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鸡TLR1A基因正选择nsSNP与沙门氏菌易感性的关联性研究 被引量:3
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作者 孟婕 张传生 +5 位作者 张夕霏 周泽宇 张贝 李可 李祥龙 耿立英 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期136-142,共7页
为探究鸡TLR1A基因正选择nsSNP位点与沙门氏菌易感性的关联,挖掘其潜在的功能性位点,本研究利用多种生物信息学方法对ChTLR1A的21个nsSNP位点及基因的选择压力进行综合分析,筛选ChTLR1A正选择nsSNP功能性位点,深入分析其与鸡沙门氏菌易... 为探究鸡TLR1A基因正选择nsSNP位点与沙门氏菌易感性的关联,挖掘其潜在的功能性位点,本研究利用多种生物信息学方法对ChTLR1A的21个nsSNP位点及基因的选择压力进行综合分析,筛选ChTLR1A正选择nsSNP功能性位点,深入分析其与鸡沙门氏菌易感性之间的相关性。结果显示,rs739087452(I388L)和rs313678806(C815R)在种上及种内均受到正选择作用,且rs739087452(I388L)位点的变异使其蛋白稳定性降低。rs313678806(C815R)与鸡沙门氏菌的易感性显著相关(P<0.001),C/C基因型为沙门氏菌抵抗型,表明rs313678806(C815R)可能是影响鸡沙门氏菌易感性的重要功能性SNP。本实验结果可为TLR1A基因标记在鸡抗病育种中的利用提供参考依据。 展开更多
关键词 tlr1a nsSNP 沙门氏菌 dCAPS 正选择
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鸡TLR1A基因2个SNP位点功能分析及与坝上长尾鸡沙门氏菌感染抗性的相关分析
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作者 张夕霏 孟婕 +4 位作者 周泽宇 葛华梁 贾万里 张传生 耿立英 《河北科技师范学院学报》 CAS 2023年第4期59-66,共8页
为确定鸡TLR1A基因g.926G>A和g.1076G>C等2个nsSNP位点多态性及其功能意义,采用CRS-PCR-RFLP方法检测了310只坝上长尾鸡(阳性127只,阴性183只)TLR1A基因2个nsSNP位点的多态性、二者与沙门氏菌抗性的关联,并对其进行生物信息学与... 为确定鸡TLR1A基因g.926G>A和g.1076G>C等2个nsSNP位点多态性及其功能意义,采用CRS-PCR-RFLP方法检测了310只坝上长尾鸡(阳性127只,阴性183只)TLR1A基因2个nsSNP位点的多态性、二者与沙门氏菌抗性的关联,并对其进行生物信息学与适应性进化分析。结果表明,g.926G>A(S309N)和g.1076G>C(R359P)与鸡沙门氏菌易感性显著相关(P<0.05)。其中,S309N在种间种内水平均受到正选择压力;R359P在种内受到正选择压力。二者均具有有害性,且后者蛋白稳定性较低。鸡TLR1A基因的g.926G>A和g.1076G>C位点可作为鸡抗病育种中潜在的功能性位点。 展开更多
关键词 tlr1a nsSNP 沙门氏菌 生物信息学分析
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生慧颗粒通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB通路对AD模型小鼠认知功能及神经炎症的影响
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作者 陈雨萌 李非洲 +1 位作者 杨杰 王平 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2026年第2期611-620,共10页
目的 观察生慧颗粒对HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响,探讨生慧颗粒改善AD模型小鼠认知障碍的机制。方法 采用随机分组法将60只雄性C57BL/6品系小鼠(8周龄)分配至5个实验组,分别为空白对照组、模型组、生慧颗粒低剂量组(3.9 g/kg)、生... 目的 观察生慧颗粒对HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响,探讨生慧颗粒改善AD模型小鼠认知障碍的机制。方法 采用随机分组法将60只雄性C57BL/6品系小鼠(8周龄)分配至5个实验组,分别为空白对照组、模型组、生慧颗粒低剂量组(3.9 g/kg)、生慧颗粒高剂量组(7.8 g/kg)以及多奈哌齐组(0.65 mg/kg)。除空白组每日皮下注射生理盐水外,其余各组小鼠每日口服AlCl_(3)(20 mg/kg)和腹腔注射D-gal(120 mg/kg)8周,生慧颗粒组和多奈哌齐组自第5周开始,给予生慧颗粒和多奈哌齐灌胃4周,每日一次。运用Morris水迷宫检测学习记忆能力,HE染色观察海马CA3区病理变化,免疫组化检测海马CA3区Aβ_(1-42)蛋白表达,透射电镜观察海马神经元超微结构,ELISA检测脑组织中TNF-α、IL-6、IL-1β表达水平,免疫印迹检测HMGB1/TLR4/NF-κB通路蛋白表达水平。结果 与空白组小鼠比较,模型组小鼠的游泳总路程、平台潜伏期显著增加(P<0.01),穿越平台次数、目标象限停留时间均显著减少(P<0.01);模型组小鼠海马CA3区神经元密度显著降低,细胞排列稀疏,胞体结构异常,部分神经元出现核固缩,染色明显;神经元胞体结构受损,形态异常,核膜不完整,线粒体肿胀伴嵴结构紊乱或断裂,出现空泡样变;CA3区Aβ_(1-42)蛋白表达增多;脑组织中TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著增高(P<0.01),HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达差异显著升高(P<0.01)。与模型组小鼠比较,生慧颗粒组和多奈哌齐小鼠游泳总路程及平台潜伏期显著降低(P<0.01),穿越平台次数、目标象限停留时间显著增加(P<0.05,P<0.01);CA3区神经元数量增加,排列较有序且结构损伤改善;神经元结构现修复,核膜结构完整,线粒体肿胀程度减轻,空泡化现象明显改善;Aβ_(1-42)蛋白表达减少;脑组织中TNF-α、IL-6、IL-1β水平均显著降低(P<0.01),HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论 生慧颗粒可以通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路缓解AD病理,减轻神经炎症损伤,改善认知功能,且呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 生慧颗粒 神经炎症 HMGB1/TLR4/NF-κB
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绿原酸调控HMGB1/TLR4通路对干眼症大鼠角膜炎症的影响
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作者 陈泽秦 朱丹 《眼科新进展》 北大核心 2026年第1期31-36,共6页
目的探究绿原酸(CA)对干眼症(DED)大鼠角膜炎症及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)通路的影响。方法SD大鼠连续7 d通过眼球表面注射东莨菪碱(12.5 mg·d^(-1),分4次注射)诱导DED大鼠模型。将大鼠随机分为Control组(腹腔... 目的探究绿原酸(CA)对干眼症(DED)大鼠角膜炎症及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)通路的影响。方法SD大鼠连续7 d通过眼球表面注射东莨菪碱(12.5 mg·d^(-1),分4次注射)诱导DED大鼠模型。将大鼠随机分为Control组(腹腔注射生理盐水)、DED组(腹腔注射生理盐水)、CA-L组(腹腔注射35 mg·kg^(-1)的CA)、CA-H组(腹腔注射70 mg·kg^(-1)的CA)、HMGB1/TLR4通路抑制剂组(TAK-242组)(腹腔注射0.25 mg·kg^(-1)的TAK-242)以及高剂量CA+HMGB1/TLR4通路激活剂组(CA-H+rRHMGB1组)(腹腔注射70 mg·kg^(-1)的CA和8μg·kg^(-1)的rRHMGB1),每组12只。Control组使用正常未干预大鼠,其余组均使用DED模型大鼠。酚红棉线检测大鼠泪腺分泌量;荧光素染色检测大鼠角膜上皮损伤;采集大鼠角膜组织检测角膜组织病理变化(HE染色)、角膜上皮细胞凋亡(TUNEL染色)、相关炎症因子水平(ELISA法)、角膜组织中水通道蛋白1(AQP1)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)阳性表达(TUNEL染色)以及HMGB1/TLR4通路蛋白表达水平(Western blot检测)。结果与Control组相比,DED组大鼠角膜组织受损,炎症细胞浸润,泪液分泌量、AQP1蛋白表达水平均降低,角膜荧光素染色评分、角膜上皮细胞凋亡率、各炎症相关因子水平、MMP-9蛋白表达水平以及角膜组织HMGB1/TLR4通路蛋白表达水平均上升;与DED组相比,CA-L组、CA-H组以及TAK-242组大鼠角膜组织受损均减轻,炎症细胞浸润均减少,泪液分泌量、AQP1蛋白表达水平均上升,角膜荧光素染色评分、角膜上皮细胞凋亡率、各炎症相关因子水平、MMP-9蛋白表达水平以及角膜组织HMGB1/TLR4通路蛋白表达水平均下降;与CA-L组相比,CA-H组大鼠角膜组织受损减轻,炎症细胞浸润减少,泪液分泌量、AQP1蛋白表达水平均上升,角膜荧光素染色评分、角膜上皮细胞凋亡率、各炎症相关因子水平、MMP-9蛋白表达水平以及角膜组织HMGB1/TLR4通路蛋白表达水平均下降;与CA-H组相比,CA-H+rRHMGB1组大鼠角膜组织受损加重,炎症细胞浸润加重,泪液分泌量、AQP1蛋白表达水平均下降,角膜荧光素染色评分、角膜上皮细胞凋亡率、各炎症相关因子水平、MMP-9蛋白表达水平以及角膜组织HMGB1/TLR4通路蛋白表达水平均上升,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论CA可通过抑制HMGB1/TLR4通路减轻DED大鼠角膜组织炎症损伤,改善DED症状。 展开更多
关键词 绿原酸 干眼症 炎症 HMGB1/TLR4通路
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穿心莲内酯对抑郁症大鼠相关神经递质及HMGB1/RAGE/TLR4信号通路的影响
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作者 胡文凤 张琳 +2 位作者 孙佳林 王星辰 朱晓芳 《中国细胞生物学学报》 2026年第2期375-383,共9页
该文探讨了穿心莲内酯(Andr)对抑郁症大鼠相关神经递质及HMGB1/RAGE/TLR4信号通路的影响。将大鼠随机分为Control组、Model组、Andr低剂量(Andr-L)组、Andr高剂量(AndrH)组、Andr-H+r HMGB1(HMGB1重组蛋白)组。评价大鼠抑郁行为和认知功... 该文探讨了穿心莲内酯(Andr)对抑郁症大鼠相关神经递质及HMGB1/RAGE/TLR4信号通路的影响。将大鼠随机分为Control组、Model组、Andr低剂量(Andr-L)组、Andr高剂量(AndrH)组、Andr-H+r HMGB1(HMGB1重组蛋白)组。评价大鼠抑郁行为和认知功能;检测血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、NGF水平和海马组织中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5羟色胺(5-HT)水平;观察海马组织形态;检测海马组织神经元凋亡情况;检测Cleaved-caspase-3、BDNF和HMGB1/RAGE/TLR4通路蛋白表达水平。与Control组相比,Model组大鼠海马组织有明显损伤,站立次数,蔗糖水饮用量,血清NGF水平,海马组织NE、DA和5-HT水平以及BDNF蛋白表达水平降低;游泳不动时间,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平,海马组织神经元凋亡率以及Cleaved-caspase-3、HMGB1、RAGE和TLR4蛋白表达水平升高(P<0.05);与Model组比较,Andr-L组和Andr-H组大鼠海马组织形态损伤有明显改善,站立次数,蔗糖水饮用量,血清NGF水平,海马组织NE、DA和5-HT水平以及BDNF蛋白表达水平升高;游泳不动时间,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平,海马组织神经元凋亡率以及Cleavedcaspase-3、HMGB1、RAGE和TLR4蛋白表达水平降低(P<0.05);rHMGB1可逆转Andr对抑郁症大鼠神经递质水平的改善作用(P<0.05)。Andr可提高抑郁症大鼠海马组织神经递质水平,改善抑郁行为,可能与抑制HMGB1/RAGE/TLR4信号通路有关。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 HMGB1/RAGE/TLR4信号通路 抑郁症 认知障碍 BDNF
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基于HMGB1/TLR4通路探讨艾司氯胺酮对癫痫神经损伤的影响
6
作者 赵华英 张冰 +2 位作者 刘步云 艾田妹 国义民 《脑与神经疾病杂志》 2026年第1期57-63,共7页
目的探讨艾司氯胺酮(Eske)是否可通过调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路减轻癫痫大鼠神经损伤。方法将大鼠随机分为NC组、Model组、Eske-L组、Eske-H组、Eske-H+rHMGB1(HMGB1激活剂)组。观察大鼠癫痫发作情况;Mor... 目的探讨艾司氯胺酮(Eske)是否可通过调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路减轻癫痫大鼠神经损伤。方法将大鼠随机分为NC组、Model组、Eske-L组、Eske-H组、Eske-H+rHMGB1(HMGB1激活剂)组。观察大鼠癫痫发作情况;Morris水迷宫实验评估大鼠空间学习记忆能力;Nissl染色观察海马组织形态;TUNEL染色检测神经元凋亡;Fluoro-Jade B染色检测损伤神经元;免疫荧光染色检测神经元特异性核蛋白(NeuN)标记的神经元核抗原;ELISA检测TNF-α、IL-10、IL-1β、γ-氨基丁酸(GABA)水平;蛋白印迹法检测Cleaved-caspase-3、HMGB1、TLR4、NF-κB和p-NF-κB蛋白表达水平。结果与NC组相比,Model组大鼠海马CA3区组织严重损伤,癫痫发作时间和潜伏期延长,Racine评分、TNF-α和IL-1β水平、神经元凋亡率、损伤神经元数量、Cleavedcaspase-3、HMGB1、TLR4和p-NF-κB/NF-κB蛋白表达水平升高,大鼠滞留时间缩短,穿越平台次数减少,IL-10和GABA水平、NeuN神经元数量降低(P<0.05);与Model组比较,Eske-L组和Eske-H组大鼠海马CA3区组织损伤程度减轻,癫痫发作时间和潜伏期缩短,Racine评分、TNF-α和IL-1β水平、神经元凋亡率、损伤神经元数量、Cleaved-caspase-3、HMGB1、TLR4和p-NF-κB/NF-κB蛋白表达水平降低,滞留时间延长,穿越平台次数增加,IL-10和GABA水平、NeuN神经元数量升高(P<0.05);rHMGB1可减弱Eske对癫痫大鼠神经损伤的改善作用(P<0.05)。结论Eske可能通过抑制HMGB1/TLR4通路来降低癫痫大鼠炎性反应和神经元凋亡,减轻神经损伤,改善其认知功能。 展开更多
关键词 HMGB1/TLR4通路 艾司氯胺酮 癫痫 神经损伤
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舒芬太尼调节高迁移率族蛋白1/Toll样受体4/核因子-κB信号通路对脓毒症大鼠急性肾损伤的影响 被引量:1
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作者 何洁 张永洪 宋波 《四川医学》 2025年第1期49-54,共6页
目的探索舒芬太尼(SUF)对脓毒症大鼠急性肾损伤(AKI)的影响以及对高迁移率族蛋白1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调节机制。方法将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物组(亚胺培南/西司他丁)、SUF低... 目的探索舒芬太尼(SUF)对脓毒症大鼠急性肾损伤(AKI)的影响以及对高迁移率族蛋白1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调节机制。方法将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物组(亚胺培南/西司他丁)、SUF低剂量组、SUF高剂量组、SUF高+HMGB1组,每组10只。检测大鼠血清中肾功能标志物肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的水平;HE染色观察大鼠肾脏的病理变化;TUNEL染色检测大鼠肾脏细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验检测血清中促炎因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6的水平;Western Blot检测大鼠肾脏中通路蛋白HMGB1、TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠血清中肾功能指标Cr、BUN水平,促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平,细胞凋亡率,HMGB1、TLR4表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65比值均升高(P<0.05)。与模型组相比,阳性药物和SUF低、高剂量组大鼠肾功能指标Cr、BUN水平,促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平,细胞凋亡率,HMGB1、TLR4表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65比值均显著降低(P<0.05)。HMGB1过表达逆转了SUF对信号通路、炎症和氧化应激损伤及肾功能障碍的抑制作用(P<0.05)。结论SUF可以减轻脓毒症大鼠AKI,其作用机制可能与HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路被抑制有关。 展开更多
关键词 舒芬太尼 HMGB1/TLR4/NF-κB 脓毒症 急性肾损伤
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藏红花素调节HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对多囊卵巢综合征大鼠炎症反应的影响
8
作者 李燕 张力鹏 张新圆 《中药材》 北大核心 2025年第7期1794-1799,共6页
目的:探讨藏红花素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠炎症反应的作用及其机制。方法:通过灌胃来曲唑及高脂饲料喂养建立PCOS大鼠模型,以喂养基础饲料及灌胃羧甲基纤维素钠的10只大鼠为正常对照组,将成模大鼠随机分为模型组、盐酸二甲双胍(100 ... 目的:探讨藏红花素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠炎症反应的作用及其机制。方法:通过灌胃来曲唑及高脂饲料喂养建立PCOS大鼠模型,以喂养基础饲料及灌胃羧甲基纤维素钠的10只大鼠为正常对照组,将成模大鼠随机分为模型组、盐酸二甲双胍(100 mg/kg)阳性对照组、藏红花素低剂量(10 mg/kg)组、藏红花素高剂量(50 mg/kg)组、藏红花素高剂量+rHMGB1(8μg/kg)组,予相应药物治疗后,评估胰岛素抵抗指数;ELISA检测血清激素(LH、T、FSH)和炎症因子IL-6、CRP、TNF-α水平;HE检测卵巢组织病理学变化;免疫组化检测卵巢组织中HMGB1蛋白表达;qRT-PCR检测卵巢组织TLR4、NF-κB p65 mRNA表达;Western Blot检测卵巢组织HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠胰岛素抵抗指数和血清LH、T、IL-6、CRP、TNF-α水平显著升高,血清FSH水平显著降低(P<0.05),卵巢组织出现大量闭锁卵泡,细胞层增厚,卵巢组织TLR4、NF-κB p65 mRNA和HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达显著升高,血清FSH水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,藏红花素高、低剂量组和盐酸二甲双胍组胰岛素抵抗指数和血清LH、T、IL-6、CRP、TNF-α水平显著降低,血清FSH水平显著升高(P<0.05),卵巢组织病理形态改善,卵巢组织TLR4、NF-κB p65 mRNA和HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05)。rHMGB1可逆转藏红花素的作用(P<0.05)。结论:藏红花素可通过调节HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路抑制PCOS大鼠炎症反应,减轻病理损伤。 展开更多
关键词 藏红花素 多囊卵巢综合征 炎症反应 HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路
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TLR4/ERK1/2信号通路在孕酮调节蜕膜基质细胞IL-8表达中的作用
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作者 赵紫薇 李娜 +2 位作者 杨美霞 宫晓玲 栾兆进 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期1383-1387,共5页
目的:探究TLR4/ERK1/2信号通路在孕酮调节蜕膜基质细胞(DSCs)IL-8表达中的作用机制。方法:体外分离培养原代孕早期人DSCs,分别给予0.01μmol/L、0.1μmol/L和1μmol/L的孕酮处理细胞,Western blot检测IL-8、TLR4、ERK1/2和p-ERK1/2表达... 目的:探究TLR4/ERK1/2信号通路在孕酮调节蜕膜基质细胞(DSCs)IL-8表达中的作用机制。方法:体外分离培养原代孕早期人DSCs,分别给予0.01μmol/L、0.1μmol/L和1μmol/L的孕酮处理细胞,Western blot检测IL-8、TLR4、ERK1/2和p-ERK1/2表达;进一步分别给予TLR4抑制剂TAK-242和ERK1/2抑制剂U0126处理,Western blot检测孕酮+抑制剂组、孕酮组和对照组IL-8的表达。结果:随着孕酮浓度升高,DSCs IL-8的表达逐渐降低,0.01μmol/L孕酮组DSCs IL-8、TLR4和p-ERK1/2表达均低于对照组(P=0.0358、P=0.0194和P=0.0471);0.1μmol/L孕酮组DSCs IL-8、TLR4和p-ERK1/2表达均明显低于对照组(P=0.0035、P=0.0040和P=0.0099);1μmol/L孕酮组DSCs IL-8、TLR4和p-ERK1/2表达均明显低于对照组(P=0.0033、P=0.0016和P=0.0050)。孕酮+TAK-242组IL-8表达明显低于孕酮组(P=0.0091);孕酮+U0126组IL-8表达明显低于孕酮组(P=0.0040)。结论:TLR4/ERK1/2信号通路参与孕酮调节DSCs IL-8表达的生理过程,且孕酮通过抑制TLR4表达和ERK1/2磷酸化下调IL-8表达。 展开更多
关键词 TLR4/ERK1/2信号通路 孕酮 蜕膜基质细胞 IL-8
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NRF2通路激活抑制酒精依赖小鼠前额叶GABRB3表达的机制分析
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作者 孙光涛 程瑜 +3 位作者 郑一帆 黄作义 金玉玲 戚询中 《黑龙江医药科学》 2025年第8期37-40,共4页
目的:研究NRF2通路激动剂对酒精依赖小鼠前额叶GABRB3表达的调节作用及机制。方法:实验采用腹腔注射法构建持续酒精摄入小鼠模型;选用NRF2通路激动剂TBHQ干预模型小鼠;实时荧光定量PCR检测HMGB1/TLR4通路、炎性因子IL-1β、MAPK通路基因... 目的:研究NRF2通路激动剂对酒精依赖小鼠前额叶GABRB3表达的调节作用及机制。方法:实验采用腹腔注射法构建持续酒精摄入小鼠模型;选用NRF2通路激动剂TBHQ干预模型小鼠;实时荧光定量PCR检测HMGB1/TLR4通路、炎性因子IL-1β、MAPK通路基因JNK、P38、ERK以及GABRB3 mRNA表达。结果:TBHQ干预后,与酒精组相比较,HMGB1、TLR4、IL-1βmRNA表达水平降低;GABRB3 mRNA表达降低;MAPK通路中的p38 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TBHQ能够降低持续酒精摄入小鼠前额叶炎性通路HMGB1/TLR4基因及炎性因子IL-1βmRNA表达;抑制MAPK通路中的p38以及功能基因GABRB3表达,发挥抗氧化及神经保护作用。 展开更多
关键词 酒精依赖 GABRB3 HMGB1/TLR4 NRF2
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疏风解毒胶囊调控TLR4/TRIF/TBK1信号通路改善人冠状病毒229E感染小鼠肺部炎症
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作者 包蕾 耿子涵 崔晓兰 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第24期79-85,共7页
目的:研究疏风解毒胶囊在人冠状病毒229E(HCoV-229E)感染小鼠模型中的抗炎和免疫调节作用。方法:将48只BALB/c小鼠随机分为正常组,模型组,氯喹阳性组(0.0758 g·kg^(-1)),疏风解毒胶囊高、中、低剂量组(1.872、0.936、0.468 g·... 目的:研究疏风解毒胶囊在人冠状病毒229E(HCoV-229E)感染小鼠模型中的抗炎和免疫调节作用。方法:将48只BALB/c小鼠随机分为正常组,模型组,氯喹阳性组(0.0758 g·kg^(-1)),疏风解毒胶囊高、中、低剂量组(1.872、0.936、0.468 g·kg^(-1)),每组8只。采用滴鼻感染HCoV-229E病毒液建立冠状病毒感染模型。感染后第4天脱颈椎处死小鼠,通过称量肺湿质量和计算肺指数评估肺部病理变化,同时使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织中Toll样受体4(TLR4)、Toll/含Toll-白细胞介素受体结构域的诱导型β干扰素适应因子(TRIF)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、TANK结合激酶1(TBK1)、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)、干扰素调节因子3(IRF3)及磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)等关键基因mRNA和蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠的肺指数显著升高(P<0.01),肺间质有大量炎症渗出,并显著升高TLR4、TRIF、TRAF6、TBK1、p-TBK1、IRF3和p-IRF3蛋白的表达(P<0.01),说明HCoV-229E引起了严重的肺部炎症。与模型组比较,疏风解毒胶囊各剂量组显著降低了小鼠的肺指数(P<0.01),其中高、中剂量组的肺指数抑制率分别为78.18%和79.27%。同时,Real-time PCR和Western blot结果显示,疏风解毒胶囊中剂量组显著降低TLR4、TRIF、TRAF6、TBK1、p-TBK1及p-IRF3的基因和蛋白表达水平(P<0.05)。结论:疏风解毒胶囊能够通过抑制TLR4/TRIF/TBK1信号通路的过度激活,减轻冠状病毒感染引发的肺部炎症反应和组织损伤。 展开更多
关键词 疏风解毒胶囊 冠状病毒 Toll样受体4/含Toll-白细胞介素受体结构域的诱导型β干扰素适应因子/TANK结合激酶1(TLR4/TRIF/TBK1)信号通路 免疫调节 人冠状病毒229E(HCoV-229E)
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基于“肺与大肠相表里”探究小青龙汤肺肠同治的作用机制 被引量:3
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作者 王婷婷 宋桂华 +1 位作者 任明月 彭明浩 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第11期2195-2200,共6页
目的 基于“肺与大肠相表里”的中医理论,观察小青龙汤对哮喘模型小鼠回肠上皮TLR/IL-1R信号通路中正负调控因子的影响,探讨小青龙汤肺肠同治的作用机制。方法 将BALB/c雌性小鼠随机分为空白组、模型组、小青龙汤低、中、高剂量组(4.5,9... 目的 基于“肺与大肠相表里”的中医理论,观察小青龙汤对哮喘模型小鼠回肠上皮TLR/IL-1R信号通路中正负调控因子的影响,探讨小青龙汤肺肠同治的作用机制。方法 将BALB/c雌性小鼠随机分为空白组、模型组、小青龙汤低、中、高剂量组(4.5,9,18 g·kg^(-1),灌胃)及地塞米松组(3 mg·kg^(-1),腹腔注射)。采用卵清蛋白致敏、激发,建立哮喘模型小鼠,连续药物干预7天后,记录哮喘行为学评分,检测肺功能,流式细胞术分析肺泡灌洗液总细胞数,HE染色观察肺组织病理学改变并评分,Real-time PCR检测回肠组织中TLR4、SIGIRR、IRAK-M mRNA的表达,Western blotting检测回肠组织中TLR4、SIGIRR及IL-1F5蛋白的表达。结果 小青龙汤可以缓解哮喘行为,改善肺功能,减少肺组织病理学评分及肺泡灌洗液总细胞数,下调回肠组织中TLR4的蛋白和mRNA表达水平,上调SIGIRR、IL-1F5的蛋白表达水平和SIGIRR、IRAK-M的mRNA表达水平,且小青龙汤高剂量效果最优(P<0.05或P<0.01)。结论 小青龙汤治疗哮喘具有肺肠同治的作用,其作用机制可能是通过下调正调控因子TLR4,上调负调控因子SIGIRR、IL-1F5及IRAK-M,来纠正回肠上皮TLR/IL-1R信号通路失衡,从而维持肠上皮免疫平衡,为“肺与大肠相表里”理论提供依据。 展开更多
关键词 哮喘 小青龙汤 肺与大肠相表里 肺肠同治 TLR/IL-1R
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基于HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路探讨芪白平肺胶囊对COPD大鼠气道炎症的影响 被引量:3
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作者 方莉 张璐 +4 位作者 石梦瑶 杨程 童佳兵 高雅婷 李泽庚 《中成药》 北大核心 2025年第1期244-249,共6页
目的探讨芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症的影响。方法SD大鼠随机分为空白组、模型组、芪白平肺胶囊组(500 mg/kg,灌胃)、吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)组(100 mg/kg,腹腔注射)和芪白平肺胶囊+PDTC组,每组10只,采用熏烟... 目的探讨芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症的影响。方法SD大鼠随机分为空白组、模型组、芪白平肺胶囊组(500 mg/kg,灌胃)、吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)组(100 mg/kg,腹腔注射)和芪白平肺胶囊+PDTC组,每组10只,采用熏烟、气管内注入LPS联合低氧的方法建立COPD大鼠模型,造模第15天开始给药。给药4周后,检测大鼠肺功能,ELISA法检测血清白介素(IL)-8、IL-1β、内皮缩血管肽(ET)-1水平,HE染色观察肺组织病理形态改变,免疫组化(IHC)法检测肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB P65、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、髓样分化因子88(MyD88)蛋白表达,免疫荧光(IF)染色观察肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB P65、TNF-α分布及表达,RT-qPCR法检测肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB P65、TNF-α、MyD 88 mRNA表达。结果与空白组比较,模型组大鼠FEV0.3、FEV0.3/FVC、FVC值降低(P<0.01),血清IL-8、IL-1β、ET-1水平升高(P<0.01),肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB P65、TNF-α、MyD88蛋白和mRNA表达升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠FEV0.3、FEV0.3/FVC、FVC值升高(P<0.01),血清IL-8、IL-1β、ET-1水平降低(P<0.01),肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB P65、TNF-α、MyD88蛋白和mRNA表达降低(P<0.01),其中芪白平肺胶囊+PDTC组效果最佳(P<0.05,P<0.01)。结论芪白平肺胶囊可减轻COPD大鼠气道炎症,改善气道重塑,其机制可能与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路活化有关。 展开更多
关键词 芪白平肺胶囊 慢性阻塞性肺疾病(COPD) 肺功能 炎症 气道重塑 HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路
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基于WDFY1/TLR4/NF-κB信号通路探讨开心散对APP/PS1小鼠神经炎症的影响 被引量:3
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作者 杨雅丽 闵冬雨 +7 位作者 刘勇明 袁常斌 鞠业涛 梁元钰 程美佳 何晓明 于畅洋 张力 《中国中医药信息杂志》 2025年第5期90-97,共8页
目的观察开心散调控WDFY1/TLR4/NF-κB信号通路对APP/PS1小鼠神经炎症的影响,探讨其干预阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法将APP/PS1转基因小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组(0.66 mg/kg)和开心散低、中、高剂量组(1.625、3.25、6.5 g... 目的观察开心散调控WDFY1/TLR4/NF-κB信号通路对APP/PS1小鼠神经炎症的影响,探讨其干预阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法将APP/PS1转基因小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组(0.66 mg/kg)和开心散低、中、高剂量组(1.625、3.25、6.5 g/kg),C57BL/6J小鼠设置为空白对照组,每组8只,各给药组分别予相应药物干预24周。Morris水迷宫、Y迷宫和新物体识别实验检测小鼠认知功能和学习记忆能力,免疫组化检测海马β淀粉样蛋白(Aβ)表达,HE染色和尼氏染色观察海马CA1区神经元形态和尼氏体,ELISA检测血清白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,Western blot检测海马组织离子钙结合衔接分子1(Iba1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、WDFY1、Toll样受体4(TLR4)、Toll样受体相关分子(TRAM)、TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、核因子-κB(NF-κB)p65、p-NF-κB p65蛋白表达,RT-qPCR检测海马组织WDFY1、TLR4、TRAM、TRIF、NF-κB p65 mRNA表达。结果与空白对照组比较,模型组逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少,自主反应交替率和相对识别指数明显下降(P<0.05,P<0.01),海马组织Aβ沉积增多(P<0.01),海马CA1区神经元结构损伤,神经元数量和尼氏体数量减少,血清IL-6、IL-17、IL-1β、TNF-α含量明显升高,海马组织Iba1、GFAP、WDFY1、TLR4、TRAM、TRIF、p-NF-κB p65蛋白和WDFY1、TLR4、TRAM、TRIF mRNA表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,开心散各剂量组和盐酸多奈哌齐组逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数明显增多,自主反应交替率和相对识别指数明显上升(P<0.05,P<0.01),开心散中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组海马组织Aβ沉积减少,神经元结构恢复,神经元数量和尼氏体数量增加,血清IL-6、IL-17、IL-1β、TNF-α含量明显降低(P<0.05,P<0.01),海马组织Iba1、GFAP、WDFY1、TLR4、TRAM、TRIF、p-NF-κBp65蛋白和WDFY1、TLR4、TRAM、TRIF mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论开心散能改善AD模型小鼠认知功能和学习记忆能力,减轻海马神经元损伤和Aβ沉积,抑制小胶质细胞和星形胶质细胞激活,进而降低血清炎症因子释放,其机制可能与调控WDFY1/TLR4/NF-κB信号通路,抑制神经炎症有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 开心散 APP/PS1小鼠 WDFY1/TLR4/NF-κB信号通路 神经炎症
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熊果酸调控HMGB1/TLR4通路减轻溃疡性结肠炎大鼠模型肠屏障损伤的实验研究 被引量:1
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作者 李红心 刘静 +1 位作者 范泽文 徐闻铂 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期620-627,共8页
目的:探究熊果酸调控HMGB1/TLR4通路减轻溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型肠屏障损伤的作用机制。方法:大鼠随机分为对照组、模型组、甘草酸(HMGB1抑制剂)组、熊果酸组、甘草酸+熊果酸组,每组12只,以三硝基苯磺酸灌肠诱导UC大鼠模型。分组给药... 目的:探究熊果酸调控HMGB1/TLR4通路减轻溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型肠屏障损伤的作用机制。方法:大鼠随机分为对照组、模型组、甘草酸(HMGB1抑制剂)组、熊果酸组、甘草酸+熊果酸组,每组12只,以三硝基苯磺酸灌肠诱导UC大鼠模型。分组给药后,对各组大鼠进行体质量测量和疾病活动指数(DAI)评分;HE染色检测结肠组织黏膜病理形态,比较黏膜厚度、绒毛高度;试剂盒检测结肠组织过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及血清二胺氧化酶(DAO)、肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、TNF-α、IL-18、IL-6水平;蛋白免疫印迹法检测结肠组织紧密连接蛋白(Claudin-1、ZO-1、Occludin)及HMGB1/TLR4通路蛋白(HMGB1、TLR4、MyD88)表达水平,免疫组化法检测结肠组织HMGB1、TLR4、MyD88表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠结肠黏膜组织发生严重病理损伤,体质量、黏膜厚度、绒毛高度、结肠组织CAT、SOD及Claudin-1、ZO-1、Occludin水平明显降低,DAI评分、血清DAO、I-FABP、TNF-α、IL-18及IL-6水平、结肠组织MDA及HMGB1、TLR4、MyD88水平明显升高(P<0.05);与模型组相比,熊果酸组、甘草酸组、甘草酸+熊果酸组大鼠结肠黏膜组织病理损伤减轻,体质量、黏膜厚度、绒毛高度、结肠组织CAT、SOD及Claudin-1、ZO-1、Occludin水平升高,DAI评分、血清DAO、I-FABP、TNF-α、IL-18及IL-6水平、结肠组织MDA及HMGB1、TLR4、MyD88水平降低(P<0.05);甘草酸与熊果酸联合干预可增强熊果酸对上述指标的影响(P<0.05)。结论:熊果酸可抑制炎症,降低氧化应激水平,减轻UC大鼠结肠黏膜损伤,修复肠黏膜屏障功能,改善大鼠临床症状,可能是通过下调HMGB1/TLR4通路实现的。 展开更多
关键词 熊果酸 HMGB1/TLR4通路 溃疡性结肠炎 肠屏障损伤
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基于HMGB1/TLR4通路探讨甘草酸对血红素诱导BV2细胞炎症反应的影响
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作者 董焕 刘芳 +5 位作者 曾艳 李春辉 周旭晴 吕笑 刘皓昕 郭纯 《中成药》 北大核心 2025年第11期3782-3788,共7页
目的探讨甘草酸对血红素诱导BV2细胞炎症反应的改善作用。方法采用氯化血红素诱导BV2细胞建立体外脑出血炎症反应细胞模型,确定最佳的甘草酸作用浓度。将BV2细胞分为对照组、模型组、甘草酸组、EP(HMGB1抑制剂丙酮酸乙酯)组、EP+甘草酸... 目的探讨甘草酸对血红素诱导BV2细胞炎症反应的改善作用。方法采用氯化血红素诱导BV2细胞建立体外脑出血炎症反应细胞模型,确定最佳的甘草酸作用浓度。将BV2细胞分为对照组、模型组、甘草酸组、EP(HMGB1抑制剂丙酮酸乙酯)组、EP+甘草酸组、TAK-242(TLR4抑制剂)组、TAK-242+甘草酸组。ELISA法检测细胞上清液炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平,免疫荧光和Western blot法检测细胞HMGB1、TLR4、NF-κB P65和CD86蛋白表达。结果氯化血红素诱导BV2细胞的最佳浓度为40μmol/L,甘草酸作用最佳浓度为50 mmol/L。与模型组比较,甘草酸组细胞存活率升高(P<0.01),细胞上清液IL-1β、TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05,P<0.01),细胞HMGB1、TLR4、NF-κB P65和CD86蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论甘草酸可减轻血红素诱导BV2细胞M1型极化及炎症反应,其作用机制可能与调控HMGB1/TLR4通路相关。 展开更多
关键词 甘草酸 BV2细胞 HMGB1/TLR4通路 炎症反应 M1型极化
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髓样分化因子88抑制剂的研究进展 被引量:1
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作者 葛锶洁 傅聪 +1 位作者 陈洁 陈鹏钦 《中国药物化学杂志》 2025年第6期480-490,共11页
髓样分化因子88(MyD88)是Toll样/白细胞介素-1受体(TLR/IL-1R)超家族下游的核心衔接蛋白,其过度激活引发失控性炎症级联反应,继而导致组织损伤,因此MyD88已成为炎症性疾病预防和治疗的潜在关键靶点。MyD88通过Toll/白细胞介素-1受体(TIR... 髓样分化因子88(MyD88)是Toll样/白细胞介素-1受体(TLR/IL-1R)超家族下游的核心衔接蛋白,其过度激活引发失控性炎症级联反应,继而导致组织损伤,因此MyD88已成为炎症性疾病预防和治疗的潜在关键靶点。MyD88通过Toll/白细胞介素-1受体(TIR)结构域介导的同源或异源二聚化,是触发下游信号传导的核心分子事件,这也使TIR域成为MyD88抑制剂开发的热门区域。近年来,针对该区域的拟肽类、小分子化合物等相关研究不断涌现。本文作者探讨了MyD88的结构生物学特征,总结了MyD88抑制剂的研究进展,并分析了各类抑制剂的作用模式,以期为后续MyD88抑制剂的开发提供参考。 展开更多
关键词 髓样分化因子88 抑制剂 TLR/IL-1R 炎症性疾病
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红景天苷通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB通路影响支原体肺炎小鼠肺损伤及炎症反应 被引量:1
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作者 李晨曦 蒲方 闫海燕 《免疫学杂志》 2025年第3期150-156,共7页
目的探讨红景天苷(Sal)对支原体肺炎(MP)小鼠肺损伤、炎症反应及高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核因子-κB(HMGB1/TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法构建MP小鼠模型并将其随机分为模型组(Model组)、阳性对照—阿奇霉素组(Azithromycin组... 目的探讨红景天苷(Sal)对支原体肺炎(MP)小鼠肺损伤、炎症反应及高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核因子-κB(HMGB1/TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法构建MP小鼠模型并将其随机分为模型组(Model组)、阳性对照—阿奇霉素组(Azithromycin组)、红景天苷低、高剂量组(Sal-L、Sal-H组)、红景天苷高剂量+通路激活剂组(Sal-H+rHMGB1组),每组12只。另取12只健康小鼠作为对照组(Control组)。检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中总炎性细胞数量和炎性因子水平(IL-1β、TNF-α和IL-6),血清中炎症因子水平,肺组织氧化应激因子水平(ELISA法)、肺组织病损程度(HE染色)、肺组织细胞凋亡情况(TUNEL染色)、HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达量(Western blot法)。结果Model组小鼠肺组织发生明显病理损伤,炎症细胞浸润,BALF中总炎性细胞数量、炎症因子水平以及血清中炎症因子水平、肺组织中MDA和NO水平、细胞凋亡率、HMGB1和Bax蛋白表达水平以及p-TLR4/TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65值均明显升高,肺组织中SOD和GSH-Px活性、Bcl 2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与Model组相比,随着Sal剂量的增加,Sal-L、Sal-H和Azithromycin组小鼠肺组织病损程度减轻、炎症细胞浸润减少,BALF中总炎性细胞数量、炎症因子水平、肺组织中MDA和NO水平、细胞凋亡率、HMGB1和Bax蛋白表达水平以及p-TLR4/TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65值均显著降低,肺组织中SOD和GSH-Px活性、Bcl 2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与Sal-H组相比,Sal-H+rHMGB1组小鼠肺组织病损程度严重,BALF中总炎性细胞数量、炎症因子水平以及血清中炎症因子水平、肺组织中MDA和NO水平、细胞凋亡率、HMGB1和Bax蛋白表达水平以及p-TLR4/TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65值均明显升高;肺组织中SOD和GSH-Px活性、Bcl 2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论Sal可抑制MP小鼠的炎症反应和氧化应激反应,改善MP小鼠肺组织病损,可能与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路激活有关。 展开更多
关键词 红景天苷 支原体肺炎 肺损伤 炎症反应 HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路
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六味地黄丸合二至丸对NETs共培养4T1细胞EMT特征的影响
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作者 李芳芳 郭慧文 +2 位作者 黄玲 陈奕杉 郑里翔 《中药材》 北大核心 2025年第7期1807-1812,共6页
目的:探讨六味地黄丸合二至丸含药血清对与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)共培养条件下三阴性乳腺癌4T1细胞上皮间充质转化(EMT)的调控作用,以及对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响。方法:采用C57小鼠提取中性粒细胞,用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸... 目的:探讨六味地黄丸合二至丸含药血清对与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)共培养条件下三阴性乳腺癌4T1细胞上皮间充质转化(EMT)的调控作用,以及对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响。方法:采用C57小鼠提取中性粒细胞,用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)诱导成NETs,并运用Western Blot检测NETs标志物CitH3的表达。69只SPF级昆明小鼠随机分为六味地黄丸(11.7 g/kg)组、二至丸(36.9 g/kg)组、六味地黄丸合二至丸(35.1 g/kg)组,每组各23只,灌胃相应药物5 d后取血分离血清。实验设空白对照组、模型组、紫杉醇组、六味地黄丸含药血清组、二至丸含药血清组、六味地黄丸合二至丸含药血清组,CCK-8法检测细胞增殖活力;细胞划痕试验和Transwell侵袭试验分别检测4T1细胞的迁移和侵袭;免疫荧光试验检测CitH3、MPO表达;Western Blot检测EMT相关蛋白和HMGB1/TLR4信号轴相关蛋白表达。结果:成功诱导NETs,建立NETs-4T1共培养体系。与空白对照组比较,模型组细胞增殖活力和迁移、侵袭能力显著升高,E-cadherin蛋白表达显著降低,CitH3、MPO荧光强度和N-cadherin、Vimentin、TLR4、HMGB1蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组细胞增殖活力和迁移、侵袭能力显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高,CitH3、MPO荧光强度和N-cadherin、Vimentin、TLR4蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。六味地黄丸合二至丸的作用显著优于单用六味地黄丸或二至丸。结论:六味地黄丸合二至丸以通过抑制NETs,调控HMGB1/TLR4信号通路抑制4T1细胞EMT特征表达,抑制4T1细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 六味地黄丸合二至丸 中性粒细胞胞外诱捕网(NETs) 4T1细胞 上皮-间充质转化(EMT) HMGB1/TLR4信号轴
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基于TLR4/IRAK1/TRAF6/NF-κB通路探讨乌梅丸对溃疡性结肠炎小鼠NETs的影响
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作者 王雨吉 陈凯迪 +6 位作者 卢志华 王奎玲 陈泽芃 唐雯雯 何林海 施国平 陈玉根 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第10期4853-4860,共8页
目的:探讨乌梅丸治疗溃疡性结肠炎(UC)的潜在作用机制。方法:36只雄性C57BL/6J小鼠按体质量随机分为空白组、模型组、乌梅丸组(6 g·kg-1·d-1)和美沙拉嗪组(200 mg·kg-1·d-1),每组9只。采用2.5%葡聚糖硫酸钠自由饮用... 目的:探讨乌梅丸治疗溃疡性结肠炎(UC)的潜在作用机制。方法:36只雄性C57BL/6J小鼠按体质量随机分为空白组、模型组、乌梅丸组(6 g·kg-1·d-1)和美沙拉嗪组(200 mg·kg-1·d-1),每组9只。采用2.5%葡聚糖硫酸钠自由饮用7 d诱导UC小鼠模型,实验过程中每日记录小鼠体质量,粪便性状以及便血情况以计算疾病活动指数(DAI)。在实验结束时测量小鼠结肠长度;HE染色和AB-PAS染色观察结肠组织病理学改变;ELISA法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;Western Blot法检测结肠组织带状闭合蛋白-1(ZO-1)、咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白-1(Claudin-1)的蛋白表达量;免疫荧光检测结肠组织中中性粒细胞的表达量;ELISA法检测血清中髓过氧化物酶-DNA复合物(MPODNA)和弹性蛋白酶-DNA复合物(NE-DNA)的含量;Western Blot法检测结肠组织肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)、髓过氧化物酶(MPO)、瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)的蛋白表达量;qPCR和Western Blot法检测结肠组织TLR4/IRAK1/TRAF6/NF-κB通路相关基因的mRNA和蛋白表达量。结果:与模型组比较,乌梅丸组小鼠DAI评分下降(P<0.01),结肠长度增加(P<0.01),结肠组织病理学损伤减轻;血清中IL-1β、TNF-α、IL-6含量降低(P<0.01);结肠组织中ZO-1、Occludin、Claudin-1蛋白表达上升(P<0.01);结肠组织中中性粒细胞浸润减少;血清中MPO-DNA和NE-DNA含量降低(P<0.01);结肠组织中PAD4、MPO、CitH3蛋白表达下调(P<0.01,P<0.05);结肠组织中TLR4、IRAK1、TRAF6、NF-κB p65的mRNA和蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论:乌梅丸可能通过抑制中性粒细胞胞外陷阱和下调TLR4/IRAK1/TRAF6/NF-κB通路,发挥缓解肠屏障损伤、治疗UC的作用。 展开更多
关键词 乌梅丸 溃疡性结肠炎 TLR4/IRAK1/TRAF6/NF-κB通路 中性粒细胞胞外陷阱
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