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EGFP-Sam68融合蛋白在HeLa细胞的表达和定位
被引量：
1
1
作者
曹宏伟
李凤岐
张华
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期270-273,共4页
目的克隆有丝分裂Src相关蛋白p68(Sam68)基因cDNA全长,构建Sam68真核绿色荧光蛋白表达载体,并确定其在HeLa中的表达和定位。方法提取HeLa细胞总RNA,RT-PCR扩增Sam68基因片段,经酶切鉴定及测序正确后,克隆到真核绿色荧光蛋白表达载体(pcD...
目的克隆有丝分裂Src相关蛋白p68(Sam68)基因cDNA全长,构建Sam68真核绿色荧光蛋白表达载体,并确定其在HeLa中的表达和定位。方法提取HeLa细胞总RNA,RT-PCR扩增Sam68基因片段,经酶切鉴定及测序正确后,克隆到真核绿色荧光蛋白表达载体(pcDNA3.0-EGFP)上,并转染HeLa细胞,Western blot法检测Sam68表达,免疫荧光细胞化学染色观察其细胞定位。结果酶切和测序证实Sam68正确插入pcDNA3.0-EGFP载体中,且载体正确表达了EGFP-Sam68融合蛋白,该蛋白定位在HeLa细胞核内。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-EGFP-Sam68。
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关键词
有丝分裂Src相关蛋白p68
真核表达
基因克隆
载体构建
原文传递
题名
EGFP-Sam68融合蛋白在HeLa细胞的表达和定位
被引量：
1
1
作者
曹宏伟
李凤岐
张华
机构
黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期270-273,共4页
基金
国家自然科学基金(31200121
31300145
31310103018)
文摘
目的克隆有丝分裂Src相关蛋白p68(Sam68)基因cDNA全长,构建Sam68真核绿色荧光蛋白表达载体,并确定其在HeLa中的表达和定位。方法提取HeLa细胞总RNA,RT-PCR扩增Sam68基因片段,经酶切鉴定及测序正确后,克隆到真核绿色荧光蛋白表达载体(pcDNA3.0-EGFP)上,并转染HeLa细胞,Western blot法检测Sam68表达,免疫荧光细胞化学染色观察其细胞定位。结果酶切和测序证实Sam68正确插入pcDNA3.0-EGFP载体中,且载体正确表达了EGFP-Sam68融合蛋白,该蛋白定位在HeLa细胞核内。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-EGFP-Sam68。
关键词
有丝分裂Src相关蛋白p68
真核表达
基因克隆
载体构建
Keywords
sarn68
eukaryotic expression
gene clone
construction of vector
分类号
R392.33 [医药卫生—免疫学]
Q782 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
EGFP-Sam68融合蛋白在HeLa细胞的表达和定位
曹宏伟
李凤岐
张华
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
原文传递
已选择
0
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参考文献
引证文献
统计分析
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