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硝酸羟胺对大鼠脑中Synaptobrevin和Syntaxin的表达的影响 被引量:1
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作者 高亚兵 彭瑞云 +4 位作者 王水明 王德文 陈建魁 马俊杰 张志毅 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期274-277,共4页
目的观察硝酸羟胺(HAN)对大鼠脑组织Synaptobrevin 2、Syntaxin的影响,探讨二者在HAN致脑损伤中的作用。方法应用免疫荧光双标记技术标记Synaptobrevin2和Syntaxin,用Hochest衬染细胞核,Radiance2100型激光共聚焦显微镜观察。结果Synapt... 目的观察硝酸羟胺(HAN)对大鼠脑组织Synaptobrevin 2、Syntaxin的影响,探讨二者在HAN致脑损伤中的作用。方法应用免疫荧光双标记技术标记Synaptobrevin2和Syntaxin,用Hochest衬染细胞核,Radiance2100型激光共聚焦显微镜观察。结果Synaptobrevin 2及Syntaxin广泛分布在正常大脑皮质、海马及小脑,HAN注射后7d内,Synaptobrevin 2表达减弱,Syntaxin表达增强。结论Synaptobrevin 2和Syntaxin比例失调和相互作用减弱可能在HAN致脑损伤中发挥重要作用。 展开更多
关键词 免疫荧光技术 硝酸羟胺 激光共聚焦扫描显微镜 synaptobrevin2 SYNTAXIN
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基于酿酒酵母细胞构建靶向囊泡相关膜蛋白2的肉毒神经毒素检测系统 被引量:1
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作者 蒋瑶 陈世林 +2 位作者 李雨晴 谌佳 中西秀树 《生物工程学报》 北大核心 2025年第5期2132-2144,共13页
肉毒神经毒素(botulinum neurotoxins,BoNTs)是一种神经毒性蛋白质,可水解参与突触囊泡融合的可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(soluble N-ethylmaleimide factor attachment protein receptor,SNARE)。其中,囊泡相关膜蛋白(... 肉毒神经毒素(botulinum neurotoxins,BoNTs)是一种神经毒性蛋白质,可水解参与突触囊泡融合的可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(soluble N-ethylmaleimide factor attachment protein receptor,SNARE)。其中,囊泡相关膜蛋白(synaptobrevin-2,Sb2)是BoNTs主要靶向的SNARE蛋白之一。本研究旨在开发一种基于酵母的BoNTs检测系统,用于分析靶向Sb-2的BoNTs。鉴于SNARE蛋白在真核生物中的高度保守性,Snc1和Snc2是酿酒酵母中Sb-2的同源物,本研究构建了功能性的SNARE嵌合蛋白,其中Snc2中的SNARE结构域的一部分被Sb-2的相应区域所取代,从而Snc2/Sb2-4嵌合蛋白可以被BoNTs所识别。由于Snc1和Snc2是酵母产孢所必需的,因此在携带Snc2/Sb2-4嵌合蛋白的snc1Δsnc2Δ酵母中,靶向Sb-2蛋白的BoNTs(包括BoNT/B在内)表达后显著降低了孢子的形成效率。然而,在野生型酵母中,BoNTs表达的影响可以忽略不计。产孢效率在本研究中被用作检验BoNTs活性的指标。这种方法的优点在于可以通过荧光比色法来评估酵母的产孢效率,进而反映出BoNTs的活性。最终,本研究基于酵母细胞构建的体系不仅能够简单便捷地分析BoNTs,还能够用于挖掘未鉴定的BoNTs和BoNTs抑制剂。鉴于BoNTs广泛应用于临床和美容领域,该体系有望为发现和优化具有应用价值的BoNTs提供有力支持。 展开更多
关键词 肉毒神经毒素 囊泡相关膜蛋白 可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(SNARE) 酿酒酵母 孢子
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SNAREs蛋白复合物与囊泡融合分子调节机制的研究进展 被引量:5
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作者 陈立强 王洋洋 +2 位作者 司艳辉 梁洁玲 李海珠 《检验医学与临床》 CAS 2015年第10期1462-1463,共2页
细胞内大分子物质及颗粒性物质不能自由穿过细胞膜,必须以囊泡运输的方式进行跨膜转运,囊泡介导的转运方式,无论是正向或是逆向转运,都包括3个主要步骤,分别是外壳蛋白的选择,囊泡的出芽与形成和转运物质的选择[1]。研究表明在囊泡运输... 细胞内大分子物质及颗粒性物质不能自由穿过细胞膜,必须以囊泡运输的方式进行跨膜转运,囊泡介导的转运方式,无论是正向或是逆向转运,都包括3个主要步骤,分别是外壳蛋白的选择,囊泡的出芽与形成和转运物质的选择[1]。研究表明在囊泡运输过程中N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(SNAREs)发挥着重要作用, 展开更多
关键词 SNARES 囊泡融合 synaptobrevins Syntaxins 突触相关蛋白
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大鼠耳蜗中三磷酸腺苷表达及来源的初步研究 被引量:6
4
作者 何珊 杨军 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期466-469,共4页
目的研究大鼠耳蜗中三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)的表达部位、来源及其可能的存在形式。方法运用喹丫因染色技术,观察培养的大鼠耳蜗血管纹缘细胞、全膜迷路铺片和新鲜分离的单离外毛细胞;用免疫组化荧光染色法,观察突触素(s... 目的研究大鼠耳蜗中三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)的表达部位、来源及其可能的存在形式。方法运用喹丫因染色技术,观察培养的大鼠耳蜗血管纹缘细胞、全膜迷路铺片和新鲜分离的单离外毛细胞;用免疫组化荧光染色法,观察突触素(synaptophysin,SYN)和小泡相关膜蛋白-2(vesicle-associated mem-brane protein-2/synaptobrevin,VAMP-2)在大鼠耳蜗中的表达。结果培养的缘细胞胞浆中存在星点状喹丫因染色,全膜迷路铺片血管纹以外的区域和单离毛细胞中均未发现喹丫因的特异性染色。SYN和VAMP-2在大鼠耳蜗的内螺旋束、外螺旋束、Deiters细胞内侧缘和螺旋神经元(spiral ganglion neurons,SGNs)有共同表达。结论大鼠耳蜗缘细胞胞浆中存在大量囊泡状的ATP,而毛细胞、支持细胞中的ATP可能以非囊泡的形式储存。内螺旋束、外螺旋束和SGNs中有可能存在SYN染色的ATP囊泡。 展开更多
关键词 耳蜗 三磷酸腺苷 喹丫因染色 突触素 小泡相关联膜蛋白-2
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囊泡相关膜蛋白8基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关性研究 被引量:6
5
作者 段成城 徐力辛 陈倩 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期329-332,共4页
目的 研究囊泡相关膜蛋白8(synaptobrevins/vesicle-associated membrane proteins 8,VAMP8)基因rs1010多态性在中国汉族人群中的分布及与冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态... 目的 研究囊泡相关膜蛋白8(synaptobrevins/vesicle-associated membrane proteins 8,VAMP8)基因rs1010多态性在中国汉族人群中的分布及与冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,对汉族185例冠心病患者及149名正常人VAMP8 rs1010基因多态性,基因型及等位基因频率分布进行研究.结果 研究人群中存在VAMP8 rs1010基因多态性,基因型符合Hardy-Weinberg平衡,冠心病患者A等位基因频率显著高于对照组(67.3%VS 53.0%,P〈0.05).Logistic回归分析得出:VAMP8基因(AA+AG)基因型是冠心病的独立危险因素,(AA+AG)基因型比GG基因型的比数比为1.969,95%可信区间为1.032~3.755.结论 VAMP8 rs1010基因多态性与冠心病有关,A等位基因可能是汉族人群冠心病的遗传危险因素. 展开更多
关键词 冠状动脉粥样硬化性心脏病 囊泡相关膜蛋白8 遗传多态性
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Lipid Rafts Identified on Synaptic Vesicles from Rat Brain 被引量:1
6
作者 何立 吕继华 +1 位作者 周庆华 隋森芳 《Tsinghua Science and Technology》 SCIE EI CAS 2006年第4期452-458,共7页
For a long time, lipid rafts have been thought to participate in regulating neurotransmitter release. However, the existence of lipid rafts on synaptic vesicles (SVs) and the mechanism by which exocytosisrelative pr... For a long time, lipid rafts have been thought to participate in regulating neurotransmitter release. However, the existence of lipid rafts on synaptic vesicles (SVs) and the mechanism by which exocytosisrelative proteins distribute on this structure have not been fully investigated. There is also much controversial data concerning rafts on SVs and synaptic vesicle proteins which makes the results difficult to interpret. This study systematically analyzed the existence and properties of lipid rafts on purified SVs by sucrose density gradient centrifugation, cholesterol depletion, and temperature variation. The data reveals that typical lipid rafts on SVs are both cholesterol dependent and temperature sensitive. Previous confusing results may have been caused by improper treatment or side effects of particular reagent. We also screened the lateral distribution of major exocytosis-related SV proteins and found that only the synaptobrevin (syb) and synaptotagmin (syt) produce detectable association with lipid rafts in 1% Triton X-100. 展开更多
关键词 synaptic vesicles lipid rafts cholesterol depletion SYNAPTOPHYSIN synaptobrevin
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