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马铃薯StCYP83B1基因过表达载体构建及遗传转化
被引量:
3
1
作者
孔乐辉
宗德乾
+4 位作者
史青尧
殷盼盼
巫文玉
单卫星
强晓玉
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第8期1462-1469,共8页
旨在为解析马铃薯StCYP83B1基因的免疫功能提供重要材料基础,从四倍体马铃薯栽培种‘大西洋’的cDNA中克隆到StCYP83B1基因,将其与融合mCherry标签的35S::pART27重组载体连接,构建p35S::StCYP83B1-mCherry植物过表达载体,并通过农杆菌...
旨在为解析马铃薯StCYP83B1基因的免疫功能提供重要材料基础,从四倍体马铃薯栽培种‘大西洋’的cDNA中克隆到StCYP83B1基因,将其与融合mCherry标签的35S::pART27重组载体连接,构建p35S::StCYP83B1-mCherry植物过表达载体,并通过农杆菌介导的本氏烟瞬时表达体系确认该蛋白的表达;利用农杆菌介导的马铃薯遗传转化方法,将p35S::StCYP83B1-mCherry转入马铃薯中,随机挑选3株转基因植株进行鉴定:PCR检测证明StCYP83B1已整合到马铃薯基因组中,反转录实时定量PCR检测表明StCYP83B1在转化植株中的转录水平比未转化的对照植株上调40~49倍,免疫印迹检测表明StCYP83B1蛋白可以在转化植株中正常表达。同时,对转化马铃薯植株及微型薯的表型鉴定表明,StCYP83B1过量表达并不影响马铃薯的正常生长发育。该稳定转化马铃薯植株的获得为后续深入解析StCYP83B1基因的免疫功能及作用机制奠定了重要材料基础。
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关键词
马铃薯
stcyp83b1
表达载体
遗传转化
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职称材料
题名
马铃薯StCYP83B1基因过表达载体构建及遗传转化
被引量:
3
1
作者
孔乐辉
宗德乾
史青尧
殷盼盼
巫文玉
单卫星
强晓玉
机构
西北农林科技大学农学院
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第8期1462-1469,共8页
基金
国家自然科学基金(31872657)
国家重点研发计划(2017YFD0200602-2)
+1 种基金
国家现代农业产业技术体系(CARS-09)
高校科研业务科技创新专项(2452020146)。
文摘
旨在为解析马铃薯StCYP83B1基因的免疫功能提供重要材料基础,从四倍体马铃薯栽培种‘大西洋’的cDNA中克隆到StCYP83B1基因,将其与融合mCherry标签的35S::pART27重组载体连接,构建p35S::StCYP83B1-mCherry植物过表达载体,并通过农杆菌介导的本氏烟瞬时表达体系确认该蛋白的表达;利用农杆菌介导的马铃薯遗传转化方法,将p35S::StCYP83B1-mCherry转入马铃薯中,随机挑选3株转基因植株进行鉴定:PCR检测证明StCYP83B1已整合到马铃薯基因组中,反转录实时定量PCR检测表明StCYP83B1在转化植株中的转录水平比未转化的对照植株上调40~49倍,免疫印迹检测表明StCYP83B1蛋白可以在转化植株中正常表达。同时,对转化马铃薯植株及微型薯的表型鉴定表明,StCYP83B1过量表达并不影响马铃薯的正常生长发育。该稳定转化马铃薯植株的获得为后续深入解析StCYP83B1基因的免疫功能及作用机制奠定了重要材料基础。
关键词
马铃薯
stcyp83b1
表达载体
遗传转化
Keywords
Potato
stcyp83b1
Expression vector
Genetic transformation
分类号
S532 [农业科学—作物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马铃薯StCYP83B1基因过表达载体构建及遗传转化
孔乐辉
宗德乾
史青尧
殷盼盼
巫文玉
单卫星
强晓玉
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
3
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