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人参皂苷Rg1对人白血病TF-1细胞EPOR信号通路的影响 被引量：15
1
作者 夏菁 李静 +6 位作者 左国伟 赵亮 魏强 游智梅 李丹阳 刘泽洪 陈地龙 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期113-120,共8页
目的:探讨人参皂苷Rg1诱导急性髓系白血病M6型人红白血病TF-1细胞凋亡及其对红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)通路的影响,以及可能的机制。方法:不同浓度人参皂苷Rg1处理TF-1细胞后,应用CCK-8(cell counting kit-8)法检... 目的:探讨人参皂苷Rg1诱导急性髓系白血病M6型人红白血病TF-1细胞凋亡及其对红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)通路的影响,以及可能的机制。方法:不同浓度人参皂苷Rg1处理TF-1细胞后,应用CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞的增殖活性,FCM法检测并在透射电子显微镜下观察人参皂苷Rg1诱导TF-1细胞的凋亡,FCM法和免疫荧光法检测TF-1细胞中EPOR蛋白的表达水平和分布情况,实时荧光定量-PCR法检测TF-1细胞EPOR mRNA的表达,蛋白质印迹法检测人参皂苷Rg1作用后TF-1细胞的红细胞生成素(erythropoietin,EPO)反应性以及TF-1细胞中EPOR、磷酸化EPOR、酪氨酸激酶JAK2(Janus tyrosine kinase 2)、磷酸化JAK2、信号转导和转录激活因子5(signal transducers and activators of transcription 5,STAT5)、磷酸化STAT5、Bax、Bcl-2和caspase-3(激活型)蛋白的表达。结果:人参皂苷Rg1(12.5、25、50、100和200μmol/L)作用24、48和72 h后,TF-1细胞的增殖受到抑制(P<0.05)。人参皂苷Rg1(12.5、25和50μmol/L)作用48 h后,TF-1细胞的早期凋亡率高于人参皂苷Rg1未处理的对照组(P<0.05),透射电子显微镜下可见TF-1细胞出现凋亡变化。FCM法和免疫荧光检测结果均显示,人参皂苷Rg1作用后TF-1细胞膜表面EPOR的表达明显减少,并且TF-1细胞EPOR mRNA的表达水平下调(P<0.05)。与对照组比较,人参皂苷Rg1作用后TF-1细胞EPOR总蛋白的表达水平无明显变化,但降低了TF-1细胞对EPO的反应性,磷酸化EPOR的表达水平明显下调,Bax和caspase-3(激活型)蛋白的表达水平明显上调,Bcl-2以及EPOR下游JAK2、磷酸化JAK2、STAT5和磷酸化STAT5的表达水平均明显下调(P均<0.05)。结论:人参皂苷Rg1可明显抑制TF-1细胞的增殖并促进其凋亡,其促凋亡机制可能与降低TF-1细胞对EPO的反应性,下调EPOR下游相关蛋白的表达并激活caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 白血病 细胞凋亡 受体 红细胞生成素 人参皂苷RG1 细胞 tf-1
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凋亡相关蛋白TFAR19在TF-1细胞凋亡中出现细胞核转位 被引量：25
2
作者 陈英玉 孙荣华 +4 位作者 韩文玲 张颖妹 宋泉声 狄春辉 马大龙 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期97-100,共4页
目的 :探讨凋亡相关分子TFAR19在TF 1细胞凋亡过程中的表达及定位。方法 :以TFAR19的单克隆抗体为工具 ,采用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等研究手段 ,观察细胞凋亡过程中TFAR19分子的表达水平和细胞内定位 ,分析其与... 目的 :探讨凋亡相关分子TFAR19在TF 1细胞凋亡过程中的表达及定位。方法 :以TFAR19的单克隆抗体为工具 ,采用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等研究手段 ,观察细胞凋亡过程中TFAR19分子的表达水平和细胞内定位 ,分析其与细胞膜磷脂酰丝氨酸 (phosphatidylserine,PS)以及细胞核DNA片段化的关系。结果 :TFAR19蛋白在撤除GM CSF的TF 1细胞中表达水平显著增高 ,伴有明显的核转位现象 ,且早于PS外翻和细胞DNA片段化。结论 :TFAR19蛋白的核转位是细胞凋亡更早期发生的事件之一 ,这一新发现为进一步探讨TFAR19蛋白的生物学效应 。 展开更多
关键词 TFAR19 tf-1细胞 细胞凋亡 细胞核转位
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TF-1细胞凋亡相关基因的研究 被引量：18
3
作者 刘红涛 王玉刚 +4 位作者 张颖妹 宋泉声 敬保迁 袁勇 马大龙 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第1期38-43,共6页
利用近年来发展起来的代表差异分析（ｃＤＮＡｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓａｎａｌｙｓｉｓ，ｃＤＮＡＲＤＡ）技术研究了在人红白血病细胞株ＴＦ１细胞撤除细胞因子后进入凋亡时诱导表达的基因．发现了... 利用近年来发展起来的代表差异分析（ｃＤＮＡｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓａｎａｌｙｓｉｓ，ｃＤＮＡＲＤＡ）技术研究了在人红白血病细胞株ＴＦ１细胞撤除细胞因子后进入凋亡时诱导表达的基因．发现了６个新基因片段．其中有三个经与ＧｅｎＢａｎｋｎｒ和ｄｂＥＳＴ查询均没有发现同源性，已经向ＧｅｎＢａｎｋ进行登记，登记号分别为Ｕ８３２０８，Ｕ８３２７９，Ｕ８３３９７．此外还发现一批已知基因的表达与凋亡相关，其中包括Ｈｏｕ和人硫氧还原蛋白等，提示它们在凋亡中可能起作用．这项工作为进一步研究凋亡相关基因打下了良好基础．通过ＲＤＡ的研究结果，有可能发现人白血病细胞凋亡的特异标记蛋白或发挥作用的重要蛋白，以期为白血病治疗提供理论基础． 展开更多
关键词 tf-1细胞株 代表差异分析 细胞凋亡
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苦参碱诱导白血病TF-1细胞凋亡及对SALL4基因表达的影响 被引量：4
4
作者 喻依川 王兰 +2 位作者 傅雷华 胡成琳 陈林 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期2719-2722,共4页
目的:探讨苦参碱(matrine,Mat)诱导急性髓性白血病M6型人红白血病TF-1细胞凋亡及对SALL4基因表达的影响。方法:将不同质量浓度(0.5,1.0,1.52,.0 g.L-1)的Mat分别作用于体外培养的TF-1细胞不同时间(24,48,72 h),MTT检测Mat对细胞增殖的影... 目的:探讨苦参碱(matrine,Mat)诱导急性髓性白血病M6型人红白血病TF-1细胞凋亡及对SALL4基因表达的影响。方法:将不同质量浓度(0.5,1.0,1.52,.0 g.L-1)的Mat分别作用于体外培养的TF-1细胞不同时间(24,48,72 h),MTT检测Mat对细胞增殖的影响;流式细胞术(flow cytometry,FCM)测定细胞周期;Annexin V和PI双染色法检测细胞凋亡;逆转录RT-PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)检测SALL4 mRNA表达。结果:Mat(0.5～2.0 g.L-1)作用TF-1细胞24,48,72 h后均有增殖抑制作用(P<0.01),在该浓度范围内抑制率呈剂量和时间依赖4,8 h半数抑制浓度(IC50)为1.0 g.L-1;Mat作用TF-1细胞48 h后,与对照组相比G0/G1期细胞比例增加,S期细胞下降(P<0.01);流式细胞术检测细胞凋亡率分别为8.6%1,1.21%,15.26%,17.63%,与对照组(5.05%)相比较,差异具有统计学意义(P<0.01);RT-PCR结果显示SALL4mRNA表达量与β-actin(内参照)表达量的比值,随Mat剂量增加而显著减小(P<0.01)。结论:Mat在一定浓度和时间范围内对TF-1细胞具有增殖抑制作用,其机制是使细胞发生G0/G1期阻滞;抑制SALL4基因的表达,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 苦参碱 SALL4基因 白血病 tf-1细胞 细胞凋亡
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TF-1细胞凋亡相关基因19在系统性红斑狼疮发病中的作用 被引量：5
5
作者 宋清华 王晶 +4 位作者 陈英玉 狄春晖 孙荣华 陈学荣 李世荫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期189-193,T004,共6页
目的 :探讨TF - 1细胞凋亡相关基因 1 9(TFAR1 9)在系统性红斑狼疮 (SLE)发病诱因中的作用及其与SLE病情的关系。方法 :应用倒置相差显微镜、Ladder方法、Westernblotting方法、荧光免疫显微镜、ELISA方法检测中波紫外线 (UVB)诱导HaCa... 目的 :探讨TF - 1细胞凋亡相关基因 1 9(TFAR1 9)在系统性红斑狼疮 (SLE)发病诱因中的作用及其与SLE病情的关系。方法 :应用倒置相差显微镜、Ladder方法、Westernblotting方法、荧光免疫显微镜、ELISA方法检测中波紫外线 (UVB)诱导HaCaT细胞凋亡时TFAR1 9的表达及其与SLE患者病情的关系。结果 :在剂量为 30mJ/cm2的UVB照射 2 4h后 ,HaCaT细胞开始凋亡 ,TFAR1 9在此过程中有表达 ,发现活动期SLE患者血清中TFAR1 9的抗体值高于稳定期和正常对照组的值 (P≤ 0 .0 5)。结论 :在UVB诱导角质形成细胞HaCaT凋亡的过程中 ,有TFAR1 9的参与并发挥了作用 ,提示TFAR1 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 细胞凋亡 紫外线B tf-1细胞凋亡相关基因19
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蛋白酶体抑制剂可增加足叶乙甙对白血病细胞系M-07e和TF-1的凋亡诱导效应 被引量：2
6
作者 兰雨 张学敏 +1 位作者 杨平地 沈倍奋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期485-489,共5页
近年来的研究显示泛素 蛋白酶体通路在细胞凋亡调控中发挥了重要的作用。本实验就蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO与经典的凋亡诱导剂足叶乙甙 (VP16)对白血病细胞系M 0 7e及TF 1的联合效应进行了初步研究。应用MTT法及台盼蓝拒染法显示Z LLL ... 近年来的研究显示泛素 蛋白酶体通路在细胞凋亡调控中发挥了重要的作用。本实验就蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO与经典的凋亡诱导剂足叶乙甙 (VP16)对白血病细胞系M 0 7e及TF 1的联合效应进行了初步研究。应用MTT法及台盼蓝拒染法显示Z LLL CHO及VP16联合作用于M 0 7e及TF 1细胞 ,可增强两种药物单独的细胞杀伤效应。流式细胞术检测提示单独应用Z LLL CHO及VP16均可使S +G2 /M期细胞比例增加 ,两者联合应用导致细胞凋亡峰比例的显著增高。通过对M 0 7e细胞裂解物做免疫印迹检测 ,发现在Z LLL CHO及VP16单独作用中均导致Bcl 2蛋白被酶解为 2 2kD的片段 ,而联合作用时Bcl 2的酶解现象具有叠加效应。结论 :Z LLL CHO与VP16联合作用较单独作用有更强的细胞杀伤及诱导细胞凋亡活性 ,细胞周期S +G2 /M期比例的增加及Bcl 2酶解片段的增加是导致蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO及VP16对白血病细胞系联合效应的可能机制。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 足叶乙甙 细胞凋亡 白血病细胞系 M—07e tf-1
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撤除粒-巨噬细胞集落刺激因子对TF-1细胞生长的影响 被引量：4
7
作者 杨素荣 文莉 +2 位作者 孙兰英 朱德厚 姚明辉 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2003年第2期199-203,共5页
采用MTT实验测定撤除细胞因子后TF 1细胞的增殖活性 ,经流式细胞仪、透射电镜观察撤除细胞因子对TF 1细胞凋亡的作用及其形态学变化。采用荧光微孔板读数仪测定凋亡过程中Caspase 3活性的改变。结果发现 ,撤除细胞因子后 4 8h ,细胞存... 采用MTT实验测定撤除细胞因子后TF 1细胞的增殖活性 ,经流式细胞仪、透射电镜观察撤除细胞因子对TF 1细胞凋亡的作用及其形态学变化。采用荧光微孔板读数仪测定凋亡过程中Caspase 3活性的改变。结果发现 ,撤除细胞因子后 4 8h ,细胞存活率为正常培养时的 4 8 8% ;电镜显示TF 1细胞出现了凋亡典型的变化。细胞凋亡率在撤除因子后 2 4h、4 8h时分别为 2 1 2 3%和 71 36 % ,TF 1细胞被阻滞在G0 G1 期。细胞内Caspase 3活性在撤除因子后 12h、36h时明显升高 ,荧光度分别为 6 32 1和 1782 3。结果表明 ,撤除因子后可导致TF 1细胞凋亡 ,Caspase 3活化参与了此凋亡过程。另外通过MTT实验观察到一种新型造血刺激因子粒 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF) 白细胞介素 3(IL 3)融合蛋白可维持TF 展开更多
关键词 粒-巨噬细胞集落刺激因子 tf-1细胞 细胞凋亡 CASPASE-3 白细胞介素3 融合蛋白
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TF-1细胞增殖法测定神经生长因子生物学活性的建立与应用 被引量：8
8
作者 于婷 宋小红 +1 位作者 付玲 侯利华 《生物技术通讯》 CAS 2012年第6期840-845,共6页
目的:建立并优化用于检测神经生长因子(NGF)生物学活性的TF-1细胞增殖法,并应用于重组人NGF和鼠NGF制品的活性检测。方法:将梯度稀释的人NGF国际参考品与TF-1细胞相作用,通过MTT法测定细胞增殖情况,建立测定NGF活性的TF-1细胞增殖法;从... 目的:建立并优化用于检测神经生长因子(NGF)生物学活性的TF-1细胞增殖法,并应用于重组人NGF和鼠NGF制品的活性检测。方法:将梯度稀释的人NGF国际参考品与TF-1细胞相作用,通过MTT法测定细胞增殖情况,建立测定NGF活性的TF-1细胞增殖法;从粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)残留、NGF加样稀释率、TF-1细胞接种浓度、培养时间等多个环节对实验条件进行优化;将建立的TF-1细胞增殖法应用于重组人NGF和鼠NGF的活性检测。结果:建立了用于NGF活性检测的TF-1细胞增殖法;实验条件优化结果表明,在无GM-CSF残留的情况下,将稀释至1/4的NGF样品与4×105/mL的细胞相互作用,培养48 h,可以得到更为典型的的四参数曲线;利用条件优化后建立的检测方法对重组人NGF和鼠NGF各2批样品分别进行4次测定,结果平均值分别为10.01×105、10.81×105和3.55×105、3.30×105U/mg,变异系数分别为7.5%、7.2%和7.2%、9.1%,检测结果稳定均一,表明检测方法具有很好的重复性。结论:建立并优化了用于NGF活性检测的TF-1细胞增殖法,该方法操作简便、定量准确、重复性好、稳定可靠,可有效应用于人NGF和鼠NGF制品的活性检测。 展开更多
关键词 tf-1细胞 神经生长因子 生物学活性
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重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子生物学活性测定TF-1细胞/MTT比色法的优化及其验证 被引量：1
9
作者 许国杰 周丽红 +5 位作者 李丹 田云蕾 于丽娟 刘英华 严永男 李利 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第12期1311-1315,共5页
目的对检测重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte macrophage colony stimulating factor,rh GM-CSF）生物学活性的TF-1细胞/MTT比色法进行优化及验证。方法以rh GM-CSF依赖细胞株TF-1为靶细胞,采用MTT比... 目的对检测重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte macrophage colony stimulating factor,rh GM-CSF）生物学活性的TF-1细胞/MTT比色法进行优化及验证。方法以rh GM-CSF依赖细胞株TF-1为靶细胞,采用MTT比色法测定rh GM-CSF生物学活性,对比色法中裂解液种类、裂解时间、细胞浓度、MTT作用时间等进行优化,并对优化后的方法进行准确度和精密度验证。结果优化后的TF-1细胞/MTT比色法：将供试品及标准品稀释至18 IU/ml,做2倍系列稀释,共8个稀释度,50μl/孔;加入6×10^5个/ml TF-1细胞悬液,50μl/孔,37℃培养48-52 h;加入MTT溶液,20μl/孔,37℃培养5 h;加入15%SDS裂解液,150μl/孔,裂解过夜,检测A570值。3种不同浓度的rh GM-CSF标准品活性测定结果回收率为104%;rh GM-CSF标准品6次检测活性平均值为18.6 IU/ml,变异系数为5.37%;rh GM-CSF标准品3 d活性检测结果的平均变异系数为5.18%。结论采用优化后MTT比色法检测rh GM-CSF生物学活性,准确度和精密度均较高,可应用于rh GM-CSF活性的检测。 展开更多
关键词 tf-1细胞/MTT比色法 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 生物学活性 优化 验证
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人红系分化相关基因高表达提高TF-1细胞系存活能力 被引量：1
10
作者 郑巍薇 张美江 +4 位作者 尹荣华 董小明 詹轶群 杨晓明 李长燕 《生物技术通讯》 CAS 2013年第4期462-466,共5页
目的:检测人红系分化相关基因(EDAG)对TF-1细胞株存活能力的影响。方法:采用电转染法将过表达EDAG的质粒高效转染TF-1细胞株,通过G418筛选得到过表达EDAG的TF-1细胞稳定株,用MTS法检测过表达EDAG的细胞稳定株在撤除细胞因子后的增殖情况... 目的:检测人红系分化相关基因(EDAG)对TF-1细胞株存活能力的影响。方法:采用电转染法将过表达EDAG的质粒高效转染TF-1细胞株,通过G418筛选得到过表达EDAG的TF-1细胞稳定株,用MTS法检测过表达EDAG的细胞稳定株在撤除细胞因子后的增殖情况,用流式细胞术检测细胞凋亡。结果:用表达GFP的质粒电转染TF-1细胞株,通过综合评价转染效率和细胞状态,确定最佳转染条件为1350 V电压电击30 ms,电击次数为1次;对得到的细胞稳定株进行检测,其内源EDAG的mRNA和蛋白水平均上调;将细胞稳定株在撤除细胞因子状态下培养,过表达EDAG后细胞存活能力增强、凋亡减少。结论:用电转染方式高效转染TF-1细胞,通过筛选得到过表达EDAG的稳定细胞株,并证实撤除细胞因子后过表达EDAG能提高TF-1细胞系的存活及抗凋亡能力。 展开更多
关键词 人红系分化相关基因 tf-1细胞 存活 凋亡
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TF-1细胞增殖特性与信号蛋白JAK2/STAT3表达研究 被引量：1
11
作者 谌登兵 张日 夏学鸣 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 2004年第1期18-21,共4页
目的　探索JAK/STAT途径活化与细胞增殖和凋亡之间的关系。方法　通过表达内源性GM CSF受体的TF 1细胞 ,观察细胞增殖与凋亡 ;建立免疫沉淀和Westernblot印迹方法 ,检测经GM CSF 10 0ng/ml瞬时诱导的TF 1细胞信号蛋白JAK2和STAT3酪氨酸... 目的　探索JAK/STAT途径活化与细胞增殖和凋亡之间的关系。方法　通过表达内源性GM CSF受体的TF 1细胞 ,观察细胞增殖与凋亡 ;建立免疫沉淀和Westernblot印迹方法 ,检测经GM CSF 10 0ng/ml瞬时诱导的TF 1细胞信号蛋白JAK2和STAT3酪氨酸磷酸化情况。结果　经过GM CSF刺激 ,细胞不但免于凋亡 ,TF 1细胞还呈现剂量与时间信赖性的增殖反应。当耗竭细胞因子 6～ 12h后 ,倒置显微镜下TF 1细胞呈现折光性改变 ,细胞开始凋亡 ,呈现凋亡特征性形态改变和出现DNA梯形条带 ,而加入 0 .1ng/ml的GM CSF ,TF 1细胞即开始进入增殖状态 ,提示GM CSF对细胞具有凋亡保护作用。经过 10 0ng/mlGM CSF的瞬时诱导 ,在分子量 130kd区域见到JAK2蛋白条带 ,显示GM CSF可诱导TF 1细胞磷酸化JAK2表达 ;而在分子量 90kd区域未见到STAT3蛋白条带 ,显示无磷酸化STAT3表达 ;而未经GM CSF诱导的TF 1细胞 ,既无磷酸化JAK2也无磷酸化STAT3表达。结论　GM CSF为TF 1细胞增殖诱导和凋亡保护所必需 ;GM CSF诱导的TF 展开更多
关键词 GM-CSF JAK2 STAT3 tf-1细胞系
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硼替佐米诱导TF-1细胞凋亡及其对SALL4基因表达的影响
12
作者 王兰 喻依川 +2 位作者 傅雷华 胡成琳 陈林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期785-789,共5页
目的:探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib)诱导人红系白血病细胞株TF-1凋亡的作用,及其对Sall4基因表达水平的影响。方法:(1)MTT法检测细胞增殖抑制率。(2)光学显微镜观察细胞的形态学改变。(3)电镜观察超微结构变化。(4)流式细胞... 目的:探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib)诱导人红系白血病细胞株TF-1凋亡的作用,及其对Sall4基因表达水平的影响。方法:(1)MTT法检测细胞增殖抑制率。(2)光学显微镜观察细胞的形态学改变。(3)电镜观察超微结构变化。(4)流式细胞仪检测Annexin V-FITC细胞凋亡率。(5)流式细胞仪分析细胞周期。(6)RT-PCR检测Sall4 mRNA的表达水平。结果:(1)硼替佐米呈时间和剂量依赖性抑制TF-1细胞生长,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。24 h和48 h的药物半数抑制浓度(Halfmaximal inhibitory concentration of a substance,IC50)分别为52 nmol/L和27 nmol/L。(2)显微镜下观察细胞皱缩变小,细胞密度明显下降。(3)电镜下观察可见凋亡小体。(4)Annexin V-FITC检测显示随着硼替佐米作用浓度的增加,凋亡率增加,呈剂量依赖关系(P<0.05)。(5)流式细胞仪分析细胞周期,随着硼替佐米作用时间的增加,G2/M期细胞比例逐渐增高,而G0/G1和S期细胞比例则逐渐减少,呈时间依赖关系(P<0.05)。(6)RT-PCR结果示Sall4基因在TF-1细胞上高表达,并随着硼替佐米作用浓度和时间的增加,Sall4 mRNA与β-actin mRNA表达量的积分光密度比值(Integral optical density ratio,V/B)水平下降(P<0.05)。结论:硼替佐米能抑制TF-1细胞增殖,诱导其凋亡,呈时间-剂量依赖关系。Sall4基因在TF-1细胞株上高表达,并随着硼替佐米作用浓度和时间的增加表达水平下降,呈时间-剂量依赖关系。 展开更多
关键词 硼替佐米 tf-1细胞株 细胞凋亡 Sall4基因
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GM-CSF诱导TF-1白血病细胞JAK-STAT表达研究
13
作者 谌登兵 张日 夏学鸣 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期305-306,共2页
人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)参与髓系造血细胞增殖、分化和凋亡调节,其生物学效应是通过配体与细胞因子受体超家族成员-GM-CSF受体(GM-R)相结合后,激活细胞内受体偶联的信号转导途径实现的,其中以JAK-STAT信号途径最为重要.... 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)参与髓系造血细胞增殖、分化和凋亡调节,其生物学效应是通过配体与细胞因子受体超家族成员-GM-CSF受体(GM-R)相结合后,激活细胞内受体偶联的信号转导途径实现的,其中以JAK-STAT信号途径最为重要.然而,GM-CSF诱导相关的白血病细胞异常生物学行为与JAK-STAT途径活化之间有何关联,目前还不清楚.本研究选用GM-CSF依赖性的红白血病系细胞,观察经过GM-CSF诱导后细胞的增殖情况,以及JAK2和STAT3的活化情况,旨在探索JAK/STAT途径活化与白血病细胞增殖之间的关系. 展开更多
关键词 GM-CSF tf-1白血病 JAK-STAT
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苦参碱对人急性红白血病细胞株TF-1SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的影响 被引量：7
14
作者 周陈姣 史丽君 +4 位作者 傅雷华 王兰 喻依川 胡成琳 陈林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第10期1449-1453,共5页
目的探讨苦参碱对人急性红白血病细胞株TF-1 SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的影响。方法用不同浓度的苦参碱(0.5、1.0、2.0 g/L)处理TF-1细胞,另设对照组(不加苦参碱)。苦参碱作用48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测... 目的探讨苦参碱对人急性红白血病细胞株TF-1 SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的影响。方法用不同浓度的苦参碱(0.5、1.0、2.0 g/L)处理TF-1细胞,另设对照组(不加苦参碱)。苦参碱作用48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测各组TF-1细胞中SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因β-catenin、C-myc、Cyclin DI的表达水平,并分析SALL4基因与β-catenin、C-myc及Cyclin DI表达的相关性;Western blot法检测各组TF-1细胞中SALL4蛋白的表达水平。结果经不同浓度苦参碱处理48 h后,TF-1细胞中SALL4、β-catenin、C-myc、Cyclin DI基因的表达水平及SALL4蛋白的表达水平与对照组相比,均明显下降,且呈浓度依赖性(P<0.05);SALL4基因与β-catenin、C-myc、Cyclin DI基因的表达明显相关(r s值分别为0.912、0.818和0.832,P均<0.01)。结论苦参碱对TF-1细胞中SALL4基因和蛋白表达及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因β-catenin、C-myc、Cyclin DI的抑制可能在抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡过程中起重要作用。 展开更多
关键词 苦参碱 红白血病 tf-1细胞 SALL4基因 WNT Β-CATENIN信号通路
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用人TF-1细胞系检测GM-CSF活性的新方法 被引量：3
15
作者 张明伟 蒋承勇 +3 位作者 江飞子 李秀森 毛宁 杜德林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第1期91-95,共5页
人粒单系集落刺激因子(GM—CSF)是正常髓系造血的重要调控因子,具有刺激粒-巨噬系等多种造血细胞增殖与分化的功能。近几年来,临床上已用重组GM—CSF治疗放、化疗后所引起的粒细胞减少症,取得了一定疗效。长期以来,GM-CSF的活性检测多... 人粒单系集落刺激因子(GM—CSF)是正常髓系造血的重要调控因子,具有刺激粒-巨噬系等多种造血细胞增殖与分化的功能。近几年来,临床上已用重组GM—CSF治疗放、化疗后所引起的粒细胞减少症,取得了一定疗效。长期以来,GM-CSF的活性检测多采用半固体粒-巨噬单系集落培养方法,此方法需时长(约14天),操作复杂,影响因素多,结果不稳定,难以满足快速检测多批量基因工程重组GM—CSF产品的迫切需要。TF—1细胞是GM—CSF、IL—3和EPO依赖性细胞系,我们以TF-1细胞为反应细胞。 展开更多
关键词 细胞系 基因工程重组 tf-1 半固体培养 反应细胞 活性检测 细胞团 粒细胞减少症 条件培养液 细胞增殖
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中波紫外线诱导HaCaT细胞凋亡中TF-1细胞凋亡相关基因19的表达 被引量：2
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作者 宋清华 狄春晖 +3 位作者 陈英玉 钟英诚 陈学荣 李世荫 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期506-508,共3页
目的:研究在中波紫外线(UVB)诱导正常永生化角质形成细胞(HaCaT)凋亡过程中,T细胞凋亡相关基因19(TFAR 19)的表达时相及位置。方法:使用流式细胞仪、膜联蛋白V(Annexin-V)、激光扫描共聚焦显微镜等方法进行研究。结果:在凋亡过程中,TFAR... 目的:研究在中波紫外线(UVB)诱导正常永生化角质形成细胞(HaCaT)凋亡过程中,T细胞凋亡相关基因19(TFAR 19)的表达时相及位置。方法:使用流式细胞仪、膜联蛋白V(Annexin-V)、激光扫描共聚焦显微镜等方法进行研究。结果:在凋亡过程中,TFAR 19逐渐向核周聚积,最后向核膜内移位,在核膜及其周围以及核内表达。 结论:在UVB诱导HaCaT细胞凋亡的早期和晚期过程中TFAR 19均有表达。 展开更多
关键词 T细胞凋亡相关基因 HACAT细胞 中波紫外线 凋亡
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苯线磷和甲胺磷对TF-1细胞乙酰胆碱酯酶影响的差异
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作者 陈旸升 马永超 +3 位作者 彭颖蓓 徐丽 谢群慧 赵斌 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期231-240,共10页
有机磷农药(organophosphorus pesticides,OPs)具有较强的神经毒性,主要是通过抑制胆碱能神经传导中的关键酶,乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)的活性来实现的。苯线磷和甲胺磷是广泛用于农业生产的OPs,但对它们抑制... 有机磷农药(organophosphorus pesticides,OPs)具有较强的神经毒性,主要是通过抑制胆碱能神经传导中的关键酶,乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)的活性来实现的。苯线磷和甲胺磷是广泛用于农业生产的OPs,但对它们抑制人AChE活性的机制研究十分有限。本研究应用2种不同的给药方式,包括对培养的细胞和细胞裂解液进行药物处理,明确苯线磷和甲胺磷对人血液白血病细胞系TF-1中AChE酶活性的直接作用和对AChE基因转录表达的影响,从而揭示苯线磷和甲胺磷抑制AChE酶活性的机制与两者的差别。结果表明,高浓度苯线磷(10^(-3) mol·L^(-1))处理后,TF-1细胞活力降低,同时诱导细胞凋亡和坏死;而所有被试浓度的甲胺磷对细胞活力均没有明显影响。此外,对于TF-1细胞裂解液中的AChE,苯线磷和甲胺磷短期处理(1 h和5 h)均可产生直接抑制作用,其中苯线磷的抑制作用略强于甲胺磷(孵育1 h,IC_(50)值分别为1.181×10^(-6) mol·L^(-1)和2.837×10^(-6) mol·L^(-1))。对培养细胞的药物处理实验结果显示,苯线磷和甲胺磷(10^(-6) mol·L^(-1)和10-5 mol·L^(-1))处理24 h后,均显著降低了TF-1细胞的AChE酶活性,苯线磷的抑制率略高于甲胺磷。而与对酶活性的抑制作用相反,苯线磷和甲胺磷对TF-1中AChE H转录本表达有轻微的上调作用,以甲胺磷更为明显,提示存在反馈调节机制。总结上述结果,我们发现苯线磷对TF-1细胞中AChE的抑制作用总体略强于甲胺磷,而甲胺磷对AChE基因表达的反馈上调作用更明显。从而首次从对AChE酶的直接抑制作用和生物合成影响的不同角度阐述了2个OPs对AChE影响的差异,为进一步的分子机制研究提供了实验数据。 展开更多
关键词 苯线磷 甲胺磷 乙酰胆碱酯酶(AChE) 人血液白血病细胞tf-1
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依赖IL-5增殖的细胞株TF-1-9E3的驯化及验证
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作者 李诗洁 代维燕 +5 位作者 王雪莲 柯文锋 韩飞 陈永奇 刘畅 白仲虎 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期109-114,共6页
在IL-5靶点药物的发现阶段,为评价候选药物的阻断活性,需建立依赖IL-5增殖且信噪比高、重现性好的检测用细胞株。TF-1是人白血病细胞,其生长完全依赖IL-3或GM-CSF,而IL-5与IL-3和GM-CSF共用β(βc)受体,因此,研究以GM-CSF依赖的TF-1细... 在IL-5靶点药物的发现阶段,为评价候选药物的阻断活性,需建立依赖IL-5增殖且信噪比高、重现性好的检测用细胞株。TF-1是人白血病细胞,其生长完全依赖IL-3或GM-CSF,而IL-5与IL-3和GM-CSF共用β(βc)受体,因此,研究以GM-CSF依赖的TF-1细胞株为来源,用IL-5替换TF-1细胞生长必需的生长因子GM-CSF,降低血清含量进行细胞驯化培养传代。通过35 d的细胞驯化及3~5次降血清传代培养,采用有限稀释法分离单克隆,一共得到14个单克隆细胞株。对14株细胞进行FACS检测,其中,有9个细胞株IL-5Rα表达量升高。对IL-5Rα过表达的细胞株进行IL-5增殖检测,结果表明,相比8%FBS得到的单克隆,6%FBS得到的单克隆对IL-5刺激更敏感。通过单因素优化实验,细胞增殖检测最优的细胞接种量为2×10^(4)个/孔,FBS含量为3%,血清品牌为Gibco。驯化后的细胞TF-1-9E3对IL-5的剂量-效应曲线的信噪比为3.19,Emax区间为2.15,可用于IL-5的生物学活性检测及IL-5与IL-5Rα的抗体阻断活性检测。 展开更多
关键词 IL-5 tf-1细胞 增殖 阻断活性 细胞驯化
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TF-1细胞饥饿在IL-4生物学活性测定中的应用 被引量：1
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作者 沈世烨 《海峡药学》 2006年第5期69-70,共2页
目的研究细胞先饥饿后再用来测定生物学活性对实验灵敏度的影响。方法用TF-1细胞/M TT比色法〔2〕测定重组人白细胞介素4(IL-4)的生物学活性,观察最大吸光度与最小吸光度之差,利用此差值就可以判断实验的灵敏度。结果在测定结果中,适当... 目的研究细胞先饥饿后再用来测定生物学活性对实验灵敏度的影响。方法用TF-1细胞/M TT比色法〔2〕测定重组人白细胞介素4(IL-4)的生物学活性,观察最大吸光度与最小吸光度之差,利用此差值就可以判断实验的灵敏度。结果在测定结果中,适当的饥饿比没有饥饿的吸光度差值大。结论用适当饥饿的细胞测定生物学活性灵敏度更高。 展开更多
关键词 细胞饥饿 生物学活性 tf-1细胞 IL-4
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TF-1型开关电源研究
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作者 朱成志 《中小企业管理与科技》 2010年第22期299-300,共2页
本文叙述了TF-1型开关电源的设计思想;有关电路工作特点和设计过程;并对开关电源的发展前途作了必要的阐述。
关键词 tf-1开关电源 稳压 滤波 逆变
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