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题名癌特异性双靶向载体的安全性及其携带基因的杀伤性
被引量：10
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作者
王娟
顾锦法
杨水云
肖田
齐荣
孙兰英
刘新垣
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机构
浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所
中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所
西安交通大学生命科学与技术学院
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出处
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期385-392,共8页
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基金
国家973项目(No.2004CB518804)
863国家高技术研究发展计划(No.2002AA216021)
国家自然科学基金(No.30120160823)~~
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文摘
背景与目的:我们创导的“癌症的靶向双基因-病毒治疗”策略可消灭移植性肿瘤,目前最重要的是要提高其安全性,使其只靶向肿瘤细胞,而在正常细胞内不复制或者很少复制。本研究旨在构建肿瘤特异性的双靶向腺病毒TD55,并研究其安全性;在TD55中插入凋亡基因TRAIL,构建成TD55-TRAIL,研究其杀伤性。方法:用hTERT启动子控制腺病毒复制必需的E1A基因,并将E1B55KD基因删除,构建肿瘤特异性的双靶向腺病毒TD55,使其只靶向p53功能缺乏的肿瘤。在TD55中插入凋亡基因TRAIL,构建成TD55-TRAIL,通过分子克隆构建质粒pTD55和pTD55-TRAIL,并与包装腺病毒的大质粒pBHGE3在293细胞中同源重组,得到腺病毒TD55和TD55-TRAIL。构建好的病毒体外感染人胚肺细胞MRC5、WI38,人结肠癌细胞SW620、HCT116、人肺癌细胞A549,分别用结晶紫染色法和MTT法检测其对细胞生长的影响。用流式细胞仪测定肿瘤细胞的凋亡率。结果:结晶紫染色结果和MTT结果表明,双靶向腺病毒TD55-TRAIL对正常细胞MRC5和WI38的杀伤作用比ZD55-TRAIL小很多。病毒复制能力分析表明,单靶向腺病毒在正常细胞中的复制倍数是双靶向腺病毒的3～5倍。TD55和TD55-TRAIL均能引起SW620细胞的凋亡,后者是前者的3.3倍。结论:双靶向腺病毒TD55-TRAIL对正常细胞的安全性比以往所构建的单靶向腺病毒ZD55-TRAIL更好,说明双靶向载体TD55比单靶向载体ZD55靶向性更高,如做为治疗药物可增加安全性,在治疗中可大大增加药物的安全性。携带的TRAIL基因能引起肿瘤细胞的凋亡,杀伤力较TD55增加数倍。
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关键词
肿瘤
生物疗法
溶瘤腺病毒
HTERT启动子
E1B
55KD基因
td55
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Keywords
Neoplasm
Biotherapy
Oncolytic adenovirus
hTERT promoter
E1B 55KD gene
td55
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分类号
R73-36
[医药卫生—肿瘤]
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