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猪水肿病荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用
1
作者 孙小云 王美希 白换力 《中国动物检疫》 2026年第3期95-100,共6页
为建立猪水肿病致病因子Stx2e毒素的早期检测方法,基于产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)stx2e基因保守序列,设计并合成特异性引物、探针,建立了一种荧光定量PCR检测方法。该方法在标准品拷贝数浓度2.8&... 为建立猪水肿病致病因子Stx2e毒素的早期检测方法,基于产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)stx2e基因保守序列,设计并合成特异性引物、探针,建立了一种荧光定量PCR检测方法。该方法在标准品拷贝数浓度2.8×10^(1)~2.8×10^(6) copies/μL范围内呈现良好的线性关系(标准曲线为y=-3.4997x+38.324,R^(2)=0.9994),检测灵敏度可达2.8×10^(1) copies/μL,较常规PCR方法提高100倍。该方法特异性强,与其他常见猪源病原无交叉反应;重复性良好,批内与批间试验变异系数均低于1.3%。对50份临床样品的检测结果显示,本方法阳性检出率为46%(23/50),显著高于常规PCR的38%(19/50)。结果表明,本研究建立的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好、重复性佳,可为猪水肿病的早期诊断、疫情监测及流行病学调查提供技术支持。 展开更多
关键词 猪水肿病 stx2e毒素 荧光定量PCR 检测方法
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致猪水肿病大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立及应用 被引量：6
2
作者 李伟杰 赵耘 +3 位作者 魏财文 岂晓鑫 田野 蒋桃珍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期537-543,共7页
本研究旨在建立一种快速鉴定致猪水肿病大肠埃希菌的多重PCR检测方法。分别针对大肠埃希菌16SrDNA、志贺毒素Stx2eA亚基和菌毛F18ab A亚基保守序列设计合成3对特异性引物,优化多重PCR反应条件,并进行特异性和敏感性检测。结果显示,阳性... 本研究旨在建立一种快速鉴定致猪水肿病大肠埃希菌的多重PCR检测方法。分别针对大肠埃希菌16SrDNA、志贺毒素Stx2eA亚基和菌毛F18ab A亚基保守序列设计合成3对特异性引物,优化多重PCR反应条件,并进行特异性和敏感性检测。结果显示,阳性对照菌株扩增产物大小分别为1 062、733和313bp。特异性和灵敏性检测结果表明,与肠炎沙门菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、支气管败血波氏杆菌和猪链球菌等猪常见致病菌均无交叉反应;菌体直接扩增法最低检出量为1 875CFU。利用建立的多重PCR检测方法对分离收集的128株大肠埃希菌进行鉴定,得到36株致猪水肿病大肠埃希菌,其中30株既有菌毛F18ab又产志贺毒素Stx2e,另外6株仅产志贺毒素Stx2e。结果表明,本试验所建立的多重PCR检测方法对致猪水肿病大肠埃希菌的快速诊断和流行病学调查具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 猪水肿病 大肠埃希菌 志贺毒素stx2e 菌毛F18ab
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猪水肿病疫苗的研究进展 被引量：5
3
作者 付杨 刘凯慧 +1 位作者 田佳硕 石火英 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期638-645,共8页
水肿病是猪生产中的常见病之一,造成了严重的经济损失。产志贺毒素大肠杆菌(STEC)是引起水肿病的病原菌,F18菌毛和Stx2e毒素是其重要的致病因子。STEC通过菌毛介导的黏附作用,定植于肠上皮细胞并产生毒素,引起微血管的病理学改变,表现... 水肿病是猪生产中的常见病之一,造成了严重的经济损失。产志贺毒素大肠杆菌(STEC)是引起水肿病的病原菌,F18菌毛和Stx2e毒素是其重要的致病因子。STEC通过菌毛介导的黏附作用,定植于肠上皮细胞并产生毒素,引起微血管的病理学改变,表现出水肿病的临床症状。疫苗免疫仍然是防控水肿病的最佳途径。近年来,随着水肿病致病机制研究的深入,以及菌蜕疫苗、转基因植物疫苗、核酸疫苗等新型疫苗的试验性报道为水肿病的预防带来了新的认识和起点。本文概述了当前致病机制及STEC疫苗的国内外研究进展,对各类疫苗的优劣及试验研究情况进行了梳理,为今后疫苗研发提供参考。 展开更多
关键词 水肿病 产志贺毒素大肠杆菌(STEC) 疫苗 stx2e
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