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人膀胱癌细胞系SW780中侧群细胞的功能鉴定 被引量:2
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作者 佘军军 石钊琪 +2 位作者 薛孝斌 王红军 车向明 《山西医科大学学报》 CAS 2013年第10期776-780,共5页
目的使用DCV荧光染料从SW780人膀胱癌细胞系中分离侧群细胞(SP细胞),并观察该侧群细胞是否具有肿瘤干细胞样生物学特征。方法 SW780细胞体外培养,用DCV荧光染料分析SP细胞比率。分选SP与NSP细胞群落后体外培养扩增。软琼脂克隆集落生成... 目的使用DCV荧光染料从SW780人膀胱癌细胞系中分离侧群细胞(SP细胞),并观察该侧群细胞是否具有肿瘤干细胞样生物学特征。方法 SW780细胞体外培养,用DCV荧光染料分析SP细胞比率。分选SP与NSP细胞群落后体外培养扩增。软琼脂克隆集落生成实验比较SP细胞与NSP细胞的体外单克隆生长能力。采用RT-PCR法比较ABCG2、MDR1、Oct-4及Bmi-1等基因表达差异。结果 SW780细胞的SP比率为1.6%。经体外培养后SP细胞可以产生SP细胞与NSP细胞,NSP细胞只能产生NSP细胞。SP细胞体外单克隆生长率显著大于NSP细胞(P<0.01)。半定量RT-PCR结果表明SP细胞的ABCG2、MDR1、Oct-4及Bmi-1基因表达显著高于NSP细胞。结论流式细胞仪激发DCV荧光染料可从人膀胱癌SW780细胞系中分离出侧群细胞,该侧群细胞具有肿瘤干细胞样生物学特征。 展开更多
关键词 膀胱癌 sw780细胞系 肿瘤干细胞 侧群细胞
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波形蛋白基因转染增强SW780人膀胱癌细胞的侵袭力 被引量:1
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作者 卢冠军 丁娟 王志军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期713-716,共4页
目的构建人波形蛋白(vimentin)基因的真核表达载体,转染SW780人膀胱癌细胞,检测vimentin上调对SW780细胞侵袭能力的影响。方法 PCR扩增人vimentin基因的cDNA序列,将其插入pcDNA3.1真核表达载体中,酶切鉴定并测序验证重组质粒pcDNA3.1-vi... 目的构建人波形蛋白(vimentin)基因的真核表达载体,转染SW780人膀胱癌细胞,检测vimentin上调对SW780细胞侵袭能力的影响。方法 PCR扩增人vimentin基因的cDNA序列,将其插入pcDNA3.1真核表达载体中,酶切鉴定并测序验证重组质粒pcDNA3.1-vimentin后,转染人膀胱癌SW780细胞。Western blot法检测vimentin及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,明胶酶谱分析MMP-9活性,TranswellTM实验检测vimentin对膀胱癌细胞侵袭能力的影响。结果酶切鉴定有预期目的片段,测序证实重组质粒pcDNA3.1-vimentin构建成功。Western blot法检测提示pcDNA3.1-vimentin转染SW780细胞后,vimentin与MMP-9表达水平均上调。明胶酶谱表明vimentin能够显著促进SW780细胞MMP-9的分泌。TranswellTM实验提示vimentin能显著增强SW780细胞的侵袭转移能力。结论成功构建了pcDNA3.1-vimentin真核表达载体并将其成功转染膀胱癌SW780细胞。Vimentin上调能够增强SW780细胞的侵袭能力,可能与上调MMP-9的表达及促进MMP-9分泌有关。 展开更多
关键词 波形蛋白 膀胱癌细胞 sw780 侵袭转移
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