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早期生长应答因子1对THP-1源性泡沫细胞铜死亡相关基因表达的影响及其机制
1
作者 崔芸 杨娟 +2 位作者 陈涵 王红 张黎 《山东医药》 2026年第1期1-6,共6页
目的观察早期生长应答因子1(EGR1)对THP-1源性泡沫细胞铜死亡相关基因表达的影响,并探讨其机制。方法取人单核细胞系THP-1,用佛波酯(PMA)诱导分化为THP-1源性巨噬细胞后,加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导分化为THP-1源性泡沫细胞,油... 目的观察早期生长应答因子1(EGR1)对THP-1源性泡沫细胞铜死亡相关基因表达的影响,并探讨其机制。方法取人单核细胞系THP-1,用佛波酯(PMA)诱导分化为THP-1源性巨噬细胞后,加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导分化为THP-1源性泡沫细胞,油红O染色后观察细胞形态。分别取THP-1源性巨噬细胞(对照组)、THP-1源性泡沫细胞(模型组)、转染EGR1过表达质粒LV-OE-EGR1的THP-1源性泡沫细胞(过表达组)、转染EGR1敲低质粒si-EGR1的THP-1源性泡沫细胞(敲低组)、转染EGR1敲低质粒si-EGR1并加入自噬抑制剂氯喹(CQ)的THP-1源性泡沫细胞(敲低+抑制自噬组),采用RT-qPCR法检测细胞自噬标志物[微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62]、铜死亡相关基因[铁氧还蛋白1(FDX1)、二氢硫辛酸转乙酰基酶(DLAT)]mRNA,采用Western blotting法检测细胞自噬标志物、铜死亡相关蛋白。结果显微镜下观察到,细胞胞质内被染为红色或橙色的脂滴,表明THP-1源性泡沫细胞模型构建成功。与对照组相比,模型组细胞LC3 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05),p62、FDX1、DLAT mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05)。与模型组相比,过表达组细胞LC3 mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),p62、FDX1、DLAT mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);敲低组细胞LC3 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05),p62、FDX1、DLAT mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05)。与敲低组相比,敲低+抑制自噬组细胞LC3 mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),p62、FDX1、DLAT mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05)。结论EGR1可通过自噬途径调控THP-1源性泡沫细胞铜死亡相关基因FDX1、DLAT的表达。 展开更多
关键词 早期生长应答因子1 thp-1源性泡沫细胞 铜死亡 自噬 动脉粥样硬化
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岩藻糖基转移酶7失调对脂多糖诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响
2
作者 易丽君 李红 《中国生物制品学杂志》 2025年第7期790-795,共6页
目的 探讨岩藻糖基转移酶7(fucosyltransferase 7,Fut7)失调对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响,以期为临床相关疾病的炎症发生机制的研究提供实验依据。方法 采用不同浓度LPS(0、0.5、1、2、4、10μg/... 目的 探讨岩藻糖基转移酶7(fucosyltransferase 7,Fut7)失调对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响,以期为临床相关疾病的炎症发生机制的研究提供实验依据。方法 采用不同浓度LPS(0、0.5、1、2、4、10μg/mL)作用THP-1细胞,RT-qPCR法检测细胞中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因mRNA转录水平,确定建立炎性细胞模型的LPS刺激浓度。采用最佳浓度LPS刺激THP-1细胞,建立细胞炎性反应模型,并采用RT-qPCR法检测Fut7、小分子药物唾液酸路易斯寡糖X(sialyl Lewis X,sLeX)和FutT活性抑制剂SGN-2FF对炎性细胞模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平的影响。结果 确定建立炎性细胞模型的LPS刺激浓度为4μg/mL。Fut7过表达及sLeX可明显增加LPS诱导THP-1细胞炎性反应模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平(t=3.93~30.05,P均<0.05);Fut7抑制表达可明显降低LPS诱导THP-1细胞炎性反应模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平(t=6.89~39.50,P均<0.01),SGN-2FF可明显降低IL-1β、IL-6、IL-8基因mRNA转录水平(t=5.17~6.44,P均<0.001),但TNF-α基因mRNA的转录水平则明显升高(t=12.31,P<0.001)。结论 Fut7过表达及sLeX可通过促进炎性细胞因子的表达加剧LPS诱导THP-1细胞的炎性反应;Fut7抑制表达及Fut7活性抑制剂SGN-2FF可有效缓解炎症,为炎性疾病治疗提供了新策略。 展开更多
关键词 岩藻糖基转移酶7 人单核细胞thp-1 唾液酸路易斯寡糖X 炎性反应 细胞因子
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红曲黄色素对脂多糖诱导的THP-1细胞和RAW264.7细胞炎症的影响 被引量：1
3
作者 毛禹清 高坤辉 +1 位作者 刘曾丽 陈勉华 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第9期107-113,共7页
为研究红曲黄素C(monascinol,MC)、红曲素(monascin,MS)和红曲黄素(ankaflavin,AK)的抗炎机理,从红曲菌CP-1固态发酵后得到的红曲米中提取分离出红曲黄色素MC,并使用薄层层析法(thin-layer chromatography,TLC)和HPLC进行纯度分析。构建... 为研究红曲黄素C(monascinol,MC)、红曲素(monascin,MS)和红曲黄素(ankaflavin,AK)的抗炎机理,从红曲菌CP-1固态发酵后得到的红曲米中提取分离出红曲黄色素MC,并使用薄层层析法(thin-layer chromatography,TLC)和HPLC进行纯度分析。构建2μg/mL的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人THP-1巨噬细胞和小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症模型,并进行形态学观察,利用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法测定细胞活力,以MS和AK作为参比,实时荧光定量法(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定红曲黄色素MC对脂多糖诱导的THP-1细胞和RAW264.7细胞中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。结果表明,提取出的红曲黄色素MC纯度能达到98%以上,可用于细胞实验。6μg/mL的MC、MS和AK诱导THP-1细胞24 h后,细胞存活率均能达到90%以上,符合实验要求。6μg/mL的MC、MS和AK处理THP-1细胞和RAW264.7细胞24 h后,在转录水平和翻译水平上均显著抑制了IL-6的表达(P<0.01)。MC在转录水平和翻译水平上显著抑制了THP-1细胞和RAW264.7细胞中TNF-α的表达量(P<0.01),MS和AK仅在翻译水平上显著抑制了RAW264.7细胞TNF-α的分泌(P<0.01)。 展开更多
关键词 红曲黄色素 thp-1细胞 RAW264.7细胞 抗炎作用 促炎细胞因子
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硫化氢对THP-1来源巨噬细胞炎症反应的调控作用研究
4
作者 马文霞 马佳艺 +4 位作者 郑雨竹 王晓茹 丁惠国 王珊珊 吕翎娜 《北京医学》 2025年第12期1031-1038,共8页
目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对THP-1来源巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞后,采用H2S供体GYY4137(5.0μM)进行处理,采用流式细胞术和定量实时聚合酶链式反应检测相关蛋白及mRNA表达水平。将... 目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对THP-1来源巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞后,采用H2S供体GYY4137(5.0μM)进行处理,采用流式细胞术和定量实时聚合酶链式反应检测相关蛋白及mRNA表达水平。将处理前后的巨噬细胞进行转录组测序及分析,筛选差异表达基因(differentially ex⁃pressed genes,DEGs),采用京都基因与基因组百科全书数据库对DEGs进行通路和功能注释,并结合基因本体(gene on⁃tology,GO)分析和基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA),进一步揭示相关基因的生物学功能及其调控通路。基于相邻基因重复实例的搜索工具数据库及Cytoscape软件分析相互作用关键基因。结果体外实验结果显示,低浓度H2S处理可显著降低巨噬细胞促炎因子IL-6和COX-2的表达(P<0.05)。共筛选出300个DEGs,包括121个上调基因和179个下调基因。GO功能富集显示,DEGs显著富集于Ⅱ型IFN产生和正向调节、血管相关平滑肌细胞增殖的正向调节等功能通路;GSEA结果显示,H2S处理后,巨噬细胞中与促炎反应相关的基因集呈显著下调趋势,包括TNF、IL-1α、CCL4等多种经典促炎因子。通过蛋白质-蛋白质相互作用网络分析,进一步筛选出以GNG2为核心的15个炎症反应关键基因。结论低浓度H2S处理后,巨噬细胞表现出显著的炎症抑制特性。 展开更多
关键词 硫化氢 thp-1来源巨噬细胞 炎症反应 调控作用
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CLEC4A基因对THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化的影响
5
作者 王德隆 高振盛 孙业盈 《滨州医学院学报》 2025年第5期449-454,460,共7页
目的探讨C型凝集素结构域家族4成员A(C-type lectin domain family 4 member A,CLEC4A)基因对THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化的影响。方法在THP-1细胞系中采用CRISPR/Cas9基因敲除技术和瞬时转染技术分别敲除和过表达CLEC4A,采用蛋白免疫... 目的探讨C型凝集素结构域家族4成员A(C-type lectin domain family 4 member A,CLEC4A)基因对THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化的影响。方法在THP-1细胞系中采用CRISPR/Cas9基因敲除技术和瞬时转染技术分别敲除和过表达CLEC4A,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)以及流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测CLEC4A的敲除情况,采用逆转录定量聚合酶链式反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和流式细胞术检测CLEC4A的过表达情况;对THP-1细胞进行M1型诱导,分别采用RT-qPCR法、Western blot、流式细胞术和免疫荧光法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、人类白细胞抗原-DR亚型(human leukocyte antigen-DR isotype,HLA-DR)和CD80的表达变化。结果本研究采用CRISPR/Cas9基因编辑技术实现了CLEC4A基因的高效敲除(敲除效率>95%),通过瞬时转染技术使CLEC4A表达水平上调至200%。基因功能实验显示,CLEC4A的敲除显著降低了脂多糖和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)诱导的M1型巨噬细胞标志物iNOS、HLA-DR和CD80的表达。相反,CLEC4A过表达组中上述标志物的表达量显著增加。结论CLEC4A基因可以促进THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化。 展开更多
关键词 thp-1 C型凝集素结构域家族4成员A M1型巨噬细胞极化
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630 nm发光二极管照射脂多糖刺激的THP-1来源巨噬细胞的多组学分析
6
作者 任丹丹 毕婉莹 +4 位作者 谢文婷 吴佳欣 宋武琦 张凤民 刘海亮 《照明工程学报》 2025年第2期39-48,共10页
发光二极管(Light Emitting Diode,LED)作为一种低能量光疗(Low-level Light Therapy,LLLT),已被证实可以治疗肺损伤、肌腱病、神经损伤、类风湿性关节炎等疾病。本研究采用630 nm LED红光作为光源,分析630 nm LED红光照射脂多糖(Lipopo... 发光二极管(Light Emitting Diode,LED)作为一种低能量光疗(Low-level Light Therapy,LLLT),已被证实可以治疗肺损伤、肌腱病、神经损伤、类风湿性关节炎等疾病。本研究采用630 nm LED红光作为光源,分析630 nm LED红光照射脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激的人单核细胞白血病细胞(THP-1)来源巨噬细胞的作用机制。用LPS处理THP-1细胞,并使用强度为28.8 J/cm^(2)的630 nm LED红光照射,随后检测促炎因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的mRNA表达水平及采用非标定量蛋白质组学及磷酸化蛋白质组学分析方法筛选差异表达蛋白并进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和KEGG富集;通过STRING在线网站(https://cn.string-db.org/)和Cytoscape软件分析蛋白质互作情况。结果显示,经LED照射的THP-1细胞CXCL9、CXCL10、CXCL11的mRNA表达水平较对照组显著降低。蛋白质组学结果显示,630 nm LED红光照射巨噬细胞后,23个差异表达蛋白能够显著富集在转录调节复合体、病毒防御反应的调控等通路。磷酸化蛋白质组学结果显示,有178个位点的修饰水平能够显著富集在核斑点、钙粘蛋白结合、蛋白信号转导、蛋白质定位的正向调控、肌动蛋白细胞骨架等通路中。结合多组学分析,我们推测630 nm LED红光可能是通过多种途径来实现抗炎作用的。 展开更多
关键词 发光二极管 thp-1 630 nm红光 蛋白质组学 磷酸化蛋白质组学 光生物调节
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淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对THP-1细胞分泌细胞因子的影响 被引量：29
7
作者 刘铁汉 王本祥 +4 位作者 王毅 吴立军 南陆彦 永田年 池岛乔 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期245-248,共4页
目的 :比较淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对人组织细胞瘤THP 1细胞分泌 4种细胞因子的影响。方法 :放射免疫测定方法 (RIA)。结果 :在LPS和PMA存在下 ,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物 (宝藿苷I和淫羊藿苷元 )对IL 6的产生有促进作用 ,代谢物的作... 目的 :比较淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对人组织细胞瘤THP 1细胞分泌 4种细胞因子的影响。方法 :放射免疫测定方法 (RIA)。结果 :在LPS和PMA存在下 ,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物 (宝藿苷I和淫羊藿苷元 )对IL 6的产生有促进作用 ,代谢物的作用更强 ,对IL 8的产生有一定的抑制作用。当LPS和PMA不存在时 ,对IL 6的产生无明显影响 ,而对IL 8的产生则有促进作用。不论LPS和PMA存在与否 ,原苷对TNFα的产生有抑制作用 ,原苷及其肠菌代谢产物对IL 1α的产生均有明显抑制作用。结论 :在不同的实验条件下 ,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对各种炎症性细胞因子的产生均有特异的调节作用。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 肠菌代谢物 thp-1细胞 炎症
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P38MAPK信号转导通路在大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中的作用 被引量：9
8
作者 廖洋 陈建斌 +3 位作者 汤为学 葛群芳 卢前微 杨泽松 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1439-1443,共5页
目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理... 目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理后细胞内磷酸化P38MAPK(P-p38MAPK)表达及分布变化;Western blot检测大蒜素处理前后细胞内P-p38MAPK和Fas蛋白表达量的变化。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性。其72h中效浓度(IC50)为12.8 mg.L-1。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。免疫细胞化学法检测药物处理后P-p38MAPK表达增加,主要分布于细胞核与细胞浆,而阴性对照组仅弱表达。Western blot结果分析P-p38MAPK,Fas蛋白表达量随大蒜素浓度的增加而增加,呈剂量依赖性。其阴性组、72 h的1/2 IC50组、IC50组P-p38MAPK蛋白表达水平(相对灰度值)分别为0.2598±0.0132,0.3612±0.008 3,0.5056±0.0055;Fas蛋白表达水平分别为0.287 4±0.0089,0.426 8±0.0079和0.597 1±0.0109,差别均有显著性意义(P<0.01)。结论:大蒜素可诱导THP-1细胞凋亡,其诱导凋亡机制可能是通过激活P-p38MAPK/Fas途径实现。 展开更多
关键词 大蒜素 thp-1细胞 细胞凋亡 磷酸化P38MAP K 信号转导
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LDL、oxLDL对THP-1巨噬细胞PCSK9、LDLR表达的影响研究 被引量：10
9
作者 刘录山 程艳丽 +6 位作者 谢闵 杨琼 潘利红 姜志胜 唐朝克 危当恒 唐志晗 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第5期540-547,共8页
为研究低密度脂蛋白(LDL)、氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1源性巨噬细胞中PCSK9、LDLR表达的影响及两者之间的关系.分别用0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的LDL和0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的oxLDL处理THP-1巨噬细胞,油红O染... 为研究低密度脂蛋白(LDL)、氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1源性巨噬细胞中PCSK9、LDLR表达的影响及两者之间的关系.分别用0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的LDL和0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的oxLDL处理THP-1巨噬细胞,油红O染色检测细胞荷脂情况,免疫荧光检测THP-1巨噬细胞上PCSK9蛋白表达及分布情况,RT-PCR、Western blot检测THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达.结果发现,不同浓度LDL处理THP-1巨噬细胞后,随着LDL浓度的增大,细胞内脂滴数目略有增多.免疫荧光染色发现,PCSK9在THP-1巨噬细胞上的表达随LDL浓度的增加而增多,胞浆内定位于某一特定细胞器中;RT-PCR、Western blot检测发现,LDL可以呈浓度依赖性下调THP-1巨噬细胞中LDLR的表达和上调PCSK9的表达.不同浓度oxLDL处理THP-1巨噬细胞后,随oxLDL浓度的增大,脂滴颗粒明显增加;oxLDL处理对THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达影响均不明显.研究结果表明:THP-1巨噬细胞上,同时有PCSK9和LDLR的表达,且PCSK9定位于胞浆中某一特定细胞器;oxLDL对THP-1巨噬细胞LDLR和PCSK9表达没有影响;LDL能够降低THP-1巨噬细胞表面LDLR的表达,同时上调PCSK9表达,初步说明在THP-1巨噬细胞中,两者有一定的相关性. 展开更多
关键词 低密度脂蛋白(LDL) 氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL) PCSK9/NARC-1 低密度脂蛋白受体(LDLR) 动脉粥样硬化 thp-1巨噬细胞
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肉苁蓉多糖对THP-1细胞吞噬作用的影响及其机理研究 被引量：12
10
作者 张涛 许文胜 +5 位作者 贾彦斌 白国荣 高静 崔丽霞 郎力河 张玉娟 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期148-150,155,共4页
将单核细胞株THP-1按照随机数字表随机分为观察组和对照组两组,正常的观察组给予肉苁蓉多糖培养液,根据肉苁蓉多糖浓度不同又分为10、50、100μg/L组,对照组不添加肉苁蓉多糖培养液,实验组中的不同浓度组、对照组,每组各24例.比较各组TH... 将单核细胞株THP-1按照随机数字表随机分为观察组和对照组两组,正常的观察组给予肉苁蓉多糖培养液,根据肉苁蓉多糖浓度不同又分为10、50、100μg/L组,对照组不添加肉苁蓉多糖培养液,实验组中的不同浓度组、对照组,每组各24例.比较各组THP-1细胞吞噬率、吞噬指数以及细胞因子分泌水平,以此研究肉苁蓉多糖对THP-1细胞吞噬作用的影响并探讨其发生机理.结果显示,观察组中10、50、100μg/L组单核巨噬细胞吞噬率分别为(17.42±3.19)%、(23.32±3.82)%、(29.41±4.11)%,均高于对照组的(9.34±1.26)%,比较差异有统计学意义(F=162.63,P<0.01);10、50、100μg/L组单核巨噬细胞吞噬指数分别为(0.45±0.13)、(0.67±0.19)、(0.82±0.21),均高于对照组的(0.22±0.09),比较差异有统计学意义(F=62.60,P<0.01);10、50、100μg/L组IFN-γ分别为(4.21±1.11)、(7.38±1.86)、(9.51±2.10)mg/L,均高于对照组(0.79±0.06)mg/L,比较差异有统计学意义(F=152.74,P<0.01);10、50、100μg/L组IL-1分别为(24.11±4.15)、(74.60±11.21)、(103.61±19.65)mg/L,均高于对照组(10.21±1.39)mg/L,比较差异有统计学意义(F=343.15,P<0.01),各指标进一步采用Newman-Keals法进行两两比较均有统计学意义(P<0.01).由此认为,肉苁蓉多糖可能通过增强THP-1细胞吞噬能力和促细胞因子释放发挥免疫调节功能. 展开更多
关键词 肉苁蓉多糖 thp-1细胞 吞噬作用 机理
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脑心通对人THP-1单核源性巨噬细胞清道夫受体表达的影响 被引量：9
11
作者 刘倩 王东琦 +3 位作者 雷新军 崔长琮 李红兵 刘胜强 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期240-243,共4页
目的以阿托伐他汀为标准对照,研究中成药脑心通对人THP-1单核源性巨噬细胞清道夫受体CD36和SR-A表达的影响。方法人THP-1单核源性巨噬细胞与50 mg/L oxLDL共培养0、8、162、4 h,流式细胞术检测各时间点细胞表面清道夫受体CD36和SR-A的... 目的以阿托伐他汀为标准对照,研究中成药脑心通对人THP-1单核源性巨噬细胞清道夫受体CD36和SR-A表达的影响。方法人THP-1单核源性巨噬细胞与50 mg/L oxLDL共培养0、8、162、4 h,流式细胞术检测各时间点细胞表面清道夫受体CD36和SR-A的表达。不同浓度脑心通(0.125、0.25、0.5、1 g/L)和1μmol/L阿托伐他汀分别干预THP-1单核源性巨噬细胞12 h后换液,分别加入上述浓度药液及50 mg/L oxLDL孵育24 h,检测CD36和SR-A的表达量,统计分析不同浓度脑心通及1μmol/L阿托伐他汀对CD36和SR-A表达的影响。结果oxLDL明显促进人THP-1单核源性巨噬细胞CD36和SR-A的表达;脑心通呈剂量依赖性抑制CD36和SR-A的表达,1 g/L脑心通作用最为明显(分别降低22.3%、25.0%,P<0.05);1μmol/L阿托伐他汀显著抑制两者表达(分别下降63.3%、70.5%,P<0.05)。结论中成药脑心通有轻度抑制THP-1单核源性巨噬细胞清道夫受体表达的作用,此作用弱于阿托伐他汀。 展开更多
关键词 thp-1巨噬细胞 脑心通 CD36 SR—A
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基于THP-1细胞模型荆芥挥发油抗炎作用的NLRP3炎症小体调控机制研究 被引量：12
12
作者 王凤 徐锋 +4 位作者 温桃群 桑文涛 周洪莉 王学 曾南 《中药材》 CAS 北大核心 2017年第3期689-694,共6页
目的:以THP-1细胞为载体,观察荆芥挥发油抗炎作用及与NLRP3炎症小体激活相关的调控作用机制。方法:MTS法测定荆芥挥发油对THP-1细胞的毒性作用;利用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞,然后采用LPS与激活物(ATP、Nigericin、CPPD... 目的:以THP-1细胞为载体,观察荆芥挥发油抗炎作用及与NLRP3炎症小体激活相关的调控作用机制。方法:MTS法测定荆芥挥发油对THP-1细胞的毒性作用;利用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞,然后采用LPS与激活物(ATP、Nigericin、CPPD或Ca Cl2)进行造模,观察荆芥挥发油对NLRP3炎症小体激活的影响,ELISA法检测细胞上清中IL-1β、IL-18水平;RT-PCR法检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6 mRNA的表达。结果:荆芥挥发油浓度≤0.4 mg/mL时对THP-1巨噬细胞无毒;0.2 mg/mL荆芥挥发油对4种激活物诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌具有显著抑制作用(P<0.05或P<0.01),且对ATP或Nigericin诱导下THP-1巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6 mRNA的高表达具有显著下调作用(P<0.05或P<0.01)。结论:荆芥挥发油体外能抑制ATP、Nigericin、CPPD或Ca Cl2诱导的THP-1巨噬细胞IL-1β高分泌,抑制ATP或Nigericin诱导下THP-1巨噬细胞裂解液中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6 mRNA的高表达,其抗炎作用的发挥与干预NLRP3炎症小体的激活有关。 展开更多
关键词 荆芥挥发油 thp-1细胞 NIGERICIN ATP NLRP3炎症小体
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NF-κB信号通路介导AngⅡ诱导THP-1巨噬细胞表达MMP-9 被引量：17
13
作者 柴婵娟 杨志明 +1 位作者 康玉明 肖传实 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2334-2337,共4页
目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人单核/巨噬细胞(THP-1细胞)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的机制。方法:用0.1μmol/L佛波酯(PMA)作用48h,诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞后,随机分为4组:(1)PMA组,即对照组;(2)PMA+AngⅡ组(10-7mol/L... 目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人单核/巨噬细胞(THP-1细胞)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的机制。方法:用0.1μmol/L佛波酯(PMA)作用48h,诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞后,随机分为4组:(1)PMA组,即对照组;(2)PMA+AngⅡ组(10-7mol/L,1h);(3)PMA+AngⅡ+2-硫代氨基甲酸吡咯烷组[PDTC(10μmol/L,30min)];(4)PDTC组。用Western blotting蛋白印记技术分别检测总蛋白MMP-9及磷酸化核转录因子-κBp65(NF-κBp65)的变化,用RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达的变化。结果:与对照组相比,AngⅡ诱导THP-1巨噬细胞磷酸化NF-κBp65增加(1.02±0.10,P<0.05),MMP-9蛋白量也增加(1.06±0.11,P<0.05),MMP-9 mRNA表达上调(1.22±0.08,P<0.05),而使用NF-κB的抑制剂PDTC后磷酸化NF-κBp65(0.99±0.12,P<0.01)减少,MMP-9表达明显受到抑制(1.04±0.14,P<0.01),MMP-9 mR-NA表达下调(0.90±0.06,P<0.01)。结论:NF-κB信号转导途径是AngⅡ诱导THP-1巨噬细胞表达MMP-9的重要途径之一。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ NF-ΚB 基质金属蛋白酶-9 thp-1细胞
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氧化低密度脂蛋白对THP-1巨噬细胞CD36表达的影响 被引量：11
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作者 莫中成 易光辉 +4 位作者 陈欣 唐朝克 王佐 刘录山 杨永宗 《医学研究生学报》 CAS 2006年第1期6-9,i0009,共5页
目的:观察氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1巨噬细胞CD36表达和细胞胆固醇流入的影响,探讨CD36在巨噬细胞胆固醇流入中的作用。方法:用50 mg/L oxLDL分别孵育THP-1巨噬细胞不同时间(0、12、24、36和48 h),采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-P... 目的:观察氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1巨噬细胞CD36表达和细胞胆固醇流入的影响,探讨CD36在巨噬细胞胆固醇流入中的作用。方法:用50 mg/L oxLDL分别孵育THP-1巨噬细胞不同时间(0、12、24、36和48 h),采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和W estern印迹分别检测CD36 mRNA和蛋白质的表达;用油红O染色观测细胞内脂质蓄积情况;用液体闪烁计数法检测[3H]胆固醇流入。结果:50mg/L oxLDL孵育THP-1巨噬细胞不同时间(0、12、24、36和48 h),THP-1巨噬细胞CD36 mRNA及蛋白质表达上调,油红O染色可见细胞内脂滴逐渐增加,液体闪烁计数发现THP-1巨噬细胞胆固醇流入增加,分别为23.5%、27.8%、39.7%、44.1%和49.7%。结论:oxLDL可使THP-1巨噬细胞CD36表达上调,并使细胞胆固醇流入增加。 展开更多
关键词 CD36 thp-1巨噬细胞 氧化型低密度脂蛋白 胆固醇流人 动脉粥样硬化
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人参皂苷Ro促进THP-1细胞向DC分化的作用 被引量：9
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作者 李紫薇 于宁 +7 位作者 朱肖肖 赵霖 张博 郭强 张振 魏然 丁娜 李霞(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1170-1176,共7页
目的:探讨人参皂苷Ro联合细胞因子(GM-CSF与IL-4)促进人单核白血病细胞(THP-1)向树突状细胞(DC)分化的作用。方法:筛选细胞因子诱导白血病源DC敏感细胞株;采用细胞因子联合人参皂苷Ro诱导筛选的敏感细胞株THP-1向DC分化。培养体系中分... 目的:探讨人参皂苷Ro联合细胞因子(GM-CSF与IL-4)促进人单核白血病细胞(THP-1)向树突状细胞(DC)分化的作用。方法:筛选细胞因子诱导白血病源DC敏感细胞株;采用细胞因子联合人参皂苷Ro诱导筛选的敏感细胞株THP-1向DC分化。培养体系中分别加入小(5μmol/L)、中(10μmol/L)、大(20μmol/L)剂量人参皂苷Ro,流式细胞术检测白血病来源DC表面标志CD1a、MHCⅡ、共刺激分子CD86表达;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测白血病来源DC MHCⅡ、CD86 mRNA转录水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清TNF-α、IL-6蛋白水平。结果:THP-1是细胞因子诱导DC分化的敏感白血病细胞株,与单纯细胞因子诱导比较,细胞因子联合人参皂苷Ro作用后,白血病来源DC表面标志CD1a、MHCⅡ、共刺激分子CD86比例显著升高(P<0.05),CD1a、CD86及MHCⅡ转录水平显著升高(P<0.05),培养上清TNF-α、IL-6蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:人参皂苷Ro能明显促进细胞因子诱导THP-1细胞向DC分化。 展开更多
关键词 人参皂苷Ro 白血病 树突状细胞 thp-1细胞 粒细胞巨噬细胞-集落刺激因子
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参莲提取物对TNF-α刺激下单核细胞株THP-1功能的影响 被引量：6
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作者 李玉洁 杨庆 +4 位作者 翁小刚 朱晓新 王怡薇 刘小霓 韩晓 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1030-1033,共4页
目的：观察参莲（SL）提取物对炎症因子刺激下单核细胞功能的影响。方法：SL提取物预孵育,以TNF-α20μg.L-1为刺激因子,观察SL提取物对单核细胞株THP-1黏附、迁移、摄脂、分泌功能变化的影响。结果：SL1-3（0.5-2 g.L-1）可明显降低HU... 目的：观察参莲（SL）提取物对炎症因子刺激下单核细胞功能的影响。方法：SL提取物预孵育,以TNF-α20μg.L-1为刺激因子,观察SL提取物对单核细胞株THP-1黏附、迁移、摄脂、分泌功能变化的影响。结果：SL1-3（0.5-2 g.L-1）可明显降低HUVEC和THP-1的黏附率,与模型组比较有显著性差异。SL1-5（0.125-2 g.L-1）均可显著减少THP-1迁移细胞数,与模型组比较有显著性差异。SL1-5（0.125-2 g.L-1）均可显著降低细胞内TC值。SL 1（2 g.L-1）可显著降低细胞上清中异常增高的IL-6值,同时升高IL-10的含量,其他剂量未见明显作用。结论：SL提取物对TNF-α刺激下单核细胞黏附、迁移、摄脂、分泌功能均有显著影响,其作用可能是SL提取物干预AS早期炎症反应的机制之一。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 参莲提取物 炎症 thp-1
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海藻多糖锌配合物的组成及其对THP-1细胞耗氧的影响 被引量：7
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作者 先宏 张莉 +3 位作者 宋曙辉 步卫东 丛建波 计峰 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期261-265,271,共6页
目的通过海藻多糖(SP)与锌离子(II)络合成一种新型的海藻多糖锌(SPZC),在比较SP和SPZC二者理化性质、结构组成基础上,对锌离子的多糖螯合物在单核细胞THP-1细胞耗氧的影响做了初步的研究。方法:用苯酚法法测定SP和SPZC的总多糖含量、Hod... 目的通过海藻多糖(SP)与锌离子(II)络合成一种新型的海藻多糖锌(SPZC),在比较SP和SPZC二者理化性质、结构组成基础上,对锌离子的多糖螯合物在单核细胞THP-1细胞耗氧的影响做了初步的研究。方法:用苯酚法法测定SP和SPZC的总多糖含量、Hodgson法测定二者的硫酸根含量和Folin酚试剂法等化学法测定二者主要作用成分,气相色谱(GC)分析了二者所含的主要单糖及摩尔比,红外光谱(IR)分析多糖二者的主要成分基团等。用ESR自旋捕捉法检测了二者对细胞的呼吸爆发作用(respiratory burst,RB)下耗氧量的影响,以及利用活性氧(reactive oxygen species,ROS)的荧光探针(2,7-二氢二氯荧光素,DCFH-DA)分析了PMA激活THP-1细胞后ROS产生的变化。结果 SP络合上锌离子成为SPZC后也具有很好的稳定性,二者之间的主要成分含量变化明显,多糖含量、蛋白质含量、硫酸根离子下降明显;而SPZC中Zn(II)的含量为15%。通过GC分析,表明锌离子的配位反应,使得SP的单糖组成也有改变;IR图谱可以发现SP结合上锌离子后,图谱上的特征性峰发生位移、钝化或消失,而代之有SPZC核的类型峰。RB结果,提示在细胞受到激发的短暂时间内,SPZC比SP更能维持细胞的RB在一个更高水平;而同样细胞激发后的较长时间内,ROS产生的荧光染色,相较SP对ROS产生有一定的淬灭作用,而SPZC则能触发ROS产生更多。结论 SP同锌离子(II)络合产生的SPZC,增加了新的有机锌来源;同时,SPZC对比SP,其抗氧化性能有所减弱。 展开更多
关键词 海藻多糖 海藻多糖锌 thp-1 呼吸爆发 活性氧
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活血化瘀中药对内毒素诱导THP-1细胞增殖及蛋白质组的影响 被引量：13
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作者 张萃 王培训 +1 位作者 周联 董燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期662-665,670,共5页
目的:通过内毒素诱导的炎症细胞模型,筛选抗炎活血化瘀中药单体,并探讨蛋白质表达谱。方法:用LPS诱导THP-1细胞株增殖和产生TNF-α,作为内毒素诱导的炎症细胞模型。以此筛选活血化瘀中药单体抗炎成分,用双向电泳技术,分析差异蛋白点。结... 目的:通过内毒素诱导的炎症细胞模型,筛选抗炎活血化瘀中药单体,并探讨蛋白质表达谱。方法:用LPS诱导THP-1细胞株增殖和产生TNF-α,作为内毒素诱导的炎症细胞模型。以此筛选活血化瘀中药单体抗炎成分,用双向电泳技术,分析差异蛋白点。结果:通过筛选活血化瘀中药单体发现丹参酮ⅡA对内毒素诱导的炎症细胞模型有明显抑制作用,双向电泳图象分析筛选出差异性明显的蛋白质点26个。模型组有16个蛋白点增高,丹参酮ⅡA组能下调13个蛋白点(占50%),有3个蛋白点进一步上调(占11.5%);在模型组下调表达的10个蛋白点(占38.5%),丹参酮ⅡA组均有不同程度上调趋势。结论:内毒素感染的细胞模型适合实验室小剂量中药单体的筛选,丹参酮ⅡA的抗炎作用与这些差异表达蛋白质有关,能够改善一些蛋白质的表达。 展开更多
关键词 活血化瘀中药单体 thp-1 双向电泳 蛋白质组学
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两种PMA诱导方案对THP-1巨噬细胞M1和M2亚型相关基因表达的影响 被引量：11
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作者 章述军 雷青松 +2 位作者 李麟 秦波 黄文祥 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第6期765-771,共7页
佛波酯诱导THP-1单核细胞系分化为巨噬细胞的模型广泛被使用,目前主要使用高、低浓度两种方案,其是否对M1和M2亚型相关基因的表达有影响鲜有报道。该研究比较了两种常用佛波酯方案对THP-1细胞分化为巨噬细胞及进一步极化为M1和M2亚型过... 佛波酯诱导THP-1单核细胞系分化为巨噬细胞的模型广泛被使用,目前主要使用高、低浓度两种方案,其是否对M1和M2亚型相关基因的表达有影响鲜有报道。该研究比较了两种常用佛波酯方案对THP-1细胞分化为巨噬细胞及进一步极化为M1和M2亚型过程后相关标志基因的表达情况。结果表明,高浓度佛波酯方案增强M0细胞白介素-1β、肿瘤坏死因子-α、诱导型一氧化氮合酶和甘露糖受体C1、转化生长因子-β的表达,而抑制白介素-10的表达。进一步极化为M1和M2亚型时,高浓度佛波酯方案主要增强白介素-1β,而抑制白介素-6对干扰素-γ的应答,而低浓度方案增强甘露糖受体C1、树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合蛋白因子对白介素-4的应答。两种佛波酯方案可诱导THP-1产生不同表型的巨噬细胞以及后续极化亚型,需根据实验目的选择合适的诱导方案。 展开更多
关键词 thp-1 巨噬细胞 极化 佛波酯
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调补肺肾三法对香烟烟雾提取物和脂多糖刺激单核巨噬细胞THP-1分泌细胞因子的影响 被引量：8
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作者 陈玉龙 吴耀松 +3 位作者 李建生 赫丽丽 田燕歌 李亚 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2012年第22期1948-1953,共6页
目的探讨调补肺肾三法治疗慢性阻塞性肺疾病的分子机理。方法用香烟烟雾提取物(CSE)和脂多糖(LPS)及两者联合(LC)体外刺激单核巨噬细胞THP-1,每种刺激物下分为正常组(加入20%正常大鼠血清)、刺激物组(加入20%正常大鼠血清和5%CSE,或75pg... 目的探讨调补肺肾三法治疗慢性阻塞性肺疾病的分子机理。方法用香烟烟雾提取物(CSE)和脂多糖(LPS)及两者联合(LC)体外刺激单核巨噬细胞THP-1,每种刺激物下分为正常组(加入20%正常大鼠血清)、刺激物组(加入20%正常大鼠血清和5%CSE,或75pg/mlLPS,或5%CSE和75pg/mlLPS)、补肺益肾组、补肺健脾组和益气滋肾组(加20%相应方药大鼠含药血清和5%CSE,或75pg/mlLPS,或5%CSE和75pg/mlLPS),检测各组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-3(IL-3)、巨噬细胞-粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)、转化生长因子-β(TGF-β)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、超氧化物歧化酶(SOD)、CD36、磷脂酸磷酸酶2B(PPAP2B),应用网络工具分析细胞因子的转录因子。结果与正常组比较,CSE组、LPS组和LC组分泌MMP-9增加,分泌TNF-α和PPAP2B减少;CSE组分泌TIMP-1减少,LPS组分泌TGF-β增加,LC组GM-CSF分泌增加(P<0.05或P<0.01)。3个复方对细胞分泌的各因子调节明显不同(P<0.05或P<0.01),其中补益肺肾方在各条件下,所调节分泌的因子和涉及转录因子较为广泛。结论 CSE和LPS对THP-1分泌细胞因子影响不同,调补肺肾三法在一定程度上都对CSE和LPS刺激下分泌细胞因子有调控作用,补益肺肾方药作用最明显而广泛,补肺健脾方次之。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 调补肺肾三法 香烟烟雾提取物 脂多糖 细胞因子 thp-1细胞
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