目的 探讨基于PDZ结合基序的转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif, TAZ)在卵巢癌中的表达情况,并进一步分析其在卵巢癌中的作用机制。方法 利用仙桃学术分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TC...目的 探讨基于PDZ结合基序的转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif, TAZ)在卵巢癌中的表达情况,并进一步分析其在卵巢癌中的作用机制。方法 利用仙桃学术分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)数据库中卵巢癌组织及正常对照组织中TAZ mRNA表达水平,并进行受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic, ROC)分析。通过人类蛋白质图谱(The Human Protein Atlas, HPA)数据库提供的免疫组化切片,分析TAZ蛋白在卵巢癌组织及正常对照组织中的表达。将卵巢癌细胞SKOV3分为2组:阴性对照组和缺氧组,采用实时定量PCR和Western blot分别检测TAZ的mRNA及蛋白表达;在HIF-2α过表达质粒转染SKOV3细胞后,检测TAZ的表达变化。获取TCGA数据库中376例卵巢癌RNAseq数据及相应的临床信息,通过基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析TAZ相关的差异表达基因,并分析TAZ高、低表达组中铁死亡相关基因的表达差异。结果 卵巢癌中Hippo通路核心分子TAZ的mRNA水平显著下调(P<0.05),蛋白水平上调,TAZ在卵巢癌诊断中的曲线下面积为0.739。与对照组比较,缺氧组SKOV3细胞中TAZ的表达水平显著升高(P<0.05)。转染HIF-2α过表达质粒后,TAZ的mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05)。富集分析结果显示,TAZ可能参与细胞外基质-受体相互作用、局灶黏附、PI3K-Akt信号通路、胶原纤维结构等信号通路及生物学过程。此外,部分铁死亡相关基因的表达在TAZ高、低表达组间存在显著差异。结论 TAZ在卵巢癌中呈现异常表达,并与缺氧反应及铁死亡等关键生物过程密切相关,提示其作为卵巢癌潜在生物标志物和治疗靶点的可能性。展开更多
目的本研究旨在探讨转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)与组蛋白H2A(histone H2A,H2A)的一种组蛋白变体H2A.Z,在缺氧诱导的肺损伤后修复中的作用及其潜在机制。方法利用缺氧模拟仓(5800 m)处理4 d...目的本研究旨在探讨转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)与组蛋白H2A(histone H2A,H2A)的一种组蛋白变体H2A.Z,在缺氧诱导的肺损伤后修复中的作用及其潜在机制。方法利用缺氧模拟仓(5800 m)处理4 d后,构建小鼠缺氧肺损伤模型,肺组织切片HE染色评估肺损伤程度。利用缺氧工作站(1%O_(2)浓度)处理小鼠肺泡上皮细胞系(murine lung epithelial-12,MLE12)24 h,构建MLE12缺氧细胞模型,Western blot分析检测TAZ表达。CCK-8实验评价肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cells,AECs)增殖。免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)实验验证TAZ与H2A.Z二者之间的相互作用。靶向剪切及转座酶标记技术(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)测序分析TAZ影响H2A.Z在染色质沉积情况。结果缺氧显著诱导小鼠肺组织肺泡萎缩及炎症浸润(P<0.01)。缺氧培养显著上调MLE12细胞中TAZ蛋白表达(P<0.05)。CCK-8实验发现,敲低TAZ后AECs增殖能力显著下降(P<0.01)。Co-IP证实TAZ与H2A.Z存在物理相互作用。靶向剪切及转座酶标记技术(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)测序显示缺氧促进H2A.Z在染色质上的沉积(常氧结合位点31817,缺氧结合位点44078),而TAZ敲低部分逆转此现象(结合位点37840)。结论缺氧显著上调TAZ表达,后者与H2A.Z的结合并促进H2A.Z在染色质上的沉积,增强AECs增殖以应对缺氧损伤。展开更多
[目的]研究ASPM对非小细胞肺癌A549细胞发展的影响。[方法]通过免疫组化实验分析ASPM在非小细胞肺癌组织中的表达;将非小细胞肺癌A549细胞随机分为3个实验组:si NC实验组、si ASPM实验组与BPD-MA实验组。通过CCK-8实验检测A549细胞的增...[目的]研究ASPM对非小细胞肺癌A549细胞发展的影响。[方法]通过免疫组化实验分析ASPM在非小细胞肺癌组织中的表达;将非小细胞肺癌A549细胞随机分为3个实验组:si NC实验组、si ASPM实验组与BPD-MA实验组。通过CCK-8实验检测A549细胞的增殖速度;通过Transwell实验检测A549细胞的侵袭能力;通过流式细胞术检测A549细胞的凋亡率;采用蛋白免疫印迹方法分析A549细胞中YAP1/TAZ通路蛋白的表达。[结果]与癌旁组织比较,ASPM在非小细胞肺癌组织中表达增加(0.28±0.09 vs 0.81±0.06,P<0.05)。与si NC实验组比较,si ASPM以及BPD-MA实验组的A549细胞增殖能力减弱(2.23±0.07 vs 1.16±0.03 vs 1.13±0.05,P<0.05);si ASPM以及BPD-MA实验组的A549细胞侵袭数量减少(126.08±9.33 vs 68.51±7.21 vs 72.82±10.55,P<0.05);si ASPM以及BPD-MA实验组的A549细胞凋亡率增加[(3.22±0.73)%vs(17.01±5.26)%vs(19.23±8.68)%,P<0.05];si ASPM以及BPD-MA实验组的A549细胞YAP1、TAZ蛋白表达下调(0.87±0.03 vs 0.35±0.07 vs 0.33±0.06;0.91±0.12 vs 0.26±0.09 vs 0.31±0.03,P<0.05)。[结论]抑制ASPM表达后,A549细胞的增殖能力与侵袭数量降低,凋亡率增加,该过程与ASPM调节YAP1/TAZ信号通路相关。展开更多
目的:研究食管癌及癌旁组织中PDZ结合域的转录共刺激因子(transcriptional co-activator with PDZ-binding motif,TAZ)蛋白的表达,并探讨其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测123例食管癌及对应癌旁组织中TAZ蛋白的表达,并对其与临床...目的:研究食管癌及癌旁组织中PDZ结合域的转录共刺激因子(transcriptional co-activator with PDZ-binding motif,TAZ)蛋白的表达,并探讨其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测123例食管癌及对应癌旁组织中TAZ蛋白的表达,并对其与临床特征的关系作相关统计分析。结果:TAZ蛋白在食管癌组织中的阳性表达率明显高于对应癌旁组织(60.2%vs.18.7%,P<0.001),且其阳性表达与患者临床分期晚、肿瘤分化程度低、总生存期短相关(P均<0.05);COX比例多因素风险模型分析显示,TAZ阳性表达是食管癌预后的独立影响因子(P=0.031)。结论:TAZ蛋白在食管癌组织中表达升高,是食管癌预后的独立影响因子,TAZ蛋白有望成为食管癌诊断和预后判断的一个新指标。展开更多
文摘目的 探讨基于PDZ结合基序的转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif, TAZ)在卵巢癌中的表达情况,并进一步分析其在卵巢癌中的作用机制。方法 利用仙桃学术分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)数据库中卵巢癌组织及正常对照组织中TAZ mRNA表达水平,并进行受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic, ROC)分析。通过人类蛋白质图谱(The Human Protein Atlas, HPA)数据库提供的免疫组化切片,分析TAZ蛋白在卵巢癌组织及正常对照组织中的表达。将卵巢癌细胞SKOV3分为2组:阴性对照组和缺氧组,采用实时定量PCR和Western blot分别检测TAZ的mRNA及蛋白表达;在HIF-2α过表达质粒转染SKOV3细胞后,检测TAZ的表达变化。获取TCGA数据库中376例卵巢癌RNAseq数据及相应的临床信息,通过基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析TAZ相关的差异表达基因,并分析TAZ高、低表达组中铁死亡相关基因的表达差异。结果 卵巢癌中Hippo通路核心分子TAZ的mRNA水平显著下调(P<0.05),蛋白水平上调,TAZ在卵巢癌诊断中的曲线下面积为0.739。与对照组比较,缺氧组SKOV3细胞中TAZ的表达水平显著升高(P<0.05)。转染HIF-2α过表达质粒后,TAZ的mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05)。富集分析结果显示,TAZ可能参与细胞外基质-受体相互作用、局灶黏附、PI3K-Akt信号通路、胶原纤维结构等信号通路及生物学过程。此外,部分铁死亡相关基因的表达在TAZ高、低表达组间存在显著差异。结论 TAZ在卵巢癌中呈现异常表达,并与缺氧反应及铁死亡等关键生物过程密切相关,提示其作为卵巢癌潜在生物标志物和治疗靶点的可能性。
文摘目的本研究旨在探讨转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)与组蛋白H2A(histone H2A,H2A)的一种组蛋白变体H2A.Z,在缺氧诱导的肺损伤后修复中的作用及其潜在机制。方法利用缺氧模拟仓(5800 m)处理4 d后,构建小鼠缺氧肺损伤模型,肺组织切片HE染色评估肺损伤程度。利用缺氧工作站(1%O_(2)浓度)处理小鼠肺泡上皮细胞系(murine lung epithelial-12,MLE12)24 h,构建MLE12缺氧细胞模型,Western blot分析检测TAZ表达。CCK-8实验评价肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cells,AECs)增殖。免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)实验验证TAZ与H2A.Z二者之间的相互作用。靶向剪切及转座酶标记技术(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)测序分析TAZ影响H2A.Z在染色质沉积情况。结果缺氧显著诱导小鼠肺组织肺泡萎缩及炎症浸润(P<0.01)。缺氧培养显著上调MLE12细胞中TAZ蛋白表达(P<0.05)。CCK-8实验发现,敲低TAZ后AECs增殖能力显著下降(P<0.01)。Co-IP证实TAZ与H2A.Z存在物理相互作用。靶向剪切及转座酶标记技术(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)测序显示缺氧促进H2A.Z在染色质上的沉积(常氧结合位点31817,缺氧结合位点44078),而TAZ敲低部分逆转此现象(结合位点37840)。结论缺氧显著上调TAZ表达,后者与H2A.Z的结合并促进H2A.Z在染色质上的沉积,增强AECs增殖以应对缺氧损伤。
文摘[目的]研究ASPM对非小细胞肺癌A549细胞发展的影响。[方法]通过免疫组化实验分析ASPM在非小细胞肺癌组织中的表达;将非小细胞肺癌A549细胞随机分为3个实验组:si NC实验组、si ASPM实验组与BPD-MA实验组。通过CCK-8实验检测A549细胞的增殖速度;通过Transwell实验检测A549细胞的侵袭能力;通过流式细胞术检测A549细胞的凋亡率;采用蛋白免疫印迹方法分析A549细胞中YAP1/TAZ通路蛋白的表达。[结果]与癌旁组织比较,ASPM在非小细胞肺癌组织中表达增加(0.28±0.09 vs 0.81±0.06,P<0.05)。与si NC实验组比较,si ASPM以及BPD-MA实验组的A549细胞增殖能力减弱(2.23±0.07 vs 1.16±0.03 vs 1.13±0.05,P<0.05);si ASPM以及BPD-MA实验组的A549细胞侵袭数量减少(126.08±9.33 vs 68.51±7.21 vs 72.82±10.55,P<0.05);si ASPM以及BPD-MA实验组的A549细胞凋亡率增加[(3.22±0.73)%vs(17.01±5.26)%vs(19.23±8.68)%,P<0.05];si ASPM以及BPD-MA实验组的A549细胞YAP1、TAZ蛋白表达下调(0.87±0.03 vs 0.35±0.07 vs 0.33±0.06;0.91±0.12 vs 0.26±0.09 vs 0.31±0.03,P<0.05)。[结论]抑制ASPM表达后,A549细胞的增殖能力与侵袭数量降低,凋亡率增加,该过程与ASPM调节YAP1/TAZ信号通路相关。
文摘目的:研究食管癌及癌旁组织中PDZ结合域的转录共刺激因子(transcriptional co-activator with PDZ-binding motif,TAZ)蛋白的表达,并探讨其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测123例食管癌及对应癌旁组织中TAZ蛋白的表达,并对其与临床特征的关系作相关统计分析。结果:TAZ蛋白在食管癌组织中的阳性表达率明显高于对应癌旁组织(60.2%vs.18.7%,P<0.001),且其阳性表达与患者临床分期晚、肿瘤分化程度低、总生存期短相关(P均<0.05);COX比例多因素风险模型分析显示,TAZ阳性表达是食管癌预后的独立影响因子(P=0.031)。结论:TAZ蛋白在食管癌组织中表达升高,是食管癌预后的独立影响因子,TAZ蛋白有望成为食管癌诊断和预后判断的一个新指标。
