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Tat蛋白结构与功能的研究进展 被引量：17
1
作者 艾菁 王丽梅 +1 位作者 夏威 耿美玉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B03期133-135,共3页
关键词 tat蛋白 并发症 调控蛋白 人类免疫缺陷病毒1型 HIV-1基因 Kaposi’s肉瘤 研究进展 结构与功能 转录 细胞
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我国HIV-1 B'/C重组流行株Tat蛋白的表达、纯化及功能分析 被引量：14
2
作者 陆彬 邢辉 +2 位作者 赵全壁 耿运琪 邵一鸣 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期297-302,共6页
根据全国HIV分子流行病学研究发现,B'和C亚型HIV-1在我国发生了重组,并以优势株形式在我国广泛流行。为了探讨这种HIV-1B'/C重组毒株tat基因的变异与其表型之间的关系,利用pET表达系统在大肠杆菌中高效表达了三种不同基因变异... 根据全国HIV分子流行病学研究发现,B'和C亚型HIV-1在我国发生了重组,并以优势株形式在我国广泛流行。为了探讨这种HIV-1B'/C重组毒株tat基因的变异与其表型之间的关系,利用pET表达系统在大肠杆菌中高效表达了三种不同基因变异类型的Tat蛋白,重组蛋白占菌体总蛋白的26%,Westernblot显示较好的反应原性,并通过金属鏊合层析纯化了目的蛋白。荧光素酶活性检测表明:体外表达的Tat蛋白具有明显的生物学活性,可以反式激活HIVLTR引导的报告基因的表达;三种Tat蛋白在激活活性上的差异与流行现场检测的病毒载量的高低存在明显的对应关系,说明tat基因的变异可以引起病毒生物学特性的改变,进而影响病毒的流行特征。此结果为进一步研究我国HIV重组毒株的基因变异特征及变异规律奠定了基础。 展开更多
关键词 HIV-1B'/重组流行株 tat蛋白 表达 纯化 功能分析 人免疫缺陷病毒1型 基因变异
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毛细管电泳研究HIV抑制剂、Tat蛋白与RNA的相互作用 被引量：4
3
作者 齐小花 丁里 +3 位作者 张新祥 常文保 林伟 杨铭 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期214-216,共3页
利用毛细管区带电泳法对新型HIV抑制剂(β 咔啉类药物)、HIVTat蛋白与HIVTARRNA竞争作 用中的反应物和产物进行分离,研究了这种新型HIV抑制剂与RNA的相互作用,证明了其结合比为1∶1,并 进一步测定了该反应的结合常数为2.76×104... 利用毛细管区带电泳法对新型HIV抑制剂(β 咔啉类药物)、HIVTat蛋白与HIVTARRNA竞争作 用中的反应物和产物进行分离,研究了这种新型HIV抑制剂与RNA的相互作用,证明了其结合比为1∶1,并 进一步测定了该反应的结合常数为2.76×104L/mol,与Tat蛋白和RNA的结合常数相近,说明这种抑制剂可 与蛋白竞争性地结合RNA,从而有效抑制病毒复制。此结果与生物学方法的结论一致。 展开更多
关键词 HIV RNA tat蛋白 抑制剂 病毒复制 毛细管区带电泳法 药物 结合常数 相互作用 毛细管电泳
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HIV-1 Tat蛋白对人类疱疹病毒8型复制的影响 被引量：5
4
作者 卢春 黄丽 +1 位作者 贾雪梅 曾怡 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期306-312,共7页
用HindⅢ将HIV-1Tat101蛋白编码基因从pEV质粒中切出,BamHI、NotⅠ将绿色荧光蛋白(GFP)编码基因从表达质粒pcDNA3 1+/GFP中切出,分别插入到质粒LZRSpBMN-Z中,构建成重组反转录病毒表达质粒LZRS-Tat101和LZRS-GFP。采用磷酸钙转染法将两... 用HindⅢ将HIV-1Tat101蛋白编码基因从pEV质粒中切出,BamHI、NotⅠ将绿色荧光蛋白(GFP)编码基因从表达质粒pcDNA3 1+/GFP中切出,分别插入到质粒LZRSpBMN-Z中,构建成重组反转录病毒表达质粒LZRS-Tat101和LZRS-GFP。采用磷酸钙转染法将两重组质粒转染到含反转录病毒env、gal和pol编码基因的包装细胞Phoenix(ΦNX)中,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞系。分别收集稳定细胞系分泌的病毒上清,并感染体外培养的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)BCBL-1细胞。收集LZRS-GFP重组病毒感染的BCBL-1细胞进行流式细胞计数,检测GFP表达水平。收集LZRS-Tat101重组病毒感染的BCBL-1细胞,提取蛋白作Westernblot,检测Tat蛋白表达状况;取细胞总RNA作Northernblot和定量PCR,检查HHV-8次要衣壳蛋白ORF26mRNA转录水平。重组LZRS-Tat101病毒进一步感染HL3T1细胞(HeLa细胞包含HIV-1-LTR/CAT报告基因),收集感染细胞提取蛋白,检测CAT活性,评价Tat生物学功能。PCR扩增HHV-8复制和转录激活蛋白Rta启动子区上游序列,并克隆至pGL-3载体中,构建Rta启动子+虫荧光素酶(Luciferase)报告基因重组质粒。此重组质粒进一步电转染预先感染了LZRS-Tat101病毒的BC-3细胞,TPA刺激后收集细胞,检测Luciferase活性。结果显示:①重组反转录病毒感染BCBL-1细胞,一次感染? 展开更多
关键词 人类疱疹病毒8型 复制 可溶性周期复制 HIV-1tat蛋白
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TAT蛋白转导肽介导的秀丽线虫体内外源蛋白的跨膜转导研究 被引量：3
5
作者 吴永红 石锦平 +3 位作者 何国维 任长虹 高艳 张成岗 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期39-45,共7页
TAT蛋白转导肽是HIV-1病毒编码的一段富含碱性氨基酸序列的多肽,能够高效介导多种外源生物大分子通过多种膜性结构,如细胞质膜和血脑屏障等。为探索TAT蛋白转导肽介导的秀丽线虫体内外源蛋白跨膜转导作用,以EGFP为报告基因结合常规分子... TAT蛋白转导肽是HIV-1病毒编码的一段富含碱性氨基酸序列的多肽,能够高效介导多种外源生物大分子通过多种膜性结构,如细胞质膜和血脑屏障等。为探索TAT蛋白转导肽介导的秀丽线虫体内外源蛋白跨膜转导作用,以EGFP为报告基因结合常规分子克隆技术构建了原核表达载体pET28b-EGFP和pET28-TAT-EGFP,继而利用诱导剂IPTG(终浓度1mmol/L)诱导表达了靶蛋白并结合荧光显微观察、SDS-PAGE和Western blot等鉴定技术获得表达靶蛋白的大肠杆菌BL21(DE3)细胞,最后将其涂布到含有Kana+的LB固体培养基上直接饲喂野生型N2株系线虫,利用荧光显微镜观察绿色荧光信号在线虫体内的分布。结果证明,TAT-EGFP融合蛋白较之于EGFP可高效、可溶性表达,而且通过直接饲喂秀丽线虫表达靶蛋白的大肠杆菌48小时后,TAT-EGFP荧光信号明显分布于线虫肠壁细胞,而EGFP荧光信号则分布在秀丽线虫肠腔,空载体对照组未见任何荧光信号,说明TAT蛋白转导肽能够高效介导外源蛋白在秀丽线虫体内跨膜转导。同时,通过比较空载体对照组与实验组线虫微分干涉图像,未见线虫出现明显的细胞形态变化,说明TAT蛋白转导肽介导的外源蛋白跨膜转导作用是安全的,为在秀丽线虫体内直接研究外源蛋白的功能以及进行蛋白药物的研发提供了重要参考。 展开更多
关键词 tat蛋白转导肽 原核表达 线虫 跨膜转导
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甲基苯丙胺和人类免疫缺陷病毒-Tat蛋白协同神经毒性机制的研究进展 被引量：5
6
作者 李艳明 李桢 曾晓锋 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期389-392,共4页
甲基苯丙胺的滥用和人类免疫缺陷病毒(HIV)感染是两大公共卫生问题。HIV-Tat蛋白和甲基苯丙胺滥用均能导致神经元损伤、变性、坏死和凋亡,并且甲基苯丙胺和HIV-Tat蛋白对神经元损害有着显著的协同作用。但协同作用的机制尚未完全明了。... 甲基苯丙胺的滥用和人类免疫缺陷病毒(HIV)感染是两大公共卫生问题。HIV-Tat蛋白和甲基苯丙胺滥用均能导致神经元损伤、变性、坏死和凋亡,并且甲基苯丙胺和HIV-Tat蛋白对神经元损害有着显著的协同作用。但协同作用的机制尚未完全明了。本综述系统综述了甲基苯丙胺和HIV-Tat蛋白的协同神经毒性及其可能的毒理学机制,以期为HIV阳性的甲基苯丙胺滥用者神经和精神疾病的防治提供参考。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 人类免疫缺陷病毒 tat蛋白 神经毒性
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人类免疫缺陷病毒1型Tat蛋白N末端缺失突变体融合蛋白的表达及其免疫原性分析 被引量：1
7
作者 张华群 廖文婷 +9 位作者 陈秋莉 葛宜兵 杨界 章萍萍 祁培培 刘超 何婷 王锦红 潘卫 曹洁 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期580-586,共7页
本研究采用PCR方法从人类免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus 1,HIV-1)HXB2株tat基因中扩增编码Tat蛋白N末端1-21位氨基酸缺失的突变体Tat22-101基因片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat22-101,经双酶切及测序验证后,转化大... 本研究采用PCR方法从人类免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus 1,HIV-1)HXB2株tat基因中扩增编码Tat蛋白N末端1-21位氨基酸缺失的突变体Tat22-101基因片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat22-101,经双酶切及测序验证后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达及Ni^(2+)-NTA柱亲和层析纯化。纯化后的突变体融合蛋白PET32a-Tat22-101经SDS-PAGE及Western blotting鉴定,其相对分子质量约为26.9kD。该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,经ELISA检测结果表明,pET32a-Tat22-101融合蛋白不仅较好地保留其免疫原性,而且能诱导产生高滴度的针对Tat N末端区之外的Tat其他功能区表位的抗体,为进一步研究Tat生物学功能和研制新型HIV Tat疫苗奠定试验基础。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒1型 tat蛋白 缺失突变 原核表达 免疫原性
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TAT蛋白转导结构域介导融合蛋白在小鼠活体的跨膜递送作用 被引量：1
8
作者 刘树滔 何火聪 +3 位作者 陈菁 傅蓉 潘剑茹 饶平凡 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2010年第6期463-466,I0003,I0004,共6页
目的探讨跨膜递送短肽——TAT蛋白转导结构域(简称TAT)介导的与其融合的活性蛋白在活体的跨膜递送作用。方法以融合蛋白GST-TAT-GFP,GST-GFP-TAT和GST-GFP为研究模型蛋白,不经过蛋白质的变性处理、直接通过向小鼠腹腔注射和皮肤涂抹这... 目的探讨跨膜递送短肽——TAT蛋白转导结构域(简称TAT)介导的与其融合的活性蛋白在活体的跨膜递送作用。方法以融合蛋白GST-TAT-GFP,GST-GFP-TAT和GST-GFP为研究模型蛋白,不经过蛋白质的变性处理、直接通过向小鼠腹腔注射和皮肤涂抹这两种含TAT的融合蛋白及作为对照的融合蛋白GST-GFP,一定时间作用后取体内器官和皮肤做冷冻切片,荧光显微镜检测这些融合蛋白的跨膜递送情况;并对分别融合在C端或者N端的TAT介导GFP在活体动物体内和皮肤的跨膜递送作用进行对比。结果腹腔注射实验结果表明,TAT可以介导不经过蛋白质的变性处理的融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT跨膜递送进入到小鼠的心脏、肝、肾、脾和肺,甚至脑组织;其中GST-GFP-TAT跨膜递送效率比GST-TAT-GFP更高。结构模拟分析提示GST-GFP-TAT与GST-TAT-GFP中的TAT的暴露情况不同可能是造成两种蛋白跨膜递送活性差异的重要因素。皮肤实验的结果则表明TAT不仅介导融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT进入小鼠表皮,而且使其进入小鼠皮肤的真皮层。结论 TAT可以跨膜递送不经过变性处理的融合蛋白进入小鼠皮肤和体内,递送效率可能与TAT的暴露程度相关;这些结果为在蛋白质疗法方面应用TAT提供了进一步的理论依据。 展开更多
关键词 tat蛋白转导结构域 融合蛋白 跨膜递送 皮肤 器官
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HIV-1Tat蛋白改变血脑屏障结构和功能的研究进展 被引量：1
9
作者 胡霄 王震 +2 位作者 李桢 曾柏瑞 曾晓锋 《昆明医科大学学报》 CAS 2013年第2期162-166,共5页
HIV-Tat蛋白是人类免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)基因编码的一种被称为反式转录激活因子,是HIV转录和复制所必须的一个很重要的调控蛋白.艾滋病痴呆以及艾滋病相关性脑炎的患者其血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)都受到不同程度的损伤,其中... HIV-Tat蛋白是人类免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)基因编码的一种被称为反式转录激活因子,是HIV转录和复制所必须的一个很重要的调控蛋白.艾滋病痴呆以及艾滋病相关性脑炎的患者其血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)都受到不同程度的损伤,其中HIV-1 Tat蛋白起到了非常重要的作用.然而HIV-Tat蛋白改变血脑屏障结构和功能并不清楚,本综述主要讨论HIV-1 Tat蛋白对血脑屏障结构和功能的影响. 展开更多
关键词 HIV-1tat蛋白 血脑屏障 紧密连接
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TAT蛋白在介导外源物质进入细胞方面的应用 被引量：1
10
作者 江晓曦 郑文岭 +1 位作者 崔东 马文丽 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第5期6-8,共3页
TAT蛋白能够介导多肽、蛋白质、基因等外源物质进入细胞 ,对机体没有毒性 ,对周围环境的影响也不敏感 ,因而可以直接应用于组织细胞。它能够引导外源基因定位于细胞核 ,具有其它介导方法所没有的优点。这些优点将使TAT蛋白在研究蛋白质... TAT蛋白能够介导多肽、蛋白质、基因等外源物质进入细胞 ,对机体没有毒性 ,对周围环境的影响也不敏感 ,因而可以直接应用于组织细胞。它能够引导外源基因定位于细胞核 ,具有其它介导方法所没有的优点。这些优点将使TAT蛋白在研究蛋白质功能、基因治疗等方面发挥极为重要的作用。TAT蛋白与细胞表面进行低亲和力的结合 ,以Caveolae途径进入细胞 。 展开更多
关键词 tat蛋白 介导 外源物质 细胞 艾滋病毒
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HIV-1 Tat蛋白免疫抑制作用的研究进展 被引量：3
11
作者 滕竞飞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期472-474,共3页
关键词 HIV-1感染 免疫抑制作用 tat蛋白 KAPOSI 神经系统损伤 病毒基因组 调控蛋白 反式激活
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TAT蛋白介导外源物质进入细胞的作用机制探讨 被引量：1
12
作者 江晓曦 郑文岭 +1 位作者 崔东 马文丽 《生命的化学》 CAS CSCD 2003年第2期113-115,共3页
来源于人类免疫缺陷病毒HIV 1的反式激活因子 (trans activator,TAT)蛋白能够有效的介导多肽、蛋白质、基因以及一些其它的物质进入细胞。它以低亲和力与细胞上的受体相结合 ,通过破坏细胞质膜 。
关键词 tat蛋白 蛋白质转导域 融合蛋白 小窝途径
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人免疫缺陷病毒1型TAT蛋白点突变对其反式激活作用的影响 被引量：1
13
作者 白龙川 袁建刚 +2 位作者 陈菊凤 屠郑 强伯勤 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第4期381-385,共5页
不同免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１，ＨＩＶ－２和ＳＩＶ）的Ｔａｔ均有３个高度保守的结构域：Ｃｙｓ富集域、核心域和碱性氨基酸富集域，用ＰＣＲ定点突变法在ＨＩＶ－１Ｔａｔ蛋白的这些区域引入单氨基酸或多氨基酸突变；构建了以ＨＩＶ... 不同免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１，ＨＩＶ－２和ＳＩＶ）的Ｔａｔ均有３个高度保守的结构域：Ｃｙｓ富集域、核心域和碱性氨基酸富集域，用ＰＣＲ定点突变法在ＨＩＶ－１Ｔａｔ蛋白的这些区域引入单氨基酸或多氨基酸突变；构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲ－１５８到＋８Ｏ区域为启动子，含有不同突变点的突变Ｔａｔ基因表达质粒；以荧光酶基因为报告基因，瞬时共转染Ｊｕｒｋａｔ细胞：分析不同氨基酸突变对Ｔａｔ的反式激活作用的影响。结果发现，突变后的Ｔａｔ蛋白的活性均极大地降低或丧失，表明这些序列内的氨基酸的确定性对Ｔａｔ的活性至关重要。 展开更多
关键词 艾滋病毒 定点突变 tat蛋白
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TAT蛋白介导锰—超氧化物歧化酶(Mn-SOD)可行性研究 被引量：2
14
作者 贾栋 高国栋 《神经疾病与精神卫生》 2007年第1期18-20,共3页
目的探究TAT蛋白介导锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的可行性。方法建立插入TATPTDDNA序列的表达载体pT7460,将锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因融合进入载体pT7460。应用层析方法提纯融合蛋白并用电泳分析。结果锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)与... 目的探究TAT蛋白介导锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的可行性。方法建立插入TATPTDDNA序列的表达载体pT7460,将锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因融合进入载体pT7460。应用层析方法提纯融合蛋白并用电泳分析。结果锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)与TAT的融合蛋白表达在包涵体内。结论锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)可与TAT形成融合蛋白。 展开更多
关键词 tat蛋白 锰-超氧化物歧化酶 介导
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细胞外HIV Tat蛋白的致病作用及其疫苗研究进展 被引量：4
15
作者 林剑萍 于永利 王丽颖 《国外医学（免疫学分册）》 2005年第2期76-79,共4页
HIV反式激活因子 (transactivator,Tat)作为HIV的调节蛋白 ,不但通过反式激活效应参与病毒基因的复制和表达 ,还可以分泌到胞外 ,抑制免疫细胞的分化和增殖 ,诱导其凋亡 ,激活静止的CD4 + T细胞 ,利于HIV的感染和体内传播 ,同时还能促... HIV反式激活因子 (transactivator,Tat)作为HIV的调节蛋白 ,不但通过反式激活效应参与病毒基因的复制和表达 ,还可以分泌到胞外 ,抑制免疫细胞的分化和增殖 ,诱导其凋亡 ,激活静止的CD4 + T细胞 ,利于HIV的感染和体内传播 ,同时还能促进卡波氏肉瘤肿瘤细胞的发生、生长 ,直接或间接作用于皮质层和皮质下层区引起神经系统的损害。因此Tat作为爱滋病疫苗的靶点进行深入的研究引起了人们的关注 ,本文拟就有关内容作一综述。 展开更多
关键词 爱滋病 tat蛋白 疫苗
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HIV Tat蛋白与单核细胞表达辅助受体CCR5和感染HIV病毒相互关系的研究
16
作者 杨益大 郑临 +2 位作者 吕国才 陈亚岗 Maria Salvato 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第6期532-534,545,共4页
目的 :研究 HIV Tat蛋白对单核细胞表达 HIV辅助受体 CCR5的影响 ,并观察 Tat蛋白对单核细胞感染嗜单核细胞 HIVBa-L病毒的影响。方法 :以流式细胞仪方法测定单核细胞表面表达的 CCR5 ,单核细胞表达分泌的HIV gag p2 4蛋白由 ELISA方法... 目的 :研究 HIV Tat蛋白对单核细胞表达 HIV辅助受体 CCR5的影响 ,并观察 Tat蛋白对单核细胞感染嗜单核细胞 HIVBa-L病毒的影响。方法 :以流式细胞仪方法测定单核细胞表面表达的 CCR5 ,单核细胞表达分泌的HIV gag p2 4蛋白由 ELISA方法检测。结果 :HIV Tat蛋白能增加单核细胞表达 CCR5 ,此作用能被多克隆 Tat蛋白抗体所抑制 ;同时 HIV Tat蛋白能明显增加嗜单核细胞 HIV病毒 (HIVBa-L)感染单核细胞 ,表现为 HIV gag p2 4蛋白表达明显增加。结论 :HIV Tat蛋白增加单核细胞表面 CCR5受体的表达 ,并增加 HIVBa-L感染单核细胞 ,表明HIV Tat蛋白在 HIV感染和发病中起着十分重要的作用。 展开更多
关键词 HIV tat蛋白 辅助受体CCR5 单核细胞 感染
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分泌型TAT蛋白转导结构域基因通用真核表达载体的构建及表达
17
作者 王锦之 陈巨星 +3 位作者 杨忠 周宇荀 马昱澍 魏东芝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期435-436,441,共3页
目的:构建一个全新的分泌型TAT蛋白转导结构域基因哺乳动物细胞融合表达载体并对融合蛋白的表达进行分析。方法:依照编码TATPTD11肽及所引入的BamHI酶识别序列和增强性绿色荧光蛋白N端7个氨基酸的碱基序列合成了3条引物,以egfp基因为模... 目的:构建一个全新的分泌型TAT蛋白转导结构域基因哺乳动物细胞融合表达载体并对融合蛋白的表达进行分析。方法:依照编码TATPTD11肽及所引入的BamHI酶识别序列和增强性绿色荧光蛋白N端7个氨基酸的碱基序列合成了3条引物,以egfp基因为模板通过依次3轮PCR扩增得到tategfp融合基因,该基因片段以SfiI和HindⅢ双酶切后插入哺乳动物细胞表达载体pSectagA,构建成重组载体pSecTATmegfp,BamHI单酶切后该载体自连,即得到可通用的真核表达载体pSecTATm,重组质粒pSecTATmegfp转染HEK293细胞,融合蛋白的表达用Westernblot分析。结果:酶切及测序证实表达载体pSecTATm构建成功,Westernblot表明TATEGFP融合蛋白在HEK293细胞中获得表达并分泌到细胞培养液中。结论:成功地构建了分泌型TAT蛋白转导结构域基因的哺乳动物细胞融合表达载体,为更充分发挥TAT蛋白转导结构域在蛋白质功能及疾病治疗研究中的应用打下了基础。 展开更多
关键词 tat蛋白转导结构域 载体构建 增强性绿色荧光蛋白 WESTEM BLOT
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HIV-1Tat蛋白与艾滋病脑病
18
作者 周勤华 姚鑫 惠斌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期399-404,共6页
Tat蛋白是HIV-1编码的反式转录激活因子,其主要功能是反式激活HIV-1病毒基因组转录的起始和延伸,启动病毒复制.近年来研究发现,Tat蛋白在HIV-1感染所引起的严重中枢神经系统(CNS)并发症——艾滋病脑病中起重要作用,是艾滋病脑病发生与... Tat蛋白是HIV-1编码的反式转录激活因子,其主要功能是反式激活HIV-1病毒基因组转录的起始和延伸,启动病毒复制.近年来研究发现,Tat蛋白在HIV-1感染所引起的严重中枢神经系统(CNS)并发症——艾滋病脑病中起重要作用,是艾滋病脑病发生与发展的重要致病因子.本文就HIV-1 Tat蛋白在艾滋病脑病中的研究进展作一综述. 展开更多
关键词 tat蛋白 艾滋病脑病 神经毒性
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HIV-1 Tat蛋白结合Tar的抗艾滋病药物筛选模型的建立研究
19
作者 李在留 刘朝奇 +4 位作者 邹坤 李凤兰 韩钰 杨凡 王磊黎 《中国药理通讯》 2007年第3期33-34,共2页
目的：建立HIV-1 Tat蛋白结合Tar的细胞模型用于抗艾滋病药物体外筛选。方法：构建表达HIV-1 Tat蛋白的真核表达质粒（pCDNA3．1（＋）-Tat）和HIV-1 LTR-luc荧光素酶报告基因，采用脂质体转染法共转染HeLa细胞，荧光仪检测Tat蛋白结合H... 目的：建立HIV-1 Tat蛋白结合Tar的细胞模型用于抗艾滋病药物体外筛选。方法：构建表达HIV-1 Tat蛋白的真核表达质粒（pCDNA3．1（＋）-Tat）和HIV-1 LTR-luc荧光素酶报告基因，采用脂质体转染法共转染HeLa细胞，荧光仪检测Tat蛋白结合HIV-1LTR促进荧光素酶在HeLa细胞内的表达情况。结果：成功构建pCDNA3．1（＋）-Tat和HIV-1 LTR-luc质粒，将质粒共转染HeLa细胞，荧光仪检测到荧光素酶的活性，建立了HIV-1 Tat蛋白结合Tar的细胞模型。以DRB（5，6-二氯-1-β呋核亚硝脲-苯并咪唑）为阳性对照，进行模型的条件优化。通过反复试验表明：目的基因和报告基因的比例、细胞浓度以及药物作用时间等对模型的稳定性和敏感性有影响。应用优化的细胞模型对文冠果、紫苏等天然产物浸提物进行筛选及结果的分析。结论：建立的HIV-1Tat蛋白结合Tar的细胞模型可用于抗HIV-1的药物筛选。 展开更多
关键词 艾滋病病毒 HIV-1tat蛋白 海拉细胞 药物筛选
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反显性突变Tat蛋白抑制人免疫缺陷病毒1型的复制
20
作者 白龙川 胡松年 +2 位作者 赵全壁 邵一鸣 强伯勤 《自然科学进展（国家重点实验室通讯）》 1999年第7期602-605,共4页
Tat(Transactivator)蛋白是人免疫缺陷病毒HIV基因组编码的反式激活因子。为了进一步研究M5 Tat和M6 Tat蛋白对HIV病毒复制的抑制作用,将可被Tat调控的启动子YL158替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体LNCX中的CMV启动子,构建了表达上述... Tat(Transactivator)蛋白是人免疫缺陷病毒HIV基因组编码的反式激活因子。为了进一步研究M5 Tat和M6 Tat蛋白对HIV病毒复制的抑制作用,将可被Tat调控的启动子YL158替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体LNCX中的CMV启动子,构建了表达上述反显性Tat蛋白的逆转录病毒载体,随后导入双向性包装细胞PA317细胞中,用产生出的复制缺陷病毒感染MT4 T淋巴细胞.用HIV-1病毒攻击稳定表达有M5和M6 Tat蛋白的MT4细胞;结果显示,M5和M6 Tat蛋白均能抑制低剂量的HIV-1病毒的复制。 展开更多
关键词 人免疫缺陷病毒 1型 反显性 tat蛋白
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