miR-205对肾上腺皮质癌SW-13细胞转移潜能影响的研究 被引量：4

1

作者 吴义高 王尉 +2 位作者 胡卫列 肖戈 徐文清 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第8期566-571,共6页

目的:通过调控miR-205在肾上腺皮质癌(ACC)细胞株SW-13中的表达,探讨miR-205对SW-13细胞生物学行为的影响。方法:通过基因重组技术构建pcDNA3.1(+)-miR-205重组质粒并合成miR-205的反义寡核苷酸作为反向对照,调控miR-205在肾上腺皮质癌S... 目的:通过调控miR-205在肾上腺皮质癌(ACC)细胞株SW-13中的表达,探讨miR-205对SW-13细胞生物学行为的影响。方法:通过基因重组技术构建pcDNA3.1(+)-miR-205重组质粒并合成miR-205的反义寡核苷酸作为反向对照,调控miR-205在肾上腺皮质癌SW-13细胞中表达,实时荧光定量PCR法验证miR-205表达情况;分别采用MTS、EdU、TUNNEL及Transwell小室法,检测过表达及抑制miR-205对增殖、凋亡及侵袭的影响。结果:在转染pcDNA3.1(+)-miR-205及miR-205反义寡核苷酸后,SW-13细胞中miR-205分别上调了63.2倍(P=0.001)及下调了86.3%(P=0.002)。MTS结果显示,在24、48、72和96h时,miR-205上调后SW-13细胞增殖率下降了(10.50±1.80)%、(23.67±4.80)%、(30.9±5.40)%和(38.34±6.20)%,P值分别为0.041、0.014、0.016和0.032;miR-205下调后增殖率提高了(25.31±3.20)%、(32.51±4.60)%、(40.15±4.10)%和(38.34±6.20)%,P值分别为0.032、0.026、0.022和0.013。TUNNEL结果显示,pcDNA3.1(+)-miR-205组SW-13细胞凋亡数为(46±4)个,pcDNA3.1(+)组为(25±3)个,P=0.001 9;anti-miR-205转染组为(11±2)个,空白组为(25±3)个,P=0.002 5。Transwell侵袭实验显示,pcDNA3.1(+)-miR-205组穿过小室膜细胞数为(43±8)个,pcDNA3.1(+)组为(120±15)个,P=0.001 4;anti-miR-205转染组为(118±14)个,空白组为(220±20)个,P=0.001 9。结论:miR-205通过抑制细胞增殖、侵袭并促进凋亡在ACC SW-13细胞中起抑癌作用;成功构建pcD-NA3.1(+)-miR-205真核表达质粒,为进一步研究miR-205在SW-13细胞中的基因调控机制奠定基础。 展开更多

关键词 肾上腺皮质肿瘤 生物学 MIRNA sw-13细胞 miR-205细胞凋亡

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绞股蓝总皂苷对人肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖及凋亡蛋白Caspase-8表达的影响 被引量：6

2

作者 刘丽 罗佐杰 卢杰 《广西医学》 CAS 2015年第6期801-803,809,共4页

目的探讨绞股蓝总皂苷(Gyp)体外干预对人肾上腺皮质癌(ACC)SW-13细胞增殖及其含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-8(Caspase-8)表达的影响。方法采用MTT法检测不同浓度的Gyp对SW-13细胞增殖的影响;普通显微镜下观察细胞形态学改变;实时荧... 目的探讨绞股蓝总皂苷(Gyp)体外干预对人肾上腺皮质癌(ACC)SW-13细胞增殖及其含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-8(Caspase-8)表达的影响。方法采用MTT法检测不同浓度的Gyp对SW-13细胞增殖的影响;普通显微镜下观察细胞形态学改变;实时荧光定量PCR检测Gyp干预后Caspase-8表达的变化。结果 Gyp对SW-13细胞增殖产生明显地抑制作用,且呈时间和浓度依赖性;光镜下观察,Gyp干预后SW-13细胞凋亡特征更明显;实时荧光定量PCR结果显示,Gyp干预后SW-13细胞Caspase-8 mRNA表达明显上调(P<0.01)。结论 Gyp可显著抑制人ACC SW-13细胞的增殖,其作用机制可能为通过上调Caspase-8 mRNA的表达来实现。 展开更多

关键词 绞股蓝总皂苷 肾上腺皮质癌 sw-13 细胞 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-8

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氯硝柳胺对肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1

3

作者 王敏捷 王尉 +2 位作者 朱沂 赵旭 胡卫列 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第1期76-82,共7页

目的研究氯硝柳胺对人肾上腺皮质癌SW-13细胞株细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞迁移力、侵袭力的影响。方法通过体外培养SW-13细胞,采用CCK8法和i CELLigence实时无标记细胞增殖监测仪检测不同浓度氯硝柳胺对细胞增殖的影响;设对照... 目的研究氯硝柳胺对人肾上腺皮质癌SW-13细胞株细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞迁移力、侵袭力的影响。方法通过体外培养SW-13细胞,采用CCK8法和i CELLigence实时无标记细胞增殖监测仪检测不同浓度氯硝柳胺对细胞增殖的影响;设对照组和氯硝柳胺组,流式细胞技术检测氯硝柳胺作用后SW-13细胞周期的变化,AO/EB染色法和Annexin V/PI染色流式细胞技术测定细胞凋亡率的变化,Transwell实验和细胞划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力的变化,Western blot(WB)法检测β-catenin/LRP6表达的变化。结果不同浓度的氯硝柳胺分别作用SW-13细胞24、48、72、96、120 h后,呈时间和浓度依赖性抑制SW-13细胞增殖(F=157.93,P<0.001);流式细胞仪周期检测结果显示24、48、72 h后,与对照组相比氯硝柳胺组将SW-13细胞周期阻滞在G0/G1期(P=0.001、0.005、0.008);AO/EB染色法和Annexin V/PI染色法结果均显示氯硝柳胺组的凋亡率与对照组相比明显升高(P<0.001);Transwell实验结果示氯硝柳胺组SW-13细胞的侵袭力降低(P<0.001),细胞划痕实验结果显示氯硝柳胺组SW-13细胞的迁移能力下降(P=0.002),WB结果示氯硝柳胺组SW-13细胞β-catenin/LRP6的表达明显降低(P<0.001)。结论氯硝柳胺抑制人肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖,阻滞细胞周期,抑制侵袭及迁移能力,促进细胞凋亡;可能与其抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多

关键词 氯硝柳胺 肾上腺皮质癌 sw-13 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡

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姜黄素干预肾上腺皮质癌SW-13细胞的miRNA调控机制 被引量：2

4

作者 黄雪梅 匡雅琪 +2 位作者 刘雨平 林媛媛 罗佐杰 《广西医学》 CAS 2022年第15期1758-1762,共5页

目的 探讨姜黄素干预肾上腺皮质癌SW-13细胞的miRNA调控机制。方法 将肾上腺皮质癌SW-13细胞分为对照组和姜黄素干预组,分别加入基础培养基2 mL、50μmol/L姜黄素溶液2 mL,干预24 h后提取总RNA用于小RNA文库构建和测序。将获得的序列进... 目的 探讨姜黄素干预肾上腺皮质癌SW-13细胞的miRNA调控机制。方法 将肾上腺皮质癌SW-13细胞分为对照组和姜黄素干预组,分别加入基础培养基2 mL、50μmol/L姜黄素溶液2 mL,干预24 h后提取总RNA用于小RNA文库构建和测序。将获得的序列进行miRNA注释和新miRNA预测后,筛选差异性表达的miRNA;对差异性表达的miRNA进行靶基因预测,对靶基因进行功能和通路富集分析。使用实时荧光定量PCR鉴定部分差异性表达miRNA的表达量。结果 共筛选出44个差异性表达的miRNA,包括21个表达上调的miRNA和23个表达下调的miRNA,其中预测有靶基因且有功能的miRNA共9个。功能富集分析结果显示,靶基因主要富集在细胞增殖、细胞迁移、细胞分化和凋亡等生物学过程;通路富集分析结果显示,靶基因主要富集在癌症途径、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、内质网应激信号通路、细胞周期和凋亡途径等。实时荧光定量PCR结果提示,miR-184、miR-490-3p、miR-766-3p、miR-200b-3p、miR-200c-3p和miR-3622a-5p的表达量与小RNA测序数据结果基本一致。结论 姜黄素可能通过miR-184、miR-490-3p、miR-766-3p、miR-200c-3p、miR-3622a-5p等miRNA参与调控癌症途径、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、内质网应激信号通路、细胞周期和凋亡途径等信号通路,以抑制细胞增殖、迁移、分化和凋亡,从而发挥抗肾上腺皮质癌的作用。 展开更多

关键词 肾上腺皮质癌 姜黄素 sw-13细胞 微小RNA 小RNA测序

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羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞凋亡的影响

5

作者 张劼 吴峰萍 +2 位作者 罗佐杰 梁杏欢 文静 《广西医科大学学报》 CAS 2014年第2期173-176,共4页

目的:研究羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞生长抑制和凋亡作用的影响。方法:采用CCK8检测不同浓度羟喜树碱对SW-13细胞增殖的影响;流式细胞仪测定药物作用前后的细胞凋亡情况。结果:不同浓度的羟喜树碱分别作用24,48,72h后,SW-13细... 目的:研究羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞生长抑制和凋亡作用的影响。方法:采用CCK8检测不同浓度羟喜树碱对SW-13细胞增殖的影响;流式细胞仪测定药物作用前后的细胞凋亡情况。结果:不同浓度的羟喜树碱分别作用24,48,72h后,SW-13细胞的生长增殖均受到明显抑制(P<0.01),并呈时间和浓度依赖性;流式细胞术显示SW-13细胞凋亡率随羟喜树碱浓度的增加而升高。结论:羟喜树碱可以显著抑制人肾上腺皮质癌SW-13细胞生长,促进其凋亡。 展开更多

关键词 羟喜树碱 人肾上腺皮质癌sw-13细胞 凋亡

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羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞生长增殖的影响 被引量：1

6

作者 吴峰萍 张劼 +2 位作者 罗佐杰 文静 梁杏欢 《广西医学》 CAS 2013年第10期1273-1274,1287,共3页

目的观察羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞生长增殖的影响。方法体外培养人肾上腺皮质癌SW-13细胞,随机分为干预组和对照组,干预组加入羟喜树碱使其终浓度为0.8μg/ml,对照组不加羟喜树碱,分别培养48 h后,采用台盼蓝拒染法观察羟喜树... 目的观察羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞生长增殖的影响。方法体外培养人肾上腺皮质癌SW-13细胞,随机分为干预组和对照组,干预组加入羟喜树碱使其终浓度为0.8μg/ml,对照组不加羟喜树碱,分别培养48 h后,采用台盼蓝拒染法观察羟喜树碱对SW-13细胞生长增殖的影响。结果光镜下可见干预组SW-13细胞数减少,死亡细胞数较多,干预组活细胞率明显低于对照组(P<0.05)。结论羟喜树碱可能具有抑制人肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖并促进其死亡的作用。 展开更多

关键词 肾上腺皮质癌 羟喜树碱 人肾上腺皮质癌sw-13细胞 台盼蓝拒染法

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shRNA沉默IGF-Ⅱ基因对人肾上腺皮质癌细胞株SW-13增殖与凋亡的影响

7

作者 杨翠英 罗佐杰 《山东医药》 CAS 2012年第33期1-4,14,共5页

目的探讨shRNA沉默IGF-Ⅱ基因对人肾上腺皮质癌细胞株SW-13增殖与凋亡的影响。方法构建针对人IGF-Ⅱ基因的shRNA慢病毒表达载体,稳定转染人肾上腺皮质癌细胞株SW-13。将实验随机分为3组:空白对照组、阴性对照组、IGF-Ⅱ-shRNA组,应用RT-... 目的探讨shRNA沉默IGF-Ⅱ基因对人肾上腺皮质癌细胞株SW-13增殖与凋亡的影响。方法构建针对人IGF-Ⅱ基因的shRNA慢病毒表达载体,稳定转染人肾上腺皮质癌细胞株SW-13。将实验随机分为3组:空白对照组、阴性对照组、IGF-Ⅱ-shRNA组,应用RT-PCR检测转染后各组IGF-Ⅱ基因mRNA的表达,以MTT比色法、流式细胞术检测转染后SW-13细胞生长增殖、凋亡的情况。结果 IGF-Ⅱ-shRNA组的IGF-Ⅱ基因mRNA表达量明显低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.01),IGF-Ⅱ-shRNA组较之其他两组能明显抑制细胞的增殖(P均<0.01),IGF-Ⅱ-shRNA组的细胞凋亡率与其他两组相比显著增加(P均<0.01)。结论靶向IGF-Ⅱ基因的shR-NA可以有效抑制人肾上腺皮质癌细胞株SW-13的生长,并促进其凋亡,IGF-Ⅱ基因可能是肾上腺皮质癌治疗的一个潜在靶点。 展开更多

关键词 肾上腺质皮肿瘤 干扰素类 sw-13 细胞增殖 细胞凋亡

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STR分型法鉴定人SW-13、293T及AGS细胞系种内及种间污染

8

作者 刘国娟 蔡伟文 +1 位作者 林峻 陈鲤群 《临床医学研究与实践》 2017年第10期1-4,共4页

目的检测研究所使用的人肾上腺皮质癌细胞SW-13、人胚肾细胞293T及人胃癌细胞AGS 3种细胞系污染情况,并探索短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型方法检测人类细胞系污染的可靠性。方法人类基因组上的微卫星位点携带着大量STR,... 目的检测研究所使用的人肾上腺皮质癌细胞SW-13、人胚肾细胞293T及人胃癌细胞AGS 3种细胞系污染情况,并探索短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型方法检测人类细胞系污染的可靠性。方法人类基因组上的微卫星位点携带着大量STR,每个STR核心序列的重复次数随个体不同存在差异,作为一种DNA标记使得细胞系在DNA水平上具有个性化。通过荧光聚合酶链式反应体系扩增STR位点,检测的数据与DSMZ细胞库进行匹配以对细胞系进行鉴别。结果比对得出SW-13基本匹配,其中20个STR基因位点中只有TH01位点的两个等位基因重复数为7和8,与DSMZ细胞库中此等位基因重复数7和7有差异,其余均一致在可接受范围内。细胞系293T、AGS等位基因的重复数与DSMZ细胞库完全匹配。结论 STR分型检测方法被ATCC、DSMZ等权威机构推崇,且此研究采用20位点检测法涵盖ATCC-9位点及中检院-16位点检测法,该法权威可靠。本所3种细胞系遗传稳定,均无种内或种间污染。 展开更多

关键词 STR分型 人sw-13、293T及AGS 细胞系交叉污染

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miR-205靶向E2F1对肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖影响 被引量：1

9

作者 赵兴亮 张帆 刘佳 《解剖科学进展》 2020年第6期677-680,共4页

目的探讨miR-205对肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖的影响及机制。方法采用miR-205模拟物转染肾上腺皮质癌SW-13细胞,设置空白组(未进行转染)、miR-205阴性对照组(转染无义序列)、miR-205模拟物转染组(转染miR-205模拟物),采用CCK-8法检测各... 目的探讨miR-205对肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖的影响及机制。方法采用miR-205模拟物转染肾上腺皮质癌SW-13细胞,设置空白组(未进行转染)、miR-205阴性对照组(转染无义序列)、miR-205模拟物转染组(转染miR-205模拟物),采用CCK-8法检测各组SW-13细胞的增殖,实时定量PCR检测miR-205和E2F1表达,Western blot检测SW-13细胞E2F1蛋白表达,应用生物信息学网站预测E2F1是否为miR-205潜在的靶基因,应用双荧光素酶报告基因实验验证。结果 miR-205过表达抑制SW-13细胞增殖,下调SW-13细胞中E2F1mRNA和蛋白表达水平,生物信息学分析结果显示,E2F1是miR-205的靶基因之一,双荧光素酶实验证实E2F1为miR-205的靶基因。结论 miR-205通过靶向调控E2F1抑制肾上腺皮质癌SW-13细胞的增殖。 展开更多

关键词 miR-205 E2F1 肾上腺皮质癌sw-13细胞 增殖

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miR-214在肾上腺皮质肿瘤组织中的表达及意义 被引量：3

10

作者 杨明妍 罗佐杰 +3 位作者 邝晓聪 秦映芬 梁杏欢 冼晶 《山东医药》 CAS 2012年第17期1-3,共3页

目的探讨miR-214在肾上腺皮质肿瘤组织中的表达及意义。方法选择21例行肾上腺皮质肿瘤手术患者的术后切除组织,其中肾上腺皮质腺瘤组织8份,其瘤旁正常组织8份,肾上腺皮质癌组织5份;另选人肾上腺皮质癌SW-13细胞系(SW-13细胞系)和裸鼠皮... 目的探讨miR-214在肾上腺皮质肿瘤组织中的表达及意义。方法选择21例行肾上腺皮质肿瘤手术患者的术后切除组织,其中肾上腺皮质腺瘤组织8份,其瘤旁正常组织8份,肾上腺皮质癌组织5份;另选人肾上腺皮质癌SW-13细胞系(SW-13细胞系)和裸鼠皮下移植瘤组织6份。采用RT-PCR技术检测各组织中的miR-214表达。结果与肾上腺皮质腺瘤组织和瘤旁正常组织比较,肾上腺皮质癌组织、SW-13细胞系、裸鼠皮下移植瘤组织中的MiR-214表达明显降低(P均<0.01);与肾上腺皮质癌组织和SW-13细胞系比较,裸鼠皮下移植瘤组织中的MiR-214表达降低(P<0.05)。结论 miR-214表达下调可能参与肾上腺皮质癌的发生、发展,深入探讨其功能和作用机制有重要意义。 展开更多

关键词 肾上腺皮质肿瘤 miR-214 sw-13细胞系 裸鼠移植瘤 荧光定量PCR

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趋化因子受体4在肾上腺皮质腺癌中的表达及意义 被引量：2

11

作者 罗佐杰 蒋莉 +3 位作者 邝晓聪 梁杏欢 秦映芬 卢德成 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第9期1536-1539,共4页

目的:探讨趋化因子受体4(CXCR4)在肾上腺皮质腺癌中的表达及其临床意义。方法:免疫组化法检测肾上腺疾病标本(肾上腺皮质腺癌15例,皮质醇瘤16例,醛固酮瘤14例,肾上腺皮质增生11例,正常肾上腺皮质2例)中CXCR4的表达;免疫化学染色法和流... 目的:探讨趋化因子受体4(CXCR4)在肾上腺皮质腺癌中的表达及其临床意义。方法:免疫组化法检测肾上腺疾病标本(肾上腺皮质腺癌15例,皮质醇瘤16例,醛固酮瘤14例,肾上腺皮质增生11例,正常肾上腺皮质2例)中CXCR4的表达;免疫化学染色法和流式细胞术检测肾上腺皮质腺癌细胞系(SW-13)中CXCR4的表达;将SW-13细胞注射至裸鼠体内,建立皮下移植瘤模型,待皮下成瘤后流式细胞术和免疫组化法检测瘤体组织CXCR4的表达。结果:肾上腺皮质腺癌标本中CXCR4表达阳性率为93.3%,远远高于在皮质醇瘤(25.0%)、醛固酮瘤(14.3%)、肾上腺皮质增生(阴性)以及正常肾上腺组织(阴性)中的表达水平。SW-13细胞系CXCR4阳性率为(61.35±0.92)%,皮下移植瘤CXCR4的表达率为(71.39±3.60)%。结论:CXCR4与肾上腺皮质腺癌有密切关系,可为肾上腺皮质腺癌以及其他肾上腺疾病的诊断提供新思路。 展开更多

关键词 肾上腺皮质腺肿瘤 受体 CXCR4 sw-13

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ABCG2在不同微环境下肾上腺皮质癌细胞中的表达及意义

12

作者 巫丽丽 罗佐杰 +3 位作者 邝晓聪 秦映芬 梁杏欢 邹欣妤 《广西医科大学学报》 CAS 2011年第2期174-177,共4页

目的:探讨ABCG2在不同微环境下在肾上腺皮质癌细胞中的表达和意义。方法:利用SW-13细胞株建立体内及体外微环境模型,流式细胞技术检测ABCG2在不同微环境下肾上腺皮质癌组织及细胞中的表达情况。结果:ABCG2在裸鼠转移淋巴结中的表达率[(5... 目的:探讨ABCG2在不同微环境下在肾上腺皮质癌细胞中的表达和意义。方法:利用SW-13细胞株建立体内及体外微环境模型,流式细胞技术检测ABCG2在不同微环境下肾上腺皮质癌组织及细胞中的表达情况。结果:ABCG2在裸鼠转移淋巴结中的表达率[(5.41±2.57)%]明显高于标准培养基[(1.04±1.01)%]、干细胞培养基[(2.44±2.30)%]、裸鼠皮下移植瘤[(0.89±1.43)%]及腹腔转移瘤[(3.14±2.42)%]微环境的表达率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ABCG2在不同微环境下肾上腺皮质癌细胞中的表达有差异,ABCG2为骨髓侧群细胞(side population,SP)特异表型,肾上腺皮质癌组织中可能存在SP细胞。 展开更多

关键词 ABCG2 肾上腺皮质癌 sw-13细胞 微环境

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人肾上腺皮质癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立

13

作者 徐文清 肖戈 +3 位作者 吴义高 黄福 王尉 胡卫列 《实用癌症杂志》 2014年第5期489-490,494,共3页

目的建立人肾上腺皮质癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法采用人肾上腺皮质癌细胞株SW-13细胞接种于裸鼠腋下皮下,记录成瘤潜伏期,观察肿瘤生长情况,并绘制生长曲线,对移植瘤进行组织病理学鉴定。结果采用SW-13细胞皮下接种方式建立移植瘤的模... 目的建立人肾上腺皮质癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法采用人肾上腺皮质癌细胞株SW-13细胞接种于裸鼠腋下皮下,记录成瘤潜伏期,观察肿瘤生长情况,并绘制生长曲线,对移植瘤进行组织病理学鉴定。结果采用SW-13细胞皮下接种方式建立移植瘤的模型成瘤百分率为95%,成瘤平均潜伏期为(18±1.2)d,移植瘤体积倍增时间为(10±1.8)d天,移植瘤组织病理学形态与人肾上腺皮质腺癌相似。结论成功建立人肾上腺皮质癌裸鼠皮下移植瘤模型,为研究其发病机制及诊治方法提供实验依据。 展开更多

关键词 肾上腺皮质癌 裸鼠 移植瘤 sw-13细胞株

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氯硝柳胺联合顺铂抑制肾上腺皮质癌的实验研究 被引量：1

14

作者 王敏捷 王尉 +2 位作者 朱沂 赵旭 胡卫列 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第26期22-29,共8页

目的研究氯硝柳胺和低剂量顺铂联合应用对人肾上腺皮质癌SW-13细胞株增殖、凋亡,以及迁移力、侵袭力的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养SW-13细胞,CCK-8法检测氯硝柳胺和不同浓度顺铂对细胞增殖的影响。设对照组、氯硝柳胺组、顺铂... 目的研究氯硝柳胺和低剂量顺铂联合应用对人肾上腺皮质癌SW-13细胞株增殖、凋亡,以及迁移力、侵袭力的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养SW-13细胞,CCK-8法检测氯硝柳胺和不同浓度顺铂对细胞增殖的影响。设对照组、氯硝柳胺组、顺铂组、联合用药组,分别用Annexin V/PI和吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色检测细胞凋亡率的变化,Transwell实验和细胞划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力的变化,Western blot检测B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、波形蛋白(Vimnetin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的变化。结果氯硝柳胺增强顺铂对SW-13细胞增殖的抑制作用。Annexin V/PI和AO/EB染色结果表明,与联合用药组比较,氯硝柳胺、顺铂促进细胞凋亡(P<0.05)。Transwell和划痕实验结果表明,与联合用药组比较,氯硝柳胺、顺铂降低SW-13细胞的侵袭能力(P<0.05)。Western blot检测结果表明,与联合用药组比较,氯硝柳胺、顺铂抑制Bcl-2、Vimentin的表达,促进Caspase-3、E-cadherin的表达(P<0.05)。结论氯硝柳胺能够增强低剂量顺铂对SW-13细胞增殖的抑制作用,促进细胞凋亡,抑制侵袭及迁移能力,可能与其抑制Bcl-2、Caspase-3、E-cadherin、Vimentin的表达有关。 展开更多

关键词 氯硝柳胺 顺铂 sw-13 细胞增殖 细胞凋亡

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IGF-Ⅱ基因RNAi慢病毒载体构建与稳定转染细胞株建立 被引量：1

15

作者 杨翠英 罗佐杰 《广西医学》 CAS 2012年第6期677-680,共4页

目的构建人的IGF-Ⅱ基因RNA干扰慢病毒载体并建立人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13稳定转染细胞株。方法根据人的IGF-Ⅱ基因序列,设计3条针对IGF-Ⅱ-shRNA序列,分别构建pLLU2G-shIGF-Ⅱ3个慢病毒载体。筛选出最有效沉默靶基因的shRNA后,将携... 目的构建人的IGF-Ⅱ基因RNA干扰慢病毒载体并建立人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13稳定转染细胞株。方法根据人的IGF-Ⅱ基因序列,设计3条针对IGF-Ⅱ-shRNA序列,分别构建pLLU2G-shIGF-Ⅱ3个慢病毒载体。筛选出最有效沉默靶基因的shRNA后,将携带目的序列的慢病毒载体转染到293FT细胞中,感染人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13,建立稳定转染细胞株。结果设计的针对IGF-Ⅱ的序列中第3条的抑制效果最好,下调80%。以此目的序列构建稳定转染细胞株,对IGF-ⅡmRNA抑制率达95%。结论成功构建表达人肾上腺皮质瘤IGF-Ⅱ-shRNA的慢病毒载体,它能有效沉默IGF-Ⅱ基因在人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13中的表达并建立稳定转染细胞株。 展开更多

关键词 IGF-Ⅱ RNAi sw-13 shRNA 慢病毒载体 转染细胞

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人肾上腺皮质腺癌细胞株裸鼠移植瘤模型的建立及其意义 被引量：4

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作者 蒋莉 罗佐杰 +3 位作者 邝晓聪 梁杏欢 秦映芬 卢德成 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1334-1335,共2页

目的建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤动物模型,为研究肾上腺皮质腺癌提供实验平台。方法选取4-6周龄裸鼠5只,将体外培养的人肾上腺皮质腺癌细胞株（SW-13）注射至其双侧腋窝皮下,建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤模型。结果 6周后5只裸鼠双侧腋... 目的建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤动物模型,为研究肾上腺皮质腺癌提供实验平台。方法选取4-6周龄裸鼠5只,将体外培养的人肾上腺皮质腺癌细胞株（SW-13）注射至其双侧腋窝皮下,建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤模型。结果 6周后5只裸鼠双侧腋窝皮下均长出肿瘤,肿瘤胞膜完整,HE染色可见大量肿瘤细胞。结论成功建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤动物模型,可以为肾上腺皮质腺癌的研究提供有效的动物模型平台。 展开更多

关键词 肾上腺皮质腺癌 人肾上腺皮质腺癌细胞株 移植瘤 动物模型

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氯硝柳胺联合顺铂对裸鼠肾上腺皮质癌移植瘤的抑制作用

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作者 王敏捷 胡卫列 +2 位作者 王尉 朱沂 赵旭 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期306-310,共5页

目的:研究氯硝柳胺联合低剂量顺铂对裸鼠肾上腺皮质癌移植瘤的抑制作用,并探讨其机制。方法:建立SW-13细胞裸鼠移植瘤模型,设对照组、氯硝柳胺组、顺铂组、联合用药组,比较各组终末肿瘤体积、瘤重、生化指标。TUNEL检测移植瘤组织的细... 目的:研究氯硝柳胺联合低剂量顺铂对裸鼠肾上腺皮质癌移植瘤的抑制作用,并探讨其机制。方法:建立SW-13细胞裸鼠移植瘤模型,设对照组、氯硝柳胺组、顺铂组、联合用药组,比较各组终末肿瘤体积、瘤重、生化指标。TUNEL检测移植瘤组织的细胞凋亡率,免疫组织化学法和Western blot检测移植瘤组织Bcl-2、caspase-3的表达。结果:联合用药组的终末肿瘤体积、瘤重低于氯硝柳胺组、顺铂组(均P<0.001);顺铂组、联合用药组的白细胞低于对照组(均P<0.001),顺铂组与联合用药组比较差异无统计学意义(P=0.29);顺铂组、联合用药组的肌酐、谷丙转氨酶高于对照组(均P<0.001),顺铂组与联合用药组的肌酐、谷丙转氨酶比较差异无统计学意义(均P>0.05)。TUNEL检测显示联合用药组的细胞凋亡率高于氯硝柳胺组(P=0.004)、顺铂组(P=0.005),免疫组织化学法、Western blot检测显示联合用药组中Bcl-2表达较氯硝柳胺组、顺铂组降低(均P<0.001),caspase-3的表达升高(均P<0.001)。结论:氯硝柳胺能够增强低剂量顺铂对肾上腺皮质癌生长的抑制作用且不增加毒副作用,可能与影响Bcl-2、caspase-3表达促进肿瘤细胞凋亡相关。 展开更多

关键词 氯硝柳胺 顺铂 sw-13 Bcl-2 CASPASE-3

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P(MMA-DBMEA)乳液聚合研究 被引量：1

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作者 张金枝 柴仕淦 +2 位作者 王世敏 宋功武 程时远 《胶体与聚合物》 2004年第3期35-37,共3页

甲基丙烯酸甲酯 ( MMA)在无皂乳化剂条件下 ,加入少量的功能性单体 N,N一二甲基 ,N-丁基 ,N-甲基丙烯酰氧乙基溴化铵 ( DBMEA) ,合成了稳定的 P( MMA-DBMEA)共聚物乳液 .该共聚物乳胶粒呈现单分散分布。同时用 NMR研究了共聚物 ,并对 P(... 甲基丙烯酸甲酯 ( MMA)在无皂乳化剂条件下 ,加入少量的功能性单体 N,N一二甲基 ,N-丁基 ,N-甲基丙烯酰氧乙基溴化铵 ( DBMEA) ,合成了稳定的 P( MMA-DBMEA)共聚物乳液 .该共聚物乳胶粒呈现单分散分布。同时用 NMR研究了共聚物 ,并对 P( MMA-DBMEA)聚合物13 C进行了全归属。 展开更多

关键词 甲基丙烯酸甲酯 无皂乳化剂 N N-二甲基 N-丁基 N-甲基丙烯酰氧乙基溴化铵 合成 P(MMA-DBMEA)乳液

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阿司匹林对人肾上腺皮质癌细胞增殖和凋亡作用的研究

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作者 卢晓 邢增苗 +4 位作者 卢德成 梁杏欢 黄振兴 杨海燕 罗佐杰 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期732-737,共6页

目的 观察阿司匹林对人肾上腺皮质癌细胞增殖抑制作用及诱导细胞凋亡的影响,探讨其相关机制.方法 体外培养人肾上腺皮质癌SW-13细胞和H295R细胞,实验组为含不同浓度阿司匹林（终浓度为0.125、0.25、0.5、1 mg/ml）的DMEM/F-12完全培养基... 目的 观察阿司匹林对人肾上腺皮质癌细胞增殖抑制作用及诱导细胞凋亡的影响,探讨其相关机制.方法 体外培养人肾上腺皮质癌SW-13细胞和H295R细胞,实验组为含不同浓度阿司匹林（终浓度为0.125、0.25、0.5、1 mg/ml）的DMEM/F-12完全培养基,对照组为不加入阿司匹林的含1%无水乙醇的DMEM/F-12完全培养基.经过不同浓度阿司匹林作用不同时间后（24、48、72 h）,采用噻唑蓝（ MTT）法检测阿司匹林对两株细胞的增殖抑制情况;用药48 h后使用倒置显微镜观察细胞的形态学变化;通过Hoechst33258荧光染色观察和计数凋亡细胞,应用流式细胞术检测细胞凋亡率的改变,Western印迹法检测Bcl-2和Bax基因的表达.结果 MTT结果提示,SW-13细胞和H295R细胞经不同浓度阿司匹林处理后,生长抑制率均比对照组高（P＜0.05）,且当作用时间相同、药物浓度增大时,抑制率增高（P＜0.05）,呈剂量依赖性;当药物浓度相同时,随着作用时间的延长,细胞生长抑制率也升高（P＜0.05）,呈时间依赖性.不同浓度阿司匹林处理细胞48 h后,细胞凋亡数、细胞凋亡率均高于对照组（P＜0.01）;Western印迹结果经灰度值分析显示,阿司匹林处理细胞48 h后,各实验组与对照组相比,Bax的表达增加,差异有统计学意义（ P＜0.05）;相反,Bcl-2的相对表达量低于对照组（P＜0.05）.结论 阿司匹林能抑制肾上腺皮质癌细胞增殖并诱导其凋亡,呈剂量和时间依赖性,可能的机制是上调Bax表达并下调Bcl-2表达. 展开更多

关键词 阿司匹林 sw-13细胞 H295R细胞 增殖抑制 细胞凋亡

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