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日本血吸虫重组铁蛋白的粘膜免疫效果研究 被引量：10
1
作者 陈利玉 易新元 +2 位作者 曾宪芳 张顺科 LarryMcReynolds 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期129-132,共4页
目的　构建日本血吸虫铁蛋白 (SjFer)原核表达质粒。以壳聚糖作佐剂 ,探讨重组日本血吸虫铁蛋白(rSjFer)粘膜免疫诱导小鼠抗血吸虫感染的保护力。　方法　用PCR扩增SjFer基因 ,亚克隆入原核表达载体pTWIN1上intein 2的N端 ,经PCR、限制... 目的　构建日本血吸虫铁蛋白 (SjFer)原核表达质粒。以壳聚糖作佐剂 ,探讨重组日本血吸虫铁蛋白(rSjFer)粘膜免疫诱导小鼠抗血吸虫感染的保护力。　方法　用PCR扩增SjFer基因 ,亚克隆入原核表达载体pTWIN1上intein 2的N端 ,经PCR、限制性酶切筛选阳性重组子并经测序鉴定。将阳性重组子转化大肠埃希菌 ,在低温和低浓度的异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)条件下诱导表达可溶性重组融合蛋白。利用重组融合蛋白的壳聚糖结合功能域 (CBD)结合位点 ,使其与壳聚糖结合 ,经滴鼻免疫小鼠 ,于第 3次免疫后 2周攻击感染 ,用减虫率和减卵率表示保护力。感染前采血和唾液用ELISA检测抗体。　结果　成功克隆并表达了rSjFer。rSjFer以壳聚糖作佐剂经滴鼻免疫获得了 3 5 .5 1%的减虫率和 5 2 .17%的减卵率。免疫后小鼠血清IgG和IgA及唾液SIgA抗体水平与对照组比较均明显升高。　结论　获得了rSjFer ,该蛋白以壳聚糖作佐剂经粘膜免疫能诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组铁蛋白 粘膜免疫 sjfer 壳聚糖
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日本血吸虫铁蛋白基因在油菜中的表达
2
作者 袁鑫 黄复深 +2 位作者 邱元 郝知友 陈尔曼 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期926-929,共4页
根据GenBank日本血吸虫铁蛋白基因(SjFer)的序列设计1对特异性引物,利用PCR从cDNA文库中扩增SjFer基因,与T载体连接并测序。常规方法构建植物表达载体SjFer/pBI121,采用根癌农杆菌介导法转化油菜子叶,组织培养卡那霉素抗性筛选,获得转... 根据GenBank日本血吸虫铁蛋白基因(SjFer)的序列设计1对特异性引物,利用PCR从cDNA文库中扩增SjFer基因,与T载体连接并测序。常规方法构建植物表达载体SjFer/pBI121,采用根癌农杆菌介导法转化油菜子叶,组织培养卡那霉素抗性筛选,获得转化植株。转化植株通过PCR和Northern-blot杂交进行鉴定。结果表明SjFer可在油菜中正确表达。该研究为进一步研究转基因油菜工程疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 植物转基因疫苗 油菜 日本血吸虫铁蛋白
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