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p66^(Shc)对心肌细胞凋亡的调控作用研究
1
作者 柳昊睿 张源 +2 位作者 刘维静 冯杰 徐瑞霞 《中国分子心脏病学杂志》 2025年第3期6862-6867,共6页
目的探讨p66^(Shc)对小鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法构建p66^(Shc)过表达腺病毒和对照腺病毒,分离1 d龄小鼠原代心肌细胞,培养24 h后分别使用p66^(Shc)过表达腺病毒和相应的对照腺病毒对细胞进行处理。利用实时荧光定量PCR(rev... 目的探讨p66^(Shc)对小鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法构建p66^(Shc)过表达腺病毒和对照腺病毒,分离1 d龄小鼠原代心肌细胞,培养24 h后分别使用p66^(Shc)过表达腺病毒和相应的对照腺病毒对细胞进行处理。利用实时荧光定量PCR(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测p66^(Shc)在小鼠原代心肌细胞中的过表达效率;利用Hoechst 33258染色试剂盒检测过表达p66^(Shc)对小鼠原代心肌细胞凋亡的影响;利用qRT-PCR及Western blot检测p66^(Shc)过表达后小鼠原代心肌细胞DNA损伤相关基因的表达。结果使用p66^(Shc)过表达腺病毒处理原代心肌细胞48 h后,与对照组比较,p66^(Shc)过表达组的p66^(Shc)表达显著升高;Hoechst 33258染色发现,p66^(Shc)过表达组心肌细胞凋亡程度较对照组增加;qRT-PCR结果显示,p66^(Shc)过表达组DNA损伤相关基因表达较对照组上调;Western blot结果表明p66^(Shc)过表达组DNA损伤反应相关蛋白磷酸化ATM水平明显上调。结论p66^(Shc)能够诱导DNA损伤的同时引起心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 p66^(shc) 心肌细胞 DNA损伤应答 细胞凋亡
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乌头汤调节Ahr/LOC101928120/SHC1信号通路抑制炎症和氧化应激对人尿源性干细胞的损伤
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作者 吴丹 童亮明 +2 位作者 李茜 周平 李洁芳 《医学分子生物学杂志》 2025年第3期252-258,共7页
目的探讨乌头汤(Wutou decoction,WTD)调节芳烃受体(aryl hydrocarbon receptor,Ahr)/长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)LOC101928120/SHC衔接蛋白1(SHC articulin 1,SHC1)信号通路抑制炎症和氧化应激对人尿源性干细胞(urogeni... 目的探讨乌头汤(Wutou decoction,WTD)调节芳烃受体(aryl hydrocarbon receptor,Ahr)/长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)LOC101928120/SHC衔接蛋白1(SHC articulin 1,SHC1)信号通路抑制炎症和氧化应激对人尿源性干细胞(urogenic stem cells,UdSC)损伤的机制。方法将UdSC细胞分为Control组、IL-1β组、IL-1β+WTD组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+WTD组。CellTiterGlo法、流式细胞术检测各组细胞中的增殖、凋亡;qRT-PCR检测各组细胞中Ahr、LOC101928120、SHC1 mRNA水平;蛋白质印迹检测各组细胞中Ahr、HDAC1、SHC1、COL2、SOX-9的表达;ELISA检测炎症诱导的UdSC细胞中IL-6、TNF-α及MMP-13的表达;DCFH-DA荧光探针检测氧化应激诱导UdSC细胞中的ROS水平。结果IL-1β组A_(560 nm)值,Ahr mRNA和蛋白水平,LOC101928120 mRNA水平,COL2、SOX-9蛋白水平低于Control组,IL-1β+WTD组以上各指标高于IL-1β组(P<0.05);IL-1β组凋亡率,IL-6、TNF-α、MMP-13水平,SHC1 mRNA和蛋白水平,HDAC1蛋白水平高于Control组,IL-1β+WTD组以上各指标低于IL-1β组(P<0.05)。H_(2)O_(2)组A_(560 nm)值,Ahr mRNA和蛋白水平,LOC101928120 mRNA水平,COL2、SOX-9蛋白水平低于Control组,H_(2)O_(2)+WTD组以上各指标高于H_(2)O_(2)组(P<0.05);H_(2)O_(2)组凋亡率、ROS阳性细胞比例、SHC1 mRNA和蛋白水平、HDAC1蛋白水平高于Control组,H2O2+WTD组以上各指标低于H_(2)O_(2)组(P<0.05)。结论WTD可抑制炎症和氧化应激诱导的人UdSC损伤,其机制可能是通过调节Ahr/LOC101928120/SHC1信号通路实现的。 展开更多
关键词 乌头汤 Ahr/LOC101928120/shc1信号通路 炎症 氧化应激 人尿源性干细胞
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SOCS4通过CRL5泛素化SHCBP1对食管鳞状细胞癌增殖与迁移的促进作用
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作者 应杰 羊海峰 葛建新 《中国临床研究》 2025年第5期782-787,共6页
目的分析细胞因子信号抑制物4(SOCS4)在食管鳞状细胞癌增殖和迁移中的作用,并探讨与其相互作用的Cullin-RING泛素连接酶(CRL5)和Shc1结合蛋白(SHCBP1)之间的关系。方法通过CCK8实验、克隆形成实验、划痕实验和transwell实验检测SOCS4对... 目的分析细胞因子信号抑制物4(SOCS4)在食管鳞状细胞癌增殖和迁移中的作用,并探讨与其相互作用的Cullin-RING泛素连接酶(CRL5)和Shc1结合蛋白(SHCBP1)之间的关系。方法通过CCK8实验、克隆形成实验、划痕实验和transwell实验检测SOCS4对食管鳞状细胞癌Eca-109细胞增殖和迁移的影响。应用免疫共沉淀联合质谱分析检测与SOCS4相互作用的蛋白。结果SOCS4在食管鳞状细胞癌中高表达(P<0.010),且与预后负相关(P=0.048)。SOCS4高表达促进食管鳞状细胞癌Eca-109细胞增殖和迁移(t=2.503,P=0.046)。SOCS4与CRL5和SHCBP1相互作用,并促进SHCBP1泛素化(P<0.001)。敲低SHCBP1抑制了食管鳞状细胞癌Eca-109细胞增殖和迁移(Day2:F=7.903,P=0.005;Day3:F=11.569,P<0.001;Day4:F=3.894,P=0.043)。敲低SHCBP1逆转了SOCS4对食管鳞状细胞癌Eca-109细胞增殖和迁移的促进作用(Day3:F=7.343,P=0.030)。结论SOCS4高表达患者预后较差,SOCS4通过泛素化SHCBP1促进食管鳞状细胞癌增殖与迁移。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 细胞因子信号抑制物4 泛素化修饰 shc1结合蛋白
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基于SHC460润滑脂的MT5500矿车轴承过热问题防控研究
4
作者 高永飞 牛志刚 +1 位作者 贾亮 乔飞 《时代汽车》 2025年第22期142-144,共3页
文章针对MT5500矿用自卸车轴承系统过热问题开展研究。通过分析SHC460润滑脂在极端工况下的性能衰变机理,揭示了温度异常、润滑脂分布不均等问题的成因。提出了润滑脂与矿物油复配改性、基于油膜厚度的动态补给策略、多层级温度监测预... 文章针对MT5500矿用自卸车轴承系统过热问题开展研究。通过分析SHC460润滑脂在极端工况下的性能衰变机理,揭示了温度异常、润滑脂分布不均等问题的成因。提出了润滑脂与矿物油复配改性、基于油膜厚度的动态补给策略、多层级温度监测预警等防控措施。实际应用表明,改进方案使轴承最高工作温度降低18℃,温升速率减少33%,有效提升了设备运行可靠性。 展开更多
关键词 MT5500 矿车 轴承系统 shc460 润滑脂 过热防控
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p66Shc的生物学效应及其在肾脏疾病中的作用 被引量:1
5
作者 景宇 何娅妮 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期55-58,共4页
关键词 shc P66shc 氧化应激 凋亡
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慢肾康宁方对慢性肾衰大鼠肾组织氧化应激状态及Caspase-3,JNK,p66Shc蛋白表达影响 被引量:9
6
作者 何铃 朱诗平 +1 位作者 金鑫 聂玲辉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期559-564,共6页
目的:观察中药慢肾康宁方对腺嘌呤诱发的慢性肾衰大鼠肾脏氧化应激状态及p66Shc,Caspase-3和JNK蛋白的影响。方法:60只wistar大鼠随机分成正常组,模型组,氯沙坦组,中药慢肾康宁方低、中、高质量分数组,除正常组给予生理盐水灌胃外,其余... 目的:观察中药慢肾康宁方对腺嘌呤诱发的慢性肾衰大鼠肾脏氧化应激状态及p66Shc,Caspase-3和JNK蛋白的影响。方法:60只wistar大鼠随机分成正常组,模型组,氯沙坦组,中药慢肾康宁方低、中、高质量分数组,除正常组给予生理盐水灌胃外,其余各组使用腺嘌呤灌胃复制慢性肾衰大鼠模型,时间是21d。检测模型建立成功后,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,其余各组对应给予等量药物进行治疗,疗程为28d。实验结束后,检测各组大鼠血清尿肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)的含量,采用化学比色法测定肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,提取肾组织蛋白,通过Western blotting进行p66Shc,Caspase-3和JNK蛋白的检测。结果:造模成功后,模型组Scr及BUN水平明显升高,显著高于正常组(P<0.01),SOD水平降低,MDA活性升高,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.05),肾脏组织内Caspase-3,JNK,p66Shc及其磷酸化位点p66Shc-ser36表达量明显上升(P<0.05)。经药物治疗后,中药低中高剂量组及氯沙坦组Scr和BUN均明显降低(P<0.01),SOD活性升高,中药高剂量组和氯沙坦组升高明显(P<0.05),其余治疗组具有升高趋势,MDA含量明显降低,氯沙坦组和中药高剂量降低趋势明显(P<0.05),其余各组存在降低趋势,Caspase-3,JNK,p66Shc及磷酸化蛋白p66Shc-ser36表达量较模型组相比均呈现出下降趋势(P<0.05)。结论:中药慢肾康宁方高剂量治疗组能够降低慢性肾衰大鼠血清Scr,BUN水平,改善肾间质纤维化程度,作用的机制可能与提高SOD水平,降低MDA表达,改善肾脏氧化应激状态及降低Caspase-3,p66Shc和JNK蛋白表达水平相关。 展开更多
关键词 慢肾康宁方 慢性肾衰 氧化应激 CASPASE-3 P66shc JNK
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细胞复制衰老与H_2O_2诱导细胞早衰过程中P66^(SHC)基因表达谱及组蛋白修饰研究 被引量:2
7
作者 徐薇 庄志雄 +3 位作者 杨建平 杨琳清 许玉玲 张文娟 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期777-782,共6页
目的研究细胞复制衰老与H2O2诱导细胞早衰过程中P66SHC基因表达变化及复制衰老过程中组蛋白修饰改变。方法人胚肺成纤维细胞固定传代直至停止增殖以制备复制衰老模型,过氧化氢诱导细胞早衰模型。采用Q-PCR方法动态观察细胞复制衰老与早... 目的研究细胞复制衰老与H2O2诱导细胞早衰过程中P66SHC基因表达变化及复制衰老过程中组蛋白修饰改变。方法人胚肺成纤维细胞固定传代直至停止增殖以制备复制衰老模型,过氧化氢诱导细胞早衰模型。采用Q-PCR方法动态观察细胞复制衰老与早衰过程中P66SHC以及组蛋白乙酰化酶EP300和去乙酰化酶HDAC1的基因表达,采用染色质免疫沉淀技术观察年轻细胞与衰老细胞P66SHC基因启动子区的组蛋白修饰情况。结果 P66SHCmRNA表达与染毒剂量正相关(R=0.909,P=0.000),EP300表达与染毒剂量负相关(R=-0.922,P=0.000),HDAC1与染毒剂量不相关(R=-0.066,P=0.839)。P66SHC表达与群体倍增代数正相关(R=0.743,P=0.006),EP300表达和HDAC1表达与群体倍增代数负相关(R=-0.709,P=0.010;R=-0.599,P=0.040)。与复制衰老组相比,早衰组细胞P66SHC、EP300及HDAC1的基因表达量均有显著性差异(t=-19.733,P=0.000;t=11.103,P=0.000;t=9.728,P=0.001)。老年细胞的P66SHC基因调控区的H3组蛋白修饰丰度均降低;在转录起始点上游3.0kb处抑制基因转录的H3K9-tri-Me修饰几乎为零,选择启动子(转录起始点下游3.8kb)处的组蛋白修饰以活化转录的修饰为主。结论 P66SHC、EP300和HDAC1均可能参与细胞衰老和氧化应激诱导的细胞早衰,早衰组细胞P66SHC基因表达与复制衰老组不同;组蛋白修饰参与P66SHC的基因表达调控。 展开更多
关键词 过氧化氢 复制性衰老 氧化应激 P66shc组蛋白修饰
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山茱萸纳米水提液对衰老小鼠脑组织p66^(shc)表达的影响 被引量:3
8
作者 王明富 欧芹 +2 位作者 朱贵明 王昭 冷莉莉 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1249-1250,共2页
目的探讨山茱萸制剂对自然衰老小鼠脑组织的磷酸化酪氨酸信号适配蛋白(66kilodalton isoform of shcgene products,p66shc)表达的影响。方法人工饲养自然衰老小鼠11~12月龄36只、青年鼠8只,分6组:青年对照组、衰老对照组和给药组,给药... 目的探讨山茱萸制剂对自然衰老小鼠脑组织的磷酸化酪氨酸信号适配蛋白(66kilodalton isoform of shcgene products,p66shc)表达的影响。方法人工饲养自然衰老小鼠11~12月龄36只、青年鼠8只,分6组:青年对照组、衰老对照组和给药组,给药组又分为山茱萸纳米水提液和醇提液的大剂量、小剂量组;各组给药30d,然后断头取小鼠肝组织做超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)检测,RT-PCR法测定小鼠脑组织p66shc的表达。结果山茱萸纳米水提和醇提液给药组SOD活性与衰老对照组相比显著升高(P<0.01),而MDA含量和脑p66shc的表达显著降低(P<0.01);山茱萸纳米制剂水提液小剂量、大剂量组和醇提液比较上述作用均更显著(P<0.01)。结论山茱萸能够明显降低衰老小鼠脑p66shc活性亚基的表达,从而影响p66shc活性起到延缓衰老的作用。山茱萸纳米水提取液小剂量组的作用优于山茱萸纳米醇提液各组。 展开更多
关键词 山茱萸 p66shc活性 衰老小鼠 脑组织 纳米水提取液
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p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达及其与胞质氧化还原稳态的关系 被引量:3
9
作者 张通 栗瑞兰 +4 位作者 范晓梅 刘春洁 海日汗 霍敏 张家新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2183-2192,共10页
[目的]研究p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达特征及其与卵母细胞胞质氧化还原稳态的关系,为揭示p66Shc参与调控卵母细胞胞质氧化还原稳态分子机制提供理论依据。[方法]试验所用卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs)来源于... [目的]研究p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达特征及其与卵母细胞胞质氧化还原稳态的关系,为揭示p66Shc参与调控卵母细胞胞质氧化还原稳态分子机制提供理论依据。[方法]试验所用卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs)来源于屠宰场的绵羊卵巢。分别收集成熟前优质和劣质、常规成熟24 h及成熟30 h老化的卵母细胞,采用实时荧光定量PCR对成熟前后不同质量绵羊卵母细胞中p66Shc mRNA的表达量进行分析,利用细胞免疫荧光结合MitoTracker Red探针对p66Shc蛋白和线粒体进行共定位,同时利用荧光探针DCFH-DA和卵母细胞自发荧光分别对成熟前后不同质量卵母细胞内ROS水平和氧化还原稳态进行检测。此外,采用外源H2O2诱导的氧化应激处理成熟前优质卵母细胞,并对p66Shc蛋白的表达及定位进行了检测分析。[结果]实时荧光定量PCR结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc mRNA表达量分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。然而优质卵母细胞成熟前后p66Shc mRNA表达量没有显著差异(P>0.05)。共定位结果表明,p66蛋白主要分布在线粒体分布活跃的区域。细胞免疫荧光结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc蛋白表达量也分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。与成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞相比,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞表现出线粒体分布紊乱和活性下降、ROS水平升高以及氧化还原稳态的失衡。此外,与未添加外源H2O2的对照组相比,外源H2O2处理成熟前优质卵母细胞诱导的氧化应激显著(P<0.05)上调p66Shc蛋白的表达并促使p66Shc由胞质向细胞核定位。[结论]p66Shc基因在劣质和老化的绵羊卵母细胞中呈现高水平的表达,H2O2诱导的氧化应激显著上调p66Shc蛋白的表达并影响其亚细胞定位。总之,绵羊卵母细胞中p66Shc表达上调影响了胞质的氧化还原稳态。 展开更多
关键词 绵羊卵母细胞 P66shc 线粒体 ROS 氧化还原稳态
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基于PKCβ/P66shc信号通路探讨针刺干预肥胖糖尿病大鼠氧化应激的作用机制 被引量:12
10
作者 尹刚 申国明 +1 位作者 江爱娟 李静雅 《针刺研究》 CSCD 北大核心 2021年第8期642-648,678,共8页
目的:观察针刺"足三里""三阴交"对肥胖糖尿病大鼠糖脂代谢及胰岛素抵抗的影响,探讨针刺改善肥胖糖尿病的作用机制。方法:SPF级雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、针刺干预组、非经非穴组、二甲双胍组,每组1... 目的:观察针刺"足三里""三阴交"对肥胖糖尿病大鼠糖脂代谢及胰岛素抵抗的影响,探讨针刺改善肥胖糖尿病的作用机制。方法:SPF级雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、针刺干预组、非经非穴组、二甲双胍组,每组10只。高脂饲料持续喂养8周联合链脲佐菌素腹腔注射复制肥胖糖尿病大鼠模型。针刺干预组电针"足三里""三阴交",非经非穴组电针"足三里""三阴交"旁开5 mm处,20 min/次;二甲双胍组予300 mg/kg二甲双胍灌胃。记录大鼠体质量和体长,计算Lee’s指数,监测空腹血糖(FBG)及血脂,ELISA法检测空腹血清胰岛素(FINS)水平并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI),TBA比色法检测血清丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,三硫代双硝基苯甲酸直接法测定血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,活性氧(ROS)试剂盒检测血清ROS水平,RT-PCR技术检测胰腺组织中P66shc、PKCβmRNA表达水平,HE染色法观察肝脏、脂肪组织病理形态变化。结果:与正常对照组比较,模型对照组Lee’s指数、FBG、FINS、HOMA-IR及血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)及血清MDA水平、ROS活性及胰腺组织中P66shc、PKCβmRNA表达水平均升高(P<0.05,P<0.01),ISI、血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL)和血清SOD、GSH-Px水平均降低(P<0.05,P<0.01);与模型对照组比较,针刺干预组、二甲双胍组Lee’s指数、FBG、FINS、HOMA-IR及血浆TC、TG、LDL及血清MDA水平、ROS活性及胰腺组织中P66shc、PKCβmRNA表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),ISI、血浆HDL和血清SOD、GSH-Px水平均升高(P<0.05,P<0.01)。模型对照组、非经非穴组可见许多白色脂肪细胞分布,正常对照组、针刺干预组、二甲双胍组白色脂肪细胞较模型对照组及非经非穴组明显减少,细胞形态变小。正常对照组、针刺干预组、二甲双胍组肝脏细胞排列呈索状,结构清晰,模型对照组、非经非穴组肝脏细胞仍呈放射状排列,但较多肝细胞胞质内有小泡状脂滴空泡。结论:针刺"足三里""三阴交"可以改善肥胖糖尿病大鼠的糖脂代谢及胰岛素抵抗,这一作用可能与PKCβ/P66shc信号通路及氧化应激有关。 展开更多
关键词 电针 肥胖糖尿病 PKCβ/P66shc信号通路 氧化应激
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Shc1在肝癌组织中的表达及对肝癌SMMC-7721细胞增殖迁移能力的影响 被引量:2
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作者 戴敏 刘俊 +5 位作者 朱海燕 顾澄宇 陶汉川 乔谦 杨树东 蔡兵 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期944-951,共8页
目的探讨Shc1在肝癌组织中的表达情况及其对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移能力的影响。方法采用实时定量PCR、蛋白质印迹法、免疫组织化学法检测33例肝癌及其对应的癌旁组织中Shc1的表达情况,并分析Shc1蛋白表达量与临床特征间的关系;... 目的探讨Shc1在肝癌组织中的表达情况及其对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移能力的影响。方法采用实时定量PCR、蛋白质印迹法、免疫组织化学法检测33例肝癌及其对应的癌旁组织中Shc1的表达情况,并分析Shc1蛋白表达量与临床特征间的关系;培养肝癌SMMC-7721细胞,以siRNA技术干扰Shc1的表达,采用MTT法和细胞划痕试验分别检测干扰Shc1对细胞增殖活力和迁移能力的影响。结果在33对样本中,肝癌组织中Shc1的表达高于癌旁组织(P<0.05);Shc1表达于肝癌细胞的胞质中。无肝硬化的患者Shc1阳性率(100%)高于伴肝硬化者(54.2%),术前Child-Pugh分级A级的患者Shc1阳性率(75.9%)高于B级或C级的患者(0%),术前血AFP阳性患者Shc1阳性率(79.2%)高于AFP阴性患者(33.3%),术后病理EdmondsonⅢ、Ⅳ级患者Shc1阳性率(84.2%)高于Ⅰ、Ⅱ级的患者(42.9%),差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰Shc1表达后,随时间延长,SMMC-7721细胞增殖、迁移明显受到抑制(P<0.05)。结论 Shc1在肝癌组织中高表达,且Shc1的阳性率与有无肝硬化、Child-Pugh分级、术前AFP、病理Edmondson分级相关;干扰Shc1的表达可抑制肝癌SMMC-7721细胞的增殖、迁移能力。 展开更多
关键词 shc1 肝细胞癌 细胞增殖 细胞迁移 RNA干扰
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结肠癌中雌激素受体和衔接蛋白p66Shc的表达和意义 被引量:3
12
作者 张莉 田月 +3 位作者 李鹏 吴咏冬 张澍田 林明丰 《胃肠病学》 2012年第9期527-530,共4页
背景:雌激素和雌激素受体(ER)在结肠癌的发生、发展中起重要作用,然而ER在其中的具体作用机制尚不完全清楚。在甾类激素敏感性肿瘤细胞中,甾类激素可显著上调衔接蛋白p66Shc表达并刺激细胞增殖。目的:探讨ER和p66Shc在结肠癌中的表达特... 背景:雌激素和雌激素受体(ER)在结肠癌的发生、发展中起重要作用,然而ER在其中的具体作用机制尚不完全清楚。在甾类激素敏感性肿瘤细胞中,甾类激素可显著上调衔接蛋白p66Shc表达并刺激细胞增殖。目的:探讨ER和p66Shc在结肠癌中的表达特点及其临床意义。方法:以免疫组化方法检测65例石蜡包埋结肠癌组织及其癌旁非癌组织中的ER和p66Shc蛋白表达,分析p66Shc蛋白表达与结肠癌临床病理特征的相关性。结果:ER和p66Shc蛋白表达分别定位于细胞核和细胞质,结肠癌组织中的ER和p66Shc蛋白表达阳性率显著高于癌旁非癌组织(ER:47.7%对0%,P<0.01;p66Shc:49.2%对0%,P<0.01),且两者呈正相关(r=0.43,P<0.05)。p66Shc蛋白表达与结肠癌患者的性别、年龄以及原发肿瘤部位、肿瘤大小、大体类型、浸润深度、淋巴结转移、AJCC分期均无相关性,而与肿瘤组织学分级相关(高分化:22.2%,中分化:47.7%,低分化:75.0%,P=0.046)。结论:结肠癌可能是一种雌激素敏感性肿瘤。雌激素及其受体可能与p66Shc共同参与了结肠癌的发生、发展。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 受体 雌激素 P66shc 免疫组织化学
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急性心肌梗死患者外周血单个核细胞P66Shc mRNA的表达及其与氧化应激的关系 被引量:3
13
作者 陈亮 徐标 +2 位作者 黄为 钟静 李声娜 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期159-162,共4页
目的探讨急性心肌梗死患者外周血单个核细胞P66Shc mRNA的表达及其与氧化应激的关系。方法选择经冠状动脉造影检查及治疗的患者67例,根据临床表现和冠状动脉造影结果分成健康对照组23例,稳定型心绞痛组23例,急性心肌梗死组21例。通过检... 目的探讨急性心肌梗死患者外周血单个核细胞P66Shc mRNA的表达及其与氧化应激的关系。方法选择经冠状动脉造影检查及治疗的患者67例,根据临床表现和冠状动脉造影结果分成健康对照组23例,稳定型心绞痛组23例,急性心肌梗死组21例。通过检测血中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,对机体氧化应激状态进行全面分析,在此基础上运用RT-qPCR比较三组外周血单个核细胞中P66Shc mRNA的表达,并对P66Shc mRNA的表达与MDA及SOD进行相关性分析。结果急性心肌梗死组MDA明显高于稳定型心绞痛组和健康对照组(P<0.05),而SOD明显低于稳定型心绞痛组和健康对照组(P<0.01);急性心肌梗死组P66Shc mRNA的表达明显高于稳定型心绞痛组及健康对照组(P<0.01),而在稳定型心绞痛组与健康对照组之间无明显差别(P>0.05),且P66Shc mRNA的表达量与MDA水平呈正相关(r=0.49,P=0.024),与SOD水平相关性不明显。结论急性心肌梗死时P66Shc mRNA表达增高,P66Shc可能介导了斑块由稳定到不稳定性转化的机制。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 P66shc 氧化应激
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过表达SHC3激活AKT/Nrf2/GSH通路保护帕金森病氧化应激损伤 被引量:13
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作者 齐献忠 邢英瀛 秦慧兵 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第17期4333-4337,共5页
目的 研究过表达含有Src同源结构域2的衔接蛋白(SHC)3对帕金森病(PD)氧化应激损伤的影响及其机制。方法 运用1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理PC12细胞构建PD模型,将PC12细胞分为正常组、模型组、模型+NC组、模型+SHC3组;用qRT-PCR法检... 目的 研究过表达含有Src同源结构域2的衔接蛋白(SHC)3对帕金森病(PD)氧化应激损伤的影响及其机制。方法 运用1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理PC12细胞构建PD模型,将PC12细胞分为正常组、模型组、模型+NC组、模型+SHC3组;用qRT-PCR法检测各组细胞中SHC3mRNA表达;Western印迹检测各组细胞中SHC3、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)/Bcl-2关联X的蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3、磷酸化(p)-蛋白激酶B(AKT)、核因子NF-E2相关因子(Nrf)2的蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果 与正常组相比,成功构建PC12细胞损伤模型,且MPP+损伤的PC12细胞可显著下调SHC3表达,上调ROS、MDA、LDH含量,下调GSH含量,显著降低细胞活性,促进细胞凋亡,显著下调p-AKT、Nrf2的蛋白表达,上调Bcl-2/Bax、caspase-3的蛋白表达。与模型+NC组相比,成功构建过表达SHC3的PC12细胞损伤模型,且过表达SHC3可降低ROS、MDA、LDH含量,升高GSH含量,显著升高细胞活性,显著抑制细胞凋亡,显著上调p-AKT、Nrf2的蛋白表达,下调Bcl-2/Bax、caspase-3的蛋白表达。结论 过表达SHC3可保护PD的氧化应激损伤,其机制可能与激活AKT/Nrf2/GSH通路有关。 展开更多
关键词 shc3 AKT/Nrf2/GSH通路 帕金森病 氧化应激
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氧化应激下的p66^(Shc)调控作用 被引量:5
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作者 顾闻 陈川 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期870-873,共4页
氧化应激产生的过量活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)可通过分子毒性作用或相关信号通路影响相关病理生理学过程.p66Shc是Shc蛋白家族的重要成员之一.氧化应激下p66Shc能被蛋白激酶Cβ(protein kinase Cβ,PKCβ)、Jun氨基末端激... 氧化应激产生的过量活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)可通过分子毒性作用或相关信号通路影响相关病理生理学过程.p66Shc是Shc蛋白家族的重要成员之一.氧化应激下p66Shc能被蛋白激酶Cβ(protein kinase Cβ,PKCβ)、Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)和p53等激活,促进线粒体产生ROS.本文将对氧化应激下p66Shc的作用以及调控其作用的信号转导机制做一综述. 展开更多
关键词 P66shc 氧化应激 蛋白激酶Cβ(PKCβ) Jun氨基末端激酶
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人胚肺成纤维细胞衰老过程中P66Shc启动子区CpG岛甲基化状态 被引量:1
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作者 张文娟 纪卫东 +2 位作者 杨淋清 许玉玲 庄志雄 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期321-324,共4页
目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中P66Shc的表达改变及其启动子区域的甲基化水平变化。方法荧光定量PCR方法检测细胞衰老过程中的mRNA表达改变,甲基化特异性PCR(MSP)定性检测甲基化的变化情况,亚硫酸氢盐... 目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中P66Shc的表达改变及其启动子区域的甲基化水平变化。方法荧光定量PCR方法检测细胞衰老过程中的mRNA表达改变,甲基化特异性PCR(MSP)定性检测甲基化的变化情况,亚硫酸氢盐修饰基因组结合克隆测序定量检测启动子区域CpG岛甲基化水平。结果人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中,P66Shc的mRNA表达水平逐渐升高,中年细胞组及复制性衰老细胞组mRNA表达分别升高至1.78和1.73倍,而早衰组却显著增高,至7.16倍;年轻细胞组、复制性衰老细胞组及早衰组P66Shc启动子区域CpG岛呈高甲基化水平,分别为94%、90%和90%。结论人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中P66Shc的mRNA表达水平逐渐升高,其启动子区CpG岛呈高的甲基化水平,不参与该基因表达调控。 展开更多
关键词 细胞衰老 早衰 P66shc 甲基化
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Shc的研究进展 被引量:3
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作者 夏洪娟 魏盟 《医学综述》 2014年第17期3081-3083,共3页
原癌基因Shc家族包含ShcA、ShcB、ShcC和ShcD 4个基因成员,可编码7种衔接分子。其表达分布和作用广泛。Shc可以通过磷脂酰肌醇3-激酶/苏氨酸激酶信号通路和Ras-Raf-膜受体酪氨酸蛋白激酶等信号通路,参与氧化应激及各种生理功能的调控。S... 原癌基因Shc家族包含ShcA、ShcB、ShcC和ShcD 4个基因成员,可编码7种衔接分子。其表达分布和作用广泛。Shc可以通过磷脂酰肌醇3-激酶/苏氨酸激酶信号通路和Ras-Raf-膜受体酪氨酸蛋白激酶等信号通路,参与氧化应激及各种生理功能的调控。ShcA可参与早期心血管系统及神经系统形态发生,且参与心脏结构功能的维护。该文就近年来Shc的研究进展予以综述。 展开更多
关键词 shc 结构域 信号通路 衰老 功能
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慢病毒载体靶向介导p66shc基因沉默 被引量:1
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作者 张婵 董文斌 +5 位作者 赵帅 李清平 康兰 雷小平 郭琳 翟雪松 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第1期73-75,83,共4页
目的构建p66shc基因重组慢病毒表达载体,并将之转染至293T细胞,通过RNA干扰致使p66shc基因沉默,为进一步研究p66shc基因功能奠定基础。方法筛选3个RNA靶点,命名为p66shc-shc1、p66shc-shc2、p66shc-shc3,与双酶切后的pLenR-绿色荧光蛋白... 目的构建p66shc基因重组慢病毒表达载体,并将之转染至293T细胞,通过RNA干扰致使p66shc基因沉默,为进一步研究p66shc基因功能奠定基础。方法筛选3个RNA靶点,命名为p66shc-shc1、p66shc-shc2、p66shc-shc3,与双酶切后的pLenR-绿色荧光蛋白(GPH)(含有GFP表达)连接,转化入感受态的DH5α细胞,挑取阳性克隆测序正确后,与pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G一起转染293T细胞,于倒置荧光显微镜下检测GFP的表达,证实病毒包装成功。使用荧光定量PCR及Western blot技术检测p66shc在基因及蛋白水平的表达,选取有效沉默p66shc基因的p66shc-shc1靶点,为后续试验做准备。结果成功构建表达p66shc的shRNA慢病毒载体并转染至真核生物细胞内,通过荧光定量PCR及Western blot技术检测其通过RNA干扰导致细胞内p66shc基因沉默。结论靶向表达p66shc的shRNA慢病毒载体,转染入真核生物细胞内可通过RNA干扰在分子及蛋白水平导致p66shc基因沉默。 展开更多
关键词 慢病毒属 RNA干扰 P66shc
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金色中仓鼠胚胎植入小鼠子宫后PTEN、FAK、Shc信号分子的异常表达(英文) 被引量:1
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作者 王希朝 段恩奎 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1067-1072,共6页
除了马属动物外,种间妊娠的胚胎总在妊娠的一定时期流产。以往的研究多集中在宏观结构和解剖学差别的研究上,对于这种现象产生的分子机制却少有报道。为了从信号分子角度阐明种间妊娠维持失败的可能原因,我们通过免疫组化和明胶酶谱法... 除了马属动物外,种间妊娠的胚胎总在妊娠的一定时期流产。以往的研究多集中在宏观结构和解剖学差别的研究上,对于这种现象产生的分子机制却少有报道。为了从信号分子角度阐明种间妊娠维持失败的可能原因,我们通过免疫组化和明胶酶谱法比较了科间和同种妊娠部位整合素αvβ3、FAK、p-ERK、IGFⅡ、IGFBP-1、Shc、PTEN和MMP-2、-9表达的差异。科间妊娠是将金色中仓鼠(Mesocricetus auratus)的胚胎移植入假孕小鼠(Mus musculus)子宫并取妊娠D4、D8、D12的子宫为实验材料,相应时间同种小鼠胚胎移植小鼠妊娠后的子宫和假孕小鼠子宫分别为阳性和阴性对照。免疫组化结果表明D8时,科间妊娠孕体integrinαvβ3、IGF-Ⅱ、IGFBP-1、PTEN、Shc、FAK的表达强度均与正常同种妊娠有差异。而妊娠D8时同种、科间妊娠子宫p-ERK的表达部位与表达量无明显差异。明胶酶谱显示,科间妊娠时MMP-2,-9的分泌模式与同种妊娠明显不同。这些结果表明,上述信号通路分子的差异表达有可能是造成科间妊娠时母胎界面异常的组织学表现的一个原因。 展开更多
关键词 金色中仓鼠 小鼠 科间妊娠 PTEN FAK shc
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衔接蛋白p66Shc在糖尿病及其并发症中的作用 被引量:3
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作者 聂静 孙林 刘伏友 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2009年第3期250-253,共4页
p66Shc是调控氧化应激和生命周期的关键蛋白。在氧化应激信号的刺激下,p66Shc在线粒体内氧化细胞色素C产生大量活性氧,造成细胞的氧化损伤。最新的研究表明,p66Shc可能在衰老及衰老相关的疾病如糖尿病中扮演关键的角色。本文简要综述p66... p66Shc是调控氧化应激和生命周期的关键蛋白。在氧化应激信号的刺激下,p66Shc在线粒体内氧化细胞色素C产生大量活性氧,造成细胞的氧化损伤。最新的研究表明,p66Shc可能在衰老及衰老相关的疾病如糖尿病中扮演关键的角色。本文简要综述p66Shc的结构、功能、相关的信号通路及其在糖尿病领域的最新研究进展。 展开更多
关键词 P66shc 氧化应激 活性氧 糖尿病
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