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内皮细胞Tie2-L914F突变引发静脉畸形发病机制的初步研究 被引量:1
1
作者 祁雨晨 黄佳栋 +2 位作者 李天一 冷春儒 司亚萌 《口腔医学》 2025年第4期268-274,共7页
目的探究静脉畸形患者TEK受体酪氨酸激酶(TEK receptor tyrosine kinase,Tie2)L914F突变对血管内皮细胞的生物学行为影响及相关信号通路的变化。方法基因测序检测静脉畸形中Tie2-L914F突变情况。运用HE染色及免疫组织化学染色检测该突... 目的探究静脉畸形患者TEK受体酪氨酸激酶(TEK receptor tyrosine kinase,Tie2)L914F突变对血管内皮细胞的生物学行为影响及相关信号通路的变化。方法基因测序检测静脉畸形中Tie2-L914F突变情况。运用HE染色及免疫组织化学染色检测该突变导致的静脉畸形组织中,血小板衍生生长因子亚基B(platelet derived growth factor subunit B,PDGFB)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。将过表达Tie2野生型(Tie2-wild type,Tie2-WT)、Tie2-L914F和Tie2-GFP(green fluorescent protein,GFP)的慢病毒感染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)。实时荧光定量PCR检测内皮细胞中Tie2的表达水平及蛋白质免疫印迹法检测Flag标签蛋白Tie2蛋白用于验证转染效率。通过CCK-8法、流式细胞术、Transwell迁移实验、Matrigel基质胶成管实验测定细胞的增殖、凋亡、迁移、成管能力,蛋白质免疫印迹法检测蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)、FOXO1及其磷酸化表达水平,ELISA法检测PDGFB表达水平。结果发生L914F位点突变的静脉畸形患者数量约为33.3%。HE及免疫组织化学染色显示:发生Tie2-L914F突变的静脉畸形组织中PDGFB及α-SMA表达显著下调,并与管壁细胞覆盖率下降呈正相关。与表达Tie2-WT内皮细胞比较,表达Tie2-L914F内皮细胞凋亡数明显减少,同时增殖及迁移能力显著增加,成管能力则显著下降。蛋白质免疫印迹及ELISA法显示:表达Tie2-L914F内皮细胞Tie2信号通路下游AKT及FOXO1磷酸化水平显著升高,PDGFB表达水平显著下降。结论在静脉畸形中,Tie2-L914F突变可能通过AKT信号通路下调PDGFB表达,影响血管内皮细胞的生物学行为。 展开更多
关键词 静脉畸形 TEK受体酪氨酸激酶 AKT通路 tie2-L914F突变
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黄芪丹参配伍提取物经VEGF、Ang1/Tie2通路对心肌梗死大鼠血管新生的病理影响 被引量:19
2
作者 张瓅方 李梦华 +2 位作者 刘暖 杨雷 毛秉豫 《科学技术与工程》 北大核心 2020年第1期104-108,共5页
为观察黄芪、丹参配伍提取物对心肌梗死大鼠VEGF(vascular endothelial growth factor)、血管生成素Ang1及其受体酪氨酸激酶Tie2信号通路的表达影响,对心肌梗死大鼠模型复制成功后分为假手术对照组、模型组、黄芪、丹参配伍提取物低、... 为观察黄芪、丹参配伍提取物对心肌梗死大鼠VEGF(vascular endothelial growth factor)、血管生成素Ang1及其受体酪氨酸激酶Tie2信号通路的表达影响,对心肌梗死大鼠模型复制成功后分为假手术对照组、模型组、黄芪、丹参配伍提取物低、中、高剂量组,分别予以对应药物灌胃4周。观察大鼠一般生活状态,并分别采用HE染色和免疫组织化学染色测试大鼠心肌组织病理形态结构和VEGF、Ang1、Tie2的蛋白表达。结果表明:模型组心肌结构紊乱伴有炎性侵润,VEGF、Ang1和Tie2蛋白表达较假手术对照组有所增加(P<0.05);低、中、高剂量组的这些表达随着药物浓度梯度增加,心肌结构逐渐规整,内皮细胞完整、新生血管增多,与模型组比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。可见黄芪、丹参配伍提取物可以上调心肌梗死大鼠VEGF、Ang1和Tie2的表达,促进血管新生。 展开更多
关键词 心肌梗死 血管新生 VEGF ANG1 tie2
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Tie2、Ang1和Ang2蛋白在血管瘤和血管畸形中的表达及临床意义 被引量:6
3
作者 周梅 瞿智玲 +2 位作者 白靖平 岳娜 阿迪拉 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期428-431,共4页
目的探讨Tie2、Ang1和Ang2蛋白在血管异常(血管瘤和血管畸形)中的表达。方法收集新疆医科大学附属肿瘤医院2005年至2012年血管畸形50例,皮肤增殖期血管瘤30例,正常组织20例,采用免疫组化SP法检测Tie2、Ang1和Ang2蛋白在血管异常中的表... 目的探讨Tie2、Ang1和Ang2蛋白在血管异常(血管瘤和血管畸形)中的表达。方法收集新疆医科大学附属肿瘤医院2005年至2012年血管畸形50例,皮肤增殖期血管瘤30例,正常组织20例,采用免疫组化SP法检测Tie2、Ang1和Ang2蛋白在血管异常中的表达。结果 Tie2在血管异常中的阳性表达率较高,而Ang1在血管异常中的阳性表达率较低,Tie2在血管瘤和血管畸形中的表达显著高于正常组织,Ang1在血管瘤和血管畸形中的表达显著低于正常组织,差异均具有统计学意义(均P<0.05);Tie2和Ang2在血管异常中的表达呈正相关关系(P<0.05)。结论Ang1蛋白表达降低可能破坏了血管的稳定性,有助于病变的发展,Tie2蛋白表达增高,其与Ang2结合对病变血管生成可能具有促进作用,Tie2、Ang1和Ang2表达失衡在血管异常的发病过程中可能起重要的调节作用。 展开更多
关键词 血管畸形 血管瘤 tie2 ANG1 ANG2
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眼针运动疗法对MCAO模型大鼠缺血半暗带区域脑组织Ang-1、Tie2影响的实验研究 被引量:35
4
作者 邵妍 王鹏琴 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第7期1580-1584,共5页
目的:观察眼针运动疗法对脑缺血再灌注(MCAO)模型大鼠大脑缺血半暗带区域脑组织内Ang-1、Tie2表达水平的影响,探讨眼针运动疗法对MCAO模型大鼠大脑缺血半暗带区域内新生血管影响的机制。方法:采用随机数字法,将100只SD大鼠随机分为3组:... 目的:观察眼针运动疗法对脑缺血再灌注(MCAO)模型大鼠大脑缺血半暗带区域脑组织内Ang-1、Tie2表达水平的影响,探讨眼针运动疗法对MCAO模型大鼠大脑缺血半暗带区域内新生血管影响的机制。方法:采用随机数字法,将100只SD大鼠随机分为3组:空白对照组(10只)、假手术组(10只)、模型复制组(80只)。对模型复制组大鼠采用线栓法进行脑缺血再灌注模型复制,再将模型复制成功的大鼠66只(模型复制80只,失败13只,模型评价1只)随机分别为:模型对照组(17只);头针组(17只);眼针组(16只);眼针运动组(16只)。分别进行头针、眼针及眼针运动进行干预治疗。头针组取穴百会、曲鬓,眼针组取穴定位参照人体取穴方法,取肝区、上焦区、下焦区、肾区。眼针运动疗法组眼针干预同时,在跑步机上进行训练。采用酶联免疫吸附(ELISA)法,检测各组大鼠血清中Ang-1含量,采用RT-PCR及western-blot法对各组大鼠脑组织中Ang-1、Tie2基因及蛋白表达水平进行检测。结果:与空白组比较,模型组、眼针组、头针组、眼针运动组大鼠缺血半暗带区域脑组织中Ang-1、Tie2表达水平显著上调(P<0.01);与模型组比较,眼针组和眼针运动组Ang-1、Tie2表达水平显著上调(P<0.05)。与空白组比较,模型组、眼针组、头针组、眼针运动组大鼠缺血半暗带区域脑组织中Ang-1、Tie2 mRNA表达水平显著上调(P<0.01);与模型组比较,眼针组和眼针运动组Ang-1、Tie2 mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。结论:眼针运动疗法在一定程度上能促进血清中Ang-1含量,增加Ang-1及其mRNA表达增加,与受体Tie-2结合,启动Ang/Tie-2信号传导系统,在时间和数量上调节缺血半暗带新生血管和侧支循环的形成,改善缺血半影区的脑血流,从而抑制神经元凋亡,恢复脑血流量,促进脑缺血后神经功能的恢复。 展开更多
关键词 眼针疗法 脑缺血再灌注 运动疗法 ANG-1 tie2
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血管生成素受体Tie2在直肠癌中的表达及作用 被引量:4
5
作者 王康 尚卫华 +2 位作者 贾蓬勃 李徐奇 魏光兵 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期599-601,共3页
目的探讨Tie2在直肠癌中的表达及其与直肠癌侵袭、转移的关系。方法利用免疫组化S-P法,对10例正常直肠组织与40例直肠癌组织中的Tie2受体表达进行研究。结果Tie2受体定位于癌组织中血管内皮细胞胞浆及胞核,部分癌细胞胞浆也存在阳性表达... 目的探讨Tie2在直肠癌中的表达及其与直肠癌侵袭、转移的关系。方法利用免疫组化S-P法,对10例正常直肠组织与40例直肠癌组织中的Tie2受体表达进行研究。结果Tie2受体定位于癌组织中血管内皮细胞胞浆及胞核,部分癌细胞胞浆也存在阳性表达,直肠癌组织中的Tie2表达阳性率明显高于正常直肠组织(P<0.05),Tie2受体的表达与临床病理中的分化程度、浸润深度、Dukes分期无关(P>0.05),而与淋巴结转移相关(P<0.05)。结论Tie2受体在直肠癌的发展及淋巴结转移中具有重要意义。 展开更多
关键词 tie2受体 直肠癌 免疫组织化学 血管生成素
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促血管生成素2及其受体Tie2基因RNA干扰表达载体的构建与鉴定 被引量:5
6
作者 王彪 单秀英 +2 位作者 林菊丽 庄福连 鲁开化 《医学综述》 2009年第22期3498-3501,共4页
目的构建促血管生成素2(Ang-2)及其受体Tie2基因的RNA干扰(RNAi)表达载体。方法以Ang-2、Tie2的mRNA已知序列为靶点,化学合成能编码针对Ang-2、Tie2基因的短发夹RNA(shRNA)序列的寡核苷酸各2对,退火处理后克隆到pSilencer1.0-U6-siRNA... 目的构建促血管生成素2(Ang-2)及其受体Tie2基因的RNA干扰(RNAi)表达载体。方法以Ang-2、Tie2的mRNA已知序列为靶点,化学合成能编码针对Ang-2、Tie2基因的短发夹RNA(shRNA)序列的寡核苷酸各2对,退火处理后克隆到pSilencer1.0-U6-siRNA表达载体的U6RNA聚合酶Ⅲ启动子的下游,构建重组质粒pSliencer-1.0-U6-Ang-2/Tie2-siRNA。结果将与目的片段相符的双链shRNA和线性化的pSilencer1.0-U6-siRNA质粒连接后,经限制性内切酶HindⅢ酶切电泳及测序分析证实,2条重组质粒载体构建正确,无任何碱基突变。结论成功构建pSilencer1.0-U6-Ang-2/Tie2-siRNA重组质粒各2条,为进一步研究其对血管生成的作用打下基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 促血管生成素2 受体tie2 重组质粒 载体
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心肌梗死大鼠血管生成过程中血管生成素1及其Tie2受体的表达 被引量:4
7
作者 孙丽杰 崔鸣 +3 位作者 王佐岩 冯新恒 毛节明 陈凤荣 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2079-2082,共4页
目的:通过检测正常心肌组织及心肌梗死后血管生成素1及其受体Tie2受体mRNA的表达水平,探讨其在心肌梗死后的血管新生过程的作用。方法:实验于2006-04/2007-04在北京大学医学部生物化学与分子生物学基因组实验室完成。将40只雄性SD大鼠... 目的:通过检测正常心肌组织及心肌梗死后血管生成素1及其受体Tie2受体mRNA的表达水平,探讨其在心肌梗死后的血管新生过程的作用。方法:实验于2006-04/2007-04在北京大学医学部生物化学与分子生物学基因组实验室完成。将40只雄性SD大鼠随机分为急性心肌梗死组和假手术组,急性心肌梗死组通过结扎前降支建立心肌梗死模型,假手术组只穿线不结扎。于术后3,714,28d四个时间点,每组取5只处死,取心脏左室前壁同一部位,提取总RNA,用RT-PCR的方法,以GAPDH基因为内参,进行半定量分析检测正常心脏及梗死后血管生成素1及Tie2mRNA的表达;同时用免疫组化的方法检测各时间点梗死区域以及梗死周边区域血管数量。实验过程中动物处置符合动物伦理学标准。结果:40只大鼠进入结果分析。血管生成素1及Tie2在正常心肌组织中均有所表达。在心肌梗死后的28d内,血管生成素1维持在相对不变的水平,而Tie2的表达在心肌梗死后3d略有升高,于7d后达顶峰,14d后恢复正常;急性心肌梗死后7d,梗死区及梗死周边区域的血管数量均明显增多,并不随时间的延长而改变,维持在同一水平。结论:心肌梗死后Tie2受体的表达上调,与血管生成的时间相吻合,提示其在心肌梗死后的血管生成和稳定过程中起了一定的作用。 展开更多
关键词 心肌梗死 血管生成 血管生成素1 tie2受体
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转录因子GATA2在TNF-α介导的炎症反应中调节Tie2基因的表达 被引量:3
8
作者 徐令 陈小 +1 位作者 赖文玉 伍俊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1198-1202,共5页
目的:探讨在炎症刺激因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的炎症反应中转录因子GATA家族成员是否参与了Tie2基因的转录调控。方法:采用实时定量PCR测定TNF-α作用前后人主动脉内皮细胞(HAECs)和肺动脉内皮细胞(HPAECs)中GATA家族成员GATA2... 目的:探讨在炎症刺激因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的炎症反应中转录因子GATA家族成员是否参与了Tie2基因的转录调控。方法:采用实时定量PCR测定TNF-α作用前后人主动脉内皮细胞(HAECs)和肺动脉内皮细胞(HPAECs)中GATA家族成员GATA2、GATA3 mRNA的表达,利用荧光素酶活性检测研究GATA转录因子能否激活Tie2基因启动子,并采用电泳迁移变动分析(EMSAs)和超级迁移率变动试验(super-shift)研究GATA转录因子是否通过与Tie2基因启动子结合,从而激活Tie2基因的表达。结果:TNF-α可诱导人血管内皮细胞HAECs和HPAECs中转录因子GATA2的表达,高表达的GATA2可与Tie2基因启动子上的(T/A)GATA(A/G)序列结合,激活Tie2基因启动子,从而上调Tie2基因的表达。结论:GATA转录因子家族成员GATA2在TNF-α介导的炎症反应中调节了Tie2基因的表达。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 基因 tie2 转录因子 GATA2
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定心方经Ang1-Tie2通路干预人脐静脉内皮细胞血管生成的实验研究 被引量:2
9
作者 赵丹丹 苏志杰 +6 位作者 周凤华 程赛博 张宇 张蕾 徐煜凌 郭绍东 贾钰华 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期177-182,共6页
目的探讨定心方(DXR)含药血清对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)Angiopietin/Tie2(Ang1-Tie2)通路及血管形成的影响,研究DXR防治动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS... 目的探讨定心方(DXR)含药血清对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)Angiopietin/Tie2(Ang1-Tie2)通路及血管形成的影响,研究DXR防治动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,采用OX-LDL 100 mg·m L-1损伤人脐静脉内皮细胞24 h,分别观察DXR含药血清对其迁移及其小管形成的影响。采用免疫印迹法(Western Blot)检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)和血管紧张素(Angiotensin1,Ang1)以及Ang1受体Tie2的表达。采用鸡胚尿囊膜实验观察(Chick embryo chorioallantoic membrane)DXR对体外血管生成的影响。结果经DXR作用24 h后,DXR高剂量组(DXR1,30%浓度)、中剂量组(DXR2,15%浓度)、低剂量组(DXR3,5%浓度)、空白组HUVEC细胞迁移数目与模型组相比,DXR1和DXR2组与Model组相比迁移细胞数量减少,差异具有统计学意义(P<0.05),DXR3、DXR2、DXR1、空白组鸡胚尿囊膜实验中形成的一级和二级血管数目与Model组一、二级血管数目相比,DXR3、DXR2、DXR1与Model组相比,一级血管数量明显降低(P<0.05),二级血管数量明显降低(P<0.05)。Western Blot实验显示,与Model组比较,受DXR干预的HUVEC细胞中的Ang1蛋白和Tie2蛋白表达量上调,VEGF蛋白表达量下降。受DXR干预的HUVEC细胞形成小管密集程度明显低于Model组。结论体外实验结果表明,DXR具有抑制血管生成的作用,这种效应与其可以调控HUVEC细胞内与血管生成密切相关的Ang1,Tie2,VEGF有关联。 展开更多
关键词 定心方 动脉粥样硬化 ANG1 tie2 VEGF 人脐静脉内皮细胞 血管生成
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Ang/Tie2体系与VEGF、bFGF在血管瘤增生退化过程中的协同作用 被引量:4
10
作者 王彪 鲁开化 +2 位作者 赵亚南 庄福连 林文雄 《中国美容医学》 CAS 2006年第11期1227-1230,I0001,共5页
目的:探讨促血管生成素家族(Ang/Tie2)与血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在血管瘤增生退化过程中的协同作用。方法:采用免疫组化SP法,检测增生期血管瘤32例、退化期血管瘤10例及小儿正常皮肤10例标本中促血管生成... 目的:探讨促血管生成素家族(Ang/Tie2)与血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在血管瘤增生退化过程中的协同作用。方法:采用免疫组化SP法,检测增生期血管瘤32例、退化期血管瘤10例及小儿正常皮肤10例标本中促血管生成素1(Ang1)、促血管生成素2(Ang2)及其受体Tie2、VEGF及bFGF的表达情况。结果:增生期血管瘤组织Ang2、Tie2、VEGF及bFGF表达明显高于消退期血管瘤(P<0.01);消退期血管瘤组织Ang2、Tie2、VEGF及bFGF表达明显高于小儿正常皮肤(P<0.01);Ang1在血管瘤和小儿正常皮肤表达均较弱,各组之间的比较无显著性差异(P﹥0.05);血管瘤中Ang2、Tie2分别与VEGF、bFGF标记指数间具有强的正相关性(P<0.01)。结论:Ang/Tie2体系与VEGF、bFGF在血管瘤增生退化过程中可能起协同的作用。 展开更多
关键词 血管瘤 促血管生成素2(Ang2) tie2受体 血管内皮生长因子(VEGF) 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)
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原位RT-PCR检测血管瘤组织Ang2 mRNA及其受体Tie2 mRNA的表达 被引量:2
11
作者 徐泉 孟保英 +3 位作者 党双锁 李鹏 刘宾 段怡涛 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2004年第11期979-981,共3页
目的 :探讨Ang2及其受体Tie2与血管瘤发生、发展的关系 .方法 :采用原位RT PCR方法 ,对临床收集的 6 2例手术切除的先天性皮肤血管标本 (其中增生期血管瘤 2 6例 ,消退期血管瘤 2 4例 ,静脉型血管畸形 1 2例 )进行Ang2mRNA ,Tie2mRNA表... 目的 :探讨Ang2及其受体Tie2与血管瘤发生、发展的关系 .方法 :采用原位RT PCR方法 ,对临床收集的 6 2例手术切除的先天性皮肤血管标本 (其中增生期血管瘤 2 6例 ,消退期血管瘤 2 4例 ,静脉型血管畸形 1 2例 )进行Ang2mRNA ,Tie2mRNA表达水平的检测 .结果 :增生期、消退期血管瘤及静脉型血管畸形均有Ang2mRNA ,Tie2mRNA的阳性信号 ,但是三者阳性信号强弱有显著性差异 (P 0 .0 1 ) ,即静脉型血管畸形Ang2mRNA ,Tie2mRNA的表达较不同生长时期血管瘤低 ,增生期血管瘤二者的表达高于消退期 .结论 :Ang2及其受体Tie2可能与血管瘤及静脉型血管畸形的发生。 展开更多
关键词 血管瘤 ANG2 MRNA tie2 MRNA 原位RT-PCR
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血管生成素-2及其受体Tie2在肾癌中的表达及与微血管密度的关系 被引量:8
12
作者 蔡大伟 陈晓楠 +1 位作者 刘学峰 吴斌 《中华实用诊断与治疗杂志》 2010年第1期26-28,共3页
目的:探讨血管生成素-2及其受体Tie2在肾透明细胞癌中的表达及与肿瘤血管生成、肿瘤组织发生、发展之间的关系。方法:应用免疫组织化学SP法,分别检测80例肾透明细胞癌组织及10例癌旁组织中血管生成素-2,Tie2及CD34的表达,根据CD34染色... 目的:探讨血管生成素-2及其受体Tie2在肾透明细胞癌中的表达及与肿瘤血管生成、肿瘤组织发生、发展之间的关系。方法:应用免疫组织化学SP法,分别检测80例肾透明细胞癌组织及10例癌旁组织中血管生成素-2,Tie2及CD34的表达,根据CD34染色结果计算微血管密度。结果:肾透明细胞癌组织中血管生成素-2、Tie2阳性表达率分别为61.25%,58.75%,均明显高于癌旁组织(P<0.05);血管生成素-2和Tie2的表达与肾透明细胞癌患者血尿、临床分期以及淋巴结转移密切相关(P<0.05);血管生成素-2和Tie2阳性表达组微血管密度均高于阴性表达组(P<0.05)。结论:血管生成素-2和Tie2在肾透明细胞癌发生和转移过程中起重要作用,并与肿瘤血管生成关系密切。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 血管生成素 tie2 肿瘤血管生成
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Tie2受体在口腔鳞癌中的表达 被引量:3
13
作者 冀洪海 杨勇 +3 位作者 胥欣 王斯华 孙岩 高玉光 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2008年第6期386-389,共4页
目的:探讨Tie2受体在口腔鳞癌组织中的表达规律及其在肿瘤组织发展以及血管生成中的作用。方法:采用免疫组织化学S-P法,检测40例口腔鳞癌组织的微血管密度(microvessel density,MVD)和Tie2的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果:... 目的:探讨Tie2受体在口腔鳞癌组织中的表达规律及其在肿瘤组织发展以及血管生成中的作用。方法:采用免疫组织化学S-P法,检测40例口腔鳞癌组织的微血管密度(microvessel density,MVD)和Tie2的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果:口腔鳞癌组织中MVD和Tie2的表达水平均高于正常对照组,且Tie2的表达水平与MVD呈正相关;Tie2的表达随临床病理分级的增加呈递增的趋势。结论:Tie2可能通过调节口腔鳞癌组织的血管生成参与其发展的过程。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 tie2 微血管密度 CD34
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小鼠TIE2基因启动子的克隆及转录活性分析 被引量:2
14
作者 陆俊佳 袁志刚 +6 位作者 许淑茹 廖明 赖青鸟 畅荣妮 袁广之 侯伟 舒伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期90-94,共5页
克隆小鼠TIE2基因的启动子并分析其转录活性。设计并合成引物,以小鼠肝脏组织DNA为模板,巢式PCR扩增小鼠TIE2基因启动子区。将扩增获得的系列截短片段克隆入荧光素酶(Luc)报告基因表达载体pGL3-Basic中,构建系列启动子区转录活性报告质... 克隆小鼠TIE2基因的启动子并分析其转录活性。设计并合成引物,以小鼠肝脏组织DNA为模板,巢式PCR扩增小鼠TIE2基因启动子区。将扩增获得的系列截短片段克隆入荧光素酶(Luc)报告基因表达载体pGL3-Basic中,构建系列启动子区转录活性报告质粒pGL3-TIE2-Luc。报告质粒与内参质粒共转染SVEC4-10、NIH3T3、HUVEC及NIT-1细胞系,48 h后收获细胞检测双荧光素酶的表达情况。构建的pGL3-TIE2-Luc系列报告质粒经过酶切鉴定及DNA测序分析都显示正确;转染4种细胞系后进行双荧光素酶活性检测的结果表明,TIE2基因启动子区域(-2056-+1)具有较强的转录活性。成功构建小鼠TIE2基因启动子报告质粒,证实TIE2基因上游区域(-2056-+1)具有较强的启动子活性。 展开更多
关键词 tie2 启动子 双荧光素酶活性检测
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恙虫病东方体感染对内皮细胞Tie2/Akt/Foxo1通路的影响 被引量:3
15
作者 卫阳 金迎迎 +1 位作者 梁越进 邢燕 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期969-974,共6页
目的研究恙虫病东方体感染对Tie2/Akt/Foxo1通路的影响。方法本研究应用新建立的小鼠和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)严重恙虫病东方体感染模型,在感染的不同时间点收集小鼠肺脏组织或细胞,用Western blot法检测Tie2/Akt/Foxo1通路蛋白的表达... 目的研究恙虫病东方体感染对Tie2/Akt/Foxo1通路的影响。方法本研究应用新建立的小鼠和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)严重恙虫病东方体感染模型,在感染的不同时间点收集小鼠肺脏组织或细胞,用Western blot法检测Tie2/Akt/Foxo1通路蛋白的表达,用RT-PCR法检测炎症因子mRNA的表达。结果感染后,小鼠肺脏血管生成素2(Ang2)表达升高,而Tie2和磷酸化Tie2(p-Tie2)水平显著下降。感染HUVEC的检测结果支持小鼠实验结果,即Ang2升高,而Tie2和p-Tie2降低;添加重组人源血管生成素1(Ang1)可以部分恢复Tie2的改变。进一步研究发现Tie2信号下游蛋白Akt磷酸化降低、Foxo1去磷酸化增加;Foxo1呈细胞核内积累,HMGB1及IFN-γ等炎症因子表达增加。同时发现恙虫病东方体感染HUVEC后,血管内皮生长因子受体2及钙粘素等细胞通透性相关蛋白表达也同Tie2一样降低。结论恙虫病东方体感染抑制Tie2/Akt/Foxo1信号的活化,而该信号在维持血管正常功能中起重要作用,提示Tie2可能是严重恙虫病治疗的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 恙虫病 恙虫病东方体 tie2
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Ang-1和Tie2在高血压患者内皮祖细胞中表达水平及临床意义研究 被引量:2
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作者 冯晓 潘峰 +3 位作者 张腊红 楼洪萍 张邢炜 陈兆军 《中国医药导报》 CAS 2014年第11期4-6,9,共4页
目的探讨Ang-1及其受体Tie2在高血压患者循环内皮祖细胞中的表达水平并评价其临床意义。方法选择杭州师范大学附属医院2012年1月~2013年6月高血压I、Ⅱ级和Ⅲ级患者各15例:正常体检人群30名为对照组。lit—PCR法检测各组外周血中内皮... 目的探讨Ang-1及其受体Tie2在高血压患者循环内皮祖细胞中的表达水平并评价其临床意义。方法选择杭州师范大学附属医院2012年1月~2013年6月高血压I、Ⅱ级和Ⅲ级患者各15例:正常体检人群30名为对照组。lit—PCR法检测各组外周血中内皮祖细胞内Ang-1、Tie2mRNA表达水平;Western—blot法测定Tie2酪氨酸磷酸化水平。结果Ⅲ级高血压患者内皮祖细胞内Ang-1和Tie2mRNA表达水平均低于Ⅱ、I级高血压患者和对照组(P〈0.05),1I级高血压患者均低于I级高血压患者和对照组(P〈0.05)。Ⅲ级高血压患者内皮祖细胞Tie2磷酸化水平低于Ⅱ、I级高血压患者和对照组(P〈0.05),11级高血压患者Tie2磷酸化水平低于I级高血压患者和对照组(P〈0.05)。常规治疗后,内皮祖细胞Ang-1和Tie2mRNA表达及磷酸化Tie2水平均高于治疗前(P〈0.05)。结论患者循环内皮祖细胞内Ang-1和Tie2表达随高血压分级的增加逐渐下调.治疗后水平升高,可能与高血压病血管内皮细胞修复的调控机制密切相关。 展开更多
关键词 高血压 内皮祖细胞 ANG-1 tie2
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血管生成素1基因上调Tie2受体表达促进大鼠急性心肌梗死血管生成的实验研究 被引量:5
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作者 孙丽杰 崔鸣 +6 位作者 冯新恒 王佐岩 马康涛 毛节明 沈丽 陈凤荣 周春燕 《中国介入心脏病学杂志》 2005年第1期41-44,共4页
目的 通过观察血管生成素 1 (angiopoietin 1 ,Ang1 )基因对急性心肌梗死大鼠心肌Tie2受体表达的影响 ,探讨Ang1基因治疗促进血管生成 ,减少梗死面积的可能机制。方法 结扎左前降支冠状动脉制备大鼠心肌梗死模型 ,心肌内分别直接注射... 目的 通过观察血管生成素 1 (angiopoietin 1 ,Ang1 )基因对急性心肌梗死大鼠心肌Tie2受体表达的影响 ,探讨Ang1基因治疗促进血管生成 ,减少梗死面积的可能机制。方法 结扎左前降支冠状动脉制备大鼠心肌梗死模型 ,心肌内分别直接注射空载质粒或phAng1质粒 ;分别于术后第 3,7,1 4 ,2 8天取材 ,利用RT PCR技术分析心肌组织内Tie2受体表达 ;免疫组化方法计算血管生成以及肌性小动脉生成数量 ,Masson染色法检测心肌梗死面积。结果 Ang1基因治疗组Tie2受体mRNA表达明显高于对照组 ,于术后 7天达到高峰 ,2 8天降至正常水平。术后第 7,1 4和 2 8天 ,Ang1基因治疗组的血管生成及肌性小动脉生成较同期对照组均明显增加 ,梗死面积减小。结论 Ang1基因心肌内注射促进急性心肌梗死血管生成及肌性小动脉生成 ,减小梗死面积 ,其机制可能与促进Tie2受体上调有关。 展开更多
关键词 tie2 受体表达 急性心肌梗死 大鼠 小动脉 血管生成素 术后 梗死面积 上调 对照组
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sTie2通过阻抑血管生成拟态抑制结肠癌HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量:3
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作者 孔祥琳 程先硕 +6 位作者 李富荣 肖尤川 杨之斌 黄尤光 夏翠锋 余昆 李云峰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期522-528,共7页
目的:探讨可溶性Tie2(soluble Tie 2,sTie2)对结肠癌HCT116细胞血管生成拟态(vascular mimicry,VM)形成、增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:将重组质粒pBLAST49-hsTie2及对照质粒pBLAST49通过脂质体转染至HCT116细胞,分别形成hsTie2-HC... 目的:探讨可溶性Tie2(soluble Tie 2,sTie2)对结肠癌HCT116细胞血管生成拟态(vascular mimicry,VM)形成、增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:将重组质粒pBLAST49-hsTie2及对照质粒pBLAST49通过脂质体转染至HCT116细胞,分别形成hsTie2-HCT116细胞和Ctrl-HCT116细胞。通过3D模型培养、SRB法、细胞划痕实验及Transwell法分别检测HCT116细胞的VM形成、增殖、迁移及侵袭能力,采用Western blotting法检测HCT116细胞中VE-cadherin蛋白的表达。结果:pBLAST49-hsTie2重组质粒成功转染至结肠癌HCT116细胞。与Ctrl-HCT116细胞相比,hsTie2-HCT116细胞中VM的形成[(0.75±0.45)vs(7.50±0.52)个/视野,P<0.01]及VE-cadherin蛋白的表达[(1.23±0.08)vs(1.73±0.02),P<0.05]显著降低;细胞增殖率也显著降低[(32.57±4.57)%vs(88.24±21.94)%,P<0.01];细胞迁移能力[(0.37±0.07)vs(0.80±0.03)mm,P<0.01]及侵袭能力[(57.25±3.17)vs(127.25±6.25)个/视野,P<0.01]均显著减弱。结论:sTie2通过阻抑VM形成抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,有望成为既抗血管生成又抗VM形成的双靶向治疗结肠癌的药物。 展开更多
关键词 血管生成拟态 stie2 结肠癌 HCT116细胞 增殖 迁移 侵袭
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Angiopoietin/Tie2系统在大鼠高动力型肺动脉高压形成中的作用(英文) 被引量:2
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作者 王伟 王治平 方丹青 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第18期1-11,共11页
目的研究angiopoietin家族成员在高动力型肺动脉高压形成中的作用。方法通过左颈总动脉和左颈外静脉分流手术建立大鼠高动力型肺动脉高压模型。术后第1、2、4、8和12周检测肺组织内Ang-1、Ang-2、Ang-3、Tie2和激活型caspase-3的变化。... 目的研究angiopoietin家族成员在高动力型肺动脉高压形成中的作用。方法通过左颈总动脉和左颈外静脉分流手术建立大鼠高动力型肺动脉高压模型。术后第1、2、4、8和12周检测肺组织内Ang-1、Ang-2、Ang-3、Tie2和激活型caspase-3的变化。结果高动力引起肺动脉高压,出现肺动脉内皮细胞增生肥大。在肺动脉高压形成的过程中,肺组织内Ang-1和Tie2的表达显著增高,而Ang-3的表达明显降低。肺微小动脉内皮细胞Tie2的磷酸化水平逐渐升高但激活型caspase-3却降低。Ang-2的表达未见明显变化。结论内皮细胞凋亡减少可能是高动力型肺动脉高压形成的一个重要的病理机制。Ang-1/Tie2可能通过抑制内皮细胞凋亡来促进高动力型肺动脉高压的形成。Ang-3的表达量下降可能也促进了这一过程。在高动力型肺动脉高压的形成过程中Ang-2可能不发挥作用。 展开更多
关键词 ANGIOPOIETIN tie2 肺动脉高压
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Tie2基因过表达对单核细胞功能的影响 被引量:2
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作者 吴丽 王凯 +2 位作者 王昕婧 朱沁怡 汪希鹏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期156-161,共6页
目的:探讨过表达Tie2基因后单核细胞功能的变化及对内皮细胞增殖、迁移、小管形成的影响,初步研究TEMs(Tie2-expressing monocytes)促血管生成的机制。方法:建立过表达Tie2单核细胞系,荧光倒置显微镜下观察U937细胞的感染情况,RT-PCR、W... 目的:探讨过表达Tie2基因后单核细胞功能的变化及对内皮细胞增殖、迁移、小管形成的影响,初步研究TEMs(Tie2-expressing monocytes)促血管生成的机制。方法:建立过表达Tie2单核细胞系,荧光倒置显微镜下观察U937细胞的感染情况,RT-PCR、Western blot分别检测感染后U937细胞Tie2 mRNA和蛋白水平的表达情况;实时定量PCR检测感染后空载组NC-L.V-U937和实验组TEK-L.V-U937细胞mRNA水平表达的差异;ELISA检测NC-L.V-U937和TEK-L.V-U937细胞上清中细胞因子分泌的异同;增殖、迁移、小管形成实验分别观察TEK-L.V-U937细胞对内皮细胞增殖、迁移、小管形成的影响。结果:首次建立了转染Tie2基因的单核细胞系;RT-PCR及Western blot结果显示,与空载组NC-L.V-U937细胞相比,实验组TEK-L.V-U937细胞在mRNA和蛋白水平Tie2的表达显著增加,而NC-L.V-U937细胞几乎不表达Tie2;Real time-PCR结果显示,TEK-L.V-U937细胞IL-8的表达较空载组显著增加(P<0.01),IL-10的表达也有所上升(P>0.05);与空载组相比,TEK-L.V-U937细胞IL-8蛋白分泌明显增多(P<0.05),VEGFA蛋白分泌量也有上升的趋势(P>0.05),但两组细胞几乎都无EGF的分泌;TEK-L.V-U937的条件培养基刺激内皮细胞形成的小管数较多,IL-8中和抗体能抑制内皮小管的形成;NC-L.V-U937、TEK-L.V-U937饥饿培养上清对内皮细胞的迁移作用不明显(P>0.05);增殖的第3天,与空载组相比,TEK-L.VU937的条件培养基能显著地引起内皮细胞的增殖(P<0.05)。结论:过表达Tie2基因后显著地增加U937单核细胞系IL-8的表达,并进一步促进了内皮细胞的增殖与小管形成。 展开更多
关键词 tie2 过表达 U937细胞系 白介素-8
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