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一种PCR产物克隆的新方法——T-A克隆法 被引量:23
1
作者 李新波 赵小松 +2 位作者 田德志 朱依纯 姚泰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第2期187-189,共3页
介绍一种PCR产物克隆的新方法———TA克隆法.用改良碱裂解法抽提pBluescriptSK(+)质粒,用EcoRⅤ将pBluescriptSK(+)质粒切成平端,利用TaqDNA聚合酶及dTTP制备pBluesc... 介绍一种PCR产物克隆的新方法———TA克隆法.用改良碱裂解法抽提pBluescriptSK(+)质粒,用EcoRⅤ将pBluescriptSK(+)质粒切成平端,利用TaqDNA聚合酶及dTTP制备pBluescriptSK(+)TA载体.将βactincDNA片段克隆入自制的pBluescriptSK(+)TA载体,经EcoRⅠ及HindⅢ双酶切得到与设定长度一致的βactincDNA片段. 展开更多
关键词 t-a克隆载体 PCR产物 t-a克隆法
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通过T-A克隆技术构建含免疫刺激序列CpG基序的抗SBR DNA疫苗(英文) 被引量:4
2
作者 姜广水 刘贤锡 +4 位作者 杨小青 杨丕山 卞继峰 李静 耿昭 《北京口腔医学》 CAS 2002年第3期109-113,共5页
目的 :构建含免疫刺激序列、能够阻止变形链球菌在牙面粘附的防龋DNA疫苗。方法 :根据原核表达质粒 pS BR CTA2 B基因序列 ,设计针对编码变形链球菌表面蛋白抗原AgⅠ /Ⅱ分子中唾液蛋白结合区段 (SBR)的特异性PCR引物 ,利用PCR技术由质... 目的 :构建含免疫刺激序列、能够阻止变形链球菌在牙面粘附的防龋DNA疫苗。方法 :根据原核表达质粒 pS BR CTA2 B基因序列 ,设计针对编码变形链球菌表面蛋白抗原AgⅠ /Ⅱ分子中唾液蛋白结合区段 (SBR)的特异性PCR引物 ,利用PCR技术由质粒 pSBR CTA2 B扩增目的DNA片断 ;通过T A克隆技术将目的DNA片段克隆于中间载体 pMD1 8 T ,鉴定插入方向后 ,选择插入方向正确的克隆 ,将目的DNA从中间载体释放 ,再克隆至含有CpG免疫刺激序列的真核表达载体pcDNA3 1。结果 :通过对重组质粒pcDNA3 1 SBR进行酶切图谱分析和DNA序列测定分析 ,证明真核表达重组质粒 pcD NA3 1 SBR构建成功、开放阅读框架正确。结论 :利用T A克隆等技术可成功将编码SBR的DNA片段克隆到含有免疫刺激序列CpG的真核表达载体 pcDNA3 1的适当部位 ,构建出真核表达重组质粒pcDNA 3 1 展开更多
关键词 免疫刺激序列 CPG基序 龋病 DNA疫苗 t-a克隆
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恶性疟原虫FCC1/HN(CQS)株Pfmdr1、Cg1基因T-A克隆及序列分析 被引量:1
3
作者 马长玲 余新炳 +3 位作者 单志新 卞国武 吴忠道 徐劲 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期45-50,54,共7页
目的 将恶性疟原虫FCC1/HN株 (CQS)Pfmdr1和Cg1全基因编码区克隆入测序载体 ,测定其序列 ,为以后研究其与疟原虫耐药性的关系奠定基础。方法 利用PCR扩增技术 ,分 3个片段从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中 ,特异扩增Pfmdr1全基因编... 目的 将恶性疟原虫FCC1/HN株 (CQS)Pfmdr1和Cg1全基因编码区克隆入测序载体 ,测定其序列 ,为以后研究其与疟原虫耐药性的关系奠定基础。方法 利用PCR扩增技术 ,分 3个片段从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中 ,特异扩增Pfmdr1全基因编码序列 ;分 2个片段特异扩增Cg1全基因编码序列。扩增产物经纯化回收后 ,T -A克隆入测序载体 pMD18-T ,转化大肠杆菌 (E coli)JM 10 9,筛选阳性克隆 ,并进行双酶切及PCR扩增鉴定 ,获得阳性重组质粒 ,用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测定。结果 CQSFCC1/HN株Pfmdr1基因序列与CQSFc2 7株同源性高 ,全长 4 2 4 8bp ,编码 14 15个氨基酸 ;测得Cg1基因全长为 2 82 0bp ,编码 939个氨基酸 ,存在串联α重复序列。 结论 恶性疟原虫FCC1/HN(CQS)株Pfmdr1和Cg1全基因编码序列的测定 ,为以后研究耐药性虫株的上述基因以及它们与疟原虫耐药性的关系奠定基础。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 耐药性 t-a克隆 序列分析
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用T-A载体克隆技术构建丙肝病毒C+E1区真核表达质粒pSVL-HCV/C+E1 被引量:3
4
作者 李益民 周旭 白植生 《微生物学免疫学进展》 1997年第4期25-27,共3页
用BamHI和HindII将丙肝病毒C+E1DNA片段从其克隆载体pGEM3zf-HCV/C+E1上切下,经Taq酶补齐3’末端后插入到载体pSVL-T中,构建成丙肝病毒C+E1真核表达载体pSVL-HCV/C+E1... 用BamHI和HindII将丙肝病毒C+E1DNA片段从其克隆载体pGEM3zf-HCV/C+E1上切下,经Taq酶补齐3’末端后插入到载体pSVL-T中,构建成丙肝病毒C+E1真核表达载体pSVL-HCV/C+E1。本实验中重组效率达64.7%(11/17),正向插入为50%(2/4)。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 t-a载体技术 质粒
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用pB1uescript SK(+)质粒自制T-A载体对DD RT-PCR产物进行克隆
5
作者 李新波 周清平 +4 位作者 赵小松 田德志 丁滢炯 朱依纯 姚泰 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 1999年第10期1-2,共2页
mRNA差异显示技术可以显示mRwa表达水平的差异。为了对用mnwA差异显示技术得到的差异条带进行研究,该文用改良碱裂解法抽提pBS质粒,用ECORV将pBS切成平头,利用TaqDNa聚合酶的非模板依赖性,在dryP... mRNA差异显示技术可以显示mRwa表达水平的差异。为了对用mnwA差异显示技术得到的差异条带进行研究,该文用改良碱裂解法抽提pBS质粒,用ECORV将pBS切成平头,利用TaqDNa聚合酶的非模板依赖性,在dryP存在的条件下,用切成平头的PBS质粒自制了T—A克隆载体,对用mRNA差异显示方法得到的差异条带进行了重组,结果表明:用自制T一A克隆载体对PCR产物进行克隆的连接率较高,自制T一A载体进行PCR产物克隆是一简便可行的方法。 展开更多
关键词 t-a克隆 PCR产物 载体 PBS质粒
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高效PCR产物T-A克隆法及影响因素分析
6
作者 孙奋勇 万大方 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期293-294,共2页
关键词 聚合酶链反应 分子克隆 t-a克隆法
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基于T-A方程的三相同轴超导电缆电磁损耗研究 被引量:3
7
作者 何启笛 董再蔚 刘刚 《低温与超导》 CAS 北大核心 2021年第6期13-19,共7页
交流损耗作为超导电缆本体的主要损耗,其数值大小将影响超导电缆性能及设计长度。使用传统H公式计算CORC电缆损耗时所需时间长、计算复杂。针对以上缺点,提出一种基于有限元仿真软件COMSOL Multiphysics下的T-A公式计算方法,通过对三相... 交流损耗作为超导电缆本体的主要损耗,其数值大小将影响超导电缆性能及设计长度。使用传统H公式计算CORC电缆损耗时所需时间长、计算复杂。针对以上缺点,提出一种基于有限元仿真软件COMSOL Multiphysics下的T-A公式计算方法,通过对三相同轴超导电缆主要结构参数的设计,并建立稳态下超导电缆电磁场模型。此外,分析了导体层绕制角与电磁损耗之间的变化规律。结果表明,各相导体层绕制角均为20°情况下电缆本体总电磁损耗为0.203 W/m,满足设计要求。在此基础上,增加各相绕制角均可减少电缆电磁损耗,其中增加C相绕制角时损耗降低幅值最大。然而增加绕制角将增加电缆制造成本,综合考虑其对电缆制造成本与运维成本的影响,计算得到最佳绕制角为38°。 展开更多
关键词 高温超导电缆 三相同轴 有限元仿真 t-a公式 简化模型
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用3T-A系统更新早期进口数控车床
8
作者 傅师陶 《机床》 CSCD 1990年第9期44-45,50,共3页
本文以北京数控设备厂生产的 FANAUC- BESK3T-A数控系统,更新早期进口的数控车床获得成功。
关键词 3t-a数控系统 数控车床
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闪耀你的尊荣 ECS GF9300T-A
9
作者 桃子 《大众硬件》 2008年第10期31-31,共1页
精英GF9300T-A作为黑尊龙家族中的一员,供电电路却是2+1相,但作为A790GXM-A的强劲对手,价格方面应该更具诱惑力。
关键词 精英GF9300t-a 电脑 主板 产品介绍 供电电路
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T-a曲线法求承压含水层参数
10
作者 李兴祥 《浙江地质》 2001年第2期44-49,共6页
针对承压含水层抽水试验数据 ,本文提出一种新方法求含水层水文地质参数。并附上有关计算程序。
关键词 t-a曲线法 抽水试验 泰斯公式 承压含水层 水文地质参数
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金城欧宝路JC150T-A
11
作者 付明 《摩托车》 2007年第6期48-48,共1页
外观评价: 意大利设计师设计的欧宝路外观豪华、大气.尽显欧陆情调.在国产车中具有独一无二的外型,看外观欧宝路是一款高挡踏板车。整车外壳质量很好.喷漆亮丽.前大灯有股英气.后尾灯采用LED发光二极管.夜间骑行安全,而且灯... 外观评价: 意大利设计师设计的欧宝路外观豪华、大气.尽显欧陆情调.在国产车中具有独一无二的外型,看外观欧宝路是一款高挡踏板车。整车外壳质量很好.喷漆亮丽.前大灯有股英气.后尾灯采用LED发光二极管.夜间骑行安全,而且灯光很亮。 展开更多
关键词 金城欧宝路JC150t-a LED发光二极管 设计师 外观 意大利 国产车 踏板车
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Microchip MXT1665T-A系列汽车级触摸屏控制器
12
《世界电子元器件》 2017年第5期31-31,共1页
Microchip Technology Inc.(美国微芯科技公司)日前推出全新的ma XTouch触摸屏控制器系列。MXT1665T-A系列汽车级触摸屏控制器专门针对汽车大屏幕人机界面(HMI)应用而设计。新器件为汽车驾驶员和乘客带来了与手机多点触摸HMI相同的用户... Microchip Technology Inc.(美国微芯科技公司)日前推出全新的ma XTouch触摸屏控制器系列。MXT1665T-A系列汽车级触摸屏控制器专门针对汽车大屏幕人机界面(HMI)应用而设计。新器件为汽车驾驶员和乘客带来了与手机多点触摸HMI相同的用户体验,适用于8至15英寸大小的屏幕。 展开更多
关键词 触摸屏控制器 Microchip MXT1665t-a 汽车
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款款而行的福雅——大福DF 100T-A摩托车
13
作者 佩凌 《摩托车信息》 2007年第15期19-19,共1页
在大福2007年的多款新品摩托中.DF100T—A福雅踏板车如同一位送福的仙女。曼妙轻盈,默默地为你送上一份惊喜后又悄然离去,使你有了一种想抓住她的欲望。
关键词 大福DF100t-a摩托车 技术参数 发动机 前照灯 减震器
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红颜知己——厦杏三阳迪爵XS100T-A摩托车
14
作者 封庆伟 《摩托车信息》 2002年第7期16-16,共1页
1998年以来,由于女性踏板车市场以前所未有的速度发展,女性踏板车的生产也因此逐渐受到各厂家的重视,全力开发适合女性消费者的车款已是当前时势所趋。顺应这一市场需要的变化,厦门厦杏摩托有限公司推出了一款专为都市女性量身打造的迪... 1998年以来,由于女性踏板车市场以前所未有的速度发展,女性踏板车的生产也因此逐渐受到各厂家的重视,全力开发适合女性消费者的车款已是当前时势所趋。顺应这一市场需要的变化,厦门厦杏摩托有限公司推出了一款专为都市女性量身打造的迪爵XS100T-A踏板车,该车各项配备都是针对年轻女性车主的需求和习惯而设计,高科技含量使该车具有不逊于125级踏板车的性能,而且其“缩水”版车身更轻巧、造型更时髦前卫,让都市小姐们每天都能感受到与众不同的生活情趣。为了能让小姐们把车骑到哪儿都能成为众人的目光焦点。 展开更多
关键词 三阳迪爵XS100t-a摩托车 踏板车 厦杏摩托有限公司 设计特点 技术参数
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CSC9000T-A Gospel for All?
15
《China Textile》 2006年第1期98-99,共2页
关键词 CSC9000t-a Gospel for All OFFICE
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常利率风险模型下T-A目标函数的最大化
16
作者 孟辉 《数学学报(中文版)》 SCIE CSCD 北大核心 2010年第4期795-804,共10页
本文研究了带常利率扩散风险模型,考虑了下面的目标函数V(x,L)=E(integral from n=0 toτe^(-βt)dL_t+integral from n=0 toτe^(-βt)∧dt|R_0~L=x),这里常数∧≥0.我们称上面的表达式为T-A(Thonhauser and Albrecher)目标函数.对于... 本文研究了带常利率扩散风险模型,考虑了下面的目标函数V(x,L)=E(integral from n=0 toτe^(-βt)dL_t+integral from n=0 toτe^(-βt)∧dt|R_0~L=x),这里常数∧≥0.我们称上面的表达式为T-A(Thonhauser and Albrecher)目标函数.对于常利率下的扩散模型,通过随机控制理论(HJB方程),T-A目标函数的最大化问题得以解决:对于有界分红率,最优策略是门槛策略;对于无界分红率,最优策略是边界策略. 展开更多
关键词 扩散模型 利息率 t-a目标函数
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Changes of 5'Terminal Nucleotides of PCR Primers Causing Variable T-A Cloning Efficiency
17
作者 Mei-Qin Liu Xin Shen +1 位作者 Wei-Lun Yin Cun-Fu Lu 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2007年第3期382-385,共4页
T-A cloning takes advantage of the unpaired adenosyl residue added to the 3'terminus of amplified DNAs by Taq and other thermostable DNA polymerase and uses a Ilnearlzed plasmld vector with a protruding 3'thym... T-A cloning takes advantage of the unpaired adenosyl residue added to the 3'terminus of amplified DNAs by Taq and other thermostable DNA polymerase and uses a Ilnearlzed plasmld vector with a protruding 3'thymldylate residue at each of Its 3'termini to clone polymerase chain reaction(PCR)-derived DNA fragments.It Is a simple,reliable,and efficient Ilgatlon-dependent cloning method for PCR products,but the drawback of variable cloning efficiency occurs during application.In the present work,the relationship between variable T-A cloning efficiency and the different 5'end nucleotlde base of primers used In PCR amplification was studied.The results showed that different cloning efficiency was obtained with different primer pairs containing A,T,C and G at the 5'terminus respectively.The data shows that when the 5'end base of primer pair was adenosyl,more white colonies could be obtained In cloning the corresponding PCR product In comparison with other bases.And the least white colonies were formed when using the primer pair with 5'cytldylate end.The gluanylate end primers resulted In almost the same cloning efficiency In the white colonies amount as the thymldylate end primer did,and this efficiency was much lower than that of adenosyl end primers.This presumably is a consequence of variability In 3'dA addition to PCR products mediated by Taq polymerase.Our results offer instructions for primer design for researchers who choose T-A cloning to clone PCR products. 展开更多
关键词 efficiency polymerase chain reaction PRIMER t-a cloning terminal nucleotide
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旋转场中超导带材的磁热耦合分析
18
作者 刘锴 李华伟 方进 《低温与超导》 北大核心 2025年第10期14-20,28,共8页
全超导电机的高功率密度属性在未来的航空、航海等一系列领域有巨大的应用潜力,需要对超导带材在旋转磁场下的交流损耗和热稳定性进行分析,并为超导电机的优化设计提供依据。本文运用二维T-A方程建立电机内部的旋转磁场环境,采用超导带... 全超导电机的高功率密度属性在未来的航空、航海等一系列领域有巨大的应用潜力,需要对超导带材在旋转磁场下的交流损耗和热稳定性进行分析,并为超导电机的优化设计提供依据。本文运用二维T-A方程建立电机内部的旋转磁场环境,采用超导带材二维线模型耦合电磁场与热场,在大幅度降低计算时间的基础上对旋转磁场下的超导带材从损耗成因、温升差异等多个方面进行分析。结果表明:外加旋转场对超导带材的温升具有更显著的影响,这是由于旋转场不仅增加交流损耗,且影响超导带材内部的交流损耗分布,进而造成热堆积,使得超导带材局部温升高于预期。在制冷设计时需对此特性进行特殊考虑。 展开更多
关键词 超导电机 电热耦合 交流损耗 t-a方程
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10 kV/10 kA超导直流电缆设计及其电磁特性分析
19
作者 李力 杨明臻 +3 位作者 司文泽 徐颖 任丽 石晶 《电线电缆》 2025年第9期57-65,共9页
与传统输电方式相比,超导直流输电使用第二代高温超导带材,可以在无电阻、小体积的情况下实现大容量电能输送,为未来电网建设提供了一种重要思路。针对大容量电力输送需求,以10 kV/10 kA超导直流电缆作为研究对象,详细介绍了高温超导直... 与传统输电方式相比,超导直流输电使用第二代高温超导带材,可以在无电阻、小体积的情况下实现大容量电能输送,为未来电网建设提供了一种重要思路。针对大容量电力输送需求,以10 kV/10 kA超导直流电缆作为研究对象,详细介绍了高温超导直流电缆设计过程,分析了电缆的等效电路方程,明确电缆导体各层结构参数。以此为基础,建立超导直流电缆的3D电磁模型,分析每层超导带材的平行磁场与垂直磁场分布,探究超导带材的电磁特性,结合超导带材各向异性磁场对临界电流的影响,计算出每层超导带材中由磁场所导致的临界电流衰减,评估超导直流电缆的通流能力。最后,研制了一根长度为5 m的10 kV/10 kA正负极同轴构型超导直流电缆样缆,并开展通流测试与绝缘测试。测试结果表明,样缆的各项技术指标满足设计要求。 展开更多
关键词 高温超导直流电缆 t-a方程 临界电流评估
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利用AFLP进行榧树雌雄株鉴定的初步研究 被引量:6
20
作者 梁丹 周秦 +2 位作者 殳燕 曾燕如 喻卫武 《浙江林学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期63-67,共5页
为了解决榧树Torreya grandis苗期雌雄株鉴别的问题,利用已建立的扩增片断长度多态(AFLP)体系及T-A克隆测序,就榧树的雌雄株开展了研究。结果从15对引物中用引物对E-AGC/M-CAT得到了一条雌性榧树特异的条带。这条榧树雌性性别特异条带,... 为了解决榧树Torreya grandis苗期雌雄株鉴别的问题,利用已建立的扩增片断长度多态(AFLP)体系及T-A克隆测序,就榧树的雌雄株开展了研究。结果从15对引物中用引物对E-AGC/M-CAT得到了一条雌性榧树特异的条带。这条榧树雌性性别特异条带,仅在雌株、雌雄同株的个体中有,雄株中没有,推测榧树雌雄同株由雌性榧树变异而来。GenBank序列比对结果发现,数据库没有与此特异条带相匹配的序列。 展开更多
关键词 经济林学 榧树 扩增长度多态 t-a克隆测序
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