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粪肠球菌t3对饲喂高淀粉饲料大口黑鲈生长、血清生化指标和肝脏糖脂代谢的影响
1
作者 李芬 刘朋傲 +5 位作者 黄柯云 杨红玲 蔡国鹤 徐晓津 汪攀 孙云章 《饲料研究》 北大核心 2026年第1期71-76,共6页
试验旨在探究高淀粉饲料中添加粪肠球菌t3对大口黑鲈生长性能、血清生化指标和肝脏糖脂代谢的影响。选取225尾初始体重为(5.46±0.01) g的健康大口黑鲈,随机分成3组,每组3个重复,每个重复25尾。对照组(CON组)饲喂高淀粉基础饲料,试... 试验旨在探究高淀粉饲料中添加粪肠球菌t3对大口黑鲈生长性能、血清生化指标和肝脏糖脂代谢的影响。选取225尾初始体重为(5.46±0.01) g的健康大口黑鲈,随机分成3组,每组3个重复,每个重复25尾。对照组(CON组)饲喂高淀粉基础饲料,试验组分别在高淀粉基础饲料中添加0.12%(E1组)和1.18%(E2组)粪肠球菌t3。预试期2 w,正式试验期8 w。结果显示,与CON组相比,E1组和E2组末重、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、蛋白质效率(PER)和肥满度(CF)显著提高(P<0.05),摄食率(FR)和脏体比(VSI)显著降低(P<0.05);E2组肝体比(HSI)显著降低(P<0.05)。E2组血清中葡萄糖(GLU)含量显著降低(P<0.05),E1组和E2组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和D-乳酸(LD)含量,以及谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性显著降低(P<0.05),酸性磷酸酶(ACP)活性显著提高(P<0.05);E2组碱性磷酸酶(AKP)活性显著提高(P<0.05)。E1组和E2组肝脏中肝糖原含量及磷酸果糖激酶(PFK)、脂肪酸合成酶(FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性显著降低(P<0.05)。饲料中添加粪肠球菌t3改善了大口黑鲈肝脏和肠道的组织结构。研究表明,在高淀粉饲料中添加粪肠球菌t3可以调节大口黑鲈肝脏糖脂代谢能力,改善肝脏及肠道健康,从而提高生长性能和饲料利用效率。粪肠球菌t3添加量为1.18%时,整体效果较佳。 展开更多
关键词 粪肠球菌t3 高淀粉饲料 肝脏代谢 生长性能 生化指标 大口黑鲈
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C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化
2
作者 买热艳木·肉孜 汪红平 +5 位作者 张翠平 夏娟 申甜 雷涛 鲁郡 高洁 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第19期4867-4872,共6页
背景:脂肪细胞分化是一个复杂的生物学过程,涉及前脂肪细胞向成熟脂肪细胞的转化,这一过程在肥胖和相关代谢性疾病的发生发展中发挥关键作用。近年来,C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白家族作为脂肪因子新成员,已成为代谢调控领域的研究热点。目... 背景:脂肪细胞分化是一个复杂的生物学过程,涉及前脂肪细胞向成熟脂肪细胞的转化,这一过程在肥胖和相关代谢性疾病的发生发展中发挥关键作用。近年来,C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白家族作为脂肪因子新成员,已成为代谢调控领域的研究热点。目的:探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用及机制。方法:采用CCK-8法测定不同质量浓度C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4对3T3-L1前脂肪细胞活性的影响,选择安全浓度进行干预。将3T3-L1前脂肪细胞分为对照组、诱导剂组、 C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4组,首先将3T3-L1前脂肪细胞进行接触抑制2 d,随后加入成脂诱导剂和C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4处理。分化第10天,采用油红O染色观察脂滴形成程度,采用RT-qPCR和Western blot检测CCAAT/增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂肪酸结合蛋白4基因的mRNA和蛋白表达水平,采用甘油三酯和总胆固醇检测试剂盒测定细胞内甘油三酯和总胆固醇水平。结果与结论:C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4对3T3-L1前脂肪细胞无毒性作用的最高安全质量浓度为1 000 ng/mL。与对照组相比,诱导剂组细胞内脂滴形成增加,甘油三酯和总胆固醇水平升高(P<0.05),CCAAT/增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂肪酸结合蛋白4的mRNA及蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。与诱导剂组相比,C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4组细胞内脂滴形成减少,甘油三酯和总胆固醇水平降低(P<0.05);CCAAT/增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂肪酸结合蛋白4的mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。结果表明,C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4能抑制前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,作用机制可能与下调CCAAT/增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂肪酸结合蛋白4的表达有关。 展开更多
关键词 CTRP4 脂肪分化 3t3-L1前脂肪细胞 肥胖 脂肪生成 代谢紊乱 脂质积累 代谢失衡
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基于T3SS的沙门氏菌抑制剂筛选系统构建与多酚类化合物活性评价
3
作者 茹梦珂 刘盼盼 +5 位作者 李穗湘 杨珍 郝宝成 王胜义 胡庭俊 崔东安 《动物医学进展》 北大核心 2026年第3期1-8,共8页
Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,T3SS)是沙门氏菌重要毒力因子,针对T3SS的特异性抑制剂是抗沙门氏菌感染的有效方法。用Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门氏菌invA基因缺失株(SL1344ΔinvA),用无缝克隆连接构建pWSK29-sopE2-luc报告... Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,T3SS)是沙门氏菌重要毒力因子,针对T3SS的特异性抑制剂是抗沙门氏菌感染的有效方法。用Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门氏菌invA基因缺失株(SL1344ΔinvA),用无缝克隆连接构建pWSK29-sopE2-luc报告质粒,分别转化SL1344和SL1344ΔinvA获得报告菌株,以MOI=100感染复数建立鼠伤寒沙门氏菌感染HeLa细胞模型,建立T3SS抑制剂筛选系统,并筛选多酚类化合物以获得T3SS天然产物抑制剂。结果显示,成功获得SL1344ΔinvA菌株及SL1344(pWSK29-sopE2-luc)和SL1344ΔinvA(pWSK29-sopE2-luc)报告菌株,通过T3SS抑制剂筛选系统,筛选获得没食子酸乙酯、没食子酸丙酯、咖啡酸、4-香豆酸和单宁酸T3SS有效抑制剂。本研究成功构建T3SS抑制剂筛选系统,为沙门氏菌抗毒力因子的药物筛选搭建平台。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 Ⅲ型分泌系统(t3SS) 毒力抑制 RED同源重组 多酚类化合物
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miR-153-3p/KLF5轴对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的影响
4
作者 赵梅曼 张立春 +3 位作者 李成萍 周文皓 于元元 周国利 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第4期1895-1905,共11页
【目的】研究miR-153-3p/KLF5轴在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中的功能及作用机制。【方法】采用鸡尾酒诱导法诱导3T3-L1前脂肪细胞成脂分化,并收集诱导分化第0、2、4、6和8天细胞,利用实时荧光定量PCR检测不同分化时期细胞中miR-153-3p... 【目的】研究miR-153-3p/KLF5轴在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中的功能及作用机制。【方法】采用鸡尾酒诱导法诱导3T3-L1前脂肪细胞成脂分化,并收集诱导分化第0、2、4、6和8天细胞,利用实时荧光定量PCR检测不同分化时期细胞中miR-153-3p相对表达量;将miR-153-3p模拟物(mimics)、抑制物(inhibitor)和阴性对照(NC)分别转染3T3-L1细胞并诱导成脂分化,通过油红O染色观察脂滴形成情况,利用实时荧光定量PCR检测成脂标志基因CAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、C/EBPβ、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)相对表达量,同时采用Western blotting检测成脂标志基因的蛋白表达水平;利用TargetScan在线网站预测miR-153-3p靶基因,比对候选靶基因的3'-非翻译区(3'-UTR)与miR-153-3p结合位点在不同物种间的序列保守性。分别将miR-153-3p mimics、NC与双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2的重组体(WT-3'-UTR和Mut-miR153)共转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告基因试验检测miR-153-3p与KLF5基因的靶向关系。同样地,分别将miR-153-3p mimics、NC与pCMV质粒重组体(WT-KLF5和Mut-KLF5-153)共转染HEK293T和3T3-L1细胞,利用Western blotting检测KLF5蛋白表达水平。【结果】在3T3-L1细胞成脂过程中,与诱导分化第0天相比,诱导分化第2、4、6和8天细胞中miR-153-3p相对表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);靶基因预测结果表明,miR-153-3p种子区及其与KLF5基因3'-UTR结合序列在不同物种间具有高度保守性。miR-153-3p过表达和干扰试验结果显示,与NC组相比,miR-153-3p mimics组细胞脂滴积累量显著降低(P<0.05),成脂标志基因C/EBPα、C/EBPβ、PPARγ和FABP4相对表达量极显著下调(P<0.01),相应蛋白表达水平极显著或显著下调(P<0.01;P<0.05),而miR-153-3p inhibitor组的油红O观察结果、成脂标志基因的mRNA和蛋白表达情况则与之相反。双荧光素酶报告基因试验结果显示,与NC组相比,mimics组细胞中WT-3'-UTR荧光素酶活性显著降低(P<0.05),Mut-miR153荧光素酶活性无显著变化(P>0.05)。miR-153-3p mimics与KLF5基因共转染试验结果显示,与NC组相比,mimics组细胞中WT-KLF5蛋白表达水平极显著下调(P<0.01),Mut-KLF5-153蛋白表达水平无显著变化(P>0.05)。【结论】miR-153-3p可通过下调KLF5基因的表达进而抑制3T3-L1细胞的成脂分化。 展开更多
关键词 miR-153-3p KLF5基因 3t3-L1前脂肪细胞 成脂分化
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基于转录组学探讨芦丁调控PPARγ抑制3T3-L1细胞成脂分化
5
作者 彭泉 冯馨瑶 +4 位作者 徐睿怡 马桂秀 李翰宇 成细华 王国佐 《中国药理学通报》 北大核心 2026年第3期468-477,共10页
目的基于转录组学探讨芦丁调控过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ/PPARG)信号通路抑制3T3-L1前脂肪细胞成脂分化机制。方法体外培养3T3-L1前脂肪细胞,在诱导分化为成熟脂肪细胞过程中,分别用25、50、100μmol·L-1芦丁处理;同时,设... 目的基于转录组学探讨芦丁调控过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ/PPARG)信号通路抑制3T3-L1前脂肪细胞成脂分化机制。方法体外培养3T3-L1前脂肪细胞,在诱导分化为成熟脂肪细胞过程中,分别用25、50、100μmol·L-1芦丁处理;同时,设100μmol·L^(-1)芦丁与PPARγ激活剂罗格列酮(rosiglitazone,ROS)共同处理组。油红O染色观察脂滴积聚;RNA-seq转录组学检测mRNA差异表达;RT-qPCR技术检测PPARγmRNA的表达;Western blot检测PPARγ等蛋白的表达。结果25、50和100μmol·L^(-1)芦丁呈剂量依赖性抑制3T3-L1细胞脂质积聚(P<0.01);RNA-seq测序筛选出4432个差异基因表达,分析结果推测PPARγ在其中可能发挥关键作用。实验验证显示,50和100μmol·L^(-1)芦丁降低了PPARγmRNA和蛋白的表达水平(P<0.01)。进一步研究发现,50和100μmol·L^(-1)芦丁降低了PPARγ调节的关键基因蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),明显降低了脂质堆积(P<0.01),阻遏了3T3-L1前脂肪细胞的成脂分化;100μmol·L^(-1)芦丁与ROS共处理可部分逆转芦丁抑制的PPARγ信号通路,表现为PPARγ及其下游基因蛋白表达均上调(P<0.01),细胞中脂质含量升高(P<0.01)。结论芦丁通过调节PPARγ表达,明显抑制3T3-L1细胞的成脂分化,为肥胖治疗相关研究奠定基础。 展开更多
关键词 芦丁 转录组学 过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ) 3t3-L1前脂肪细胞 肥胖 成脂分化
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CBFA2T3::GLIS2融合基因阳性急性髓系白血病一例
6
作者 欧晓燕 奎莉越 +5 位作者 桑宝华 陈俊伶 蒋鸿超 廖莹燕 夏世梅 周百灵 《华西医学》 2026年第2期346-349,共4页
病例介绍患儿,男,11个月,因“发热8 d,腹泻4 d”于2024年6月就诊于昆明医科大学附属儿童医院(以下简称“我院”)。患儿入院前8 d无明显诱因出现发热,热峰40℃,无寒战、抽搐,家长自行给予“布洛芬”后约半小时体温可降至正常,间隔4~5 h... 病例介绍患儿,男,11个月,因“发热8 d,腹泻4 d”于2024年6月就诊于昆明医科大学附属儿童医院(以下简称“我院”)。患儿入院前8 d无明显诱因出现发热,热峰40℃,无寒战、抽搐,家长自行给予“布洛芬”后约半小时体温可降至正常,间隔4~5 h体温复升,伴烦哭难安抚。 展开更多
关键词 白血病 儿童 CBFA2t3::GLIS2融合基因
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NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系的稳定建立及其在体外培养B细胞中的应用
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作者 韩玉洁 梁思辛 +8 位作者 郑瑞 董昊 赵晓娟 王鹏举 李琰龙 杨建勋 杨安钢 阎博 左百乐 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期180-185,共6页
目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表... 目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表达,ELISA检测IL-2、IL-4、IL-21分泌水平,并对其作为饲养细胞与B细胞在体外共培养16 d,显微镜观察B细胞增殖情况,ELISA检测IgG分泌水平。结果:成功构建了NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系,该细胞系能够稳定表达CD40L、BAFF,分泌高水平的IL-2、IL-4、IL-21,与B细胞体外共培养16 d能够支持低密度B细胞高效扩增,并诱导B细胞分化为浆细胞,且其抗体分泌量高达517 ng/mL。结论:本研究成功构建了能够支持B细胞体外增殖与活化的饲养细胞系,为单克隆抗体制备奠定了良好基础。 展开更多
关键词 饲养细胞 CD40L BAFF NIH3t3细胞 体外培养
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灯盏花乙素通过调控cAMP/PKA/CREB信号通路促进3T3-L1细胞脂肪分解的作用研究
8
作者 陈延绅 方晨曦 +1 位作者 田冲冲 张琦 《海南医科大学学报》 北大核心 2026年第3期199-206,共8页
目的:从体外探究灯盏花乙素(scutellarin,SCU)对3T3‑L1细胞脂解的作用及可能的分子机制,为代谢综合征的治疗提供借鉴。方法:将3T3‑L1细胞诱导为成熟脂肪细胞,分别采用CCK‑8法检测SCU对3T3‑L1细胞活力的影响;分析细胞的脂质积累水平并检... 目的:从体外探究灯盏花乙素(scutellarin,SCU)对3T3‑L1细胞脂解的作用及可能的分子机制,为代谢综合征的治疗提供借鉴。方法:将3T3‑L1细胞诱导为成熟脂肪细胞,分别采用CCK‑8法检测SCU对3T3‑L1细胞活力的影响;分析细胞的脂质积累水平并检测细胞中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)的含量;ELISA法检测细胞上清中炎症因子(TNF‑α、IL‑1β、IL‑4和IL‑6)含量;实时荧光定量PCR检测UCP-1、Dio2和Pgc-1αmRNA的表达;Western blot法检测CREB、HSL与ATGL蛋白的表达。结果:SCU对脂肪细胞活力无明显影响,但可明显抑制3T3‑L1细胞中脂质积累,降低细胞中TC与TG含量及上清液中TNF‑α、IL‑1β含量,升高上清液中IL‑4和IL‑6的含量,升高细胞中UCP-1、Dio2、Pgc-1αmRNA的表达,上调细胞中p‑HSL、ATGL、p‑CERB和p‑PKA蛋白的表达(P<0.05)。结论:SCU可减轻脂肪炎症反应、促进3T3‑L1脂肪细胞的脂质分解,抑制TG合成和脂质积累,其作用机制与激活cAMP/PKA/CERB信号通路有关,从而为SCU抗代谢综合征作用的开发提供了必要的借鉴。 展开更多
关键词 灯盏花乙素 3t3‑L1细胞 脂解 cAMP/PKA/CERB通路
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EPA/DHA干预的C2C12肌管细胞对3T3-L1脂肪细胞脂质代谢的作用 被引量：1
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作者 杨娴 曾欢婷 +1 位作者 毛联智 毛丽梅 《营养学报》 北大核心 2025年第1期60-67,共8页
目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预... 目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预结束后,撤掉干预液,将干预后的肌管细胞在transwell小室中与成熟的脂肪细胞共培养24h。用油红O定量脂肪细胞内的脂质蓄积情况,用PCR法测定脂肪细胞的脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,Atgl)、激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase,Hsl)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ的共激活物1α(PPARG coactivator 1 alpha,Pgc-1α)、解偶联蛋白-1(uncoupling protein-1,Ucp-1)和固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein-1c,Srebp-1c)基因mRNA表达水平,用Western blot检测脂肪细胞腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine5’-monophosphate(AMP)-activatedproteinkinase,AMPK)与信号转导和转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)信号通路的蛋白表达。结果经100、200、400μmol/L EPA干预的肌管细胞可以显著降低脂肪细胞的脂质蓄积(P<0.05或P<0.001),而DHA干预后的肌管细胞则没有显著的改善脂质蓄积的作用;经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著上调脂肪细胞脂肪分解基因Atgl和Hsl的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂质氧化基因Ucp-1和Pgc-1α的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提升脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.05或P<0.01),而一定浓度DHA干预的肌管细胞则是可以显著降低脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.01);经所有浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-STAT3/STAT3的比值(P<0.01),对p-AMPK/AMPK比值变化的影响则没有显著性;经200、400μmol/L DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-AMPK/AMPK的比值(P<0.01),但是p-STAT3/STAT3比值的变化没有显著性意义。结论EPA和DHA在适宜浓度均可以促进肌管细胞提高脂肪细胞的脂质分解和脂质氧化,EPA干预的肌管细胞还可以一定程度提高脂质合成,DHA干预的肌管细胞可以一定程度降低脂质合成;EPA干预后的肌管细胞可能通过STAT3通路改善脂质代谢,DHA干预后的肌管细胞可能通过AMPK通路改善脂质代谢。 展开更多
关键词 二十碳五烯酸 二十二碳六烯酸 C2C12肌管细胞 3t3-L1脂肪细胞 脂质代谢 STAt3/AMPK信号通路 细胞共培养
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支链氨基酸通过Stat3通路双向调控3T3-L1前脂肪细胞分化
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作者 蔡兴华 高洁 +5 位作者 徐媛颖 张会会 买热艳木·肉孜 沙雯君 鲁郡 雷涛 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第3期494-501,共8页
目的 探讨不同浓度支链氨基酸(BCAA)对3T3-L1前体脂肪细胞分化的作用及其机制。方法 将3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照(Control)组、分化介质(DM)组、低浓度BCAA组和高浓度BCAA组;CCK-8法检测不同浓度BCAA对前脂肪细胞存活率的影响;油... 目的 探讨不同浓度支链氨基酸(BCAA)对3T3-L1前体脂肪细胞分化的作用及其机制。方法 将3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照(Control)组、分化介质(DM)组、低浓度BCAA组和高浓度BCAA组;CCK-8法检测不同浓度BCAA对前脂肪细胞存活率的影响;油红O染色观察各组脂肪细胞脂滴形成情况;酶法检测细胞内三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量;RT-qPCR和Western blot检测Stat3和脂肪细胞分化相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果 CCK-8结果显示,当BCAA浓度≤10 mmol/L时,3T3-L1细胞的存活率不受BCAA的影响。与DM组相比,低浓度BCAA组(0.5、1.0 mmol/L)细胞内脂滴明显增大、脂滴数目明显增加,且细胞内TC(0.88 vs 0.68 mmol/g;0.83 vs 0.68 mmol/g,P<0.01)和TG水平(0.77 vs 0.40 mmol/g;0.62 vs 0.40 mmol/g,P<0.01)明显上升;而高浓度BCAA组(5.0、10.0 mmol/l)细胞分化较DM组明显下降。RT-qPCR和Western blot检测显示低浓度BCAA组PPARγ、C/EBPα、Adiponectin、FABP4的mRNA和蛋白表达均明显上升,而高浓度BCAA组上述基因表达均明显下降(P<0.01)。此外,低浓度BCAA促进Stat3磷酸化水平,而高浓度BCAA抑制其磷酸化水平(P<0.01)。结论 BCAA通过Stat3双向调控前脂肪细胞脂肪分化,即低浓度BCAA可通过促进Stat3磷酸化水平诱导其向成熟脂肪细胞分化;而高浓度BCAA则抑制Stat3磷酸化及细胞分化。 展开更多
关键词 BCAA 3t3-L1 脂肪细胞分化 STAt3 脂肪生成 肥胖
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参附注射液治疗脓毒症休克伴低T3综合征的效果及对甲状腺功能、预后影响
11
作者 黄彩凤 杨晓帆 +2 位作者 黄正米 荣清源 宋林燕 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第7期68-71,共4页
目的 探讨参附注射液治疗脓毒症休克(SS)伴低T3综合征(LT3S)的效果及对甲状腺功能、预后的影响。方法 选取医院2022年2月—2023年11月98例SS伴LT3S患者,随机数字表法分为观察组及对照组,均49例。两组均予以常规治疗,对照组予以左甲状腺... 目的 探讨参附注射液治疗脓毒症休克(SS)伴低T3综合征(LT3S)的效果及对甲状腺功能、预后的影响。方法 选取医院2022年2月—2023年11月98例SS伴LT3S患者,随机数字表法分为观察组及对照组,均49例。两组均予以常规治疗,对照组予以左甲状腺素,观察组在对照组基础上加用参附注射液。比较两组疗效、症状和病情变化、治疗前后血流动力学[CVP、全身血管阻力指数(SVRI)、MAP]、甲状腺功能、炎症因子、预后。结果 两组总有效率分为91.84%(45/49)、85.71%(42/49),差异无统计学意义(P>0.05);治疗7d后,两组中医证候积分、SOFA评分、APACHEⅡ评分均低于治疗前(P<0.05),但两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗7d后,观察组CVP、SVRI、MAP均高于对照组(P<0.05);治疗7d后,观察组FT3、T3、T4均高于对照组(P<0.05);治疗7d后,观察组血清hs-CRP、IL-6、TNF-α均低于对照组(P<0.05);观察组机械通气时间短于对照组(P<0.05)。两组ICU入住时间、28d死亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 参附注射液治疗能改善SS伴LT3S患者血流动力学,促进甲状腺功能恢复,缓解炎症反应,缩短机械通气时间。 展开更多
关键词 脓毒症休克 低t3综合征 参附注射液 甲状腺功能 预后
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骨疏康对MC3T3-E1细胞成骨分化及大鼠磨牙压低牙根吸收作用影响的研究
12
作者 万哲 杜军 肖朋 《新疆医科大学学报》 2025年第9期1292-1298,共7页
目的探讨骨疏康对MC3T3-E1细胞分化及大鼠磨牙压低牙根吸收的调控作用及内在机制。方法取6只大鼠分别于早晚灌胃骨疏康(0.26 g/kg),持续7 d,末次灌胃结束2 h内腹主动脉取血制备含药血清。采用细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK8... 目的探讨骨疏康对MC3T3-E1细胞分化及大鼠磨牙压低牙根吸收的调控作用及内在机制。方法取6只大鼠分别于早晚灌胃骨疏康(0.26 g/kg),持续7 d,末次灌胃结束2 h内腹主动脉取血制备含药血清。采用细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK8)法检测骨疏康含药血清对小鼠颅顶前骨细胞(MC3T3-E1细胞)的增殖活性。将细胞分为对照组、骨疏康含药血清组(10%骨疏康含药血清培养24 h)和骨疏康含药血清+MSAB组(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂,10%骨疏康含药血清和5μmol/L MSAB培养24 h),采用碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红S(Alizarin red S,ARS)染色观察细胞成骨分化能力;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2,BMP2)、无翅型MMTV整合位点家族成员3A(Wnt family member 3A,Wnt3a)和β-连环蛋白(β-catenin)的蛋白表达。取12只大鼠建立磨牙压低模型,将建模成功大鼠随机分为模型组和骨疏康组(骨疏康,2.1 g/kg,每天1次,连续4 w),每组6只,另取6只未建模大鼠为正常组;采用Western blot法检测磨牙组织Runx2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平。结果CCK8结果显示,与对照组相比,骨疏康含药血清组的细胞增殖活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,骨疏康含药血清组ALP活性、ALP和ARS染色强度升高,Runx2、BMP2、Wnt3a和β-catenin的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与骨疏康含药血清组相比,骨疏康含药血清+MSAB组ALP活性、ALP染色强度降低,Runx2和BMP2的蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。动物实验结果显示,与正常组相比,模型组磨牙组织中Runx2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,骨疏康组磨牙组织中Runx2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨疏康通过介导Wnt/β-catenin通路促进MC3T3-E1细胞及大鼠磨牙组织的成骨分化。 展开更多
关键词 骨疏康 成骨分化 MC3t3-E1细胞 信号通路
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红景天苷促进MC3T3-E1细胞成骨分化能力的体外实验 被引量：4
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作者 刘朝辉 韩晓谦 +2 位作者 段昕 郭鹏达 张云涛 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期231-237,共7页
背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因... 背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因和蛋白表达的影响。方法:采用CCK-8实验和碱性磷酸酶实验筛选红景天苷(0.5,1,5,10,50μmol/L)促进MC3T3-E1细胞增殖和分化的最佳浓度。实验分为4组:对照组、红景天苷组、红景天苷+LY294002组、LY294002组,分别用成骨诱导液、含10μmol/L红景天苷、10μmol/L红景天苷+10μmol/L LY294002、10μmol/L LY294002的成骨诱导液进行培养,观察红景天苷及PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对成骨相关基因和蛋白表达的影响。结果与结论:①CCK-8实验和碱性磷酸酶实验显示:红景天苷促进MC3T3-E1细胞增殖的作用在10μmol/L时最显著;②与对照组相比,红景天苷可以促进矿化、促进细胞黏附、减少细胞死亡,提高Runx-2、骨钙素、骨桥蛋白的mRNA表达(P<0.01),提高Runx-2和p-Akt蛋白表达(P<0.01);而添加PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002则可逆转以上结果;③结果表明,红景天苷能促进MC3T3-E1细胞矿化,并能促进成骨相关基因、蛋白的表达,这可能与PI3K/Akt信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 红景天苷 MC3t3-E1细胞 细胞分化 成骨 矿化 LY294002 PI3K/AKT信号通路
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黄芪甲苷可缓解MC3T3-E1细胞氧化应激损伤并促进成骨 被引量：8
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作者 张加豪 李嘉程 +3 位作者 温明韬 郭艳波 骆帝 李刚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第17期3529-3536,共8页
背景:氧化应激是导致骨质疏松症的主要原因之一,减少氧化应激水平与增加抗氧化防御是治疗骨质疏松症的重要研究方向。研究证实黄芪甲苷具有抗骨质疏松作用,但其作用机制尚不明确。目的:探讨黄芪甲苷对氧化应激条件下MC3T3-E1细胞成骨的... 背景:氧化应激是导致骨质疏松症的主要原因之一,减少氧化应激水平与增加抗氧化防御是治疗骨质疏松症的重要研究方向。研究证实黄芪甲苷具有抗骨质疏松作用,但其作用机制尚不明确。目的:探讨黄芪甲苷对氧化应激条件下MC3T3-E1细胞成骨的作用。方法:将MC3T3-E1细胞分4组培养:对照组加入完全培养基,模型组加入含过氧化氢的完全培养基干预24 h后更换为完全培养基,黄芪甲苷组加入含过氧化氢、黄芪甲苷的完全培养基干预24 h后更换为含黄芪甲苷的完全培养基,抑制剂组加入含过氧化氢、黄芪甲苷、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)抑制剂的完全培养基干预24 h后更换为含黄芪甲苷、ERK抑制剂的完全培养基。过氧化氢干预48 h后,通过丙二醛含量检测黄芪甲苷对MC3T3-E1细胞氧化应激的缓解作用;过氧化氢干预48 h后进行成骨诱导培养,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色验证MC3T3-E1细胞成骨及矿化能力,通过RT-qPCR检测成骨相关基因的表达,Western blot检测成骨相关蛋白及ERK/腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路蛋白的表达。结果与结论:(1)模型组细胞内碱性磷酸酶含量与矿化结节形成均少于对照组(P<0.05),黄芪甲苷组细胞内碱性磷酸酶含量与矿化结节形成均多于模型组(P<0.05)。(2)与对照组比较,模型组细胞内丙二醛含量增加(P<0.05),骨钙素、RUNX2、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA与蛋白表达均降低(P<0.05),AMPK mRNA与p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,黄芪甲苷组细胞内丙二醛含量减少(P<0.05),骨钙素、RUNX2、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05),ERK1/2、AMPK mRNA表达升高(P<0.05),p-AMPK、p-ERK1/2蛋白表达均升高(P<0.05);ERK抑制剂可部分抑制黄芪甲苷的上述作用。(3)结果表明,黄芪甲苷可通过激活ERK/AMPK信号通路促进氧化应激条件下MC3T3-E1细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 骨质疏松症 MC3t3-E1细胞 氧化应激 ERK/AMPK信号通路 成骨 工程化骨材料
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低T3综合征辨证分型与血清TT3、FT3水平关系的研究 被引量：10
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作者 杨际平 邵颖 +1 位作者 朱传安 郭宗兵 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第10期2449-2451,共3页
目的:研究低T3综合征辨证分型与血清TT3、FT3的相关性,为低T3综合征的中医辨证提供客观依据。方法:选择50例健康体检者为对照组,收集169例低T3综合征患者为低T3综合征组,对其临床症状、体征、甲状腺激素水平,借助现代统计学方法研究低T... 目的:研究低T3综合征辨证分型与血清TT3、FT3的相关性,为低T3综合征的中医辨证提供客观依据。方法:选择50例健康体检者为对照组,收集169例低T3综合征患者为低T3综合征组,对其临床症状、体征、甲状腺激素水平,借助现代统计学方法研究低T3综合征辨证分型与血清TT3、FT3的相关性。结果:低T3综合征组中气血两虚证16例、脾肾阳虚证87例、心肾阳虚证54例,肝肾阴虚证12例,其中脾肾阳虚证87例占51.48%,比例最高;心肾阳虚证组TT3、FT3水平最低,与气血两虚证组、脾肾阳虚证组、肝肾阴虚证组相比差异均有统计学意义(P<0.05);心肾阳虚证组的阳虚症状积分明显高于气血两虚证组、脾肾阳虚证组、肝肾阴虚证组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:低T3综合征中阳虚证占首位,其中脾肾阳虚证所占比例最高,低T3综合征阳虚程度越重,TT3、FT3水平越低,TT3、FT3水平的变化有助于中医辨证。 展开更多
关键词 低t3综合征 中医辨证分型 Tt3 Ft3
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环状RNA mmu_circ_0000818在地塞米松导致的MC3T3-E1细胞凋亡中的作用及机制 被引量：1
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作者 杨慧霞 丁宁 +5 位作者 马润秋 李桂忠 郝银菊 马胜超 姜怡邓 白志刚 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第4期478-489,共12页
目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dex... 目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dexamethasone(DEX)组;(2)采用Western blot检测各组细胞BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达,TUNEL染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;(3)提取正常和DEX处理的MC3T3-E1细胞RNA,进行RNA测序,筛选出差异表达的circRNAs,并通过GO和KEGG分析其功能;(4)筛选出差异表达的mmu_circ_0000818并进行细胞水平验证以及UCSC Genome Browser Gateway和circbase网站分析mmu_circ_0000818在染色体的位置和保守性;(5)构建mmu_circ_0000818过表达质粒及小干扰RNA(siRNA)并转染细胞,流式细胞术检测各组MC3T3-E1细胞凋亡情况。结果(1)与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞凋亡升高(P<0.01);(2)根据log2foldchange(≥2)和P值(P<0.05)筛选差异表达的circRNAs,与Control组相比,DEX组中共有234个表达差异的circRNAs,其中上调的138个,下调的96个。差异表达circRNAs的靶基因利用GO和KEGG进行富集分析,Apoptosis(凋亡)和PI3K-Akt signaling pathway(磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路)差异最显著。(3)qRT-PCR结果显示,与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞中mmu_circ_0000818表达明显升高(P<0.01),UCSC Genome Browser Gateway和circbase分析发现mmu_circ_0000818主要位于17:78712463-78715086,由Crim1基因第6~7外显子环化形成并且在不同物种间具有高的保守性。(4)流式细胞术结果提示抑制mmu_circ_0000818可改善DEX引起的MC3T3-E1细胞凋亡,过表达则促进其凋亡。结论mmu_circ_0000818在DEX处理的MC3T3-E1细胞中显著增高,降低其可抑制DEX引起的细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA mmu_circ_0000818 地塞米松 MC3t3-E1细胞 RNA测序 凋亡
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甲状腺激素TSH,T3,T4,FT3,FT4水平检验在妊娠早期中的临床意义
17
作者 李腾 《现代医学研究》 2025年第20期23-25,共3页
目的:探究对妊娠早期孕妇实施甲状腺激素TSH,T3,T4,FT3,FT4水平检验实际影响。方法:选取50例2024年5月至2025年5月,入院进行健康体检的非妊娠期女性,并设置为对照组。纳入50例同期在我院进行甲状腺激素检测的妊娠早期孕妇,并设置为观察... 目的:探究对妊娠早期孕妇实施甲状腺激素TSH,T3,T4,FT3,FT4水平检验实际影响。方法:选取50例2024年5月至2025年5月,入院进行健康体检的非妊娠期女性,并设置为对照组。纳入50例同期在我院进行甲状腺激素检测的妊娠早期孕妇,并设置为观察组,经病理检测可分为甲状腺功能正常组17例、甲状腺功能减退组16例、甲状腺功能亢进组17例。两组均接受甲状腺激素TSH,T3,T4,FT3,FT4水平检验,对比观察组及对照组的甲状腺激素水平,对比不同甲状腺功能产妇的甲状腺激素水平、并发症发生率、妊娠结局。结果:观察组的为TSH低于对照组(P<0.05),观察组的T3、T4、FT3均相对更高(P<0.05),两组FT4无显著差异(P>0.05);甲状腺功能减退组的TSH高于甲状腺功能正常组及甲状腺功能亢进组(P<0.05),甲状腺功能亢进组的T3、T4、FT3、FT4均高于甲状腺功能正常组、甲状腺功能减退组(P<0.05);甲状腺功能减退组的并发症发生率高于甲状腺功能正常组、甲状腺功能亢进组(P<0.05);甲状腺功能减退组的不良妊娠结局相较于甲状腺功能正常组、甲状腺功能亢进组更高,(P<0.05)。结论:实施甲状腺激素TSH,T3,T4,FT3,FT4水平检验可对妊娠早期孕妇进行甲状腺功能检测,对后期治疗干预提供数据支持,进而降低并发症风险及不良妊娠结局。 展开更多
关键词 甲状腺激素TSH t3 T4 Ft3 FT4水平 指标检验 妊娠早期 临床价值
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超声滚压对2024-T3铝合金表面完整性及疲劳性能的影响 被引量：1
18
作者 梁浩 刘鹏涛 +2 位作者 白雪飘 刘文博 赵秀娟 《表面技术》 北大核心 2025年第13期184-192,共9页
目的研究不同超声滚压参数下2024-T3铝合金表面完整性的变化规律,并研究超声滚压处理对其疲劳性能的影响规律,为提升航空铝合金构件的表面完整性和疲劳强度提供依据。方法使用超声滚压设备对铝合金试样进行强化处理,通过旋转弯曲疲劳性... 目的研究不同超声滚压参数下2024-T3铝合金表面完整性的变化规律,并研究超声滚压处理对其疲劳性能的影响规律,为提升航空铝合金构件的表面完整性和疲劳强度提供依据。方法使用超声滚压设备对铝合金试样进行强化处理,通过旋转弯曲疲劳性能试验,分析不同工艺参数下铝合金试样超声滚压处理前后的表面粗糙度、表层微观组织、表面硬度、硬化层深度和残余应力,并研究铝合金超声滚压处理的强化改性机理。结果经超声滚压后,试样的表面粗糙度均远低于原始试样,其最低粗糙度达到0.197μm,降幅达到85.6%;表面硬度最高达到192.47HV,与原始试样相比提高了57.6%。经超声滚压后,试样表层发生了明显的塑性流变和晶粒细化现象,未滚压原始晶粒的平均尺寸为36.68μm,而经超声滚压后表层晶粒的平均尺寸为10.28μm。经超声滚压后铝合金试样的疲劳强度从130 MPa提高至180 MPa,提高幅度约为38.5%。在相同应力水平下,试样的疲劳寿命比原始试样提高7倍,原始试样的裂纹源位于试样表面,而经超声滚压后试样的疲劳源萌生于次表层。结论随着超声滚压静压力的增大,试样的表面粗糙度先减小后增大,但均远低于原始试样。试样的表面硬度、硬化层深度、残余压应力均随着静压力的增大而增大。经过超声滚压后,铝合金试样的疲劳强度大幅提高。 展开更多
关键词 2024-t3铝合金 超声滚压处理 粗糙度 硬度 微观组织 疲劳强度
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淫羊藿苷调控LAP自噬促进酒精抑制的MC3T3-E1细胞成骨分化 被引量：3
19
作者 曾麒 陈跃平 +2 位作者 宋世雷 赖渝 吴华华 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第3期590-599,共10页
研究细胞自噬在MC3T3-E1细胞成骨诱导(生理)、酒精(alcohol,AL)干预(病理)分化过程中的影响机制,以及淫羊藿苷(icariin,ICA)对AL干预病理状态下MC3T3-E1细胞成骨分化的作用机制。成骨矿化结节染色鉴定该细胞可分化为成骨细胞。CCK-8实... 研究细胞自噬在MC3T3-E1细胞成骨诱导(生理)、酒精(alcohol,AL)干预(病理)分化过程中的影响机制,以及淫羊藿苷(icariin,ICA)对AL干预病理状态下MC3T3-E1细胞成骨分化的作用机制。成骨矿化结节染色鉴定该细胞可分化为成骨细胞。CCK-8实验筛选合适的AL和ICA浓度后,实验分为7组:完全培养基(complete medium,CM)组,成骨诱导培养基(osteogenic induction medium,OIM)组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL+1×10^(-8)mol·L^(-1)ICA组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL+1×10^(-7)mol·L^(-1)ICA组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL+1×10^(-6)mol·L^(-1)ICA组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL+1×10^(-5)mol·L^(-1)ICA组,培养7 d。碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测ALP相对面积,Western blot、RT-qPCR检测成骨、自噬相关蛋白及mRNA表达情况,活性氧(reactive oxygen species,ROS)染色检测ROS水平,细胞凋亡线粒体膜电位实验检测细胞凋亡情况。结果显示,ICA可上调AL干预后下调的ALP相对面积;AL下调成骨相关蛋白Wnt家族成员1(Wnt family member 1 gene,Wnt1)及成骨相关基因Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)、核心结合因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、ALP的表达水平,抑制细胞成骨分化,ICA可上调AL抑制的成骨相关蛋白及mRNA的表达水平,促进细胞成骨分化;AL抑制典型自噬,ICA调控Rubicon抑制LC3相关吞噬作用(LC3-associated phagocytosis,LAP)促进典型自噬;ICA下调AL诱导后上升的ROS水平;ICA下调AL干预后导致的成骨细胞凋亡。综上,ICA可调控Rubicon抑制LAP促进典型自噬,清除ROS减少细胞凋亡,最终通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进AL干预病理状态下MC3T3-E1细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 酒精 成骨细胞 MC3t3-E1细胞 Wnt1/β-catenin通路 成骨分化 骨代谢失衡 自噬 LAP
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川续断皂苷Ⅵ促进低氧环境下MC3T3-E1细胞的成骨分化 被引量：2
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作者 李蕴喆 牛泽蕃 +3 位作者 王紫瑈 艾崇毅 陈刚 王新兴 《中国组织工程研究》 北大核心 2025年第35期7481-7489,共9页
背景:川续断皂苷Ⅵ具有良好的促成骨作用,但其在低氧环境下促进细胞成骨的作用尚不明确。目的:探讨川续断皂苷Ⅵ在低氧环境下对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响及作用机制。方法:将MC3T3-E1细胞分为3组,对照组细胞在常氧条件下(体积分数21%O... 背景:川续断皂苷Ⅵ具有良好的促成骨作用,但其在低氧环境下促进细胞成骨的作用尚不明确。目的:探讨川续断皂苷Ⅵ在低氧环境下对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响及作用机制。方法:将MC3T3-E1细胞分为3组,对照组细胞在常氧条件下(体积分数21%O_(2))用完全培养基培养,低氧组细胞在低氧条件下(体积分数0.5%O_(2))用完全培养基培养,川续断皂苷Ⅵ组细胞在低氧条件下(体积分数0.5%O_(2))用含有川续断皂苷Ⅵ的完全培养基培养。24 h后,采用CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖活性,TUNEL染色法和Western blot实验检测细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞内活性氧水平和细胞周期分布。另外,各组细胞在低氧条件下分别用含1×10^(-5),1×10^(-6),1×10^(-7)mol/L川续断皂苷Ⅵ的成骨诱导液培养7 d,通过光学显微镜观察和碱性磷酸酶染色筛选川续断皂苷Ⅵ最适浓度,采用Western blot方法检测骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白、PI3K/AKT信号轴相关蛋白表达。结果与结论:①与对照组相比,低氧条件下MC3T3-E1细胞增殖能力下降,1×10^(-6)mol/L川续断皂苷Ⅵ可以显著提高低氧状态下细胞增殖能力,并且减少细胞凋亡;②与低氧组相比,川续断皂苷Ⅵ组细胞内活性氧减少,进入S期细胞比例明显增多;③与低氧组相比,1×10^(-6)mol/L川续断皂苷Ⅵ组细胞形态舒展,较多突起,碱性磷酸酶染色较深;④与低氧组相比,川续断皂苷Ⅵ组骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白表达增加,p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低。结果表明,低氧环境下川续断皂苷Ⅵ可能通过调节PI3K/AKT通路促进MC3T3-E1细胞成骨分化。 展开更多
关键词 MC3t3-E1细胞 低氧 川续断皂苷Ⅵ PI3K AKT 通路 细胞分化 成骨
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