实时荧光聚合酶链反应检测呼吸道感染鲍曼不动杆菌TEM-1基因

1

作者 张红河 董晓勤 +2 位作者 范建中 周田美 王贤军 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期466-467,共2页

目的建立一种快速、准确、特异、定时检测鲍曼不动杆菌TEM-1型β-内酰胺酶耐药基因的方法。方法选择TEM-1型β-内酰胺酶耐药基因作为靶序列,设计合成引物和探针;收集呼吸道感染患者痰标本培养的鲍曼不动杆菌279株,并对其进行检测分析。... 目的建立一种快速、准确、特异、定时检测鲍曼不动杆菌TEM-1型β-内酰胺酶耐药基因的方法。方法选择TEM-1型β-内酰胺酶耐药基因作为靶序列,设计合成引物和探针;收集呼吸道感染患者痰标本培养的鲍曼不动杆菌279株,并对其进行检测分析。结果采用荧光聚合酶链反应检测鳗曼不动杆菌TEM-1耐药基因灵敏度为102拷贝,279株鲍曼不动杆菌中检出47株携带TEM-1基因,检出率为16.8%。结论应用Taqman探针荧光聚合酶链反应能够快速、准确检测鲍曼不动杆菌TEM-1型β-内酰胺酶耐药基因。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 鲍曼不动杆菌 tem-1基因

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淋病奈瑟菌临床分离株对抗菌药物敏感性及TEM-1基因质粒分型研究 被引量：3

2

作者 劳丽嫦 方镇强 +4 位作者 吴文伟 郭炽星 蒋敏慧 徐碧红 吴兴中 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第15期1801-1802,1805,共3页

目的检测2010～2011年度本地区临床分离的淋病奈瑟菌流行株对青霉素、四环素、大观霉素、头孢曲松和环丙沙星的敏感性,对质粒介导的产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)进行耐药质粒TEM-1基因分型。方法采用琼脂稀释法测定菌株对5种抗菌药物的最... 目的检测2010～2011年度本地区临床分离的淋病奈瑟菌流行株对青霉素、四环素、大观霉素、头孢曲松和环丙沙星的敏感性,对质粒介导的产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)进行耐药质粒TEM-1基因分型。方法采用琼脂稀释法测定菌株对5种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),判断敏感性按WHO西太区淋病奈瑟菌耐药性监测统一标准。用纸片酸度法检测PPNG菌株,多重PCR方法鉴定β-内酰胺酶质粒并进行TEM-1基因分型。结果 150株淋病奈瑟菌中检出105株对青霉素耐药(70%);四环素和环丙沙星耐药率分别为84%和98%;未发现对大观霉素和头孢曲松耐药菌株,但头孢曲松低敏率达到48%(72/150);青霉素﹑四环素和环丙沙星的MIC50及MIC90均已超过耐药标准,尤以青霉素和四环素为甚,其MIC50及MIC90均超过耐药标准的2倍和大于32倍。检出PPNG46株,阳性率为30.7%,耐药质粒TEM-1基因分型以亚洲型为主(91.3%,42/46),只有4株携带非洲型质粒。结论淋病奈瑟菌对青霉素、四环素和环丙沙星耐药率较高,对大观霉素和头孢曲松的敏感性较高,可作为治疗的首选药物;TEM-1基因质粒分型以亚洲型为主。 展开更多

关键词 奈瑟球菌 淋病 抗药性 微生物 tem-1基因型 Β-内酰胺酶 质粒

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质粒介导产β-内酰胺酶淋球菌的检测及其TEM-1基因质粒分型 被引量：5

3

作者 吴兴中 郑和平 +4 位作者 黄进梅 曾维英 薛耀华 潘慧清 李美玲 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期363-365,共3页

质粒介导的产青霉素酶淋球菌（PPNG）对青霉素高度耐药,PPNG在世界各地流行,我国各地也有PPNG阳性率逐年增加的报道.上海地区曾对2005年度分离的PPNG耐药质粒基因进行分型,表明PPNG质粒流行类型主要以亚洲型质粒为主.根据PPNG所携带的... 质粒介导的产青霉素酶淋球菌（PPNG）对青霉素高度耐药,PPNG在世界各地流行,我国各地也有PPNG阳性率逐年增加的报道.上海地区曾对2005年度分离的PPNG耐药质粒基因进行分型,表明PPNG质粒流行类型主要以亚洲型质粒为主.根据PPNG所携带的耐药质粒基因类型可了解当地淋球菌的流行情况.我们于2000-2008年对临床淋球菌分离株进行PPNG检测及其TEM-1基因质粒分型,报道如下. 展开更多

关键词 产青霉素酶淋球菌 tem-1基因 质粒分型 质粒介导 产Β-内酰胺酶 检测 PPNG 耐药质粒

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流感嗜血杆菌氨苄西林耐药基因TEM-1、ROB-1的检测 被引量：8

4

作者 姜敏 胡翼云 +3 位作者 沈叙庄 高薇 俞桑洁 杨永弘 《中国抗感染化疗杂志》 2005年第2期83-85,共3页

目的　探讨我国北京,上海,广州3地2000—2003年流感嗜血杆菌氨苄西林的耐药机制。方法　选取2000—2003上述3地上呼吸道感染患儿鼻咽部分离培养的899株流感嗜血杆菌,采用E test法检测氨苄西林耐药情况。用头孢硝噻酚片进行β内酰胺酶检... 目的　探讨我国北京,上海,广州3地2000—2003年流感嗜血杆菌氨苄西林的耐药机制。方法　选取2000—2003上述3地上呼吸道感染患儿鼻咽部分离培养的899株流感嗜血杆菌,采用E test法检测氨苄西林耐药情况。用头孢硝噻酚片进行β内酰胺酶检测,PCR方法检测产酶菌株TEM -1、ROB -1耐药基因携带情况。结果　74株氨苄西林耐药菌株均产生内酰胺酶,PCR检测均为TEM- 1基因阳性,未发现ROB -1基因阳性菌株。结论　我们研究的儿童上呼吸道携带流感嗜血菌对氨苄西林耐药的机制主要是TEM- 1型β内酰胺酶的产生。 展开更多

关键词 流感嗜血杆菌 氨苄西林 耐药 Β内酰胺酶 tem-1基因

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无锡地区淋病奈瑟菌TEM-1基因分子流行病学研究 被引量：2

5

作者 糜祖煌 秦玲 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期58-59,共2页

目的 调查无锡地区淋病奈瑟菌株TEM-1基因流行情况。方法 参照国外的β-内酰胺酶阳性的淋病奈瑟菌菌株内含TEM-1基因的质粒序列,自行设计淋病奈瑟菌TEM-1基因的半套式聚合酶链反应(heminested PCR)检测方法。并对2002年1～10月自无锡地... 目的 调查无锡地区淋病奈瑟菌株TEM-1基因流行情况。方法 参照国外的β-内酰胺酶阳性的淋病奈瑟菌菌株内含TEM-1基因的质粒序列,自行设计淋病奈瑟菌TEM-1基因的半套式聚合酶链反应(heminested PCR)检测方法。并对2002年1～10月自无锡地区分离的195株菌进行检测。结果 195株淋病奈瑟菌临床分离株中有138株为TEM-1基因阳性,阳性率为70.8％。1株无锡地区分离株的TEM-1基因半套式PCR产物,经DNA测序与核酸库登录的β-内酰胺酶阳性的淋病奈瑟菌质粒pFA7序列99％同源。结论 含TEM-1基因的淋病奈瑟菌株是无锡地区的流行株。 展开更多

关键词 无锡市 淋病奈瑟菌 tem-1基因 分子流行病学

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2011-2012年海南地区淋球菌β-内酰胺酶的检测及其基因分型

6

作者 钟娜 乔凤 +4 位作者 刘巧 许玉军 裴东怒 郑文爱 王芳乾 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第8期778-779,782,共3页

目的了解质粒介导的产青霉素酶淋球菌(PPNG)在海南地区的分子流行病学情况。方法采用纸片酸度法测定产β-内酰胺酶菌株(PPNG),PCR方法鉴定β-内酰胺酶质粒并进行TEM-1基因质粒分型。结果 2011-2012年共检测了214株淋球菌,检出PPNG65株(3... 目的了解质粒介导的产青霉素酶淋球菌(PPNG)在海南地区的分子流行病学情况。方法采用纸片酸度法测定产β-内酰胺酶菌株(PPNG),PCR方法鉴定β-内酰胺酶质粒并进行TEM-1基因质粒分型。结果 2011-2012年共检测了214株淋球菌,检出PPNG65株(31.31%),其中55株(84.62%)携带TEM-1基因亚洲型质粒,10株(15.38%)携带TEM-1基因非洲型质粒;未见多伦多型和里约型。结论海南地区流行的PPNG以亚洲型TEM-1基因为主(84.62%),非洲型其次(15.38%)。 展开更多

关键词 奈瑟淋球菌 产青霉素酶淋球菌(PPNG) tem-1基因

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流感嗜血杆菌氨苄西林耐药基因研究 被引量：17

7

作者 张泓 吴文娟 +3 位作者 李万华 孔青 盖晶 陆权 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第6期377-379,共3页

目的明确我院分离的流感嗜血杆菌(HI)氨苄西林耐药的基因。方法用 E 试验测定我院上呼吸道感染患儿鼻咽部分离300株 HI 对氨苄西林耐药情况;以 Nitrocefin 纸片检测β内酰胺酶;PCR 扩增及序列分析确定产酶株的基因型。结果31株氨苄西林... 目的明确我院分离的流感嗜血杆菌(HI)氨苄西林耐药的基因。方法用 E 试验测定我院上呼吸道感染患儿鼻咽部分离300株 HI 对氨苄西林耐药情况;以 Nitrocefin 纸片检测β内酰胺酶;PCR 扩增及序列分析确定产酶株的基因型。结果31株氨苄西林耐药株均产β内酰胺酶,占总菌株数11%(32/300),PCR 检测出 TEM-1 31株,ROB-1 1株。结论产β内酰胺酶是 HI 对氨苄西林耐药的重要机制,TEM-1型是β内酰胺酶主要基因型,ROB-1型β内酰胺酶也首次被检出,值得关注和长期监测。 展开更多

关键词 流感嗜血杆菌 氨苄西林 耐药性 Β内酰胺酶 tem-1基因 ROB-1基因

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利用反义技术抑制大肠杆菌β-内酰胺酶基因表达的实验研究

8

作者 杨爱琼 谢勇恩 《公共卫生与临床医学》 2009年第4期252-254,共3页

目的探讨利用反义表达质粒抑制细菌耐药基因表达的可行性。方法根据GenBank中β-内酰胺酶TEM-1基因序列设计一对寡核苷酸5J物，通过PCR扩增获取TEM-1基因，将其反向克隆入质粒pBK—CMV的多克隆位点构建反义表达质粒，将此反义表达质粒... 目的探讨利用反义表达质粒抑制细菌耐药基因表达的可行性。方法根据GenBank中β-内酰胺酶TEM-1基因序列设计一对寡核苷酸5J物，通过PCR扩增获取TEM-1基因，将其反向克隆入质粒pBK—CMV的多克隆位点构建反义表达质粒，将此反义表达质粒导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌，Western—blotting检测TEM-1表达情况。结果成功构建了TEM—1基因的反义表达质粒，将其导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌后，Western—blotting检测发现TEM-1表达显著下调。结论利用反义表达质粒可抑制大肠杆菌β-内酰胺酶TEM-1基因表达。 展开更多

关键词 大肠杆菌 tem-1基因 反义表达质粒

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利用反义技术抑制大肠杆菌β-内酰胺酶基因表达的实验研究

9

作者 杨爱琼 谢勇恩 《世界感染杂志》 2009年第5期304-306,共3页

目的探讨利用反义表达质粒抑制细菌耐药基因表达的可行性。方法根据GenBank中β-内酰胺酶TEM-1基因序列设计一对寡核苷酸引物，通过PCR扩增获取TEM—1基因，将其反向克隆入质粒pBK—CMV的多克隆位点构建反义表达质粒，将此反义表达质粒... 目的探讨利用反义表达质粒抑制细菌耐药基因表达的可行性。方法根据GenBank中β-内酰胺酶TEM-1基因序列设计一对寡核苷酸引物，通过PCR扩增获取TEM—1基因，将其反向克隆入质粒pBK—CMV的多克隆位点构建反义表达质粒，将此反义表达质粒导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌，Western—blotting检测TEM-1表达情况。结果成功构建了TEM-1基因的反义表达质粒，将其导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌后，Western-blotting检测发现TEM-1表达显著下调。结论利用反义表达质粒可抑制大肠杆菌β-内酰胺酶TEM-1基因表达。 展开更多

关键词 大肠杆菌 tem-1基因 反义表达质粒

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淋病奈瑟菌青霉素耐药基因研究

10

作者 郑亚芬 承晓京 黄瑞萍 《检验医学》 CAS 北大核心 2005年第2期170-170,174,共2页

关键词 淋病奈瑟菌 青霉素 耐药基因 染色体 tem-1基因质粒

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儿童感染流感嗜血杆菌的流行病学及耐药机制研究 被引量：22

11

作者 潘芬 刘昌颀 +2 位作者 王春 秦惠宏 张泓 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期5700-5703,共4页

目的探讨儿童流感嗜血杆菌耐药情况及对氨苄西林的耐药机制,为临床治疗提供参考依据。方法收集医院2012年-2013年呼吸道感染患儿分离到375株流感嗜血杆菌菌株,采用纸片扩散法和头孢硝噻吩纸片法分析其耐药性和β-内酰胺酶情况,聚合酶链... 目的探讨儿童流感嗜血杆菌耐药情况及对氨苄西林的耐药机制,为临床治疗提供参考依据。方法收集医院2012年-2013年呼吸道感染患儿分离到375株流感嗜血杆菌菌株,采用纸片扩散法和头孢硝噻吩纸片法分析其耐药性和β-内酰胺酶情况,聚合酶链反应(PCR)法检测耐氨苄西林菌株的β-内酰胺酶基因。结果流感嗜血杆菌对氨苄西林的耐药率为40.3%,对阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛、头孢噻肟等抗菌药物敏感率较高,均>70.0%;375株流感嗜血杆菌菌株中,检出119株产β-内酰胺酶,产酶率为31.7%,且氨苄西林耐药株中均检出TEM-1型基因,未发现ROB-1型基因。结论流感嗜血杆菌耐药情况不容忽视,应加强对其耐药性监测及耐药机制研究,为控制其感染传播提供参考。 展开更多

关键词 流感嗜血杆菌 耐药性 Β-内酰胺酶 tem-1基因

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新生儿流感嗜血杆菌分离株β-内酰胺类最低抑菌浓度与β-内酰胺类分子耐药机制研究 被引量：4

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作者 王晓蕾 王战豪 +4 位作者 郭慧敏 张彤 李桦 谢江 胡俊 《中国小儿急救医学》 CAS 2020年第7期531-535,共5页

目的研究新生儿下呼吸道流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)分离株β-内酰胺类抗生素耐药趋势变化与分子耐药机制。方法对19株新生儿Hi分离株进行再鉴定,通过PCR法测菌株P6、fucK和Cap基因进行血清学分型,用肉汤微量稀释法检测氨... 目的研究新生儿下呼吸道流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)分离株β-内酰胺类抗生素耐药趋势变化与分子耐药机制。方法对19株新生儿Hi分离株进行再鉴定,通过PCR法测菌株P6、fucK和Cap基因进行血清学分型,用肉汤微量稀释法检测氨苄西林、阿莫西林克拉维酸和头孢呋辛最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);对TEM-1、ROB-1和ftsI基因进行测序和变异分析。结果(1)19株Hi经P6、fucK和Cap基因检测证实均为无荚膜型,即不可分型流感嗜血杆菌(non-typeable Haemophilus influenzae,NTHi)。(2)与2003至2004年比较,2013至2014年新生儿下呼吸道NTHi分离株氨苄西林、阿莫西林克拉维酸和头孢呋辛的MIC值明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)2003至2004年(n=9)和2013至2014年(n=10)产β-内酰胺酶菌株均为3株,10年间比较差异无统计学意义(P>0.05);BLA基因检测显示6株产β-内酰胺酶均为TEM-1型,未检测出ROB-1型菌株。(4)2003至2004年仅出现1株基因型β-内酰胺酶阳性氨苄西林耐药(gBLPAR),2013至2014年出现基因型β-内酰胺酶阴性氨苄西林耐药(gBLNAR)1株、基因型β-内酰胺酶阴性氨苄西林中介(gBLNAI)3株、gBLPAR 3株、基因型β-内酰胺酶阳性阿莫西林克拉维酸耐药(gBLPACR)1株。(5)2013至2014年ftsI基因出现了11个氨基酸替代模式,而2003至2004年仅出现5个氨基酸替代模式;10年间比较ftsI基因S357N、S385T、N526K、T532S变异率显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。1株2014年分离的耐氨苄西林、阿莫西林克拉维酸和头孢呋辛的gBLNAR/gBLNACR菌株同时出现D350N、S357N、M377I、S385T、L389F、A502T、N526K变异。结论新生儿下呼吸道NTHi感染患儿或将迅速面临β-内酰胺类抗生素多重耐药的严峻挑战。 展开更多

关键词 流感嗜血杆菌 新生儿 β-内酰胺类耐药 ftsI基因 tem-1基因 氨基酸替代

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