旨在对基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,TIMPs)家族成员中的TIMP1进行克隆和分析,通过过表达与敲减TIMP1,探究TIMP1对毛囊毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)毛囊生长相关基因的调控作用...旨在对基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,TIMPs)家族成员中的TIMP1进行克隆和分析,通过过表达与敲减TIMP1,探究TIMP1对毛囊毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)毛囊生长相关基因的调控作用。本研究通过分子克隆TIMP1编码区(coding sequence,CDS)序列,并对其进行生物信息学功能分析。之后,构建过表达载体pcDNA 3.1-TIMP1并设计合成siRNA,在DPCs中过表达和敲低TIMP1,检测毛囊生长发育相关基因的表达,并通过EdU和CCK-8检测DPCs的增殖水平。结果显示,兔TIMP1基因的CDS区全长624 bp,共编码207个氨基酸。生物信息学分析表明TIMP1蛋白存在信号肽,不包含跨膜结构域,在不同哺乳动物中存在同源性。在DPCs中过表达TIMP1能够极显著上调BMP2(bone morphogenetic protein 2)、SFRP2(secreted frizzled-related protein 2)、TGFβ1(tranforming growth factorβ1)基因的mRNA表达水平(P<0.01),极显著下调WNT2(wnt family member 2)基因的mRNA表达水平(P<0.01),敲减TIMP1能显著下调BMP2、SFRP2基因的mRNA的表达(P<0.05),极显著下调TGFβ1基因的mRNA表达(P<0.01)。此外,EdU和CCK-8结果显示过表达TIMP1能够抑制DPCs的增殖,敲低TIMP1能够促进DPCs的增殖。本研究成功克隆家兔TIMP1基因CDS序列,并对其生物信息学功能进行预测,初步分析TIMP1对毛囊生长相关基因的调控作用,验证了其抑制DPCs增殖的作用,为阐明家兔毛囊生长发育的理论研究提供参考。展开更多
Metabolic dysfunction-associated fatty liver disease(MASLD)and alcohol-associated liver disease(ALD)are prevalent chronic liver diseases that can progress to steatohepatitis,fibrosis,cirrhosis,and ultimately liver fai...Metabolic dysfunction-associated fatty liver disease(MASLD)and alcohol-associated liver disease(ALD)are prevalent chronic liver diseases that can progress to steatohepatitis,fibrosis,cirrhosis,and ultimately liver failure.Here,we demonstrated that oral administration of GNVs provided substantial protection against liver injury and fibrosis in MASLD and ALD mouse models.In a Western-style high-fat diet-induced MASLD model and a chronic binge alcohol-induced ALD model,GNVs treatment significantly reduced gut leakiness by restoring intestinal junctional complex proteins and rebalancing the gut microbiome.GNVs attenuated hepatic lipid accumulation,oxidative stress and fibrogenicmarkers.GNV treatment downregulated the fibrosis-associated tissue inhibitor of metalloproteinase-2(TIMP2)pathway in hepatic stellate cells,which is linked to enhanced matrix degradation and reduced fibrogenesis.GNVs prevent MASLD-and ALD-associated gut barrier dysfunction and liver fibrosis through modulation of the gut-liver axis and the TIMP2 pathway.Edible GNVs represent a novel,multifaceted therapeutic strategy for managing chronic liver diseases.展开更多
目的研究血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-26(MMP-26)、基质金属蛋白酶抑制剂-4(TIMP-4)与弥漫大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B celllymphoma,DLBCL)病理分期及预后的相关性。方法选取2021年1月1日至2022年4月1日于上海交...目的研究血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-26(MMP-26)、基质金属蛋白酶抑制剂-4(TIMP-4)与弥漫大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B celllymphoma,DLBCL)病理分期及预后的相关性。方法选取2021年1月1日至2022年4月1日于上海交通大学医学院附属瑞金医院治疗的75例DLBCL患者为研究组,另选取75例淋巴结反应性增生患者作为对照组,观察研究组与对照组及研究组不同分期、不同发病部位血清MMP-9、MMP-26及TIMP-4水平;采用Spearman分析DLBCL患者血清MMP-9、MMP-26与TIMP-4间的相关性;绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析MMP-9、MMP-26、TIMP-4水平与DLBCL患者预后的关系。结果研究组血清MMP-9、MMP-26水平均高于对照组,血清TIMP-4水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组Ⅰ~Ⅱ期患者血清MMP-9、MMP-26水平低于Ⅲ~Ⅳ期患者,血清TIMP-4水平高于Ⅲ~Ⅳ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组不同发病部位患者血清MMP-9、MMP-26、TIMP-4水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。DLBCL患者血清MMP-9、MMP-26水平与TIMP-4水平呈负相关(P<0.05);血清MMP-9水平与MMP-26水平正相关(P<0.05)。MMP-9和MMP-26高表达、TIMP-4低表达组患者累积生存率低于其他组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清MMP-9、MMP-26及TIMP-4水平与DLBCL病理分期及患者预后密切相关,检测血清MMP-9、MMP-26及TIMP-4水平有助于明确DLBCL病理分期及评价患者预后。展开更多
文摘旨在对基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,TIMPs)家族成员中的TIMP1进行克隆和分析,通过过表达与敲减TIMP1,探究TIMP1对毛囊毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)毛囊生长相关基因的调控作用。本研究通过分子克隆TIMP1编码区(coding sequence,CDS)序列,并对其进行生物信息学功能分析。之后,构建过表达载体pcDNA 3.1-TIMP1并设计合成siRNA,在DPCs中过表达和敲低TIMP1,检测毛囊生长发育相关基因的表达,并通过EdU和CCK-8检测DPCs的增殖水平。结果显示,兔TIMP1基因的CDS区全长624 bp,共编码207个氨基酸。生物信息学分析表明TIMP1蛋白存在信号肽,不包含跨膜结构域,在不同哺乳动物中存在同源性。在DPCs中过表达TIMP1能够极显著上调BMP2(bone morphogenetic protein 2)、SFRP2(secreted frizzled-related protein 2)、TGFβ1(tranforming growth factorβ1)基因的mRNA表达水平(P<0.01),极显著下调WNT2(wnt family member 2)基因的mRNA表达水平(P<0.01),敲减TIMP1能显著下调BMP2、SFRP2基因的mRNA的表达(P<0.05),极显著下调TGFβ1基因的mRNA表达(P<0.01)。此外,EdU和CCK-8结果显示过表达TIMP1能够抑制DPCs的增殖,敲低TIMP1能够促进DPCs的增殖。本研究成功克隆家兔TIMP1基因CDS序列,并对其生物信息学功能进行预测,初步分析TIMP1对毛囊生长相关基因的调控作用,验证了其抑制DPCs增殖的作用,为阐明家兔毛囊生长发育的理论研究提供参考。
基金supported by the National Research Foundation of Korea(NRF)grant funded by the Korea government(MSIT)(project number RS-2024-00340542).
文摘Metabolic dysfunction-associated fatty liver disease(MASLD)and alcohol-associated liver disease(ALD)are prevalent chronic liver diseases that can progress to steatohepatitis,fibrosis,cirrhosis,and ultimately liver failure.Here,we demonstrated that oral administration of GNVs provided substantial protection against liver injury and fibrosis in MASLD and ALD mouse models.In a Western-style high-fat diet-induced MASLD model and a chronic binge alcohol-induced ALD model,GNVs treatment significantly reduced gut leakiness by restoring intestinal junctional complex proteins and rebalancing the gut microbiome.GNVs attenuated hepatic lipid accumulation,oxidative stress and fibrogenicmarkers.GNV treatment downregulated the fibrosis-associated tissue inhibitor of metalloproteinase-2(TIMP2)pathway in hepatic stellate cells,which is linked to enhanced matrix degradation and reduced fibrogenesis.GNVs prevent MASLD-and ALD-associated gut barrier dysfunction and liver fibrosis through modulation of the gut-liver axis and the TIMP2 pathway.Edible GNVs represent a novel,multifaceted therapeutic strategy for managing chronic liver diseases.
文摘目的研究血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-26(MMP-26)、基质金属蛋白酶抑制剂-4(TIMP-4)与弥漫大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B celllymphoma,DLBCL)病理分期及预后的相关性。方法选取2021年1月1日至2022年4月1日于上海交通大学医学院附属瑞金医院治疗的75例DLBCL患者为研究组,另选取75例淋巴结反应性增生患者作为对照组,观察研究组与对照组及研究组不同分期、不同发病部位血清MMP-9、MMP-26及TIMP-4水平;采用Spearman分析DLBCL患者血清MMP-9、MMP-26与TIMP-4间的相关性;绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析MMP-9、MMP-26、TIMP-4水平与DLBCL患者预后的关系。结果研究组血清MMP-9、MMP-26水平均高于对照组,血清TIMP-4水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组Ⅰ~Ⅱ期患者血清MMP-9、MMP-26水平低于Ⅲ~Ⅳ期患者,血清TIMP-4水平高于Ⅲ~Ⅳ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组不同发病部位患者血清MMP-9、MMP-26、TIMP-4水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。DLBCL患者血清MMP-9、MMP-26水平与TIMP-4水平呈负相关(P<0.05);血清MMP-9水平与MMP-26水平正相关(P<0.05)。MMP-9和MMP-26高表达、TIMP-4低表达组患者累积生存率低于其他组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清MMP-9、MMP-26及TIMP-4水平与DLBCL病理分期及患者预后密切相关,检测血清MMP-9、MMP-26及TIMP-4水平有助于明确DLBCL病理分期及评价患者预后。
