息数据库和分析软件对人TM9SF1基因的结构、信号肽、蛋白的理... TM9SF1为9次跨膜蛋白,属TM9超家族成员,在人组织中广泛表达。本研究为了对人TM9SF1基因进行生物信息学方面的深入分析,以TM9SF1基因序列及编码蛋白序列为研究对象,采用生物信息数据库和分析软件对人TM9SF1基因的结构、信号肽、蛋白的理化性质、亚细胞定位、组织表达情况等进行预测分析。结果表明,人TM9SF1基因位于染色体14q12,大小为6594 bp,潜在启动子得分最高为0.98,起始4689 bp至4739 bp结束;人TM9SF1蛋白由606个氨基酸组成,含有9个跨膜区的疏水蛋白,主要定位于细胞内;人TM9SF1蛋白在甲状腺、前列腺、胆囊、肾脏等组织中表达量较高;这为我们深入研究TM9SF1的具体基因功能提供了帮助。 展开更多
关键词 tm9sf1 生物信息学 蛋白质结构
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