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香蕉枯萎病菌ste12基因的克隆与序列分析 被引量:4
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作者 周端咏 刘一贤 +5 位作者 谢德啸 黄小娟 魏巍 郭立佳 杨腊英 黄俊生 《热带作物学报》 CSCD 2011年第12期2298-2301,共4页
为了解ste12基因在尖孢镰刀菌古巴专化型侵染香蕉过程中的作用,及其与尖孢镰刀菌古巴专化型1号和4号生理小种之间的致病力差异关系,采用PCR和RT-PCR方法扩增了2个生理小种的ste12基因,并对扩增产物进行了测序及相似序列搜索和比对,还对... 为了解ste12基因在尖孢镰刀菌古巴专化型侵染香蕉过程中的作用,及其与尖孢镰刀菌古巴专化型1号和4号生理小种之间的致病力差异关系,采用PCR和RT-PCR方法扩增了2个生理小种的ste12基因,并对扩增产物进行了测序及相似序列搜索和比对,还对基因编码的蛋白进行了氨基酸序列比对和分析。研究结果表明,2个生理小种ste12基因开放阅读框均为2070 bp,存在7个碱基的差异,基因同源性为99.7%。编码689个氨基酸,氨基酸序列一个有差异。根据生物信息学软件预测编码蛋白没有信号肽,具有两个相同的功能位点,分子量和PI分别为75 ku和6.47。 展开更多
关键词 尖镰刀菌古巴专化型 生理小种 ste12基因 致病性 转录因子
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Ste12基因对玉米大斑病菌渗透胁迫的调控作用 被引量:2
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作者 张运峰 张淑红 +1 位作者 范永山 董金皋 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期91-95,共5页
前期研究表明,玉米大斑病菌Ste12基因对分生孢子发育和致病性有重要的调控作用。本试验利用Ste12基因的RNAi沉默突变体StRNAi 9-10和StRNAi 3-6分析该基因对玉米大斑病菌渗透胁迫的调控能力。通过比较野生型菌株和RNAi沉默突变体在0.4mo... 前期研究表明,玉米大斑病菌Ste12基因对分生孢子发育和致病性有重要的调控作用。本试验利用Ste12基因的RNAi沉默突变体StRNAi 9-10和StRNAi 3-6分析该基因对玉米大斑病菌渗透胁迫的调控能力。通过比较野生型菌株和RNAi沉默突变体在0.4mol/L CaCl2、1mol/L KCl、1mol/L NaCl、1mol/L山梨醇等渗透胁迫条件下的菌落形态、生长速度、菌丝形态、产孢量等指标,发现StRNAi9-10对1 mol/L NaCl和1mol/L KCl胁迫的耐受能力显著增强,对1mol/L CaCl2胁迫的耐受能力显著降低,对1mol/L山梨醇的耐受力无显著差异;StRNAi 3-6对4种胁迫条件的耐受能力均显著降低。以上研究结果表明,Ste12基因不仅调控玉米大斑病菌的分生孢子发育和致病力形成,而且参与玉米大斑病菌的渗透胁迫调控。 展开更多
关键词 玉米大斑病菌 ste12基因 渗透胁迫 调控作用
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新生隐球菌STE12α基因的克隆及表达载体的构建 被引量:3
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作者 朱红梅 娄永华 +1 位作者 贾祎鹏 温海 《中国真菌学杂志》 2009年第1期13-15,45,共4页
目的从新生隐球菌的基因组中扩增出STE12α基因,并构建相应的表达载体,以进一步研究STE12α基因对隐球菌的生长特性及致病性的影响。方法采用PCR方法以及基因重组方法扩增并克隆新生隐球菌基因组中的STE12α基因,建立具有表达野生型STE1... 目的从新生隐球菌的基因组中扩增出STE12α基因,并构建相应的表达载体,以进一步研究STE12α基因对隐球菌的生长特性及致病性的影响。方法采用PCR方法以及基因重组方法扩增并克隆新生隐球菌基因组中的STE12α基因,建立具有表达野生型STE12α基因的表达载体。结果从新生隐球菌的基因组获得STE12α全基因,建立重组子pUCm-STE12α/NovaBlue以及重组表达载体质粒pGAPZ-STE12α,实现了STE12α基因的转化并获得表达。结论成功地克隆了新生隐球菌STE12α基因并构建了可表达野生型STE12α基因的表达载体,为进一步研究STE12α基因功能打下了良好的基础。 展开更多
关键词 新生隐球菌 ste12α基因 克隆 表达 质粒
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STE12α基因对新生隐球菌形态学影响的初步研究 被引量:1
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作者 贾祎鹏 朱红梅 +1 位作者 赵瑾 温海 《中国真菌学杂志》 2010年第6期336-339,共4页
目的研究STE12α基因对新生隐球菌形态学的影响。方法分别敲除血清A型和血清B型新生隐球菌菌株的STE12α基因,建立缺陷株,再将STE12α基因重新导入建立重建株。观察并比较野生株、STE12α基因缺陷株及重建株在体内、外孵育后菌落和菌落... 目的研究STE12α基因对新生隐球菌形态学的影响。方法分别敲除血清A型和血清B型新生隐球菌菌株的STE12α基因,建立缺陷株,再将STE12α基因重新导入建立重建株。观察并比较野生株、STE12α基因缺陷株及重建株在体内、外孵育后菌落和菌落的形态学差异。结果 STE12α基因缺陷株组形成的菌落明显偏少,菌株直径偏小,荚膜发育不良,而重构株组这些方面的改变都得到了恢复。结论 STE12α基因对新生隐球菌的形态学改变有着重要的影响,可能直接影响其毒力。 展开更多
关键词 新生隐球菌 ste12α基因 毒力
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碳源对StSte12基因调控玉米大斑病菌生长和分生孢子发育的影响 被引量:1
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作者 张运峰 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第1期71-75,共5页
以葡萄糖、蔗糖、乳糖和可溶性淀粉为碳源分别培养玉米大斑病菌野生型和St Ste12基因RNAi阳性转化子,研究碳源对St Ste12基因调控玉米大斑病菌菌丝生长和分生孢子发育的影响,为阐明St Ste12基因的功能和病菌的致病机制奠定基础。结果表... 以葡萄糖、蔗糖、乳糖和可溶性淀粉为碳源分别培养玉米大斑病菌野生型和St Ste12基因RNAi阳性转化子,研究碳源对St Ste12基因调控玉米大斑病菌菌丝生长和分生孢子发育的影响,为阐明St Ste12基因的功能和病菌的致病机制奠定基础。结果表明,St Ste12基因对玉米大斑病菌菌丝生长和分生孢子发育均有重要的调控作用,St Ste12基因的表达量下降后,菌丝的生长势变弱,颜色变浅,生长速度显著下降,产孢量显著降低。4种供试碳源中,可溶性淀粉对St Ste12基因调控菌丝生长和发育的影响最大,蔗糖最小;乳糖对St Ste12基因调控分生孢子发育没有显著影响,而其他3种碳源的影响均达到显著水平。 展开更多
关键词 玉米大斑病菌 Stste12基因 碳源 菌丝生长 分生孢子发育
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苹果树腐烂病菌转录因子VmSte12的鉴定及功能分析
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作者 刘维 赵佳禾 +4 位作者 谷金明 郭衍 刘召阳 黄丽丽 冯浩 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期573-582,共10页
Ste12是最早在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中发现的一类转录因子。之后在部分丝状真菌中也发现了该类转录因子的存在,并证明其能够参与调控生殖生长以及病原真菌的致病力。然而,苹果树腐烂病菌(Valsa mali)中是否存在该类转录... Ste12是最早在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中发现的一类转录因子。之后在部分丝状真菌中也发现了该类转录因子的存在,并证明其能够参与调控生殖生长以及病原真菌的致病力。然而,苹果树腐烂病菌(Valsa mali)中是否存在该类转录因子以及其功能尚不明确。本研究基于生物信息学鉴定苹果树腐烂病菌中Ste12的同源基因,采用烟草瞬时表达系统进行蛋白亚细胞定位分析,利用酵母单杂技术进行转录激活功能分析,进而利用PEG介导的原生质体转化技术构建基因缺失突变体,并对其进行表型观察与分析。结果表明,苹果树腐烂病菌存在Ste12的同源基因,我们将其命名为VmSte12。该基因编码701个氨基酸,包含Ste同源结构域和C_(2)H_(2)锌指结构域。VmSte12定位于细胞核,并具有体外转录激活功能。与野生型相比,VmSte12敲除突变体生长速率平均下降10.1%,分生孢子器数量平均下降94.6%,致病力平均下降27.4%。可见,VmSte12具有Ste12类转录因子特征,并且极有可能在腐烂病菌的生长、繁殖、致病等方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 ste12 转录因子 亚细胞定位 基因敲除 生物学特征
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The mitogen-activated protein kinase module CcSte11-CcSte7-CcPmk1 regulates pathogenicity via the transcription factor CcSte12 in Cytospora chrysosperma
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作者 Lu Yu Yuchen Yang +2 位作者 Xiaolin Qiu Dianguang Xiong Chengming Tian 《Stress Biology》 2024年第1期754-772,共19页
The pathogen Cytospora chrysosperma is the causal agent of poplar canker disease and causes considerable economic losses in China.Mitogen-activated protein kinase(MAPK)cascades play a crucial role in mediating cellula... The pathogen Cytospora chrysosperma is the causal agent of poplar canker disease and causes considerable economic losses in China.Mitogen-activated protein kinase(MAPK)cascades play a crucial role in mediating cellular responses and Pmk1-MAPKs are indispensable for pathogenic related processes in plant pathogenic fungi.In previous studies,we demonstrated that the CcPmk1 acts as a core regulator of fungal pathogenicity by modulating a small number of master downstream targets,such as CcSte12.In this study,we identified and characterized two upstream components of CcPmk1:MAPKKK CcSte11 and MAPKK CcSte7.Deletion of CcSte11 and CcSte7,resulted in slowed growth,loss of sporulation and virulence,similar to the defects observed in the CcPmk1 deletion mutant.In addition,CcSte11,CcSte7 and CcPmk1 interact with each other,and the upstream adaptor protein CcSte50 interact with CcSte11 and CcSte7.Moreover,we explored the global regulation network of CcSte12 by transcriptional analysis between CcSte12 deletion mutants and wild-type during the simulated infection process.Two hydrolase activity GO terms(GO:0004553 and GO:0016798)and starch and sucrose metabolism(mgr00500)KEGG pathway were significantly enriched in the down-regulated genes of CcSte12 deletion mutants.In addition,a subset of glycosyl hydrolase genes and putative effector genes were significantly down-regulated in the CcSte12 deletion mutant,which might be important for fungal pathogenicity.Especially,CcSte12 bound to the CcSp84 promoter region containing the TGA AAC A motif.Moreover,comparison of CcSte12-regulated genes with CcPmk1-regulated genes revealed 116 overlapping regulated genes in both CcSte12 and CcPmk1,including some virulence-associated genes.Taken together,the protein complexes CcSte11-CcSte7-CcPmk1 receive signals transmitted by upstream CcSte50 and transmit signals to downstream CcSte12,which regulates hydrolase,effectors and other genes to promote virulence.Overall,these results indicate that the CcPmk1-MAPK signaling pathway of C.chrysosperma plays a key role in the pathogenicity. 展开更多
关键词 Cytospora chrysosperma MAPK Transcription factor ste12 PATHOGENICITY Transcriptional analysis
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