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黑麦Secalin蛋白的SDS-PAGE检测法 被引量:1
1
作者 司红起 马传喜 《麦类作物学报》 CAS CSCD 2003年第4期89-93,共5页
对84份中国冬小麦栽培品种分别使用醇提法和水提法提取其胚乳贮藏蛋白,并用SDS-PAGE检测黑麦Secalin蛋白的有无,以此来估算我国含有1B/1R易位的冬小麦品种的频率,结果表明:醇提SDS-PAGE黑麦Se-calin蛋白检出率为46.4%,水提SDS-PAGE黑麦... 对84份中国冬小麦栽培品种分别使用醇提法和水提法提取其胚乳贮藏蛋白,并用SDS-PAGE检测黑麦Secalin蛋白的有无,以此来估算我国含有1B/1R易位的冬小麦品种的频率,结果表明:醇提SDS-PAGE黑麦Se-calin蛋白检出率为46.4%,水提SDS-PAGE黑麦Secalin蛋白检出率为56.0%,后者比前者灵敏;醇提SDS-PAGE和水提SDS-PAGE都是检测黑麦Secalin蛋白的有效方法,若同时使用效果会更好,因为它们可以互相补充,由此检测可知,我国含有1B/1R易位的冬小麦品种的频率高于59.5%。 展开更多
关键词 黑麦 secalin蛋白 SDS—PAGE检测法 样品处理 醇溶蛋白 水溶蛋白 1B/1R易位系
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Secalin蛋白检测及其与面团黏性关系的研究 被引量:1
2
作者 司红起 马传喜 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期28-31,共4页
用SDS-PAGE检测了70个小麦品种是否带有黑麦Secalin蛋白,并测试了它们的面团黏性,用PCR检测了部分品种是否含有1RS染色体片断,结果表明:70%的品种为1B/1R易位系;有54.3%的品种面团发黏;带有黑麦Secalin蛋白的品种约有72.5%面团发黏,而... 用SDS-PAGE检测了70个小麦品种是否带有黑麦Secalin蛋白,并测试了它们的面团黏性,用PCR检测了部分品种是否含有1RS染色体片断,结果表明:70%的品种为1B/1R易位系;有54.3%的品种面团发黏;带有黑麦Secalin蛋白的品种约有72.5%面团发黏,而不带有黑麦Secalin蛋白的品种只有30%面团发黏;影响面团黏性的主要因素为来源于黑麦的Secalin蛋白;PCR扩增结果表明,在我国存在不带有Sec-1基因的1B/1R小片断易位系。 展开更多
关键词 小麦 面团黏性 secalin蛋白 1B/1R易位系
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秦岭黑麦75K γ-secalin亚基编码基因的克隆及序列分析
3
作者 陈毅万 陈其皎 +1 位作者 张连全 刘登才 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2008年第4期433-438,共6页
以中国春-帝国黑麦2R附加系(CS-2R)为对照,采用SDS-PAGE方法鉴定了秦岭黑麦75K γ-secalin亚基;对该亚基编码基因进行克隆测序和序列比较,结果表明:(1)秦岭黑麦75K γ-secalin(NCBI数据库登录号EU368041)具有75K γ-secalin亚基典型的... 以中国春-帝国黑麦2R附加系(CS-2R)为对照,采用SDS-PAGE方法鉴定了秦岭黑麦75K γ-secalin亚基;对该亚基编码基因进行克隆测序和序列比较,结果表明:(1)秦岭黑麦75K γ-secalin(NCBI数据库登录号EU368041)具有75K γ-secalin亚基典型的氨基酸一级结构;(2)在DNA水平,秦岭黑麦同南非开普敦的栽培黑麦材料存在一个SNP位点,与欧洲的帝国黑麦存在8个SNP位点,与黑麦属其他3个种S.vavilovii、S.strictum、S.sylvestre分别存在2%、4%和6%的差异;(3)在氨基酸水平,秦岭黑麦与来自南非开普敦的栽培黑麦无差异,与欧洲的帝国黑麦差异极小,而与其他3个黑麦种的差异大,这为发掘75K γ-seca-lin基因提供了参考信息;(4)基于该基因构建的进化树能有效区分黑麦属内种间的亲缘关系,S.vavilovii种与栽培黑麦关系最近,S.sylvestre与栽培黑麦最远,而S.strictum则是介于中间的一个种,这与先前的细胞学、rDNA ITS及SSR等分析结果一致。 展开更多
关键词 秦岭黑麦 75K γ-secalin亚基 基因克隆 SDS-PAGE
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RNA interference targeting ω-secalin genes differentially affects the processing quality in a wheat T1BL·1RS translocation line
4
作者 Shuo Zhou Cuimian Zhang +6 位作者 He Zhao Mengyu Lyu Fushuang Dong Yongwei Liu Fan Yang Haibo Wang Jianfang Chai 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2021年第2期456-464,共9页
Wheat-rye T1BL·1RS translocation lines are widely used,especially in China,but their processing quality is generally poor.An interfering expression vector targeting theω-secalin genes was constructed with the 1B... Wheat-rye T1BL·1RS translocation lines are widely used,especially in China,but their processing quality is generally poor.An interfering expression vector targeting theω-secalin genes was constructed with the 1Bx7 seed-specific promoter.Biolistic-mediated genetic transformation of the wheat cultivar KN199 carrying the T1BL·1RS translocation generated 10 transgenic lines.Two representative transgenic lines,8-2 and 13-7,were selected for analysis.Compared with the control,the two transformants showed an up to 4.5-fold decrease in totalω-secalins and various levels of decrease inω-gliadins,γ-gliadins,and low-molecular-weight glutenins.A decrease in high molecular weight(HMW)glutenin 1Bx7 was detected only in 8-2,owing possibly to promoter methylation.Increased levels ofα-gliadins were observed in both transformants,but increased levels of HMW glutenins were observed only in 13-7.Line 13-7 showed increases in gluten index,Zeleny sedimentation value,stabilization time,and maximum resistance.Its bread volume was 849.6 mL,an 11.9%increase over that of the control.Line 8-2 showed decreases in these parameters,but its total cake-making quality score was 88,an 17.3%increase over that of the control.The study demonstrates that the same RNAi construct may produce different effects on wheat processing quality and highlights the influence of the vector promoter in RNA interference. 展开更多
关键词 T1BL·1RS Quality improvement RNA interference secalin Triticum aestivum
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ω-黑麦碱基因沉默对小麦1B/1R易位系加工品质的影响 被引量:13
5
作者 柴建芳 王海波 +2 位作者 马秀英 张翠绵 董福双 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期627-632,共6页
ω-黑麦碱是造成小麦1B/1R易位系加工品质差的一个重要因素,为探索解决这一问题,构建了ω-黑麦碱基因沉默表达载体,并通过农杆菌介导转化小麦品种金禾9123,获得3个T_0代转基因植株,再经连续的扩繁和PCR检测,获得纯合转基因T_4代株系。酸... ω-黑麦碱是造成小麦1B/1R易位系加工品质差的一个重要因素,为探索解决这一问题,构建了ω-黑麦碱基因沉默表达载体,并通过农杆菌介导转化小麦品种金禾9123,获得3个T_0代转基因植株,再经连续的扩繁和PCR检测,获得纯合转基因T_4代株系。酸性PAGE检测结果表明,这些纯合转基因株系中ω-黑麦碱的总表达量平均下降53%。这些ω-黑麦碱基因沉默的转基因株系的面筋指数、沉降值和稳定时间均显著提高,而其农艺性状,如株高、穗粒数、千粒重和小区产量,均没有受到不良影响,说明沉默ω-黑麦碱基因可以在不影响产量的前提下提高小麦1B/1R易位系的加工品质。 展开更多
关键词 小麦1B/1R易位系 黑麦碱 RNA干扰 基因沉默 加工品质
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黑麦碱基因(Sec-1)表达缺失的1RS/1BL易位系的鉴定 被引量:9
6
作者 晏本菊 张怀琼 任正隆 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期F0007-F0007,514-517,共5页
用改良的GiemsaC带技术、DNA原位杂交和酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(APAGE)对来源于小麦品种绵阳11与不同黑麦自交系远缘杂交获得的高代株系(BC1F7)的染色体结构和醇溶蛋白进行了研究。结果发现,在鉴定的200个株系中,有45个株系经C带和APAG... 用改良的GiemsaC带技术、DNA原位杂交和酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(APAGE)对来源于小麦品种绵阳11与不同黑麦自交系远缘杂交获得的高代株系(BC1F7)的染色体结构和醇溶蛋白进行了研究。结果发现,在鉴定的200个株系中,有45个株系经C带和APAGE检测均一致地发现它们含有一对1RS/1BL易位染色体,而一个株系84311,C带鉴定、原位杂交结果均证明它含有一对1RS/1BL易位染色体,但APAGE醇溶蛋白图谱却不具有黑麦1RS染色体臂的黑麦碱特征带,而表达出既不同于黑麦碱又不同于亲本绵阳11的醇溶蛋白带型。这一结果表明,利用不同的黑麦亲本资源,可以获得黑麦碱基因Sec1表达缺失的新的1RS/1BL易位系。这种新的1RS/1BL易位系缺失了影响小麦品质的黑麦碱蛋白,因此是进一步研究1RS/1BL易位对小麦品质影响的珍贵材料。研究指出,在利用外源基因的植物育种中,外源种供体材料的遗传多样性是值得重视的基因资源。 展开更多
关键词 小麦 黑麦 1RS/1BL易位 黑麦碱基因
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Sec-1位点缺失对1BL/1RS易位系籽粒品质的影响 被引量:4
7
作者 昝香存 李正玲 +7 位作者 常莹莹 董海滨 高崇 韩留鹏 郭瑞 赵明忠 胡琳 许为钢 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期827-833,共7页
为了解Sec-1位点缺失对1BL/1RS易位系品质的影响,用Sec-1位点缺失突变体与郑麦7698多次回交,系谱法辅助分子标记多代选择后得到Sec-1位点缺失的1BL/1RS易位系(简称Sec-1位点缺失易位系)和正常1BL/1RS易位系(简称正常易位系),并进行品质... 为了解Sec-1位点缺失对1BL/1RS易位系品质的影响,用Sec-1位点缺失突变体与郑麦7698多次回交,系谱法辅助分子标记多代选择后得到Sec-1位点缺失的1BL/1RS易位系(简称Sec-1位点缺失易位系)和正常1BL/1RS易位系(简称正常易位系),并进行品质性状、抗病性及农艺性状鉴定。结果表明,蛋白质含量、湿面筋含量、干面筋含量和中峰值高度在Sec-1位点缺失易位系和正常易位系之间差异不显著,而Sec-1位点缺失易位系的面筋指数、面团形成时间、稳定时间、粉质质量指数、和面时间、中峰值宽度和8 min尾宽显著高于正常易位系。正常易位系的吸水率和衰落角显著大于Sec-1位点缺失易位系。Sec-1位点缺失易位系的条锈病抗性和白粉病抗性均低于正常易位系,但二者之间条锈病的病情指数差异不显著,而白粉病的病情指数差异达显著水平。正常易位系与Sec-1位点缺失易位系间的千粒重、穗粒数、产量水平差异均不显著。综上所述,Sec-1位点缺失对小麦籽粒品质的正向调控作用显著,而对农艺性状的负面效应不显著,Sec-1位点缺失突变体是研究和改良小麦籽粒品质的优良遗传材料。 展开更多
关键词 1BL/1RS易位系 Sec-1位点 黑麦碱
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ω-黑麦碱基因表达缺失的1BL/1RS易位系种质创新 被引量:1
8
作者 张士昌 李亚青 +2 位作者 张楠 彭义峰 李孟军 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期11-16,共6页
1BL/1RS易位系是小麦育种的重要亲本,但1RS Sec-1位点表达的ω-黑麦碱是导致小麦加工品质不佳的重要因素。为消除ω-黑麦碱的不良影响,进一步挖掘1BL/1RS易位系的育种潜力,本研究利用低能N+离子束处理1BL/1RS易位系小麦干种子,利用醇溶... 1BL/1RS易位系是小麦育种的重要亲本,但1RS Sec-1位点表达的ω-黑麦碱是导致小麦加工品质不佳的重要因素。为消除ω-黑麦碱的不良影响,进一步挖掘1BL/1RS易位系的育种潜力,本研究利用低能N+离子束处理1BL/1RS易位系小麦干种子,利用醇溶蛋白酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)筛选ω-黑麦碱表达缺失突变株系,1RS染色体特异引物鉴定携带1RS染色体的突变株系,结果共创制出9个ω-黑麦碱基因Sec-1位点表达缺失的新的1BL/1RS易位系种质。农艺性状和品质性状分析结果表明,这些1BL/1RS易位系新种质的籽粒蛋白含量、面筋指数、稳定时间等加工品质性状显著提高,株高、穗数、千粒重等农艺性状无显著变化。ω-黑麦碱表达缺失突变体的育成为培育优质抗逆小麦品种提供了新的方法。 展开更多
关键词 1BL/1RS易位系 ω-黑麦碱 加工品质 农艺性状
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PVC吸附二乙烯三胺催化剂合成氯化胆碱 被引量:3
9
作者 罗曼 姜丽 隋长青 《化学工程师》 CAS 2009年第1期59-60,64,共3页
在PVC吸附二乙烯三胺的作用下,三甲胺与氯乙醇反应合成氯化胆碱。讨论了反应的影响因素,胆碱的产率达99%以上。而且产品易分离,易干燥,成本低。
关键词 三甲胺 氯乙醇 PVC 二乙烯三胺
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黑麦1RS染色体臂Sec-1位点的研究进展 被引量:4
10
作者 李亚青 张楠 +2 位作者 张士昌 何明琦 李孟军 《河北农业科学》 2018年第5期37-40,75,共5页
在世界小麦育种中,小麦-黑麦1BL/1RS易位系作为优异基因资源被广泛利用。1BL/1RS易位系中1RS Sec-1位点的引入和1BS Glu-3/Gli-1位点的缺失导致其烘烤加工品质不佳,从而降低了1BL/1RS易位系在优质小麦育种中的利用价值。为了进一步发掘1... 在世界小麦育种中,小麦-黑麦1BL/1RS易位系作为优异基因资源被广泛利用。1BL/1RS易位系中1RS Sec-1位点的引入和1BS Glu-3/Gli-1位点的缺失导致其烘烤加工品质不佳,从而降低了1BL/1RS易位系在优质小麦育种中的利用价值。为了进一步发掘1BL/1RS易位系的育种价值,提高其加工品质,从Sec-1位点在染色体上的定位、Sec-1位点编码的40Kγ-黑麦碱和ω-黑麦碱基因家族的特征、ω-黑麦碱对小麦品质的影响以及消除ω-黑麦碱对品质不良影响的技术路径4个方面,综述了黑麦1RS染色体臂Sec-1位点的研究进展。 展开更多
关键词 1BL/1RS易位系 Sec-1位点 40K γ-黑麦碱 ω-黑麦碱
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小麦×玉米杂交双单倍体后代的HMW-GS组成和易位分析
11
作者 庞建周 王雪征 +2 位作者 茜晓哲 王晨阳 陈淑萍 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第4期126-129,共4页
为了提高优质小麦的育种效率,在早代明确高分子量谷蛋白亚基和醇溶蛋白的组成,增加育种的针对性,以1个小麦杂交组合的296个DH株系群体为试材,采用半粒SDS-PAGE法检测麦谷蛋白,且用A-PAGE检测了醇溶蛋白。结果表明:母本衡09-6324的HMW-G... 为了提高优质小麦的育种效率,在早代明确高分子量谷蛋白亚基和醇溶蛋白的组成,增加育种的针对性,以1个小麦杂交组合的296个DH株系群体为试材,采用半粒SDS-PAGE法检测麦谷蛋白,且用A-PAGE检测了醇溶蛋白。结果表明:母本衡09-6324的HMW-GS构成为null、7+9、2+12,是有Sec-1特征带的1BL/1RS易位系品种,父本师栾02-1亚基组成1、7+9、5+10,是非1BL/1RS易位系品种。296个DH株系共鉴定出6种不同的HMW-GS类型,均为父母本表达亚基类型的再分配,无变异类型。与面包加工品质呈正相关的5+10亚基出现频率为35.13%。DH株系材料中1BL/1RS易位系类型的占54.05%,1、5+10优质亚基同时出现,且没有Sec-1表达的占15.20%,这些株系可作为新的面包小麦种质资源使用。采用半粒SDS-PAGE和A-PAGE法对育种早代的优异单株进行有效鉴定和选择,可以提高优质小麦育种效率。 展开更多
关键词 小麦 玉米 双单倍体 半粒电泳法 HMW-GS 黑麦碱
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一个普通小麦γ-醇溶蛋白基因的分子标记
12
作者 陈其皎 袁中伟 +3 位作者 张连全 相志国 颜泽洪 刘登才 《四川农业大学学报》 CSCD 2006年第2期135-138,共4页
运用生物信息学方法,根据已知的黑麦75Kγ-黑麦碱DNA序列设计引物,对8份不同类型的普通小麦材料进行PCR扩增,均获得一条约400 bp的特异扩增带。对新中长和99L2的扩增带分别进行克隆测序,序列登录号为:DQ432029和DQ432030。分析表明,DQ43... 运用生物信息学方法,根据已知的黑麦75Kγ-黑麦碱DNA序列设计引物,对8份不同类型的普通小麦材料进行PCR扩增,均获得一条约400 bp的特异扩增带。对新中长和99L2的扩增带分别进行克隆测序,序列登录号为:DQ432029和DQ432030。分析表明,DQ432029和DQ432030序列完全一致,由377个碱基组成。BLAST分析发现,该序列与普通小麦γ-醇溶蛋白基因的同源性最高,相似性达92%,表明它是一个小麦γ-醇溶蛋白基因。同时,此序列与所有已知γ-醇溶蛋白基因序列存在显著差异,因而可以认为它是普通小麦γ-醇溶蛋白基因家族的一个新序列。所有不同类型的小麦材料都扩出一条同样大小的清晰、明亮带,此扩增带可以作为普通小麦该γ-醇溶蛋白新基因的特异分子标记。 展开更多
关键词 黑麦 普通小麦 γ-醇溶蛋白 γ-黑麦碱 分子标记
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黑麦属贮藏蛋白的SDS-PAGE分析
13
作者 尚海英 李伟 +2 位作者 蒲至恩 陈国跃 魏育明 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期403-408,共6页
对72份黑麦属材料的贮藏蛋白进行了SDS-PAGE分析。结果表明,黑麦属贮藏蛋白与普通小麦不同,可明显区分为4种组分:HMW、γ-75k、ω和γ-40k。黑麦属72份材料共有54种贮藏蛋白带型,每个材料可分离出7~11条带,多数为9~10条。在HMW... 对72份黑麦属材料的贮藏蛋白进行了SDS-PAGE分析。结果表明,黑麦属贮藏蛋白与普通小麦不同,可明显区分为4种组分:HMW、γ-75k、ω和γ-40k。黑麦属72份材料共有54种贮藏蛋白带型,每个材料可分离出7~11条带,多数为9~10条。在HMW区检测到6种亚基,22种不同组合。了40k区多为3条带,其他区域均以2条带最为普遍。各区域均可反映一定程度的变异,但以HMW-GS和γ-45区变异最大,揭示的材料间的遗传相似系数(GS)兮别为0.622和0.776。72份材料平均GS值为0.748,变幅为0.450-1.000。森林黑麦(S.syluestrg)种内的GS值最高,达0.970,而普通黑麦(S.cereale)种内的GS值最低,为0.797。森林黑麦与普通黑麦的种间GS值最低,为0.633,与其他2个种的种间GS值也均较低(〈0.700)。瓦维洛夫黑麦(S.vavilovii)与森林黑麦(S.cereale)的种间GS值高达0.785。该结果说明,SDS-PAGE可以有效地揭示黑麦属贮藏蛋白丰富的遗传差异,并可在一定程度上反映黑麦属种间的亲缘关系。 展开更多
关键词 黑麦属 贮藏蛋白 SDS—PAGE
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75K γ-黑麦碱基因的分子鉴定与转移
14
作者 王庆 袁中伟 +1 位作者 王延谦 刘登才 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期373-378,共6页
【目的】研究75K γ-黑麦碱基因的系统进化关系,并将秦岭黑麦75Kγ-黑麦碱基因导入普通小麦遗传背景中。【方法】利用75K γ-secalin亚基的特异引物secF/secR对5种黑麦进行扩增、克隆、测序及序列分析。以普通小麦(中国春)为母本,黑麦... 【目的】研究75K γ-黑麦碱基因的系统进化关系,并将秦岭黑麦75Kγ-黑麦碱基因导入普通小麦遗传背景中。【方法】利用75K γ-secalin亚基的特异引物secF/secR对5种黑麦进行扩增、克隆、测序及序列分析。以普通小麦(中国春)为母本,黑麦为父本,获得杂种。自杂种后代中,采SDS-PAGE技术分析杂交后代的75K γ-secalins蛋白亚基。用根尖制片进行体细胞染色体数目观察和原位杂交分析。【结果】序列分析结果表明,我国秦岭黑麦(AS156)与美国Wrens黑麦(CIse35)、土耳其4041黑麦(PI168199)、南非的Polko黑麦(PI412949)、智利278黑麦(PI436188)的栽培品系均具有75Kγ-黑麦碱典型的一级结构,但是在重复区中序列差异较大(包括缺失/插入和SNP)。聚类分析表明,我国的秦岭黑麦与同在北纬的土耳其和美国黑麦亲缘关系近,而与位于南纬的南非、智利的两种黑麦关系较远。以中国春为遗传背景,将位于秦岭黑麦2R染色体上的75Kγ-黑麦碱基因导入六倍体小麦,获得结实正常,农艺性状稳定的品系,编号WYQ122。通过SDS-PAGE技术和基因测序分析,已确认WYQ122中携带75Kγ-黑麦碱基因,同时原位杂交也验证黑麦染色体的存在。细胞学鉴定表明,WYQ122植株间染色体数目有41条和42条两种类型。【结论】黑麦的75Kγ-黑麦碱基因存在差异。以染色体代换系的方式将该基因转入普通小麦中。 展开更多
关键词 黑麦 75K γ-黑麦碱 分子鉴定 转移
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小麦光温敏雄性不育系BS237ω-黑麦碱基因克隆及序列分析
15
作者 侯起岭 杨卫兵 +5 位作者 娄红耀 杜冰 高建刚 赵昌平 张风廷 秦志列 《山东农业科学》 北大核心 2023年第3期1-8,共8页
为研究小麦光温敏雄性不育系BS237中ω-黑麦碱基因编码区特征,利用同源克隆的方法克隆ω-黑麦碱基因的编码区序列,共得到8条具有完整开放阅读框的基因序列(OK999982~OK999985,OK999987~OK999990),基因编码区长度为1002~1074 bp,可编码33... 为研究小麦光温敏雄性不育系BS237中ω-黑麦碱基因编码区特征,利用同源克隆的方法克隆ω-黑麦碱基因的编码区序列,共得到8条具有完整开放阅读框的基因序列(OK999982~OK999985,OK999987~OK999990),基因编码区长度为1002~1074 bp,可编码333~357个氨基酸残基,全部编码RQL型ω-黑麦碱蛋白。NCBI BLAST分析表明克隆序列与已知序列的相似度在91%~100%之间,推断其为ω-黑麦碱基因家族。进化分析表明8个克隆的基因与普通小麦(Triticum aestivum L.)和黑麦(Secale cereale L.)的ω-黑麦碱基因序列具有较高的同源性,说明ω-黑麦碱基因具有一定的基因组特异性。乳糜泻(CD)免疫肽识别分析表明,8个基因中均分布有5种T细胞免疫肽——Gli-ωt(PQQPFPQQ)、DQ2.5-glia-γ5(QQPFPQQPQ)、QQPY、SPQQ和PQQP,且肽段Gli-ωt(PQQPFPQQ)和PQQP存在多个拷贝。本研究结果可为1BL/1RS类型杂交小麦加工品质的分子改良及乳糜泻疾病的预防提供参考。 展开更多
关键词 小麦 光温敏雄性不育系 ω-黑麦碱 基因克隆 序列分析 乳糜泻
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