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莱茵衣藻TCF20的表达分析与多克隆抗体的制备
1
作者 吴倩龙 刘思远 +2 位作者 陈晓萍 张颖 冯雳 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第6期1010-1017,共8页
在哺乳动物中,TCF20作为转录因子参与细胞增殖和凋亡、免疫以及代谢等生理过程。近些年,还发现TCF20缺陷会导致神经祖细胞增殖和分化的异常,人或者小鼠TCF20缺陷表现为自闭症样神经发育障碍疾病,并且TCF20也成为相关疾病的基因筛查靶标... 在哺乳动物中,TCF20作为转录因子参与细胞增殖和凋亡、免疫以及代谢等生理过程。近些年,还发现TCF20缺陷会导致神经祖细胞增殖和分化的异常,人或者小鼠TCF20缺陷表现为自闭症样神经发育障碍疾病,并且TCF20也成为相关疾病的基因筛查靶标。莱茵衣藻TCF20相关研究此前未见报道,且尚未有从纤毛调控的角度研究TCF20的功能和分子机制。为了深入探究模式藻莱茵衣藻TCF20对纤毛的作用,对其蛋白进行了同源性分析。利用莱茵衣藻TCF20的cDNA序列构建莱茵衣藻内源TCF20蛋白原核表达载体质粒pGEX-6p-1-TCF20-GST,并转入到大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,得到55 kd的含有GST标签的TCF20-GST的重组融合蛋白。将亲和纯化的重组蛋白免疫小鼠,采集第五次免疫后的血清,以间接ELISA法测定抗血清效价达到1∶512000,利用蛋白免疫印迹检测制备的抗体,该抗体可以特异性识别莱茵衣藻内源TCF20蛋白,且CrTCF20主要定位在细胞质,细胞核有较弱定位。鞭毛再生过程中,TCF20需从细胞质进入细胞核以发挥功能。结果表明,该实验成功制备CrTCF20蛋白多克隆抗体,为后续莱茵衣藻中TCF20的功能和机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 tcf20 莱茵衣藻 转录因子 纤毛调控 原核表达 多克隆抗体
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TCF20基因新发c.1198C>T杂合突变致发育迟缓伴各种智力障碍和行为异常一例并文献复习
2
作者 周亚男 刘倩琦 +2 位作者 李荣 吴丹丹 王谦倩 《现代医学》 2023年第4期550-554,共5页
目的:分析1例药物治疗无效的发育迟缓伴各种智力障碍和行为异常(DDVIBA)患儿,外显子测序TCF20基因单核苷酸变异,提高对基因变异在DDVIBA作用中的认识。方法:报道1例DDVIBA患者的临床表现,外显子测序TCF20基因突变,并通过文献复习分析TC... 目的:分析1例药物治疗无效的发育迟缓伴各种智力障碍和行为异常(DDVIBA)患儿,外显子测序TCF20基因单核苷酸变异,提高对基因变异在DDVIBA作用中的认识。方法:报道1例DDVIBA患者的临床表现,外显子测序TCF20基因突变,并通过文献复习分析TCF20基因变异在DDVIBA中的作用。结果:1例7岁10月龄患儿因“与同伴交往欠佳5年,注意力不集中3年”就诊。心理评估为“智力发育异常伴注意力缺陷多动障碍”,诊断为DDVIBA,给予盐酸托莫西汀胶囊治疗无效,并出现窦性心动过速,室性期前收缩。外显子组测序结果提示TCF20基因新发c.1198C>T杂合突变,Swiss-Model同源建模分析显示此变异导致TCF20基因突变产生截短蛋白。结论:TCF20基因新发c.1198C>T杂合突变产生截短蛋白,可以导致DDVIBA。 展开更多
关键词 发育迟缓伴各种智力障碍和行为异常 tcf20基因 无义突变 外显子测序
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