长春花碱和秋水酰胺诱导TK6和TK6-E6细胞TK基因突变比较研究 被引量：1

1

作者 王亚男 帅培强 +1 位作者 丁晓琴 张立实 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期409-411,共3页

目的比较TK6和TK6-E6人类淋巴母细胞TK基因突变试验对2种纺锤体毒物——长春花碱(VBL)和秋水酰胺(CCM)检出情况的差异。方法用长春花碱和秋水酰胺处理TK6和TK6-E6细胞24小时,进行常规TK基因突变试验,检测细胞毒性及tk位点突变频率。结... 目的比较TK6和TK6-E6人类淋巴母细胞TK基因突变试验对2种纺锤体毒物——长春花碱(VBL)和秋水酰胺(CCM)检出情况的差异。方法用长春花碱和秋水酰胺处理TK6和TK6-E6细胞24小时,进行常规TK基因突变试验,检测细胞毒性及tk位点突变频率。结果随着长春花碱和秋水酰胺浓度的增加,TK6和TK6-E6细胞的相对存活率(RS%)和相对悬浮生长率(RSG%)均降低。相同剂量下,TK6-E6细胞的RS%和RSG%均比TK6高。长春花碱和秋水酰胺对TK6和TK6-E6细胞均有致突变性,TK6-E6细胞的诱发和自发突变频率高于TK6,而除了突变频率(MF)中CCM5·0ng/ml组和SC%中CCM0·625ng/ml组外,其它相同剂量下,TK6-E6的MF和慢生长集落百分比(SC%)均高于TK6细胞(P<0·05)。结论两种细胞都可用于TK基因突变试验,但由于TK6-E6所用细胞量少,倍增时间较短,故建议使用TK6-E6细胞。 展开更多

关键词 TK基因突变试验 tk6 tk6-E6 长春花碱 秋水酰胺

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氢醌诱导TK6细胞miR-221表达异常致PARP-1基因下调的机制 被引量：9

2

作者 刘林华 凌晓璇 +2 位作者 梁海荣 翟璐 唐焕文 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期485-487,共3页

目的探讨氢醌(HQ)致TK6细胞PARP-1基因表达下调的机制。方法以磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为染毒组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测miR-221的表达改变,以蛋白印迹法检... 目的探讨氢醌(HQ)致TK6细胞PARP-1基因表达下调的机制。方法以磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为染毒组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测miR-221的表达改变,以蛋白印迹法检测PARP-1蛋白表达量,以生物信息学方法分析miR-221的潜在甲基化相关靶基因。结果与对照组相比,2.5、5.0和10.0μmol/L HQ组细胞PARP-1蛋白量逐渐下降,5.0和10.0μmol/L HQ组miR-221表达量分别下降17%(P<0.05)、42%(P<0.05)。miR-221能与MBD2 mRNA的3’非翻译区(UTR)形成调控复合体。结论 HQ致PARP-1基因下调机制可能与miR-221表达异常有关。 展开更多

关键词 氢醌 tk6细胞 MICRORNA PARP-1基因

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TK6细胞tk基因突变试验检测甲基磺酸甲酯的诱变性 被引量：7

3

作者 张建清 张立实 王瑞淑 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期462-465,共4页

本研究通过用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)处理TK6细胞 ,对培养物进一步作tk位点突变测试 ,以及细胞p5 3基因蛋白表达水平的检测 .结果表明 ,MMS可诱导TK6细胞tk位点的突变 ,诱发突变是自发突变的 2～ 7倍 .在tk位点诱发了两种不同表型... 本研究通过用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)处理TK6细胞 ,对培养物进一步作tk位点突变测试 ,以及细胞p5 3基因蛋白表达水平的检测 .结果表明 ,MMS可诱导TK6细胞tk位点的突变 ,诱发突变是自发突变的 2～ 7倍 .在tk位点诱发了两种不同表型的突变集落 :即正常生长突变体 (tk NGmutant)和慢生长突变体 (tk SGmutant) .但以慢生长突变体为主 .MMS处理后 ,TK6细胞P5 3蛋白的表达水平增高 .本研究为将TK6细胞应用于我国tk基因突变的毒理学评价和机理的研究提供了实验依据 . 展开更多

关键词 细胞 tk6 基因 TK 突变 甲基磺酸甲酯

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低剂量氢醌对TK6淋巴母细胞生物学性状及miR-221表达影响 被引量：7

4

作者 刘林华 梁小虎 +1 位作者 凌晓璇 唐焕文 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2011年第2期102-105,共4页

目的探讨低剂量氢醌(HQ)对TK6淋巴母细胞的生物学性状及小分子非编码RNA(microRNA)-221(miR-221)表达的影响。方法磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为处理组。应用CCK-8试剂盒... 目的探讨低剂量氢醌(HQ)对TK6淋巴母细胞的生物学性状及小分子非编码RNA(microRNA)-221(miR-221)表达的影响。方法磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为处理组。应用CCK-8试剂盒检测细胞活力和细胞增殖,通过磷脂结合蛋白(Annexin V)/碘化丙啶(PI)标记的流式细胞技术检测细胞凋亡,用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-221的表达改变。结果细胞增殖以48 h最为明显,2.5、5.0和10.0μmol/L组细胞增殖指数分别为1.33(P<0.05)、1.14(P<0.05)和1.12(P<0.05);miR-221表达改变以72 h最为明显,2.5、5.0、10.0μmol/L HQ组细胞miR-221表达量分别抑制了0.31倍(P<0.05)、0.39倍(P<0.05)和0.33倍(P<0.05)。结论低剂量HQ能抑制TK6细胞凋亡和miR-221的表达,促进细胞增殖。 展开更多

关键词 氢醌 tk6细胞 microRNA 细胞凋亡 细胞增殖

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氢醌对TK6细胞周期的影响及其相关的调控机制探讨 被引量：3

5

作者 刘林华 陈玉婷 +4 位作者 唐焕文 张贺 程小广 杨慧 凌晓璇 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2014年第2期134-137,共4页

[目的]探讨氢醌(hydroquinone,HQ)对细胞周期的影响及其相关的调控机制。[方法]磷酸盐缓冲液(PBS)处理人类淋巴母细胞(TK6细胞)为对照组,20.0μmol/L HQ为处理组,48 h后通过碘化丙啶(PI)标记的流式细胞术检测细胞周期分布情况,用实时荧... [目的]探讨氢醌(hydroquinone,HQ)对细胞周期的影响及其相关的调控机制。[方法]磷酸盐缓冲液(PBS)处理人类淋巴母细胞(TK6细胞)为对照组,20.0μmol/L HQ为处理组,48 h后通过碘化丙啶(PI)标记的流式细胞术检测细胞周期分布情况,用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PTEN(抑癌基因)、p53基因mRNA表达的改变,流式细胞荧光标记法检测Rb蛋白的表达。[结果]与对照组比较,处理组G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05);HQ作用于TK6细胞后上调了Rb的表达,下调了p53的表达,其差异均有统计学意义(P<0.05),而对PTEN的表达没有明显影响。[结论]HQ可能通过上调Rb的表达使细胞阻滞于G1期。 展开更多

关键词 氢醌 细胞周期 P53 基因 RB 基因 tk6 细胞

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微囊藻毒素MCLR导致TK6细胞tk位点杂合性丢失的分析 被引量：3

6

作者 詹立 张立实 +4 位作者 王莉 张浩 铃木孝昌 本间正充 吴德生 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2005年第6期584-586,共3页

目的:应用人类淋巴母细胞TK6研究微囊藻毒素Microcystin -LR (MCLR)的体外遗传毒性分子机理。方法:藻毒素MCLR (80 μg/ml)体外染毒TK6细胞2 4h后检测tk位点突变频率并进行TK基因缺失突变体LOH的分析。结果:MCLR染毒导致TK6细胞相对存... 目的:应用人类淋巴母细胞TK6研究微囊藻毒素Microcystin -LR (MCLR)的体外遗传毒性分子机理。方法:藻毒素MCLR (80 μg/ml)体外染毒TK6细胞2 4h后检测tk位点突变频率并进行TK基因缺失突变体LOH的分析。结果:MCLR染毒导致TK6细胞相对存活率下降,TK基因突变频率明显上升,达到对照的5 1倍。MCLR诱导产生半合子LOH(41 7% )的比例是对照(2 0 7% )的两倍。结论:体外2 4h染毒TK6细胞MCLR可致突变并表现出断裂剂特性,诱发杂合性丢失而非点突变。 展开更多

关键词 微囊藻毒素 突变 杂合性丢失 tk6细胞

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L5178Y与TK6细胞的TK基因突变实验比较 被引量：2

7

作者 帅培强 张立实 王怡净 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期650-653,共4页

目的　比较 L 5 178Y与 TK6细胞在 TK基因突变试验系统中的异同和优劣。方法　采用 L 5 178Y和TK6细胞做 TK基因突变试验微孔平板法 ,对四种受试物 (MMS、EMS、MMC、KCl)的致突变性进行检测与评价。结果　两种细胞对四种受试物的检测结... 目的　比较 L 5 178Y与 TK6细胞在 TK基因突变试验系统中的异同和优劣。方法　采用 L 5 178Y和TK6细胞做 TK基因突变试验微孔平板法 ,对四种受试物 (MMS、EMS、MMC、KCl)的致突变性进行检测与评价。结果　两种细胞对四种受试物的检测结果基本一致 ,但 TK6细胞对四种受试物的耐受性均低于 L 5 178Y细胞 ,且相对突变指数显著高于 L 5 178Y细胞。结论　两种细胞应用于本试验各有其优越性 ,但由于 TK6细胞来自于人类 ,实际应用意义大于 L 5 178Y细胞 ,建议推广 TK 展开更多

关键词 TK基因突变 L5178Y tk6

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长春花碱3和24h处理TK6细胞TK基因突变试验比较研究 被引量：2

8

作者 王亚男 郭亚杰 张立实 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第17期3373-3374,3378,共3页

[目的]比较用长春花碱对人淋巴母细胞TK6处理3h和24h的诱变性。[方法]用长春花碱对TK6细胞分别进行3h和24h染毒处理,用微孔板法进行TK基因突变试验。计算TK6细胞的接种效率(PE)、相对存活率RS、相对悬浮增值率RSG、总的相对增长率RTG、... [目的]比较用长春花碱对人淋巴母细胞TK6处理3h和24h的诱变性。[方法]用长春花碱对TK6细胞分别进行3h和24h染毒处理,用微孔板法进行TK基因突变试验。计算TK6细胞的接种效率(PE)、相对存活率RS、相对悬浮增值率RSG、总的相对增长率RTG、突变频率MF。[结果]在3h处理条件下,随长春花碱浓度的增加,RS、RTG和RSG等均降低,中、高剂量水平已表现出明显的细胞毒性,但各剂量水平的MF与溶剂对照比较差异均有统计学意义(P﹤0.05);在24h处理条件下,其MF随VBL浓度的增加而增加,并有一定的剂量-反应关系。[结论]较长时间处理对于长春花碱等细胞周期依赖性的毒物是必要的。 展开更多

关键词 长春花碱 tk6 TK基因突变试验

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姜黄素对TK6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用研究 被引量：1

9

作者 张建清 张立实 王瑞淑 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期268-271,共4页

目的 :　观察姜黄素 (curcumin)对人的类淋巴母细胞 TK6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用 ,为进一步探讨其抗诱变、抗肿瘤的机制和开发利用提供理论依据。方法 :　姜黄素处理TK6细胞 ,采用 MTT比色分析法、3 H- Td R掺入法和细胞周期测定... 目的 :　观察姜黄素 (curcumin)对人的类淋巴母细胞 TK6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用 ,为进一步探讨其抗诱变、抗肿瘤的机制和开发利用提供理论依据。方法 :　姜黄素处理TK6细胞 ,采用 MTT比色分析法、3 H- Td R掺入法和细胞周期测定以及细胞超微结构观察和流式细胞分析。结果 :　 2 0 μmol/L的姜黄素处理细胞 2 4 h,即可产生显著的细胞增殖抑制作用和凋亡诱导作用 ,且有剂量和时间依赖性。姜黄素引起细胞的凋亡主要在细胞周期的 DNA合成期 (S期 ) ,将细胞周期阻滞在静止期和 DNA合成前期 (G0 /G1期 )。结论 :　姜黄素对 TK6细胞具有显著的增殖抑制作用和凋亡诱导作用。 展开更多

关键词 类淋巴母细胞 tk6细胞 细胞增殖 细胞凋亡 姜黄素 体外试验

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TK6和WTK1细胞体外微核试验比较研究 被引量：2

10

作者 王怡净 张立实 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2005年第8期869-871,共3页

目的:比较5种诱变剂诱导人类淋巴母细胞TK6和WTK1的微核反应。方法:用人的类淋巴母细胞TK6和WTK1进行体外微核试验,评价5种诱变剂的染色体损伤效应。结果:5种受试物均可诱导两种细胞微核率显著升高,但在大多数剂量和采样时间,受试物诱导... 目的:比较5种诱变剂诱导人类淋巴母细胞TK6和WTK1的微核反应。方法:用人的类淋巴母细胞TK6和WTK1进行体外微核试验,评价5种诱变剂的染色体损伤效应。结果:5种受试物均可诱导两种细胞微核率显著升高,但在大多数剂量和采样时间,受试物诱导的TK6细胞微核率均不同程度地高于WTK1细胞微核率。结论:TK6细胞对受试物诱导的染色体损伤更为敏感。 展开更多

关键词 tk6 WTK1 体外微核试验

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TK基因突变试验-L5178Y细胞与TK6细胞的比较研究 被引量：3

11

作者 帅培强 王怡净 等 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2001年第4期251-251,共1页

关键词 TK基因突变试验 L5178Y细胞 tk6细胞 突变指数

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siRNA干扰Nrf2基因对铅染毒TK6细胞凋亡和氧化应激的影响 被引量：1

12

作者 刘祥铨 吴京颖 刘雯 《海南医学》 CAS 2019年第21期2725-2728,共4页

目的研究应用siRNA抑制Nrf2基因表达后对乙酸铅染毒所致TK6细胞凋亡和氧化应激的影响。方法体外培养TK6细胞,设正常组、阴性对照组及Nrf2-siRNA1、Nrf2-siRNA2、Nrf2-siRNA3转染组。Western blot验证转染效果,筛选出干扰效果最佳序列。... 目的研究应用siRNA抑制Nrf2基因表达后对乙酸铅染毒所致TK6细胞凋亡和氧化应激的影响。方法体外培养TK6细胞,设正常组、阴性对照组及Nrf2-siRNA1、Nrf2-siRNA2、Nrf2-siRNA3转染组。Western blot验证转染效果,筛选出干扰效果最佳序列。采用480μmol/L的乙酸铅染毒TK6细胞,运用流式细胞技术、2’,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色分析、高度水溶性四唑盐(WST-1)法技术检测TK6细胞凋亡、细胞内活性氧(ROS)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果正常组、阴性对照组、Nrf2-siRNA1转染组、Nrf2-siRNA2转染组、Nrf2-siRNA3转染组细胞Nrf2蛋白表达水平分别为1.00±0.08、0.96±0.07、0.71±0.05、0.58±0.07、0.20±0.07,差异有显著统计学意义(F=29.361,P<0.01),其中Nrf2-siRNA3转染组的Nrf2蛋白表达水平低于其他四组细胞,故选用Nrf2-siRNA3转染组进行后续实验;经乙酸铅染毒TK6细胞24 h后,Nrf2-siRNA3转染组细胞凋亡率为(26.8±2.13)%,与正常组的(8.5±1.79)%及阴性对照组的(9.0±2.02)%比较,差异均有显著统计学意义(P<0.01);Nrf2-siRNA3转染组细胞内ROS探针荧光强度为21 621±345,与正常组的14 141±289及阴性对照组的14 694±301比较差异均有显著统计学意义(P<0.01);Nrf2-siRNA3转染组细胞SOD含量为(13.3±2.8) U/mg·prot,与正常组的(34.6±3.3) U/mg·prot及阴性对照组的(31.9±3.2) U/mg·prot比较差异均具有显著统计学意义(P<0.01)。结论 Nrf2基因表达受抑制后,TK6细胞对铅毒性的敏感性增强,TK6细胞凋亡率增加和抗氧化损伤能力下降。 展开更多

关键词 tk6细胞 Nrf2基因 SIRNA 细胞凋亡 氧化应激

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环磷酰胺诱导TK6细胞TK基因杂合性丢失的实验研究

13

作者 詹立 张立实 +4 位作者 王莉 张浩 铃木孝昌 本间正充 吴德生 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期334-337,共4页

目的　应用人类淋巴母细胞TK6研究环磷酰胺(CP)遗传毒性分子机理。方法　CP+S9体外染毒TK6细胞4 h后检测细胞相对存活率、tk位点突变频率并进行TK基因缺失突变体杂合性丢失(L OH)的分析。结果　环磷酰胺染毒导致TK 6细胞相对存活率下降... 目的　应用人类淋巴母细胞TK6研究环磷酰胺(CP)遗传毒性分子机理。方法　CP+S9体外染毒TK6细胞4 h后检测细胞相对存活率、tk位点突变频率并进行TK基因缺失突变体杂合性丢失(L OH)的分析。结果　环磷酰胺染毒导致TK 6细胞相对存活率下降,TK基因突变频率上升,并呈现剂量-反应关系。正常及缓慢生长突变集落倍增时间分别为(14 .6±1.74 ) h及(35 .8±3.78) h。环磷酰胺诱导产生半合子L OH的比例(5 0 % )是对照(2 0 .7% )的2 .4倍。结论　环磷酰胺对TK基因较大范围的损伤是导致基因突变的主要原因。 展开更多

关键词 环磷酰胺 突变 杂合性丢失 tk6细胞

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长春花碱诱导TK6细胞tk位点杂合性丢失的研究

14

作者 王亚男 帅培强 +1 位作者 郭亚杰 张立实 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期558-561,共4页

目的建立用人类淋巴母细胞TK 6检测纺锤体毒物——长春花碱的TK基因突变试验方法,同时探讨长春花碱的遗传毒性分子机理。方法使用长春花碱0.625 ng/mL、1.250 ng/mL、2.500 ng/mL和5.000 ng/mL对TK 6细胞染毒24 h,进行TK基因突变试验。... 目的建立用人类淋巴母细胞TK 6检测纺锤体毒物——长春花碱的TK基因突变试验方法,同时探讨长春花碱的遗传毒性分子机理。方法使用长春花碱0.625 ng/mL、1.250 ng/mL、2.500 ng/mL和5.000 ng/mL对TK 6细胞染毒24 h,进行TK基因突变试验。检测细胞相对存活率(RS%)、相对悬浮增长率(RTG%)、tk位点突变频率(M F)和缓慢生长集落的百分比(SC%),同时对突变集落tk位点杂合性丢失(LOH)进行分析。结果随着长春花碱浓度的增加,TK 6细胞的相对存活率和相对悬浮增长率均降低,而tk位点突变频率逐渐增加,且有剂量反应关系。tk位点杂合性分析表明长春花碱诱发的突变集落中有96.4%为LOH丢失,其中半合子LOH为39.3%,纯合子LOH为57.1%。结论长春花碱可诱导TK 6细胞tk基因突变,主要以LOH为主。 展开更多

关键词 长春花碱 tk6细胞 杂合性丢失 TK基因突变试验

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TK6和WTK1细胞对H_2O_2诱导的DNA损伤和修复能力的比较

15

作者 张建清 张立实 王瑞淑 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期767-769,共3页

目的　探讨人的近二倍体类淋巴母细胞 TK6和 WTK1细胞的 DNA损伤和修复能力的差异和机制。方法　采用 2 5μmol/ L、5 0μmol/L、10 0μmol/L的 H2 O2 分别处理 TK6和 WTK1细胞 ,对两种细胞进行单细胞凝胶电泳 ,检测 TK6和 WTK1细胞的... 目的　探讨人的近二倍体类淋巴母细胞 TK6和 WTK1细胞的 DNA损伤和修复能力的差异和机制。方法　采用 2 5μmol/ L、5 0μmol/L、10 0μmol/L的 H2 O2 分别处理 TK6和 WTK1细胞 ,对两种细胞进行单细胞凝胶电泳 ,检测 TK6和 WTK1细胞的彗星细胞率和彗星细胞尾长以及 p5 3基因的蛋白表达。结果　 TK6细胞对 H2 O2 诱导的 DNA损伤具有较高的敏感性 ,具有更为快速有效的损伤后修复能力。在孵育 0 .5 h至 1h内两种细胞达最大有效修复。TK6细胞 P5 3蛋白本底水平明显低于 WTK1细胞 ,在 H2 O2 处理后 ,其表达水平明显增强。结论　 TK6细胞对 H2 O2 诱导的 DNA损伤更为敏感 ,损伤后的修复更为快速、有效。p5 3基因的表达水平的差异是两种细胞 DNA损伤和修复能力差异的重要机制。 展开更多

关键词 tk6 WTK1 DNA损伤 彗星细胞检测 修复 过氧化氢

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人类淋巴母细胞TK6检测环磷酰胺诱发微核及TK基因突变的体外实验研究

16

作者 詹立 本间正充 +3 位作者 吴德生 张立实 坂本浩子 樱庭真弓 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期82-84,共3页

目的建立TK6细胞检测环境诱变剂诱发微核及TK基因突变的实验方法。方法用诱变剂环磷酰胺(CP)体外染毒TK6细胞4h后检测细胞毒性,微核及tk位点突变频率。结果CP处理导致TK6细胞的相对存活率下降,细胞微核率及TK基因突变频率明显上升,并均... 目的建立TK6细胞检测环境诱变剂诱发微核及TK基因突变的实验方法。方法用诱变剂环磷酰胺(CP)体外染毒TK6细胞4h后检测细胞毒性,微核及tk位点突变频率。结果CP处理导致TK6细胞的相对存活率下降,细胞微核率及TK基因突变频率明显上升,并均有剂量-反应关系。最高浓度组(4.0μg/ml)的细胞微核率及TK基因突变频率分别是对照组的8.8和15.7倍。CP诱发tk位点两种不同表型的突变细胞集落,即正常生长突变体集落及缓慢生长突变体集落,并以后者为主。结论CP可以诱发TK6细胞微核及TK基因突变,揭示CP可能是一种断裂剂。TK6细胞可用于评估环境化学物细胞水平遗传改变及TK基因突变。 展开更多

关键词 胸苷激酶 微核 突变 环磷酰胺 tk6细胞

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白血病相关原癌基因在氢醌处理TK6细胞中的表达

17

作者 凌晓璇 刘林华 +3 位作者 梁海荣 戴娟秀 郭莲仙 唐焕文 《职业与健康》 CAS 2012年第24期3009-3011,共3页

目的探索氢醌(hydroquinone,HQ)致DNA整体低甲基化的后续结果。方法用磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为处理组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测白血病相关原癌基因... 目的探索氢醌(hydroquinone,HQ)致DNA整体低甲基化的后续结果。方法用磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为处理组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测白血病相关原癌基因MPL、BRAF、ERBB2、MYB、MYC和RAF1的表达水平。结果与对照细胞相比,HQ处理细胞MPL和RAF1的mRNA表达量都随HQ剂量增加而上升,其中20μmol/L HQ对原癌基因表达的影响最为明显,分别上升了80%(P<0.05)和35%(P<0.05);MYB、MYC和ERBB2基因的mRNA表达量随HQ的剂量上升而下降。结论 MPL的转录活化很有可能与HQ导致的DNA整体低甲基化有关。 展开更多

关键词 氢醌 tk6细胞 原癌基因 MPL基因

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TK6和WTK1细胞tk位点突变敏感性的比较研究

18

作者 张建清 张立实 王瑞淑 《卫生毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期71-73,共3页

目的　比较研究 2种起源于人类的tk+ - 杂合子细胞TK6和WTK1细胞对化合物———甲基磺酸甲酯(MMS)诱发tk位点突变的敏感性 ,为tk位点突变敏感细胞株的筛选提供实验依据。方法　用标准诱变剂MMS处理TK6和WTK1细胞 ,对培养物进一步作tk... 目的　比较研究 2种起源于人类的tk+ - 杂合子细胞TK6和WTK1细胞对化合物———甲基磺酸甲酯(MMS)诱发tk位点突变的敏感性 ,为tk位点突变敏感细胞株的筛选提供实验依据。方法　用标准诱变剂MMS处理TK6和WTK1细胞 ,对培养物进一步作tk位点突变测试 ,以及细胞p5 3基因蛋白表达水平的检测。结果　MMS可诱导TK6和WTK1细胞tk位点的突变 ,其诱发突变分别是自发突变的 2～ 7倍和 3～ 10倍。WTK1细胞对MMS的细胞毒作用具有较大的抗性。MMS的作用下 ,WTK1细胞的突变频率分别是TK6细胞的 15 7、19 0和 2 0 4倍。在tk位点诱发了 2种不同表型的突变集落 ,但以慢生长突变体为主。无论是自发突变还是MMS的诱发突变 ,WTK1细胞的突变频率均显著地高于TK6细胞。经MMS处理后 ,TK6细胞p5 3蛋白的表达水平增高更为明显。结论　WTK1细胞是更为敏感的tk基因突变试验检测细胞株。MMS诱发的突变有染色体畸变和基因突变 。 展开更多

关键词 tk6 WTKl细胞 tk位点 基因突变 甲基磺酸甲酯

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Rad51基因沉默对铅诱导TK6细胞DNA双链断裂损伤修复的影响

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作者 刘祥铨 吴京颖 +1 位作者 林秀洁 陈美芳 《职业卫生与应急救援》 2022年第1期5-9,共5页

目的研究Rad51基因沉默后对醋酸铅染毒致人淋巴母细胞(TK6细胞)DNA双链断裂损伤的修复作用的影响。方法构建Rad51沉默慢病毒载体及阴性对照,感染对数期TK6细胞,荧光定量PCR和Western blot验证感染效果。运用480μmol/L的醋酸铅染毒TK6细... 目的研究Rad51基因沉默后对醋酸铅染毒致人淋巴母细胞(TK6细胞)DNA双链断裂损伤的修复作用的影响。方法构建Rad51沉默慢病毒载体及阴性对照,感染对数期TK6细胞,荧光定量PCR和Western blot验证感染效果。运用480μmol/L的醋酸铅染毒TK6细胞24 h(Control组、shRNA-NC组和shRNA-Rad51组),采用免疫荧光法检测TK6细胞的磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)的表达,Western Blot检测TK6细胞的Rad51、BRCA1、53BP1蛋白的表达。结果 shRNA-Rad51组的Rad51 mRNA表达水平和Rad51蛋白表达水平均低于Control组及shRNA-NC组(P <0.01);shRNA-Rad51组的γ-H2AX阳性率为(27.48±1.66)%,与Control组的(14.77±1.21)%及shRNA-NC组的(14.04±1.31)%比较,差异均有统计学意义(P <0.01);shRNA-Rad51组的BRCA1蛋白表达水平为(0.25±0.03),与Control组的(0.55±0.04)及shRNA-NC组的(0.51±0.04)比较,差异均有统计学意义(P <0.01);shRNARad51组的53BP1蛋白表达水平为(3.24±0.27),与Control组的(2.01±0.19)及shRNA-NC组的(2.11±0.17)比较,差异均有统计学意义(P <0.01)。结论 Rad51基因沉默后,TK6细胞HR修复通路受抑制和NHEJ修复通路激活,TK6细胞对铅遗传毒性的敏感性增强。 展开更多

关键词 醋酸铅 人淋巴母细胞 tk6细胞 DNA双链断裂 基因沉默 RAD51基因 损伤修复

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一组标准诱变剂诱导TK6和WTK1细胞微核反应的比较

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作者 张立实 本间正充 等 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 1997年第6期352-352,共1页

关键词 诱变剂 tk6 WTK1 微核反应 标准靶细胞系

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