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干扰鞘氨醇-1-磷酸受体1表达慢病毒质粒及其稳转THP-1细胞株的建立
1
作者 谭佳佳 赵玲 +6 位作者 苏秋源 周海琴 莫世恩 卢芳芳 周洋 韦依 况燕 《中国生物制品学杂志》 2026年第3期270-276,共7页
目的构建干扰鞘氨醇-1-磷酸受体1(sphingosine-1-phosphate receptor 1,S1PR1)表达的慢病毒质粒,并建立THP-1细胞稳转株,以期在细胞水平上深入研究S1PR1对巨噬细胞功能的影响及其在肿瘤发生发展中的作用机制。方法根据NCBI数据库中登录... 目的构建干扰鞘氨醇-1-磷酸受体1(sphingosine-1-phosphate receptor 1,S1PR1)表达的慢病毒质粒,并建立THP-1细胞稳转株,以期在细胞水平上深入研究S1PR1对巨噬细胞功能的影响及其在肿瘤发生发展中的作用机制。方法根据NCBI数据库中登录的S1PR1基因(1901)序列,设计3对针对该基因shRNA序列的扩增引物,PCR法扩增目的基因,插入至载体pLKO.1-puro中,构建相应慢病毒质粒,进行单酶切及测序鉴定。将鉴定正确的质粒命名为pLKO.1-S1PR1-shRNA1、pLKO.1-S1PR1-shRNA2、pLKO.1-S1PR1-shRNA3,以包含stuffer序列的载体pLKO.1-puro作为对照(命名为pLKO.1-S1PR1-shNC)。将慢病毒质粒与慢病毒包装质粒共转入293T细胞进行病毒包装,浓缩后测定病毒液滴度。确定THP-1细胞的嘌呤霉素筛选浓度(0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5μg/mL)、培养时间(0、24、48、72 h)和MOI(10、20、30、40、50)后,将慢病毒按最佳条件感染THP-1细胞,并经嘌呤霉素筛选,采用RT-qPCR和Western blot法分别检测各组THP-1细胞中S1PR1基因mRNA相对转录和SIPR1蛋白相对表达水平。结果经单酶切和测序鉴定证明,慢病毒质粒pLKO.1-S1PR1-shRNA1、pLKO.1-S1PR1-shRNA2、pLKO.1-S1PR1-shRNA3构建正确。shNC、shRNA1、shRNA2、shRNA3组慢病毒滴度分别为9.5×10^(9)、4.25×10^(9)、2×10^(9)、4.4×10^(9)TU/mL。按最佳MOI=50感染THP-1细胞72 h,经1.5μg/mL嘌呤霉素筛选后,与shNC组比较,shRNA1、shRNA2、shRNA3组THP-1细胞中S1PR1基因mRNA相对转录水平均明显降低(F=44.916,P<0.001);shRNA1组S1PR1蛋白相对表达水平虽降低,但差异无统计学意义(t=1.921,P>0.05),shRNA2、shRNA3组中的S1PR1蛋白相对表达水平均显著降低(t分别为8.730和6.957,P均<0.05)。结论成功构建了干扰S1PR1表达的慢病毒质粒及其THP-1细胞稳转株,可用于后续深入研究。 展开更多
关键词 鞘氨醇-1-磷酸受体1 thp-1细胞 慢病毒
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has-miR-126-5p联合黄连素对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞的作用机制研究
2
作者 杨学娟 刘原 +2 位作者 陈广洲 欧阳徐梦 丁雪松 《宁夏医学杂志》 2026年第2期93-97,F0002,共6页
目的探究血管内皮细胞外泌体(VECs-Exos)中的has-miR-126-5p联合黄连素对人单核细胞白血病(THP-1)巨噬细胞泡沫化的作用。方法将人血管内皮细胞(VECs)分为VECs空细胞组、VECs+氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)模型组和VECs+ox-LDL+黄连素组,采... 目的探究血管内皮细胞外泌体(VECs-Exos)中的has-miR-126-5p联合黄连素对人单核细胞白血病(THP-1)巨噬细胞泡沫化的作用。方法将人血管内皮细胞(VECs)分为VECs空细胞组、VECs+氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)模型组和VECs+ox-LDL+黄连素组,采用差速超速离心法提取VECs-Exos,通过外泌体(Exos)示踪、透射电镜和免疫蛋白质印迹法(Western blot)对外泌体进行鉴定;利用高通量测序系统(Illumina)对VECs-Exos进行测序,对筛选出差异表达的miRNA进行分析;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞中miRNA表达。针对表达差异最大的miRNA has-miR-126-5p进行下一步实验。将VECs-Exos与THP-1细胞共同培养后,分为THP-1对照组(a组)、THP-1+ox-LDL泡沫细胞组(b组)、THP-1+ox-LDL+外泌体组(c组)、THP-1+ox-LDL+外泌体+黄连素组(d组)、THP-1+ox-LDL+has-miR-126-5p-抑制剂组(e组)、THP-1+ox-LDL+has-miR-126-5p-抑制剂乱序列对照组(f组)、THP-1+ox-LDL+has-miR-126-5p-模拟物组(g组)、THP-1+ox-LDL+has-miR-126-5p-模拟物乱序列对照组(h组)。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、油红O染色及胆固醇(TC)含量测定等实验评估巨噬细胞活力、脂质积累程度及TC含量。结果VECs-Exos形态呈杯托状;Exos表面标志物TSG101、CD81、CD9表达阳性。PKH67与外泌体脂质双层膜稳定结合。与VECs空细胞组相比,has-miR-126-5p在VECs+ox-LDL模型组中显著高表达(P<0.05),使用黄连素干预后,其表达水平明显降低(P<0.05)。实验结果显示,与a组相比,b组细胞活力降低,细胞内TC含量及脂质积累增加(P<0.05);与b组相比,c组和g组细胞活力降低、TC含量及脂质积累增加(P<0.05),e组细胞活力升高、TC含量及脂质积累降低(P<0.05);与c组相比,d组和e组细胞活力升高、TC含量及脂质积累降低(P<0.05),g组细胞活力显著降低,TC含量及脂质积累升高(P<0.05)。结论has-miR-126-5p加重了THP-1巨噬细胞泡沫化以及脂质、胆固醇积累,黄连素通过降低has-miR-126-5p表达减少了THP-1巨噬细胞脂质堆积,改善了细胞动脉粥样硬化程度。 展开更多
关键词 血管内皮细胞外泌体 thp-1细胞 动脉粥样硬化 has-miR-126-5p 黄连素 巨噬细胞泡沫化
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早期生长应答因子1对THP-1源性泡沫细胞铜死亡相关基因表达的影响及其机制
3
作者 崔芸 杨娟 +2 位作者 陈涵 王红 张黎 《山东医药》 2026年第1期1-6,共6页
目的观察早期生长应答因子1(EGR1)对THP-1源性泡沫细胞铜死亡相关基因表达的影响,并探讨其机制。方法取人单核细胞系THP-1,用佛波酯(PMA)诱导分化为THP-1源性巨噬细胞后,加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导分化为THP-1源性泡沫细胞,油... 目的观察早期生长应答因子1(EGR1)对THP-1源性泡沫细胞铜死亡相关基因表达的影响,并探讨其机制。方法取人单核细胞系THP-1,用佛波酯(PMA)诱导分化为THP-1源性巨噬细胞后,加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导分化为THP-1源性泡沫细胞,油红O染色后观察细胞形态。分别取THP-1源性巨噬细胞(对照组)、THP-1源性泡沫细胞(模型组)、转染EGR1过表达质粒LV-OE-EGR1的THP-1源性泡沫细胞(过表达组)、转染EGR1敲低质粒si-EGR1的THP-1源性泡沫细胞(敲低组)、转染EGR1敲低质粒si-EGR1并加入自噬抑制剂氯喹(CQ)的THP-1源性泡沫细胞(敲低+抑制自噬组),采用RT-qPCR法检测细胞自噬标志物[微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62]、铜死亡相关基因[铁氧还蛋白1(FDX1)、二氢硫辛酸转乙酰基酶(DLAT)]mRNA,采用Western blotting法检测细胞自噬标志物、铜死亡相关蛋白。结果显微镜下观察到,细胞胞质内被染为红色或橙色的脂滴,表明THP-1源性泡沫细胞模型构建成功。与对照组相比,模型组细胞LC3 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05),p62、FDX1、DLAT mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05)。与模型组相比,过表达组细胞LC3 mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),p62、FDX1、DLAT mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);敲低组细胞LC3 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05),p62、FDX1、DLAT mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05)。与敲低组相比,敲低+抑制自噬组细胞LC3 mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),p62、FDX1、DLAT mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05)。结论EGR1可通过自噬途径调控THP-1源性泡沫细胞铜死亡相关基因FDX1、DLAT的表达。 展开更多
关键词 早期生长应答因子1 thp-1源性泡沫细胞 铜死亡 自噬 动脉粥样硬化
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构建LILRA2过表达慢病毒载体及建立THP-1-LILRA2稳定转染细胞株
4
作者 黄高翔 魏冬梅 +3 位作者 杨耀 郭夏宁 周凯 栾晶 《基础医学与临床》 2026年第4期498-503,共6页
目的通过构建过表达白细胞免疫球蛋白样受体亚家族A成员2(LILRA2)重组慢病毒载体和建立过表达LILRA2的稳定转染人髓系白血病单核细胞THP-1细胞株,初步探讨LILRA2对单核细胞炎性因子表达的影响。方法采用BamHⅠ/XbaⅠ双酶切pLV-SFFV-MCS-... 目的通过构建过表达白细胞免疫球蛋白样受体亚家族A成员2(LILRA2)重组慢病毒载体和建立过表达LILRA2的稳定转染人髓系白血病单核细胞THP-1细胞株,初步探讨LILRA2对单核细胞炎性因子表达的影响。方法采用BamHⅠ/XbaⅠ双酶切pLV-SFFV-MCS-EF1-ZsGreen1-T2A-Puro骨架载体,构建LILRA2过表达重组慢病毒载体。经慢病毒包装、浓缩、滴度测定后,通过病毒感染实验确定THP-1细胞株的最佳感染复数(MOI=30)和嘌呤霉素筛选浓度(2μg/mL)。慢病毒载体感染THP-1细胞后经嘌呤霉素筛选获得稳定转染细胞株,采用RT-qPCR和Western blot验证LILRA2的表达,验证后采用RT-qPCR检测TNF-α和IL-1β的表达。结果测序证实过表达LILRA2的重组载体构建成功。稳定转染的THP-1中荧光阳性率达到90%以上。THP-1-LILRA2组中LILRA2 mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.05)的表达水平均显著高于THP-1-NC阴性对照组。THP-1-LILRA2组中TNF-α(P<0.05)和IL-1β(P<0.05)mRNA表达水平均显著高于阴性对照组。结论成功构建了LILRA2过表达慢病毒载体且建立了稳定过表达LILRA2的THP-1细胞株,LILRA2过表达能够上调单核细胞炎性因子的表达。 展开更多
关键词 白细胞免疫球蛋白样受体亚家族A成员2(LILRA2) thp-1细胞 慢病毒载体 促炎性因子
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α-突触核蛋白对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇蓄积和LOX-1表达的影响
5
作者 吴向斌 夏忠斌 +5 位作者 桂敏 谈丹丹 柴竞艳 官燕琴 鲍兵 陈志颖 《广州医药》 2026年第2期176-181,201,共7页
目的探索α-突触核蛋白(α-Syn)干预对人单核细胞白血病细胞系(THP-1)巨噬细胞源性泡沫细胞的影响。方法通过佛波酯(PMA)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)构建THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,使用不同浓度(33、66、100、133 nmol/L)α-Syn... 目的探索α-突触核蛋白(α-Syn)干预对人单核细胞白血病细胞系(THP-1)巨噬细胞源性泡沫细胞的影响。方法通过佛波酯(PMA)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)构建THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,使用不同浓度(33、66、100、133 nmol/L)α-Syn处理泡沫细胞,随后检测细胞胆固醇含量和炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-8(IL-8)的mRNA表达以及核因子κB(NF-κB)和凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的蛋白表达变化。结果高剂量(100和133 nmol/L)α-Syn处理可以减少THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇的含量(P<0.05),并且减少IL-1β、IL-6和IL-8的mRNA表达(P<0.05)。进一步发现(100 nmol/L和133 nmol/L)α-Syn可以降低THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞p-NF-κB和LOX-1的蛋白表达(P<0.05)。结论α-Syn可以降低THP-1源性巨噬细胞泡沫细胞胆固醇蓄积和炎症反应,可能是通过下调p-NF-κB和LOX-1蛋白表达。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 人单核细胞白血病细胞系巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇 炎症
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岩藻糖基转移酶7失调对脂多糖诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响
6
作者 易丽君 李红 《中国生物制品学杂志》 2025年第7期790-795,共6页
目的 探讨岩藻糖基转移酶7(fucosyltransferase 7,Fut7)失调对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响,以期为临床相关疾病的炎症发生机制的研究提供实验依据。方法 采用不同浓度LPS(0、0.5、1、2、4、10μg/... 目的 探讨岩藻糖基转移酶7(fucosyltransferase 7,Fut7)失调对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响,以期为临床相关疾病的炎症发生机制的研究提供实验依据。方法 采用不同浓度LPS(0、0.5、1、2、4、10μg/mL)作用THP-1细胞,RT-qPCR法检测细胞中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因mRNA转录水平,确定建立炎性细胞模型的LPS刺激浓度。采用最佳浓度LPS刺激THP-1细胞,建立细胞炎性反应模型,并采用RT-qPCR法检测Fut7、小分子药物唾液酸路易斯寡糖X(sialyl Lewis X,sLeX)和FutT活性抑制剂SGN-2FF对炎性细胞模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平的影响。结果 确定建立炎性细胞模型的LPS刺激浓度为4μg/mL。Fut7过表达及sLeX可明显增加LPS诱导THP-1细胞炎性反应模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平(t=3.93~30.05,P均<0.05);Fut7抑制表达可明显降低LPS诱导THP-1细胞炎性反应模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平(t=6.89~39.50,P均<0.01),SGN-2FF可明显降低IL-1β、IL-6、IL-8基因mRNA转录水平(t=5.17~6.44,P均<0.001),但TNF-α基因mRNA的转录水平则明显升高(t=12.31,P<0.001)。结论 Fut7过表达及sLeX可通过促进炎性细胞因子的表达加剧LPS诱导THP-1细胞的炎性反应;Fut7抑制表达及Fut7活性抑制剂SGN-2FF可有效缓解炎症,为炎性疾病治疗提供了新策略。 展开更多
关键词 岩藻糖基转移酶7 人单核细胞thp-1 唾液酸路易斯寡糖X 炎性反应 细胞因子
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红曲黄色素对脂多糖诱导的THP-1细胞和RAW264.7细胞炎症的影响 被引量：1
7
作者 毛禹清 高坤辉 +1 位作者 刘曾丽 陈勉华 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第9期107-113,共7页
为研究红曲黄素C(monascinol,MC)、红曲素(monascin,MS)和红曲黄素(ankaflavin,AK)的抗炎机理,从红曲菌CP-1固态发酵后得到的红曲米中提取分离出红曲黄色素MC,并使用薄层层析法(thin-layer chromatography,TLC)和HPLC进行纯度分析。构建... 为研究红曲黄素C(monascinol,MC)、红曲素(monascin,MS)和红曲黄素(ankaflavin,AK)的抗炎机理,从红曲菌CP-1固态发酵后得到的红曲米中提取分离出红曲黄色素MC,并使用薄层层析法(thin-layer chromatography,TLC)和HPLC进行纯度分析。构建2μg/mL的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人THP-1巨噬细胞和小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症模型,并进行形态学观察,利用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法测定细胞活力,以MS和AK作为参比,实时荧光定量法(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定红曲黄色素MC对脂多糖诱导的THP-1细胞和RAW264.7细胞中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。结果表明,提取出的红曲黄色素MC纯度能达到98%以上,可用于细胞实验。6μg/mL的MC、MS和AK诱导THP-1细胞24 h后,细胞存活率均能达到90%以上,符合实验要求。6μg/mL的MC、MS和AK处理THP-1细胞和RAW264.7细胞24 h后,在转录水平和翻译水平上均显著抑制了IL-6的表达(P<0.01)。MC在转录水平和翻译水平上显著抑制了THP-1细胞和RAW264.7细胞中TNF-α的表达量(P<0.01),MS和AK仅在翻译水平上显著抑制了RAW264.7细胞TNF-α的分泌(P<0.01)。 展开更多
关键词 红曲黄色素 thp-1细胞 RAW264.7细胞 抗炎作用 促炎细胞因子
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CLEC4A基因对THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化的影响
8
作者 王德隆 高振盛 孙业盈 《滨州医学院学报》 2025年第5期449-454,460,共7页
目的探讨C型凝集素结构域家族4成员A(C-type lectin domain family 4 member A,CLEC4A)基因对THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化的影响。方法在THP-1细胞系中采用CRISPR/Cas9基因敲除技术和瞬时转染技术分别敲除和过表达CLEC4A,采用蛋白免疫... 目的探讨C型凝集素结构域家族4成员A(C-type lectin domain family 4 member A,CLEC4A)基因对THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化的影响。方法在THP-1细胞系中采用CRISPR/Cas9基因敲除技术和瞬时转染技术分别敲除和过表达CLEC4A,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)以及流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测CLEC4A的敲除情况,采用逆转录定量聚合酶链式反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和流式细胞术检测CLEC4A的过表达情况;对THP-1细胞进行M1型诱导,分别采用RT-qPCR法、Western blot、流式细胞术和免疫荧光法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、人类白细胞抗原-DR亚型(human leukocyte antigen-DR isotype,HLA-DR)和CD80的表达变化。结果本研究采用CRISPR/Cas9基因编辑技术实现了CLEC4A基因的高效敲除(敲除效率>95%),通过瞬时转染技术使CLEC4A表达水平上调至200%。基因功能实验显示,CLEC4A的敲除显著降低了脂多糖和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)诱导的M1型巨噬细胞标志物iNOS、HLA-DR和CD80的表达。相反,CLEC4A过表达组中上述标志物的表达量显著增加。结论CLEC4A基因可以促进THP-1细胞向M1型巨噬细胞极化。 展开更多
关键词 thp-1 C型凝集素结构域家族4成员A M1型巨噬细胞极化
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硫化氢对THP-1来源巨噬细胞炎症反应的调控作用研究
9
作者 马文霞 马佳艺 +4 位作者 郑雨竹 王晓茹 丁惠国 王珊珊 吕翎娜 《北京医学》 2025年第12期1031-1038,共8页
目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对THP-1来源巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞后,采用H2S供体GYY4137(5.0μM)进行处理,采用流式细胞术和定量实时聚合酶链式反应检测相关蛋白及mRNA表达水平。将... 目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对THP-1来源巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞后,采用H2S供体GYY4137(5.0μM)进行处理,采用流式细胞术和定量实时聚合酶链式反应检测相关蛋白及mRNA表达水平。将处理前后的巨噬细胞进行转录组测序及分析,筛选差异表达基因(differentially ex⁃pressed genes,DEGs),采用京都基因与基因组百科全书数据库对DEGs进行通路和功能注释,并结合基因本体(gene on⁃tology,GO)分析和基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA),进一步揭示相关基因的生物学功能及其调控通路。基于相邻基因重复实例的搜索工具数据库及Cytoscape软件分析相互作用关键基因。结果体外实验结果显示,低浓度H2S处理可显著降低巨噬细胞促炎因子IL-6和COX-2的表达(P<0.05)。共筛选出300个DEGs,包括121个上调基因和179个下调基因。GO功能富集显示,DEGs显著富集于Ⅱ型IFN产生和正向调节、血管相关平滑肌细胞增殖的正向调节等功能通路;GSEA结果显示,H2S处理后,巨噬细胞中与促炎反应相关的基因集呈显著下调趋势,包括TNF、IL-1α、CCL4等多种经典促炎因子。通过蛋白质-蛋白质相互作用网络分析,进一步筛选出以GNG2为核心的15个炎症反应关键基因。结论低浓度H2S处理后,巨噬细胞表现出显著的炎症抑制特性。 展开更多
关键词 硫化氢 thp-1来源巨噬细胞 炎症反应 调控作用
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刚地弓形虫棒状体蛋白16过表达人单核THP⁃1细胞的转录组学分析
10
作者 李佳铭 陈梅 +2 位作者 党甜甜 殷荷 赵志军 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第3期317-323,共7页
目的转录组测序分析Ⅰ型RH株刚地弓形虫棒状体蛋白16(ROP16)过表达人单核THP⁃1细胞的基因表达谱变化,筛选免疫应答相关驱动基因。方法将人单核THP⁃1细胞接种于96孔板,过表达组中加入ROP16过表达慢病毒,对照组加入等量培养基,72 h后在荧... 目的转录组测序分析Ⅰ型RH株刚地弓形虫棒状体蛋白16(ROP16)过表达人单核THP⁃1细胞的基因表达谱变化,筛选免疫应答相关驱动基因。方法将人单核THP⁃1细胞接种于96孔板,过表达组中加入ROP16过表达慢病毒,对照组加入等量培养基,72 h后在荧光显微镜下观察转染情况。TRIzol法提取过表达组和对照组人单核THP⁃1细胞总RNA,并进行转录组测序,筛选差异表达基因(DEG),绘制火山图。对DEG进行聚类分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)代谢通路富集分析和基因本体(GO)功能富集分类,筛选出过表达组和对照组的DEG,并进行实时荧光定量PCR(qPCR)验证。两组间比较采用独立样本t检验。结果荧光显微镜下过表达组90%以上的人单核THP⁃1细胞表达绿色荧光,对照组细胞未见绿色荧光。qPCR结果表明,过表达组ROP16 mRNA相对转录水平(1083.484±68.990)较对照组(1.000±0)显著上调(t=22.9,P<0.01),表明已构建稳定表达ROP16的THP⁃1细胞株。共筛选出312个DEG,其中193个表达上调,119个表达下调。KEGG注释结果显示,注释到有机体系统的DEG占比最高(24.2%),显著富集于85个条目,其中免疫系统显著富集的基因有47个。KEGG富集分析发现,DEG富集至20条信号通路上,Th1和Th2细胞分化、自然杀伤细胞介导的细胞毒性及IL⁃17信号通路等3条与免疫系统相关的通路分别富集DEG 6、7和8个。GO功能注释结果显示,共有309个DEG注释到生物过程、细胞组分和分子功能等3个一级节点分类下的55个二级节点分类中。GO富集结果显示,DEG显著富集于炎症反应、肿瘤坏死因子产物负调控、细胞因子产生、γ干扰素产生的正调节,以及与免疫应答相关的通路中。qPCR检测发现ROP16过表达组中MAN2B1、FOS、C1QA的mRNA相对转录水平(25.994±0.382、60.584±2.968、36.759±0.180)均高于对照组(1.000±0.039、1.000±0.015、1.000±0)(t=92.00、28.39、280.7,P<0.05或0.01),LMNB1、IL⁃6和IL⁃12 mRNA相对转录水平(0.728±0.054、0.517±0.073、0.587±0.015)均低于对照组(1.052±0.027、1.000±0.039、1.000±0.010)(t=7.64、8.24、33.62,P<0.05或0.01)。结论Ⅰ型RH株弓形虫效应分子ROP16过表达后,人单核THP⁃1细胞基因表达谱发生了明显变化。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 棒状体蛋白16 人单核thp⁃1细胞 转录组 免疫应答
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刚地弓形虫Ⅰ/Ⅲ型ROP16调控TAF15对THP‑1细胞影响及机制研究
11
作者 殷荷 马磊 +2 位作者 党甜甜 李佳铭 赵志军 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第1期103-111,共9页
目的探究刚地弓形虫Ⅰ、Ⅲ型棒状体蛋白16(ROP16)通过调控TATA结合蛋白相关因子15(TAF15)对人单核细胞白血病细胞(THP-1)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法将Ⅰ、Ⅲ型ROP16过表达慢病毒转染至THP-1细胞,构建稳定表达ROP16的细胞株(THP-1... 目的探究刚地弓形虫Ⅰ、Ⅲ型棒状体蛋白16(ROP16)通过调控TATA结合蛋白相关因子15(TAF15)对人单核细胞白血病细胞(THP-1)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法将Ⅰ、Ⅲ型ROP16过表达慢病毒转染至THP-1细胞,构建稳定表达ROP16的细胞株(THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ),以转染空载体慢病毒的细胞为空载体对照组(THP-1-Venus),未转染细胞为对照组(THP-1),通过实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blotting)验证过表达效果。利用免疫沉淀-质谱联用技术(IP-MS)在THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ细胞株中预测ROP16的互作蛋白,并通过RT-qPCR和Western blotting检测细胞中互作蛋白TAF15的表达。将3条作用于TAF15基因不同位点的小干扰RNA(siRNA 1215、siRNA 825、siRNA 288)分别干扰THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ细胞株,分为THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA 1215/825/288组,同时设未干扰对照组(THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC),Western blotting验证TAF15沉默效果。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)与流式细胞术检测各组细胞增殖及凋亡情况,Western blotting检测细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)、周期素依赖性激酶6(CDK6)、G1/S特异性周期蛋白(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(caspase-9)及磷酸化信号转导和转录激活因子3(P-STAT3)蛋白的表达。结果THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组ROP16 mRNA的相对转录水平为2679.427±250.600、2395.410±325.700,均高于THP-1-Venus组(1.036±0.102)(F=153.3,P<0.01);ROP16蛋白的相对表达水平为4.526±0.020、5.457±0.250,均高于THP-1-Venus组(1.688±0.653)(F=76.4,P<0.01)。TAF15为Ⅰ、Ⅲ型ROP16的互作蛋白,THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ组TAF15 mRNA的相对转录水平为6.027±0.313、5.567±0.088,均高于THP-1-Venus组(0.985±0.027)(F=869.4,P<0.01);TAF15蛋白的相对表达水平为1.789±0.145、1.593±0.029,均高于THP-1-Venus组(1.010±0.365)(F=50.6,P<0.01)。TAF15 siRNA转染48 h后,THP-1-ROP16Ⅰ+siRNA 1215/825/288组TAF15蛋白的相对表达水平分别为0.384±0.047、0.246±0.072、0.125±0.026,均低于THP-1-Venus组(1.007±0.019)(F=313.1,P<0.01);THP-1-ROP16Ⅲ+siRNA 1215/825/288组细胞TAF15蛋白的相对表达水平分别为0.186±0.020、0.180±0.015、0.112±0.019,均低于THP-1-Venus组(0.995±0.052)(F=3046.0,P<0.01)。THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC组细胞CCK-8实验A450值分别为0.803±0.015、0.813±0.011,低于THP-1-Venus组(0.997±0.010、0.995±0.016)(t=19.2、24.0,均P<0.01);THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA 825/288组A450值分别为0.986±0.010、0.983±0.004,0.980±0.006、0.984±0.010(F=3.5、2.9,均P>0.05)。THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA NC组细胞凋亡率分别为(38.19±0.45)%、(38.06±0.84)%,高于THP-1-Venus组的(28.41±0.69)%(t=20.5、17.7,均P<0.01);THP-1-ROP16Ⅰ/Ⅲ+siRNA 825/288组分别为(30.03±1.83)%、(28.78±0.72)%,(29.33±0.80)%、(28.94±0.58)%(F=1.5、0.4,均P>0.05)。THP-1-ROP16Ⅰ+siRNA NC组p21、Bax、caspase-9、cleaved caspase-3及P-STAT3蛋白的相对表达水平分别为1.322±0.027、1.493±0.030、1.349±0.021、1.324±0.020、10.500±1.005,均高于THP-1-Venus组(1.000±0.026、0.996±0.016、0.989±0.019、0.994±0.010、1.000±0.001)(t=14.8、25.4、22.3、25.0、15.6,均P<0.01);CDK6、CyclinD1及Bcl-2蛋白的相对表达水平分别为0.387±0.040、0.424±0.030、0.438±0.035,均低于THP-1-Venus组(0.989±0.018、1.000±0.074、0.991±0.016)(t=23.6、12.4、25.0,均P<0.01)。THP-1-ROP16Ⅲ+siRNA NC组p21、Bax、caspase-9、cleaved caspase-3及P-STAT3蛋白的相对表达水平分别为1.409±0.020、1.493±0.030、1.349±0.021、1.324±0.020、16.210±0.664,均高于THP-1-Venus组(1.004±0.032、0.996±0.015、0.989±0.019、0.994±0.010、1.000±0.001)(t=18.7、25.4、22.3、25.0、39.7,均P<0.01);CDK6、CyclinD1及Bcl-2蛋白的相对表达水平分别为0.418±0.021、0.357±0.040、0.411±0.019,均低于THP-1-Venus组(1.000±0.001、1.001±0.042、0.991±0.016)(t=47.7、19.1、40.7,均P<0.01)。结论弓形虫Ⅰ、Ⅲ型ROP16蛋白可通过促进TAF15的表达抑制THP-1细胞增殖、促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制细胞内STAT3信号通路的活化有关。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 棒状体蛋白16 TATA结合蛋白相关因子15 thp‑1细胞
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THPS对硫化亚铁去除效果的研究 被引量：4
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作者 吴晗 张毅敏 +1 位作者 曹丽丽 高月香 《环境工程》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1-4,共4页
输油管道及炼油装置中硫化亚铁(FeS)的形成及累积是严重事故的安全隐患之一,传统方法去除FeS存在种种缺陷。四羟甲基硫酸磷(THPS)是一种价格经济且环境友好的络合剂,能有效溶解FeS形成的水溶性络合物。探讨了pH值、反应时间、m(THPS)/m(... 输油管道及炼油装置中硫化亚铁(FeS)的形成及累积是严重事故的安全隐患之一,传统方法去除FeS存在种种缺陷。四羟甲基硫酸磷(THPS)是一种价格经济且环境友好的络合剂,能有效溶解FeS形成的水溶性络合物。探讨了pH值、反应时间、m(THPS)/m(FeS)、实验温度对FeS去除率的影响。实验结果表明:在pH=5、m(THPS)/m(FeS)为5∶1,反应温度为40℃时,THPS对FeS的去除效果好,去除率达95.2%。另外,pH值、反应时间、m(THPS)/m(FeS)对FeS去除率具有显著性影响(P<0.05);但是实验温度对FeS去除率没有显著性影响(P>0.05)。 展开更多
关键词 四羟甲基硫酸磷(thpS) 硫化亚铁 去除效果 m(thpS)/m(FeS) 温度 PH
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630 nm发光二极管照射脂多糖刺激的THP-1来源巨噬细胞的多组学分析
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作者 任丹丹 毕婉莹 +4 位作者 谢文婷 吴佳欣 宋武琦 张凤民 刘海亮 《照明工程学报》 2025年第2期39-48,共10页
发光二极管(Light Emitting Diode,LED)作为一种低能量光疗(Low-level Light Therapy,LLLT),已被证实可以治疗肺损伤、肌腱病、神经损伤、类风湿性关节炎等疾病。本研究采用630 nm LED红光作为光源,分析630 nm LED红光照射脂多糖(Lipopo... 发光二极管(Light Emitting Diode,LED)作为一种低能量光疗(Low-level Light Therapy,LLLT),已被证实可以治疗肺损伤、肌腱病、神经损伤、类风湿性关节炎等疾病。本研究采用630 nm LED红光作为光源,分析630 nm LED红光照射脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激的人单核细胞白血病细胞(THP-1)来源巨噬细胞的作用机制。用LPS处理THP-1细胞,并使用强度为28.8 J/cm^(2)的630 nm LED红光照射,随后检测促炎因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的mRNA表达水平及采用非标定量蛋白质组学及磷酸化蛋白质组学分析方法筛选差异表达蛋白并进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和KEGG富集;通过STRING在线网站(https://cn.string-db.org/)和Cytoscape软件分析蛋白质互作情况。结果显示,经LED照射的THP-1细胞CXCL9、CXCL10、CXCL11的mRNA表达水平较对照组显著降低。蛋白质组学结果显示,630 nm LED红光照射巨噬细胞后,23个差异表达蛋白能够显著富集在转录调节复合体、病毒防御反应的调控等通路。磷酸化蛋白质组学结果显示,有178个位点的修饰水平能够显著富集在核斑点、钙粘蛋白结合、蛋白信号转导、蛋白质定位的正向调控、肌动蛋白细胞骨架等通路中。结合多组学分析,我们推测630 nm LED红光可能是通过多种途径来实现抗炎作用的。 展开更多
关键词 发光二极管 thp-1 630 nm红光 蛋白质组学 磷酸化蛋白质组学 光生物调节
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蓝桉油对单核细胞THP-1核因子-κB核转位活化的影响 被引量：7
14
作者 周建娅 唐法娣 +3 位作者 毛国根 邵杰 王砚 卞如濂 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2003年第4期315-318,326,共5页
目的 :探讨蓝桉油对人单核细胞 THP- 1细胞株核因子 - κB(NF- κB)核转位活化的影响。方法 :蓝桉油 (1、10、10 0 mg/L,30 min)预处理 THP- 1细胞 ,经脂多糖 (L PS,1mg/L,30 min)刺激后 ,采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚... 目的 :探讨蓝桉油对人单核细胞 THP- 1细胞株核因子 - κB(NF- κB)核转位活化的影响。方法 :蓝桉油 (1、10、10 0 mg/L,30 min)预处理 THP- 1细胞 ,经脂多糖 (L PS,1mg/L,30 min)刺激后 ,采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚焦显微镜 ,测定 THP- 1细胞 NF- κB p6 5亚基 (NF- κB/p6 5 )定位 ;Western- blot法分析细胞核内NF- κB/p6 5水平。结果 :免疫荧光分析显示 ,正常细胞 NF- κB/p6 5荧光标记主要分布于胞浆区 ,核区很少 ,L PS刺激后 NF- κB/p6 5荧光标记浓集于核区 ,胞浆区少见 ;但经蓝桉油 (10 0 mg/L)预处理后 ,LPS刺激的 THP- 1细胞NF- κB/p6 5荧光标记则主要位于胞浆区 ;Western- blot分析显示 ,在正常 THP- 1细胞核蛋白中有低水平的 NF- κB/p6 5表达 ,经 L PS刺激 ,核内 NF- κB/p6 5表达明显增高 ;蓝桉油预处理后 ,可以抑制 LPS诱导的核内 NF- κB/p6 5高水平表达 ,且呈剂量依赖关系。结论 :蓝桉油预处理阻止了 LPS诱导的 NF- κB/p6 5核转位 ,从而抑制了其活性功能的发挥。蓝桉油可抑制 LPS刺激引起的 NF- κB核转位活化。 展开更多
关键词 脂多糖类 核因子-ΚB 单核细胞 蓝桉油 显微镜检查 共焦 thp一1细胞株 WESTERN-BLOT法
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THP盐与双氰胺原位结合鞣研究 被引量：12
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作者 李亚 单志华 +3 位作者 蒋岚 邵双喜 胡敏杰 史楷岐 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期797-800,共4页
确定了四羟甲基氯化鏻(THPC)与皮粉的最佳作用条件,研究了THPC单独用作鞣剂及其与双氰胺原位结合鞣时pH、用量对鞣革收缩温度(Ts)的影响,并对四羟甲基鏻盐(THP盐)鞣革性能进行了分析。实验结果表明,THPC与皮粉的最佳作用条件为pH=10.0,w... 确定了四羟甲基氯化鏻(THPC)与皮粉的最佳作用条件,研究了THPC单独用作鞣剂及其与双氰胺原位结合鞣时pH、用量对鞣革收缩温度(Ts)的影响,并对四羟甲基鏻盐(THP盐)鞣革性能进行了分析。实验结果表明,THPC与皮粉的最佳作用条件为pH=10.0,w(THPC)=60%(以皮粉质量计),温度40℃,时间1.5 h;THPC单独用作鞣剂时,pH=6.0时,Ts=75.5℃;在与双氰胺结合鞣时,四羟甲基硫酸鏻(THPS)的鞣制效果优于THPC;THP盐与双氰胺最佳摩尔比为n(THPS)∶n(双氰胺)=0.41∶1,n(THPC)∶n(双氰胺)=1.76∶1;THPS与双氰胺结合鞣革的抗张强度和撕裂强度分别为11.45 MPa、20.76 N/mm,氧指数为34.7%,有一定的阻燃性。 展开更多
关键词 thp盐 原位结合鞣 无铬鞣
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TCbHP、THP及AC-THP3种化疗方案治疗HER2阳性乳腺癌的疗效及生存预后分析 被引量：8
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作者 贺宁 王雪 董雪 《保健医学研究与实践》 2023年第11期67-72,共6页
目的分析曲妥珠单抗和帕妥珠单抗(HP)联合紫杉类+铂类(TCb HP)、紫杉类单药(THP)及蒽环类序贯紫杉类(AC-THP)3种化疗方案治疗人表皮生长因子受体-2(HER2)阳性乳腺癌的疗效及患者的生存预后情况。方法选取2019年1月—2021年3月中国医学... 目的分析曲妥珠单抗和帕妥珠单抗(HP)联合紫杉类+铂类(TCb HP)、紫杉类单药(THP)及蒽环类序贯紫杉类(AC-THP)3种化疗方案治疗人表皮生长因子受体-2(HER2)阳性乳腺癌的疗效及患者的生存预后情况。方法选取2019年1月—2021年3月中国医学科学院肿瘤医院收治的120例HER2阳性乳腺癌患者为研究对象,按研究对象接受新辅助治疗方案的不同分为3组,分别是TCb HP组(n=52)、THP组(n=47)、AC-THP组(n=21)。比较3组患者基线资料、新辅助治疗疗效、手术后HER2表达情况、化疗期间毒副反应发生情况,并统计术后3组患者的病理完全缓解(p CR)率及2年无病生存率(DFS)。结果3组患者的年龄、月经状态、肿瘤家族史、肿瘤大小、N分期、TNM分期、组织学分级、激素受体状态、手术方式、辅助放疗情况等比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。3组患者客观缓解率(ORR)和疾病控制率(DCR)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。3组患者手术后HER2表达情况比较,差异有统计学意义(P<0.05),且TCb HP组患者的HER2阴性表达率(28.85%)明显高于THP组(8.51%)(P<0.016)。化疗期间,3组患者骨髓抑制、肝功能损害、心脏毒性及恶心呕吐等毒副反应发生情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。术后3组患者的p CR率分别为48.08%、44.68%、47.62%,3组比较,差异无统计学意义(P>0.05);随访2年,3组患者的DFS分别为90.38%、70.21%、80.95%,3组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TCbHP、THP及AC-THP 3种化疗方案治疗HER2阳性乳腺癌均有较佳疗效和良好安全性,但TCb HP方案DFS更高,可考虑作为治疗HER2阳性乳腺癌的优选化疗方案。 展开更多
关键词 乳腺癌 HER2阳性 TCbHP thp AC-thp 化疗方案 生存预后
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淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对THP-1细胞分泌细胞因子的影响 被引量：29
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作者 刘铁汉 王本祥 +4 位作者 王毅 吴立军 南陆彦 永田年 池岛乔 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期245-248,共4页
目的 :比较淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对人组织细胞瘤THP 1细胞分泌 4种细胞因子的影响。方法 :放射免疫测定方法 (RIA)。结果 :在LPS和PMA存在下 ,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物 (宝藿苷I和淫羊藿苷元 )对IL 6的产生有促进作用 ,代谢物的作... 目的 :比较淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对人组织细胞瘤THP 1细胞分泌 4种细胞因子的影响。方法 :放射免疫测定方法 (RIA)。结果 :在LPS和PMA存在下 ,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物 (宝藿苷I和淫羊藿苷元 )对IL 6的产生有促进作用 ,代谢物的作用更强 ,对IL 8的产生有一定的抑制作用。当LPS和PMA不存在时 ,对IL 6的产生无明显影响 ,而对IL 8的产生则有促进作用。不论LPS和PMA存在与否 ,原苷对TNFα的产生有抑制作用 ,原苷及其肠菌代谢产物对IL 1α的产生均有明显抑制作用。结论 :在不同的实验条件下 ,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对各种炎症性细胞因子的产生均有特异的调节作用。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 肠菌代谢物 thp-1细胞 炎症
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LDL、oxLDL对THP-1巨噬细胞PCSK9、LDLR表达的影响研究 被引量：10
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作者 刘录山 程艳丽 +6 位作者 谢闵 杨琼 潘利红 姜志胜 唐朝克 危当恒 唐志晗 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第5期540-547,共8页
为研究低密度脂蛋白(LDL)、氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1源性巨噬细胞中PCSK9、LDLR表达的影响及两者之间的关系.分别用0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的LDL和0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的oxLDL处理THP-1巨噬细胞,油红O染... 为研究低密度脂蛋白(LDL)、氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1源性巨噬细胞中PCSK9、LDLR表达的影响及两者之间的关系.分别用0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的LDL和0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的oxLDL处理THP-1巨噬细胞,油红O染色检测细胞荷脂情况,免疫荧光检测THP-1巨噬细胞上PCSK9蛋白表达及分布情况,RT-PCR、Western blot检测THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达.结果发现,不同浓度LDL处理THP-1巨噬细胞后,随着LDL浓度的增大,细胞内脂滴数目略有增多.免疫荧光染色发现,PCSK9在THP-1巨噬细胞上的表达随LDL浓度的增加而增多,胞浆内定位于某一特定细胞器中;RT-PCR、Western blot检测发现,LDL可以呈浓度依赖性下调THP-1巨噬细胞中LDLR的表达和上调PCSK9的表达.不同浓度oxLDL处理THP-1巨噬细胞后,随oxLDL浓度的增大,脂滴颗粒明显增加;oxLDL处理对THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达影响均不明显.研究结果表明:THP-1巨噬细胞上,同时有PCSK9和LDLR的表达,且PCSK9定位于胞浆中某一特定细胞器;oxLDL对THP-1巨噬细胞LDLR和PCSK9表达没有影响;LDL能够降低THP-1巨噬细胞表面LDLR的表达,同时上调PCSK9表达,初步说明在THP-1巨噬细胞中,两者有一定的相关性. 展开更多
关键词 低密度脂蛋白(LDL) 氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL) PCSK9/NARC-1 低密度脂蛋白受体(LDLR) 动脉粥样硬化 thp-1巨噬细胞
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P38MAPK信号转导通路在大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中的作用 被引量：9
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作者 廖洋 陈建斌 +3 位作者 汤为学 葛群芳 卢前微 杨泽松 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1439-1443,共5页
目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理... 目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理后细胞内磷酸化P38MAPK(P-p38MAPK)表达及分布变化;Western blot检测大蒜素处理前后细胞内P-p38MAPK和Fas蛋白表达量的变化。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性。其72h中效浓度(IC50)为12.8 mg.L-1。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。免疫细胞化学法检测药物处理后P-p38MAPK表达增加,主要分布于细胞核与细胞浆,而阴性对照组仅弱表达。Western blot结果分析P-p38MAPK,Fas蛋白表达量随大蒜素浓度的增加而增加,呈剂量依赖性。其阴性组、72 h的1/2 IC50组、IC50组P-p38MAPK蛋白表达水平(相对灰度值)分别为0.2598±0.0132,0.3612±0.008 3,0.5056±0.0055;Fas蛋白表达水平分别为0.287 4±0.0089,0.426 8±0.0079和0.597 1±0.0109,差别均有显著性意义(P<0.01)。结论:大蒜素可诱导THP-1细胞凋亡,其诱导凋亡机制可能是通过激活P-p38MAPK/Fas途径实现。 展开更多
关键词 大蒜素 thp-1细胞 细胞凋亡 磷酸化P38MAP K 信号转导
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肉苁蓉多糖对THP-1细胞吞噬作用的影响及其机理研究 被引量：12
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作者 张涛 许文胜 +5 位作者 贾彦斌 白国荣 高静 崔丽霞 郎力河 张玉娟 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期148-150,155,共4页
将单核细胞株THP-1按照随机数字表随机分为观察组和对照组两组,正常的观察组给予肉苁蓉多糖培养液,根据肉苁蓉多糖浓度不同又分为10、50、100μg/L组,对照组不添加肉苁蓉多糖培养液,实验组中的不同浓度组、对照组,每组各24例.比较各组TH... 将单核细胞株THP-1按照随机数字表随机分为观察组和对照组两组,正常的观察组给予肉苁蓉多糖培养液,根据肉苁蓉多糖浓度不同又分为10、50、100μg/L组,对照组不添加肉苁蓉多糖培养液,实验组中的不同浓度组、对照组,每组各24例.比较各组THP-1细胞吞噬率、吞噬指数以及细胞因子分泌水平,以此研究肉苁蓉多糖对THP-1细胞吞噬作用的影响并探讨其发生机理.结果显示,观察组中10、50、100μg/L组单核巨噬细胞吞噬率分别为(17.42±3.19)%、(23.32±3.82)%、(29.41±4.11)%,均高于对照组的(9.34±1.26)%,比较差异有统计学意义(F=162.63,P<0.01);10、50、100μg/L组单核巨噬细胞吞噬指数分别为(0.45±0.13)、(0.67±0.19)、(0.82±0.21),均高于对照组的(0.22±0.09),比较差异有统计学意义(F=62.60,P<0.01);10、50、100μg/L组IFN-γ分别为(4.21±1.11)、(7.38±1.86)、(9.51±2.10)mg/L,均高于对照组(0.79±0.06)mg/L,比较差异有统计学意义(F=152.74,P<0.01);10、50、100μg/L组IL-1分别为(24.11±4.15)、(74.60±11.21)、(103.61±19.65)mg/L,均高于对照组(10.21±1.39)mg/L,比较差异有统计学意义(F=343.15,P<0.01),各指标进一步采用Newman-Keals法进行两两比较均有统计学意义(P<0.01).由此认为,肉苁蓉多糖可能通过增强THP-1细胞吞噬能力和促细胞因子释放发挥免疫调节功能. 展开更多
关键词 肉苁蓉多糖 thp-1细胞 吞噬作用 机理
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