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Slr0351的表达及其在Synechocystis sp.PCC 6803中功能的初步研究 被引量：1
1
作者 马琼 郑小江 +2 位作者 赵开弘 周明 王胜鹏 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期16-23,共8页
Slr0351是Synechocystis sp.PCC 6803中的未知功能蛋白,其同源蛋白广泛存在于各种蓝藻和铁硫杆菌中。为了确定Slr0351的性质,构建了表达质粒p ET-slr0351,并在E.coli中表达Slr0351。在无氧条件下采用亲和层析纯化方法获得了Slr0351,无... Slr0351是Synechocystis sp.PCC 6803中的未知功能蛋白,其同源蛋白广泛存在于各种蓝藻和铁硫杆菌中。为了确定Slr0351的性质,构建了表达质粒p ET-slr0351,并在E.coli中表达Slr0351。在无氧条件下采用亲和层析纯化方法获得了Slr0351,无氧条件下Slr0351呈棕红色,在460 nm处有[2Fe-2S]铁硫簇的特征吸收峰,棕红色Slr0351对氧气敏感,能被连二亚硫酸钠还原,由此表明Slr0351为铁硫蛋白。为了获知slr0351的功能,基于基因同源重组交换的原理,利用Kana抗性片段替换slr0351,将Synechocystis sp.PCC 6803中的slr0351基因缺失,构建了Δslr0351突变体。利用紫外-可见吸收光谱仪扫描了Δslr0351与野生型Synechocystis sp.PCC 6803(WT)的吸收光谱,发现正常光照条件下Δslr0351的叶绿素a仅为WT的68.8%,slr0351的缺失使蓝藻中叶绿素a含量降低。比较了藻细胞在缺乏不同营养元素和不同光照条件下的生长速率差异,与WT相比,Δslr0351具有如下特征:(1)对缺Fe和缺S胁迫条件更敏感;(2)在弱光照条件下Δslr0351的光能利用效率和生长速率更低,该现象与Δslr0351中叶绿素a含量的降低有关。 展开更多
关键词 蓝藻 SYNECHOCYSTIS SP.PCC 6803 slr0351 铁硫蛋白
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