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针刺对营养性肥胖小鼠肠黏膜TLR1/TLR2基因的良性调控作用 被引量：12
1
作者 司原成 苗维纳 +2 位作者 吴高鑫 陈波 丁维俊 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1166-1169,共4页
目的:探究针刺对营养性肥胖小鼠肠黏膜TLR1/TLR2基因的良性调控作用。方法:100只C57BL/6小鼠,采用随机数字表随机选取10只为正常组,余下饲养高脂饮食8周,复制营养性肥胖鼠30只,随机均分成模型组、针刺14d组及针刺28d组,针刺组针刺中脘... 目的:探究针刺对营养性肥胖小鼠肠黏膜TLR1/TLR2基因的良性调控作用。方法:100只C57BL/6小鼠,采用随机数字表随机选取10只为正常组,余下饲养高脂饮食8周,复制营养性肥胖鼠30只,随机均分成模型组、针刺14d组及针刺28d组,针刺组针刺中脘、关元、天枢、足三里,得气后留针10min,观察比较各组小鼠体质量、Lee’s指数、血清脂肪因子[瘦素(LP)、脂联素(ADPN)]、炎性因子[白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)]含量变化及肠黏膜组织中TLR1/TLR2基因的表达差异。结果:模型鼠体质量、Lee’s指数、LP、ADPN、肠组织炎性因子(IL-6、IL-10、TNF-α)及TLR1及TLR2蛋白分布密度及基因表达均显著高于正常组(P<0.01),针刺后显著下降(P<0.05,P<0.01),针刺28d组疗效优于针刺14d组(P<0.05)。结论:针刺治疗肥胖,调整肠黏膜的免疫状态,下调关键炎性调控基因TLR1/TLR2的表达,达到消除慢性炎症治疗肥胖的目的。 展开更多
关键词 针刺 肥胖 肠黏膜 炎性因子 tlr1/tlr2
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不同鸡种TLR1和TLR2基因SNP检测分析 被引量：3
2
作者 张之宣 营凡 +2 位作者 王慧华 李鹏 赵桂苹 《中国家禽》 北大核心 2014年第5期6-10,共5页
本研究利用DNA直接测序技术对9个地方鸡种(北京油鸡、白耳鸡、溧阳鸡、河南斗鸡、泰和乌骨鸡、大骨鸡、狼山鸡、仙居鸡、茶花鸡)和1个引进品种(白来航蛋鸡)鸡Toll样受体1(chTLR1-1、chTLR1-2)、Toll样受体2(chTLR2-1、chTLR2-2)基因的... 本研究利用DNA直接测序技术对9个地方鸡种(北京油鸡、白耳鸡、溧阳鸡、河南斗鸡、泰和乌骨鸡、大骨鸡、狼山鸡、仙居鸡、茶花鸡)和1个引进品种(白来航蛋鸡)鸡Toll样受体1(chTLR1-1、chTLR1-2)、Toll样受体2(chTLR2-1、chTLR2-2)基因的全部外显子、部分内含子及5′调控区的序列进行单核苷酸多态性(SNPs)检测。结果共发现了27个SNP位点,96%的SNPs位于编码区,其中33%的SNPs为错义突变。chTLR2-1基因在所有品种中均未发现SNP位点,chTLR1-1、chTLR1-2和chTLR2-2基因在9个地方品种中突变位点较为丰富,且不同品种间SNP数量差别较大,但在白来航蛋鸡中均未发现SNPs位点。本试验为进一步开展地方鸡种chTLR1和chTLR2基因多态性与抗病研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 鸡 tlr1基因 tlr2基因 SNP
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THP-1细胞中A20蛋白对TLR1和TLR2诱导免疫反应影响的研究 被引量：2
3
作者 周李娜 胡锦跃 张平安 《临床和实验医学杂志》 2017年第9期862-866,共5页
目的研究A20蛋白与Toll样受体1(TLR1)和Toll样受体2(TLR2)信号通路产生炎症因子的关系,探讨A20蛋白在TLR1和TLR2信号通路中的分子机制,为细菌性感染疾病的抗炎和基因治疗提供基础理论依据。方法预先用Pam3CSK4处理的THP-1细胞,用Pam3CSK... 目的研究A20蛋白与Toll样受体1(TLR1)和Toll样受体2(TLR2)信号通路产生炎症因子的关系,探讨A20蛋白在TLR1和TLR2信号通路中的分子机制,为细菌性感染疾病的抗炎和基因治疗提供基础理论依据。方法预先用Pam3CSK4处理的THP-1细胞,用Pam3CSK4再刺激,分析Pam3CSK4预处理对Pam3CSK4诱导的细胞因子产生的影响;RT-PCR和Western blot检测Pam3CSK4处理后TLR1和TLR2及My D88的表达水平;采用siRNA转染抑制A20表达,验证A20在Pam3CSK4诱导免疫耐受中的作用。结果 Pam3CSK4预处理可下调Pam3CSK4再刺激所诱导的细胞因子表达水平,包括IL-1β、TNF-α及IL-8,同时Pam3csk4预处理下调Pam3csk4所诱导的JNK、p38及NF-κB的信号传导;另外Pam3CSK4显著上调A20的表达水平,且有剂量及时间依赖性;A20过表达细胞中,Pam3csk4诱导的促炎症细胞因子的表达被逆转。结论 A20是诱导Pam3csk4耐受的重要调节因子,对Pam3csk4诱导的炎症反应具有负调控作用。 展开更多
关键词 A20蛋白 tlr1和tlr2 免疫反应 免疫耐受
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迟缓型爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)诱导牙鲆(Paralichthys olivaceus)TLR1及TLR2基因的表达分析 被引量：1
4
作者 李庆亚 周密 +5 位作者 张洁 郑津辉 耿绪云 潘宝平 孙金生 高虹 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期848-856,共9页
Toll样受体是一类重要的蛋白质分子,参与固有免疫系统,在哺乳动物在受到细菌感染的时候,TLR1和TLR2基因可以形成异源二聚体,进而启动宿主的固有免疫。本文应用实时荧光定量PCR的技术,检测了TLR1和TLR2基因在牙鲆健康组织以及牙鲆腹腔注... Toll样受体是一类重要的蛋白质分子,参与固有免疫系统,在哺乳动物在受到细菌感染的时候,TLR1和TLR2基因可以形成异源二聚体,进而启动宿主的固有免疫。本文应用实时荧光定量PCR的技术,检测了TLR1和TLR2基因在牙鲆健康组织以及牙鲆腹腔注射迟缓型爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)后各组织中的表达变化,并探讨了它们与牙鲆(Paralichthys olivaceus)固有免疫反应的关系。结果表明,TLR1和TLR2基因广泛表达于健康牙鲆的各种组织中,其中,TLR1在脾脏组织中表达量最高,其次是心脏、肌肉;TLR2在小肠组织中表达量最高,其次是肝脏、心脏。免疫刺激实验表明,多数组织在感染病原6h后TLR1基因表达达到峰值,其中脾脏中基因的表达量最大,是0时间点的290倍(P<0.01)。TLR2基因在感染病原1h后在脾脏中表达量最高,为0时间点的17.8倍(P<0.01),在感染病原1d后心脏组织中基因的表达量为对照组的14倍(P<0.01),其余时间点表达变化不明显。结果表明TLR1和TLR2参与了牙鲆对迟缓型爱德华氏菌的免疫应答反应。实验结果还显示,在牙鲆感染迟缓型爱德华氏菌后,MyD88、TNF-α和IL-1基因的表达也都同步上调,暗示迟缓型爱德华氏菌有可能通过TLR1通路上调MyD88的表达,并最终导致炎症因子TNF-α和IL-1的基因表达上调,以应答病原菌的感染。 展开更多
关键词 tlr1 tlr2 牙鲆 迟缓型爱德华氏菌 表达 实时荧光PCR
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黄连解毒汤含药血清对Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞极化的调节作用 被引量：1
5
作者 王睿 王俊力 +5 位作者 刘欣 孙亦轩 徐鑫梓 邵卫 梅俊华 陈国华 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2585-2588,共4页
目的探讨黄连解毒汤含药血清干预对β淀粉样蛋白1-42寡聚体诱导的BV2小胶质细胞M1/M2极化的影响。方法倒置显微镜下观察黄连解毒汤含药血清干预对BV2细胞形态改变的影响。ELISA检测细胞上清液中细胞因子含量。免疫荧光检测小胶质细胞M1... 目的探讨黄连解毒汤含药血清干预对β淀粉样蛋白1-42寡聚体诱导的BV2小胶质细胞M1/M2极化的影响。方法倒置显微镜下观察黄连解毒汤含药血清干预对BV2细胞形态改变的影响。ELISA检测细胞上清液中细胞因子含量。免疫荧光检测小胶质细胞M1表型CD86、M2表型表面标志物CD206的表达。RT-PCR检测检测TLR1、TLR2、MyD88蛋白的表达。结果黄连解毒汤含药血清可抑制β淀粉样蛋白1-42寡聚体刺激引起的BV2细胞形态变化。黄连解毒汤含药血清能下调小胶质细胞M1表型表面标志物CD86和高表达的促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)(P<0.05);上调小胶质细胞M2表型表面标志物CD206和高表达的抗炎细胞因子白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)(P<0.05);下调TLR1、TLR2、MyD88蛋白的表达(P<0.05)。结论黄连解毒汤可通过对细胞形态、M1/M2型标记分子与炎性因子的调节作用、TLR1、TLR2、MyD88蛋白的下降表达,从而对Aβ1-42诱导的BV2细胞起到抑制M1型极化、并促进M2型极化,发挥调节炎症的作用。 展开更多
关键词 黄连解毒汤含药血清 小胶质细胞 极化 炎症反应 tlr1/tlr2/MyD88信号通路
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幽门螺杆菌代谢物拮抗宿主先天免疫的机制研究 被引量：1
6
作者 陈智 林焕雄 杨惠钿 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期478-483,共6页
目的:探讨幽门螺杆菌代谢物拮抗宿主先天免疫的潜在机制。方法:RNA测序及通路富集分析测定仅LPS刺激的胃黏膜细胞GES-1、LPS与幽门螺杆菌培养上清共同处理的GES-1细胞及未经处理的GES-1细胞。3KD超滤管过滤幽门螺杆菌培养上清,并以过滤... 目的:探讨幽门螺杆菌代谢物拮抗宿主先天免疫的潜在机制。方法:RNA测序及通路富集分析测定仅LPS刺激的胃黏膜细胞GES-1、LPS与幽门螺杆菌培养上清共同处理的GES-1细胞及未经处理的GES-1细胞。3KD超滤管过滤幽门螺杆菌培养上清,并以过滤的滤液(代谢物部分)和截留的溶液(蛋白部分)处理LPS刺激的GES-1细胞,检测NF-κB通路活性、NF-κB的磷酸化水平、NF-κB通路效应因子TNF-α、IL-6和IL-8的分泌水平。非靶向代谢质谱鉴定关键代谢物。结果:相较于仅LPS刺激的GES-1细胞,LPS与幽门螺杆菌培养上清共同处理后,多种基因的表达水平受到调控,并趋于未处理的GES-1细胞水平,主要存在于NF-κB通路。LPS与幽门螺杆菌培养上清共同处理后,NF-κB通路活性受到抑制(P<0.05)。幽门螺杆菌代谢物能够抑制NF-κB通路活性,抑制NF-κB磷酸化,抑制NF-κB通路效应因子TNF-α、IL-6和IL-8的分泌(P<0.05)。1、5和25μmol/L的幽门螺杆菌代谢物2-D-Glucopyranose(2DG)处理后,胃黏膜细胞GES-1中NF-κB通路活性均受到抑制,NF-κB磷酸化受到抑制,NF-κB通路效应因子TNF-α、IL-6和IL-8的分泌受到抑制(P<0.05)。2DG处理后,TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10敲除的GES-1细胞中NF-κB活性显著降低(P<0.05);而TLR1和TLR2敲除的GES-1细胞中NF-κB活性无显著变化。2DG处理后,GES-1细胞中TLR1和TLR2的相互作用均减弱。分子对接发现2DG能够与TLR2氨基酸残基R321、K347、F349结合,结合能为-12 kcal/mol。构建TLR2野生型和突变型质粒(R321K、K347R、F349A),并分别转染TLR2敲除的GES-1细胞,发现2DG处理并不能减少转染了TLR2突变型的GES-1细胞的NF-κB活性。结论:幽门螺杆菌代谢物2DG能够与TLR2相互作用,减少TLR2与TLR1异源二聚体的形成,抑制先天免疫NF-κB通路活性。 展开更多
关键词 2-D-吡喃葡萄糖 幽门螺杆菌 先天免疫 NF-κB tlr1 tlr2
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