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重组HIV-TATm-Survivin(T34A)蛋白制备及其促癌细胞凋亡活性研究 被引量:3
1
作者 郑文云 马兴元 +4 位作者 魏东芝 王锦之 刘清海 马昱澍 杨胜利 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期285-292,共8页
从人乳腺癌细胞系B-Cap-37中克隆出Survivin的cDNA,并对其中编码34位Thr的密码子定点突变为Ala的密码子后,经一系列基因操作方法将天然HIV-TAT转导肽的突变体基因HIV-TATm引入Survivin(T34A)基因的5′端,正确构建了表达载体pRSET-B-HIV-... 从人乳腺癌细胞系B-Cap-37中克隆出Survivin的cDNA,并对其中编码34位Thr的密码子定点突变为Ala的密码子后,经一系列基因操作方法将天然HIV-TAT转导肽的突变体基因HIV-TATm引入Survivin(T34A)基因的5′端,正确构建了表达载体pRSET-B-HIV-TATm-Survivin(T34A),经转化E.coliBL21(DE3)后诱导表达,目的蛋白质以包涵体形式表达,占菌体总蛋白的45%。经3.7L发酵罐分批发酵可收获650mg/L的包涵体,经阳离子交换、凝胶层析分离和柱上复性与透析,得到纯度达96%以上的可溶性目的蛋白HIV-TATm-Survivin(T34A)。目的蛋白对人乳腺癌细胞B-Cap-37、人胰腺癌细胞SW1990和人肝癌细胞SSMC-7721作用4h后有在细胞形态上呈现出显著的凋亡特征,而对人宫颈癌细胞系Hela不敏感,对正常的人内皮细胞系EVC-304未见明显影响。作用24h时MTT法检测显示,120μg/mL目的蛋白对SW1990、B-Cap-37、SSMC-7721和Hela细胞的抑制率分别达到89%、63%、59.5%和39%,且具有剂量依赖性。对最为敏感的SW1990和B-Cap-37以每孔60μg/mL终浓度的目的蛋白作用48h的流式细胞技术检测发现,凋亡率分别为25.6%和19.3%,与对照相比,实验组细胞出现明显的凋亡峰,细胞周期的分布发生明显的变化,65%以上的癌细胞被阻滞于G1期。体外实验结果显示重组目的蛋白具有较强的抑制癌细胞增殖和促进凋亡作用,预示着良好的抗癌前景。 展开更多
关键词 重组HIV-TATm-Survivin(t34A)突变体 表达纯化 促凋亡活性 B-Cap-37和SW1990癌细胞系
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携带Survivin-△3(T34A)的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗与抗肿瘤效果初探 被引量:2
2
作者 陈英利 祁冬冬 +5 位作者 李翀 朴金花 张霞 苏晓杰 林雪松 张涛 《实用预防医学》 CAS 2012年第1期8-12,共5页
目的探讨携带Survivin-△3(T34A)基因的减毒鼠伤寒沙门菌口服疫苗对乳腺瘤MCF-7注射细胞小鼠的保护作用及其效果。方法人工合成Survivin-△3(T34A)基因,先后将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1和pVAX1载体,获得pVAX1-Survivin-△3(T34A)-E... 目的探讨携带Survivin-△3(T34A)基因的减毒鼠伤寒沙门菌口服疫苗对乳腺瘤MCF-7注射细胞小鼠的保护作用及其效果。方法人工合成Survivin-△3(T34A)基因,先后将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1和pVAX1载体,获得pVAX1-Survivin-△3(T34A)-EGFP真核表达载体,电转化至减毒鼠伤寒沙门菌;小鼠分别口服pVAX1-Survivin-△3(T34A)-EGFP转染沙门菌(实验组)、pVAX1-EGFP转染沙门菌(空质粒组)、沙门菌(对照组)和PBS(空白对照组)后,再皮下注射MCF-7乳腺癌细胞,采用Western-blotting检测Survivin-△3(T34A)蛋白水平,以及测定注射部位瘤块的体积大小。结果成功构建了真核表达载体pVAX1-Survivin-△3(T34A)-EGFP并转化到减毒鼠伤寒沙门菌得到表达;在空质粒组、细菌组、空白对照组和实验组小鼠中,肿瘤瘤块平均直径分别为(25.813±0.108)mm、(25.627±0.117)mm、(26.257±0.213)mm、(9.124±0.086)mm;实验组与其他组相比,差异有统计学意义(P<0.05),且能在血清中检测到Survivin-△3(T34A)-EGFP融合蛋白的存在。结论小鼠口服携带Survivin-△3(T34A)真核质粒的沙门菌后,能够抑制MCF-7乳腺瘤细胞的增殖和扩散。 展开更多
关键词 存活素 减毒鼠伤寒沙门菌 Survivin—△3 Survivin—△3(t34A) PVAX1
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人生存素T34A重组腺病毒载体的构建、鉴定和体外表达 被引量:1
3
作者 张鹏 李涛 郎锦义 《华西医学》 CAS 2008年第6期1362-1364,共3页
目的:采用高效简便的GatewayTM系统构建人生存素T34A基因重组腺病毒载体(Ad-hSurvivinT34A)。方法:从pORF9-hSurvivinT34A质粒中克隆人生存素T34A基因,经NcoⅠ/XhoⅠ双酶切后插入到入门载体pEN-TR11的attL1和attL2之间,形成入门克隆;在... 目的:采用高效简便的GatewayTM系统构建人生存素T34A基因重组腺病毒载体(Ad-hSurvivinT34A)。方法:从pORF9-hSurvivinT34A质粒中克隆人生存素T34A基因,经NcoⅠ/XhoⅠ双酶切后插入到入门载体pEN-TR11的attL1和attL2之间,形成入门克隆;在高效重组酶的作用下,入门克隆与带attR1和attR2位点的病毒骨架载体Ad/CMV/V5-DEST发生体外同源重组,形成表达克隆Ad-hSurvivinT34A。鉴定正确后将其线性化,由Lipo-fectamine2000介导转染293细胞进行病毒包装,收集病毒上清。采用western Blot检测病毒感染的人宫颈癌细胞株Hela细胞中人生存素T34A蛋白的表达。结果:成功构建了人生存素T34A基因的重组腺病毒,该病毒能在细胞中高效表达。结论:本实验利用GatewayTM系统成功构建了Ad-hSurvivinT34A,与传统的腺病毒构建方法相比,更简便和高效,为下一步利用人生存素T34A进行肿瘤免疫基因治疗奠定实验基础。 展开更多
关键词 人生存素t34A GatewayTM 重组腺病毒
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T34肽的圆二色性研究
4
作者 胡伟钢 朱锡华 +1 位作者 吴玉章 贾正才 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期137-137,共1页
T34肽的圆二色性研究*胡伟钢1朱锡华1吴玉章1贾正才1T34肽是对应于超抗原毒素休克综合征毒素-1(TSST-1)蛋白质分子中的第125至第158位残基序列合成的,以往的研究证明:T34肽内含有一个TSST-1的超... T34肽的圆二色性研究*胡伟钢1朱锡华1吴玉章1贾正才1T34肽是对应于超抗原毒素休克综合征毒素-1(TSST-1)蛋白质分子中的第125至第158位残基序列合成的,以往的研究证明:T34肽内含有一个TSST-1的超抗原T细胞表位,此表位的TCRVβ... 展开更多
关键词 t34 圆二色性 TSST-1 超抗原 T细胞表位
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重组蛋白TATm-Survivin(T34/117A)对乳腺癌细胞周期变化与凋亡的影响
5
作者 康燕燕 唐莉莉 +3 位作者 石磊 陈海龙 林南静 马兴元 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期91-98,共8页
背景与目的:Survivin是一个抗凋亡、促增殖的双功能基因,且高表达于多种恶性肿瘤和转化组织中,使其成为抗肿瘤药物研究的新靶点。本研究观察经点突变的重组蛋白药物TATm-Survivin(T34/117A)处理乳腺癌细胞B-Cap-37后,对乳腺癌细胞B-Cap... 背景与目的:Survivin是一个抗凋亡、促增殖的双功能基因,且高表达于多种恶性肿瘤和转化组织中,使其成为抗肿瘤药物研究的新靶点。本研究观察经点突变的重组蛋白药物TATm-Survivin(T34/117A)处理乳腺癌细胞B-Cap-37后,对乳腺癌细胞B-Cap-37细胞周期和增殖的影响,检测其对癌细胞促凋亡且抑制增殖的药效并初步探讨其分子机制。方法:重叠PCR法在TATm-Survivin(T34A)基因上引入突变位点Thr117→Ala117,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期及线粒体膜电位变化;Western blot检测Aurora B激酶底物Histone H3的磷酸化水平和Caspase-3激活情况。结果:TATm-Survivin(T34/117A)蛋白对B-Cap-37细胞的增殖有显著的抑制作用;作用24 h后,细胞被阻滞在G0/G1期,G0/G1期细胞由对照组的(54.1±6.1)%显著增加到(62.7±5.1)%(P<0.05),作用48 h后,细胞被阻滞在G2/M期,G2/M细胞由对照组的(16.6±8.9)%显著增加到(24.0±6.0)%;Aurora B激酶活性通过Histone H3的磷酸化水平间接反映,蛋白药物处理48 h后p-Histone H3的灰度值由对照组的100%降低到89.8%(P<0.05);48 h时,细胞线粒体膜电位由对照组的(649.9±8.0)%显著降低到(582.9±15.6)%(P<0.05);细胞凋亡率由对照组的(4.6±0.7)%显著增加到(42.7±0.5)%(P<0.01),与对照相比,不同浓度的重组蛋白均激活了Caspase-3。结论:重组蛋白TATm-Survivin(T34/117A)对乳腺癌B-Cap-37具有抑制增殖、促凋亡作用,其与降低Aurora B激酶的活性,并激活Caspase-3相关。 展开更多
关键词 TATm-Survivin(t34/117A) 点突变 乳腺癌 周期阻滞 凋亡
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HIV-TATm-Survivin(T34A)高表达大肠杆菌BL21(DE3)菌株的自适应进化筛选及其特性
6
作者 姚雪凌 王恒伟 +2 位作者 王玮 王风清 魏东芝 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期203-210,共8页
表达蛋白HIV-TATm-Survivin(T34A)的重组大肠杆菌BL21(DE3)在长时间保存后其表达水平明显下降,发酵罐放大难以顺利进行。利用该蛋白的本底表达对宿主菌产生的生长压力进行了实验室自适应进化工作,得到携带相同质粒但表达水平呈两极分化... 表达蛋白HIV-TATm-Survivin(T34A)的重组大肠杆菌BL21(DE3)在长时间保存后其表达水平明显下降,发酵罐放大难以顺利进行。利用该蛋白的本底表达对宿主菌产生的生长压力进行了实验室自适应进化工作,得到携带相同质粒但表达水平呈两极分化的两类菌株HTS1和HTS2。摇瓶培养时,HTS1菌株生长较迅速,但重组蛋白几乎无表达;HTS2生长较缓慢,却可以高效积累重组蛋白。因此HTS1菌株的出现,可能是原始菌株长时间保存后蛋白表达能力下降的原因之一。另外,HTS2菌株应用上的优势,外源添加高达300 mmol/L的乙酸钠对HIV-TATm-Survivin(T34A)的表达水平没有较明显负的影响,4 L和30 L发酵罐表达验证了摇瓶培养的结果。 展开更多
关键词 大肠杆菌 重组蛋白 自适应进化 菌种保存 发酵放大 HIV-TATm-Survivin(t34A)
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木霉T34对根结线虫的研究
7
作者 冯天雨 《南方农业》 2016年第21期22-23,共2页
为了明确木霉T34种类及其对根结线虫二龄幼虫的致死活性,研究采用形态学和ITS分子方法对T34进行物种鉴定,并测定T34发酵液对根结线虫的致死活性。结果表明:木霉T34为哈慈木霉,其发酵液浓度为99.63%时,在防治植物线虫上具有广阔的应用前景。
关键词 木霉t34 根结线虫 二龄幼虫 相对抑制率 校正死亡
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洗涤条件对重组TAT_m-survivin(T34A)包涵体纯度的影响 被引量:1
8
作者 张海毅 《生物化工》 2017年第6期18-20,28,共4页
目的:确定重组TAT_m-survivin(T34A)包涵体的洗涤条件。方法:将补料分批发酵得到的重组大肠杆菌破碎,得到TAT_m-survivin(T34A)粗制包涵体,探索pH、化学物质、尿素浓度、洗涤次数对包涵体洗涤的影响。结果:得到重组TAT_m survivin(T34A... 目的:确定重组TAT_m-survivin(T34A)包涵体的洗涤条件。方法:将补料分批发酵得到的重组大肠杆菌破碎,得到TAT_m-survivin(T34A)粗制包涵体,探索pH、化学物质、尿素浓度、洗涤次数对包涵体洗涤的影响。结果:得到重组TAT_m survivin(T34A)包涵体的最佳洗涤条件为洗涤液成分为pH10.0甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(20mmol/L),内含100μmol/L巯基乙醇、0.5%Triton X-100、0.5mol/L尿素、1mol/L氯化钠和2.5mmol/L EDTA;洗涤次数为4次。结论:利用优化的洗涤条件进行洗涤后,包涵体的纯度达到85%左右,整体的回收率达到80%以上。 展开更多
关键词 重组TAT_m-survivin(t34A) 包涵体 洗涤条件
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Survivin T34A质粒/脂质体复合物抑制Lewis肺癌实验研究 被引量:1
9
作者 于丹丹 王春婷 石华山 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2011年第10期2845-2850,共6页
目的本研究旨在观察及探讨Survivin基因突变体Survivin T34A对Lewis肺癌的影响和作用机制。方法构建Survivin T34A质粒/脂质体复合物(Lip-mS)及空载质粒/脂质体复合物(Lip-null);体外分别以Lip-mS及Lip-null转染Lewis肺癌细胞,以空白组(... 目的本研究旨在观察及探讨Survivin基因突变体Survivin T34A对Lewis肺癌的影响和作用机制。方法构建Survivin T34A质粒/脂质体复合物(Lip-mS)及空载质粒/脂质体复合物(Lip-null);体外分别以Lip-mS及Lip-null转染Lewis肺癌细胞,以空白组(NS)作为对照组,利用流式细胞仪检测各组肿瘤细胞的凋亡率;体内试验使用C57BL/6小鼠建立Lewis皮下移植瘤动物模型,随机分为Lip-mS治疗组、Lip-null治疗组及NS组,观察各组小鼠肿瘤生长情况,通过对肿瘤组织CD31免疫组化、TUNEL荧光染色探讨SurvivinT34A基因的抗瘤机制。结果流式细胞仪检测体外转染不同质粒后各组肿瘤细胞的凋亡:NS组(8.7±0.5)%、Lip-null组(9.0±1.0)%、Lip-mS组(41.6±1.7)%,Lip-mS组相对于其他各组诱导凋亡作用显著(P<0.01);C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型接受治疗后,计算各组小鼠抑瘤率(TIR),Lip-null组为负值,Lip-mS组为71.1%,分析小鼠肿瘤生长曲线,Lip-mS组较其他各组有显著抑瘤作用(P<0.05);肿瘤组织凋亡染色(TUNEL):Lip-mS组凋亡系数为(40.0±2.3)%,与NS组的(11.8±2.4)%、Lip-null组的(12.8±1.8)%比较有统计学差异(P<0.05);CD31免疫组化染色中肿瘤微血管密度:Lip-mS组为6.3±0.76,明显小于NS组的47.1±1.37和Lip-null组的45.8±1.18(P<0.01)。结论 SurvivinT34A质粒/脂质体复合物对Lewis肺癌治疗有效,能够诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤微血管生成,从而控制肿瘤生长。 展开更多
关键词 Lewis肺 脂质体 基因疗法 SURVIVIN t34A
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T/CSM 34—2021《钢丝拉拔用粉粒状润滑剂》制定解释
10
作者 张文倩 王宝玉 +3 位作者 李鸿涛 张俊杰 史永锋 朱文浩 《金属制品》 2025年第2期49-52,共4页
介绍制定T/CSM 34—2021《钢丝拉拔用粉粒状润滑剂》的任务来源、工作程序和编制准则,对标准中8个章节的主要条款进行说明。标准对钠皂、钙皂、钠钙混合皂、钠钾混合皂、添加剂术语进行了明确界定,对粉粒状润滑剂的堆密度、粒度、质量... 介绍制定T/CSM 34—2021《钢丝拉拔用粉粒状润滑剂》的任务来源、工作程序和编制准则,对标准中8个章节的主要条款进行说明。标准对钠皂、钙皂、钠钙混合皂、钠钾混合皂、添加剂术语进行了明确界定,对粉粒状润滑剂的堆密度、粒度、质量百分比、流动角、水分含量、灰分、软化温度、脂肪酸含量、有害物质等性能指标进行量化;对润滑剂性能指标给出具体的检验方法,包括计算公式,检验规则详细明确。团标的制定使得钢丝拉拔用粉粒状润滑剂质量有章可循。 展开更多
关键词 T/CSM 34—2021 粉粒状润滑剂 粒度 脂肪酸 添加剂 钢丝拉拔
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大斜度定向井施工实践与认识
11
作者 张利建 张文雨 《石化技术》 CAS 2016年第5期271-271,共1页
本文对大斜度定向井施工中的轨迹控制和复杂预防技术进行了详细论述。
关键词 轨迹控制 复杂预防 t34-X5井
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人CYP17基因启动子5'上游-34碱基处T→C突变与复发性流产 被引量:1
12
作者 林泓兵 张家颖 翟颖仙 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2010年第11期813-815,819,共4页
目的:探讨人类CYP17基因启动子5'上游-34碱基处T→C突变与复发性流产的关系,以期为预防和治疗该病易感人群提供新思路。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,针对CYP17基因启动子5'上游-34碱基处的多态... 目的:探讨人类CYP17基因启动子5'上游-34碱基处T→C突变与复发性流产的关系,以期为预防和治疗该病易感人群提供新思路。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,针对CYP17基因启动子5'上游-34碱基处的多态性,检测96例患有原因不明复发性流产患者(病例组)和102例有生育史的健康女性(对照组),并用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法进一步验证,且采用测序方法证实实验结果。结果:病例组和对照组CYP17基因启动子5'上游-34碱基处T和C的分布差异有统计学意义(χ2=8.188,P<0.05),CYP17基因各基因型分布差异有统计学意义(χ2=10.096,P<0.05)。杂合突变(T/C)基因型和纯合突变(C/C)基因型患复发性流产的危险度较野生(T/T)基因型分别提高了0.424和0.271倍。结论:人CYP17基因启动子5'上游-34碱基处T→C突变与中国东北地区人群复发性流产有关,C等位基因可能是复发性流产的遗传易感因素之一。 展开更多
关键词 复发性流产 人类CYP17基因 启动子5'上游-34碱基处T→C突变 聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性
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高效液相色谱法测定鸡蛋中氟苯尼考残留量的不确定度研究 被引量:2
13
作者 王英 许利琴 +2 位作者 严敏鸣 倪惠军 张海颖 《上海畜牧兽医通讯》 2018年第6期28-29,共2页
通过数学模型,对DB34/T 1376-2011HPLC法测定鸡蛋中氟苯尼考残留量的方法不确定度进行评估。从影响不确定度的标准溶液配制u_s、样品的前处理u_p、仪器测量的不确定度u_m三个主要因素,对不确定度分量进行计算合成。结果表明,该方法在本... 通过数学模型,对DB34/T 1376-2011HPLC法测定鸡蛋中氟苯尼考残留量的方法不确定度进行评估。从影响不确定度的标准溶液配制u_s、样品的前处理u_p、仪器测量的不确定度u_m三个主要因素,对不确定度分量进行计算合成。结果表明,该方法在本实验室的合成相对标准不确定度为u_x=0.028 8,k=2。 展开更多
关键词 鸡蛋 氟苯尼考 DB34/T 1376-201 不确定度 高效液相色谱法
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“高清”现身
14
作者 庄周 《电器评介》 2004年第9期64-66,共3页
如今的彩电市场,高清已成为主题。对于高清电视,业内人士在谈到它一系列优点的时候,更看到它所蕴藏的巨大商机,认为这是一个巨大的产业链,有专家预测能有上万亿的市场空间,高清数字电视更被誉为未来10年最具发展潜力的一个行业。
关键词 高清电视 创维公司 34T86HT 外观 性能
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12Cr2MoWVTiB热强钢的焊接
15
作者 王燕秋 《江西能源》 2005年第4期31-32,共2页
我公司通过对12Cr2MoWVTiB进行焊接工艺试验,匹配合理的焊接材料,确定合适的焊接工艺参数,成功用于高压锅筒的焊接生产。
关键词 12CR2MOWVTIB T1G-R34 焊接材料 焊接工艺 试验
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34英寸高端电视机对比评测
16
《电器评介》 2004年第5期12-21,共10页
声明 “主观评价为主,客观测试为辅”是《电器评介》评测室与国家监 督检验部门评测标准的最大不同。 客观、独立、公正、公开地评价、推荐优秀的产品,是我们的工作 准则。 评测人员由刊社根据所评测电器。
关键词 CRT 电视机 性能评测 HDP3411 34F9A-PN 34T68HD
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视听产品
17
《电器评介》 2004年第6期84-84,共1页
将插头插入音乐播放器的耳机插孔 调节FM收音机就会收到音乐播放器中的声音 高清晰立体声传输
关键词 产品介绍 29T66HD 电视 34T68HD DVD-HD931 DVD机
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EL-34 (T)A级推挽放大器的制作
18
作者 白宏峰 《家庭电子》 2003年第7期41-41,共1页
本文介绍一款带输入、输出变压器的EL-34(T)A级推挽13W无反馈、古典型推挽功率放大器的制作,其电路原理如附图所示。P-285Q是输入变压器,其初级阻抗为600Ω,次级阻抗为5kΩ,升压比1:2.88,输出管前设置一级电压放大器,采用电压增益20倍... 本文介绍一款带输入、输出变压器的EL-34(T)A级推挽13W无反馈、古典型推挽功率放大器的制作,其电路原理如附图所示。P-285Q是输入变压器,其初级阻抗为600Ω,次级阻抗为5kΩ,升压比1:2.88,输出管前设置一级电压放大器,采用电压增益20倍左右的中μ对管推挽型古典电路,电压放大管为飞利浦SQ管E80CC。E80CC作为低噪声管多应用于真空管时代的录音机等。向E80CC管内部看去,有外形相当于ECC82/12AU7两倍大的阳极。 展开更多
关键词 推挽功率放大器 EL-34(T)A级 制作方法 电路原理 P-285Q E80CC
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An Effective Method for Depleting MatureT Lymphocytes from Bone Marrow Cells──Two-step Percoll Centrifugation
19
作者 唐继森 王辨明 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 1994年第2期128-128,共1页
In the present paper we have observed the effect of discontinuous gradient two-step Percoll centrifugation on depleting mature T lymphocytes from normal bone marrow. The pre-/post-Percoll percentage of CD34+, and Leu4... In the present paper we have observed the effect of discontinuous gradient two-step Percoll centrifugation on depleting mature T lymphocytes from normal bone marrow. The pre-/post-Percoll percentage of CD34+, and Leu4+ cells in MNC was counted by using APAAP technique. As the two-step Percoll centrifugation is simple,and time saving, and decreases the incidence of contamination of cultured cells as well,This technique may be of value in serum-free culture of hematopoietic cells and immunological studies. 展开更多
关键词 Percoll centrifugation mature T lymphocyte in bonemarrow CD34+ cells Leu4+ T lymphocytes
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Survivin突变体对乳腺癌细胞的体内外作用
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作者 邓晓慧 宋海岩 任铭新 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期648-651,共4页
为了探讨Survivin负性突变体T34A对乳腺癌细胞MCF-7增殖与凋亡的影响,本文分别采用生理盐水、空载体质粒(PORF-9-null)及Survivin-T34A与MCF-7细胞共培养,观察体外MCF-7细胞的增殖及凋亡情况;建立乳腺癌裸鼠模型,体内实验检测Survivin-T... 为了探讨Survivin负性突变体T34A对乳腺癌细胞MCF-7增殖与凋亡的影响,本文分别采用生理盐水、空载体质粒(PORF-9-null)及Survivin-T34A与MCF-7细胞共培养,观察体外MCF-7细胞的增殖及凋亡情况;建立乳腺癌裸鼠模型,体内实验检测Survivin-T34A对乳腺癌的抑制作用。结果表明转染了Survivin-T34A的细胞增殖率明显低于PORF-9-null组,电镜下观察可见细胞凋亡增多,流式细胞术检测显示其凋亡率明显高于空载体组。瘤内注射Survivin-T34A组的抑瘤效果明显,抑制率达47.1%。本研究提示Survivin-T34A负性突变体能够有效地抑制乳腺癌细胞的增殖,并促进其凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 Survivin—t34A 突变体 乳腺癌 凋亡
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