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谷胱甘肽合成酶基因StGCS-GS的表达提高大肠杆菌对重金属的抗性 被引量:4
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作者 李平平 柳生奎 +1 位作者 邱志奇 安志刚 《森林工程》 2011年第1期5-8,12,共5页
本文将来源于嗜热链球菌(S.thermophilus)的谷胱甘肽双功能合成酶基因(StGCS-GS)通过载体pETG-A10转入大肠杆菌中。在IPTG诱导后,表达产物通过凝胶电泳(SDS-PAGE)检测,重组后的融合蛋白His-GCS-GS用His-镍蛋白纯化柱纯化,SDS-PAGE和west... 本文将来源于嗜热链球菌(S.thermophilus)的谷胱甘肽双功能合成酶基因(StGCS-GS)通过载体pETG-A10转入大肠杆菌中。在IPTG诱导后,表达产物通过凝胶电泳(SDS-PAGE)检测,重组后的融合蛋白His-GCS-GS用His-镍蛋白纯化柱纯化,SDS-PAGE和western blot检测纯化效果,鉴定表达产物。检测结果与预期一致。为了研究StGCS-GS基因的表达对大肠杆菌在重金属胁迫下的抗性作用,实验对转化大肠杆菌进行不同浓度Cd2+、Ni2+、Cu2+胁迫的耐受性测试。结果发现,在1mM CdCl2、2mM NiSO4胁迫条件下,转化大肠杆菌的生长状态明显优于对照,但在Cu2+胁迫条件下,两者没有明显区别。表明StGCS-GS基因的表达能够提高大肠杆菌对Cd2+、Ni2+的抗性,在其逆境胁迫下的生长发挥重要作用。 展开更多
关键词 stgcs-gs 大肠杆菌 重金属 抗性
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谷胱甘肽合成酶StGCS-GS对甜菜遗传转化的研究 被引量:2
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作者 刘大丽 马龙彪 《中国糖料》 2018年第5期18-21,共4页
嗜热链球菌γ-谷氨酰半胱氨酸谷胱甘肽合成酶Streptococcus thermophilusγ-glutamylcysteine synthetase-glutathione synthetase(StGCS-GS)是一类新型的非限速谷胱甘肽合成酶,其产物GSH在包括干旱在内的众多非生物逆境中发挥着重要作... 嗜热链球菌γ-谷氨酰半胱氨酸谷胱甘肽合成酶Streptococcus thermophilusγ-glutamylcysteine synthetase-glutathione synthetase(StGCS-GS)是一类新型的非限速谷胱甘肽合成酶,其产物GSH在包括干旱在内的众多非生物逆境中发挥着重要作用。本研究利用Gateway系统构建了p GWB2重组植物表达载体。以农杆菌介导法对甜菜叶柄进行遗传操作,将编码该酶的StGCS-GS基因(Genbank accession no.GQ848551)转化到甜菜体内。研究结果表明,当农杆菌侵染浓度OD600值为0.6,侵染时间10 min,共培养4 d后,甜菜叶柄外植体经过农杆菌侵染,在筛选培养基上所获得的抗性芽比率相对最高。通过对潮霉素抗性植物基因组DNA的PCR检测,研究共获得7个转基因甜菜株系。 展开更多
关键词 甜菜 遗传转化 stgcs-gs 谷胱甘肽合成酶 干旱逆境
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