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抗SVCV中草药提取物的体外筛选及对宿主免疫基因表达的影响研究
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作者 万偲佳 黄文吉 邵玲 《病毒学报》 北大核心 2025年第3期880-888,共9页
鲤春病毒血症是由鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus, SVCV)引起的一种急性出血性传染病,可导致多种鲤科鱼类发生暴发性出血症,严重危害渔业生产。目前,针对SVCV尚缺乏有效的治疗措施。中草药及其提取物可以有效抑制多种... 鲤春病毒血症是由鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus, SVCV)引起的一种急性出血性传染病,可导致多种鲤科鱼类发生暴发性出血症,严重危害渔业生产。目前,针对SVCV尚缺乏有效的治疗措施。中草药及其提取物可以有效抑制多种病毒的复制,对环境友好且不易产生耐药性。本研究选取了黄芪甲苷、甘草酸及盐酸小檗碱3种中草药提取物进行抗SVCV活性研究,并评价了盐酸小檗碱对感染前预防给药、感染过程中的联合给药及感染后治疗给药条件下对SVCV复制的影响。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测了盐酸小檗碱作用后对宿主免疫基因表达的影响。结果表明,中草药提取物黄芪甲苷、甘草酸和盐酸小檗碱能显著降低SVCV G基因和N基因的表达,其中盐酸小檗碱抑制效果最为显著。3种给药方式中,联合给药方式抑制SVCV感染效果最佳。此外,盐酸小檗碱处理细胞后,增加了免疫相关基因irf3、irf7、viperin和ifn的转录水平,推测盐酸小檗碱可激活宿主抗病毒免疫反应。本研究为防治SVCV中草药的开发提供了实验依据,并为水生病毒性疾病的防控提供了新的思路。 展开更多
关键词 鲤春病毒血症病毒 中草药提取物 盐酸小檗碱
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鲤春病毒血症病毒(SVCV)的研究进展 被引量:34
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作者 付峰 刘荭 +1 位作者 黄倢 蔡生力 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期328-334,共7页
鲤春病毒血症病毒(SVCV)是一种能够引起鲤科鱼类急性传染性病毒病-鲤春病毒血症(SVC)的病原,一旦暴发会造成巨大的经济损失。该病主要在欧洲的鲤鱼养殖中广泛传播,主要症状为体内出血,腹膜炎及腹水。SVCV具有囊膜,暂时列为弹状病毒科水... 鲤春病毒血症病毒(SVCV)是一种能够引起鲤科鱼类急性传染性病毒病-鲤春病毒血症(SVC)的病原,一旦暴发会造成巨大的经济损失。该病主要在欧洲的鲤鱼养殖中广泛传播,主要症状为体内出血,腹膜炎及腹水。SVCV具有囊膜,暂时列为弹状病毒科水泡性病毒属。病毒基因组为线性单股不分段的负链RNA,长11 019个核苷酸,主要包含5个基因,分别编码核蛋白N、磷蛋白P、基质蛋白M、糖蛋白G和RNA聚合酶L。目前,中国出入境检验检疫检测SVCV的行业标准是逆转录PCR法。本研究从病毒的生物学特征,感染的临床症状及流行特点,病毒基因组及其多肽特征,病毒的分类地位以及检测技术等方面对国内外研究的现状作一综述。 展开更多
关键词 鲤春病毒血症病毒 基因组 多肽
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鱼类病毒(SVCV、CyHV-3、CEV和VNNV)LAMP联检方法的建立和应用 被引量:1
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作者 时国强 张妍 +5 位作者 李贺杰 焦义然 张璜 张婵 石磊 董振国 《河北省科学院学报》 CAS 2023年第6期33-40,76,共9页
建立鲤春病毒血症病毒(SVCV)、鲤疱疹病毒3(CyHV-3)、鲤鱼浮肿病毒(CEV)和病毒性神经坏死病病毒(VNNV)等4种鱼类常见病毒的环介导等温扩增技术(LAMP)联合检测方法。基于4种鱼类病毒的基因保守区分别设计LAMP引物组,优化反应体系和条件,... 建立鲤春病毒血症病毒(SVCV)、鲤疱疹病毒3(CyHV-3)、鲤鱼浮肿病毒(CEV)和病毒性神经坏死病病毒(VNNV)等4种鱼类常见病毒的环介导等温扩增技术(LAMP)联合检测方法。基于4种鱼类病毒的基因保守区分别设计LAMP引物组,优化反应体系和条件,筛选测试出特异性和灵敏度最佳的引物组,建立4种鱼类常见病毒的联合检测LAMP方法,同时以市售的荧光定量检测试剂盒测试结果作为对照,评估建立的联合检测LAMP方法的准确性。结果显示,筛选出的SVCV、CyHV-3、CEV和VNNV的LAMP引物组特异性均良好,优化后的体系反应条件均为63℃,60 min,其中SVCV和CyHV-3均可检测到10 fg/μL,CEV和VNNV可检测到1 fg/μL。应用建立的4种病毒联合LAMP检测方法和市售的各荧光定量PCR检测试剂盒对150份收集的组织样本进行平行测试,联合LAMP检测方法的准确率为100%。建立的鱼类病毒LAMP联检方法能够准确、高效、快速地在鱼类组织样本中同时对SVCV、CyHV-3、CEV和VNNV进行检测,适合水产养殖现场检测,对病毒的监测和快速诊疗起到重要作用。 展开更多
关键词 svcv CyHV-3 CEV VNNV LAMP方法
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GCRV NS38 counteracts SVCV proliferation by intracellular antagonization during co-infection
4
作者 Zhuo-Cong Li Long-Feng Lu +8 位作者 Can Zhang Xue-Li Wang Jin-Feng Tong Ke-Jia Han Dan-Dan Chen Xi-Yin Li Li Zhou Jian-Fang Gui Shun Li 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2023年第1期142-156,共15页
Viral co-infection has been found in animals;however,the mechanisms of co-infection are unclear.The abundance and diversity of viruses in water make fish highly susceptible to co-infection.Here,we reported a coinfecti... Viral co-infection has been found in animals;however,the mechanisms of co-infection are unclear.The abundance and diversity of viruses in water make fish highly susceptible to co-infection.Here,we reported a coinfection in fish,which resulted in reduced host lethality and illustrated the intracellular molecular mechanism of viral co-infection.The spring viremia of carp virus(SVCV)is a highly lethal virus that infects Cyprinidae,such as zebrafish.The mortality of SVCV infection was significantly reduced when co-infected with the grass carp reovirus(GCRV).The severity of tissue damage and viral proliferation of SVCV was also reduced in co-infection with GCRV.The transcriptome bioinformatics analysis demonstrated that the effect on the host transcripts in response to SVCV infection was significantly reduced in co-infection.After excluding the extracellular interactions of these two viruses,the intracellular mechanisms were studied.We found that the GCRV NS38 remarkably decreased SVCV infection and viral proliferation.The interaction between GCRV NS38 and SVCV nucleoprotein(N)and phosphoprotein(P)proteins was identified,and NS38 downregulated both N and P proteins.Further analysis demonstrated that the N protein was degraded by NS38 indispensable of the autophagy receptor,sequestosome 1(p62).Meanwhile,K63-linked ubiquitination of the P protein was reduced by NS38,leading to ubiquitinated degradation of the P protein.These results reveal that the intracellular viral protein interactions are a crucial mechanism of co-infection and influence the host pathology and expand our understanding in intracellular viral interactions co-infection. 展开更多
关键词 CO-INFECTION Spring viremia of carp virus(svcv) Grass carp reovirus(GCRV) Antagonize AUTOPHAGY UBIQUITINATION
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Establishment of Recombinase Polymerase Amplification for Rapid Detection of Spring Viremia of Carp Virus(SVCV)
5
作者 Liang Junni Yin Weili +3 位作者 Shang Di Liu Ning Duan Xiaohui Lin Sen 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2020年第2期29-32,共4页
[Objective]The paper was to develop a rapid method for the detection of spring Viremia of carp virus(SVCV).[Method]The specific primers were designed by targeting the G gene of SVCV.The recombinase polymerase amplific... [Objective]The paper was to develop a rapid method for the detection of spring Viremia of carp virus(SVCV).[Method]The specific primers were designed by targeting the G gene of SVCV.The recombinase polymerase amplification(RPA)assay for detecting SVCV was estab-lished by optimizing the reaction conditions.The optimal amplification temperature of RPA assay was 30℃,and the test could be finished within 20 min.[Result]The method was specific with no cross-reaction with other common fish infectious viruses.Sensitivity test showed that the lowest detection limit of the method was 89.2 copies/μL,higher than that of traditional RT-PCR.Moreover,a total of 80 clinical samples were detected by RPA and RT-PCR,respectively.The weak positive samples tested by RT-PCR could be detectable with RPA,indicating that RPA assay could be used in clinical detection.[Conclusion]The method established is rapid,simple,specific and sensitive for testing SVCV,and it will be widely used in grassroots laboratory and on-site inspection. 展开更多
关键词 Recombinase polymerase amplification Rapid detection Spring viremia of carp virus(svcv)
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锦鲤人工感染SVCV后血液生化指标监测及在疾病诊断中的应用分析
6
作者 刘文珍 田飞焱 +1 位作者 花麒 欧阳敏 《江西水产科技》 2022年第4期7-10,共4页
对健康锦鲤、人工感染SVCV并引起患病症状的锦鲤进行尾静脉取血,然后对其血液生化指标进行测定,其结果经数据分析处理,得出在测定的18个参数当中,尿酸、甘油三酯、尿素氮的变化最灵敏,因此,检测尿酸、甘油三酯、尿素氮三个参数可做为SVC... 对健康锦鲤、人工感染SVCV并引起患病症状的锦鲤进行尾静脉取血,然后对其血液生化指标进行测定,其结果经数据分析处理,得出在测定的18个参数当中,尿酸、甘油三酯、尿素氮的变化最灵敏,因此,检测尿酸、甘油三酯、尿素氮三个参数可做为SVCV疾病初期的诊断指标。总蛋白、白蛋白、球蛋白、高密度脂蛋白、乳酸脱氢酶、肌酐、葡萄糖在感染后期变化明显,可以做为锦鲤患SVC疾病后期的诊断参考指标。 展开更多
关键词 锦鲤 svcv 生化指标
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维生素C体外抑制SVCV入侵鲤鱼上皮瘤细胞的初步研究 被引量:2
7
作者 刘佳 卢玉婷 +3 位作者 刘芸娜 闫子豪 汪惠庆 李月红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期10-14,共5页
为探究维生素C体外抑制鲤春病毒血症病毒(SVCV)侵染鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)的能力,本试验构建了体外EPC模型,并运用MTT法、DAPI染色和活性氧测定等方法测定维生素C和SVCV对细胞活性的影响及维生素C对SVCV的抑制作用。结果显示,维生素C对SVC... 为探究维生素C体外抑制鲤春病毒血症病毒(SVCV)侵染鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)的能力,本试验构建了体外EPC模型,并运用MTT法、DAPI染色和活性氧测定等方法测定维生素C和SVCV对细胞活性的影响及维生素C对SVCV的抑制作用。结果显示,维生素C对SVCV体外侵染EPC具有显著的抑制作用(P<0.05),且与维生素C浓度呈正相关。本试验可为SVCV的防治提供新的途径。 展开更多
关键词 维生素C 鲤春病毒血症病毒 鲤鱼上皮细胞 抑制
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重组酶聚合酶扩增技术快速检测鲤春病毒血症病毒(SVCV)方法的建立 被引量:12
8
作者 梁君妮 尹伟力 +3 位作者 谢爽 刘宁 段效辉 林森 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1037-1040,共4页
为建立鲤春病毒血症病毒(SVCV)的快速检测方法,本研究根据SVCV的G基因保守序列设计特异性引物,通过条件优化初步建立了基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的SVCV检测方法。该RPA方法最优扩增温度为30℃,恒温反应20 min内即可完成。特异性试... 为建立鲤春病毒血症病毒(SVCV)的快速检测方法,本研究根据SVCV的G基因保守序列设计特异性引物,通过条件优化初步建立了基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的SVCV检测方法。该RPA方法最优扩增温度为30℃,恒温反应20 min内即可完成。特异性试验结果显示,该方法与其它常见鱼类感染病毒无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法对SVCV质粒标准品的最低检出限为89.2拷贝/μL,高于传统的RT-PCR方法;利用已建立的RPA方法和RT-PCR方法对市场购买的80份临床样品进行检测,结果显示,RPA方法与RT-PCR方法检测结果一致,且RPA方法能够有效检出RT-PCR方法的弱阳性样品,表明RPA方法可以用于临床检测。本研究建立的检测SVCV的RPA方法具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,适合基层实验室及现地检测。 展开更多
关键词 重组酶聚合酶扩增技术 快速检测 鲤春病毒血症病毒
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鲤春病毒血症病毒(SVCV)人工感染锦鲤攻毒试验 被引量:1
9
作者 花麒 欧阳敏 +2 位作者 田飞焱 刘文珍 徐节华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第9期86-89,I0007,共5页
为了研究鲤科鱼类感染鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV)后的病理变化,试验通过使用本中心实验室采集和保藏的鲤春病毒血症病毒株(JX14-012)对养殖的锦鲤(Cyprinus carpio koi)进行人工感染试验,然后对对照组和试验... 为了研究鲤科鱼类感染鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV)后的病理变化,试验通过使用本中心实验室采集和保藏的鲤春病毒血症病毒株(JX14-012)对养殖的锦鲤(Cyprinus carpio koi)进行人工感染试验,然后对对照组和试验组锦鲤进行鲤春病毒血症病毒检测,结果显示,试验组呈阳性,即已感染鲤春病毒血症病毒,对照组呈阴性;对试验组进行生化指标检测发现肝胰脏、肾脏受到严重损害导致功能不全;组织病理切片观察结果发现,脑、鳃、肝胰脏、脾脏、肾脏、肌肉各组织均出现不同程度的变性坏死。表明JX14-012病毒株对锦鲤进行攻毒能够使试验组锦鲤致病,该毒株感染锦鲤后可在其体内复制、增殖,且对锦鲤有一定的致病力。其表现出来的症状对进一步掌握鲤春病毒血症病毒病,及时诊断其危害具有重大的现实意义。 展开更多
关键词 人工感染 鲤春病毒血症病毒病 锦鲤
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Oxygen potentiates antiviral ability of zebrafish in response to SVCV infection
10
作者 Zixuan Wang Chunchun Zhu +8 位作者 Xiaoyun Chen Hongyan Deng Xueyi Sun Qian Liao Shuke Jia Wen Liu Yao Bai Wuhan Xiao Xing Liu 《Water Biology and Security》 2023年第4期91-100,共10页
Oxygen(O_(2))profoundly influences the physiological processes of aerobic organisms through a range of mechanisms.Recently,increasing evidence has revealed the relationship between viral infection and oxygen levels.Ho... Oxygen(O_(2))profoundly influences the physiological processes of aerobic organisms through a range of mechanisms.Recently,increasing evidence has revealed the relationship between viral infection and oxygen levels.However,due to a lack of feasible methods and in vivo models,how oxygen directly affects antiviral capability remains largely unknown.In contrast to terrestrial animals,fish live in water for life,where oxygen levels change more frequently than on land in areas with similar altitude.Therefore,fish appear to be ideal organisms for elucidating the effect of oxygen levels on antiviral responses.In this study,we report that zebrafish under low oxygen conditions are more susceptible to SVCV infection.Further assays indicate that low oxygen tension not only suppresses SVCV-induced IFN activation but also promotes SVCV replication in both zebrafish cell lines and zebrafish.This study provides novel insights into the effect of oxygen on antiviral responses and virus replication. 展开更多
关键词 OXYGEN ZEBRAFISH svcv VIRUS INFECTION ANTIVIRAL
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Estimating SVCV waterborne transmission and predicting experimental epidemic development:A modeling study using a machine learning approach
11
作者 Jiaji Pan Qijin Zeng +5 位作者 Wei Qin Jixiang Chu Haibo Jiang Haiyan Chang Jun Xiao Hao Feng 《Water Biology and Security》 2024年第1期60-70,共11页
Viral infectious diseases significantly threaten the sustainability of freshwater fish aquaculture.The lack of studies on epidemic transmission patterns and mechanisms inhibits the development of containment strategie... Viral infectious diseases significantly threaten the sustainability of freshwater fish aquaculture.The lack of studies on epidemic transmission patterns and mechanisms inhibits the development of containment strategies from the viewpoint of veterinary public health.This study raises an epidemic mathematical model considering water transmission with the aim of analyzing the transmission process more accurately.The basic reproduction number R0 was derived by the model parameter including the water transmission coefficient and was used for the analysis of the virus transmission.Spring viremia of carp virus(SVCV)and zebrafish were used as model viruses and animals,respectively,to conduct the transmission experiment.Transmission through water was achieved by connecting two aquarium tanks with a water channel but blocking the fish movement between the tanks.With the collected experimental data,we determined the optimal hybrid machine learning algorithm to analyze the transmission process using an established mathematical model.In addition,future transmission was predicted and validated using the epidemic model and an optimal algorithm.Finally,the sensitivity of model parameters and the simulations of R0 variation were performed based on the modified complex epidemic model.This study is of significance in providing theoretical guidance for minimizing R0 by manipulating model parameters with containment measures.More importantly,since the modified model and algorithm demonstrated better performance in handling freshwater fish transmission problems,this study advances the future application of transmissible disease modeling with larger datasets in freshwater fish aquaculture. 展开更多
关键词 Epidemic mathematical model Hybrid machine learning algorithm Reproduction number Sensitivity analysis svcv transmission
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鲤RNF181基因的克隆、表达分析及其对病毒刺激的响应规律
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作者 洪佳乐 职毓杰 +9 位作者 吴成甲 张美娜 郭国军 杨振江 董鹏生 黄小城 于光晴 李明 武国兆 刘变枝 《淡水渔业》 北大核心 2025年第5期12-22,共11页
为探究鲤RNF181(ring finger protein181,RNF181)的生物学功能,本实验克隆并鉴定了鲤RNF181基因编码区(coding sequence,CDS)全长,使用生物信息学软件对其蛋白性质和功能进行分析。并通过RT-qPCR检测其在各组织和早期发育阶段的基因表... 为探究鲤RNF181(ring finger protein181,RNF181)的生物学功能,本实验克隆并鉴定了鲤RNF181基因编码区(coding sequence,CDS)全长,使用生物信息学软件对其蛋白性质和功能进行分析。并通过RT-qPCR检测其在各组织和早期发育阶段的基因表达。同时,利用鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)和Poly(I:C)[polyriboinosinic-polyribocytidylic acid,Poly(I:C)]进行在体和离体刺激实验,研究其对SVCV和Poly(I:C)刺激的响应规律。结果显示,鲤RNF181基因CDS区序列全长471 bp,编码157个氨基酸,其氨基酸序列与鱼类遗传距离较近,与哺乳动物则相对较远。该蛋白分子质量为18.09 kDa,等电点为4.86,主要定位于细胞核和细胞质中,具典型RING-H2-RNF181结构域。二级结构和三级结构显示其以无规卷曲和α螺旋为主。底物蛋白分析结果表明RNF181与NUGGC.1、TRIM36等相互作用的置信度高。组织表达谱分析表明,RNF181的mRNA表达水平在鳃中表达最高,肝脏中最低。早期发育阶段,在卵裂期、囊胚期和原肠胚期表达最高,孵化出膜期和孵化出膜后1 d表达水平最低。SVCV感染和Poly(I:C)刺激,RNF181的mRNA表达水平在脾脏、头肾、心脏和肌肉中显著上调。离体实验中,无论是SVCV感染还是Poly(I:C)刺激,RNF181的mRNA表达水平均呈现先下降后上升的趋势,而且鲤RNF181能够响应病毒的侵染,且这种响应受刺激时间和刺激剂量影响。上述结果提示,鲤RNF181可能在鲤抗病毒免疫中发挥重要调控作用。 展开更多
关键词 RNF181基因 鲤(Cyprinus carpio) 表达模式 病毒刺激 鲤春病毒血症病毒 Poly(I:C)
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鲤春病毒血症病毒糖蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备 被引量:8
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作者 张家林 李强 +1 位作者 叶仕根 李华 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期454-458,共5页
利用原核表达系统表达纯化鲤春病毒血症病毒(SVCV)G蛋白,制备特异性单克隆抗体,扩增出鲤春病毒0504分离株G基因片段,并将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,经诱导表达、裂解离心包涵体,包涵体经His Bind亲和层析柱纯化及尿素浓度梯度... 利用原核表达系统表达纯化鲤春病毒血症病毒(SVCV)G蛋白,制备特异性单克隆抗体,扩增出鲤春病毒0504分离株G基因片段,并将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,经诱导表达、裂解离心包涵体,包涵体经His Bind亲和层析柱纯化及尿素浓度梯度复性后,作为抗原免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体。结果表明:成功筛选出2株稳定分泌G蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1C5、2D5,经Western-Blot检测表明,制备的单克隆抗体具有良好的特异性。本研究中成功制备的抗G蛋白单克隆抗体,可为建立新型鲤春病毒检测方法提供工具。 展开更多
关键词 鲤春病毒血症病毒(svcv) G蛋白 原核表达 单克隆抗体
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SVC亚洲株在中国的分离及其和欧洲分离株特性的比较 被引量:4
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作者 高隆英 刘荭 +2 位作者 史秀杰 何俊强 江育林 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期47-51,共5页
2003年在全国性的流行病学调查中我国首次分离到鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV),并且确认为亚洲株。本文从理化特性、生物学特性、形态学特性方面对欧洲的SVCV参考株(SVCV-10/3)和在中国分离到的SVCV亚洲株(SVCV-... 2003年在全国性的流行病学调查中我国首次分离到鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV),并且确认为亚洲株。本文从理化特性、生物学特性、形态学特性方面对欧洲的SVCV参考株(SVCV-10/3)和在中国分离到的SVCV亚洲株(SVCV-741)进行比较,以期发现它们之间的差异。研究结果显示,二者的主要不同点是:1.在我国分离到的SVCV株对热的稳定性比欧洲参考株高,这一点在进化和生物学上的意义值得注意;2.SVCV能导致欧洲的鲤鱼大量死亡,但却没有发现中国的SVCV分离株导致大量死亡的例子。此外在病毒对不同细胞系的敏感性研究时,发现SVCV无论是在中国分离到的亚洲株还是欧洲的参考株,在草鱼卵巢细胞(Ova-ry of grass carp,CO)中出现CPE比OIE诊断手册中提供的敏感细胞胖头鱼肌肉细胞(Fathead minnow FHM)和鲤鱼上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprini,EPC)中快,而且增殖的滴度高,可以作为研究SVCV的好材料。 展开更多
关键词 鲤春病毒血症病毒(svcv) 病毒 鱼病 鲤鱼
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鲤RNF14基因的生物学功能及其对病原刺激的免疫响应
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作者 张美娜 张子豪 +8 位作者 洪佳乐 郭朝辉 李海洁 于光晴 董鹏生 黄小城 杨振江 王延晖 刘变枝 《河南农业大学学报》 北大核心 2025年第2期255-265,共11页
【目的】探究鲤环指蛋白14(ring finger protein 14,RNF14)基因的生物学功能,为阻断鲤春季病毒血症病毒(spring viremia of Cyprinus carpio virus, SVCV)感染提供新思路。【方法】采用PCR技术、生物信息学分析和实时荧光定量PCR方法,对... 【目的】探究鲤环指蛋白14(ring finger protein 14,RNF14)基因的生物学功能,为阻断鲤春季病毒血症病毒(spring viremia of Cyprinus carpio virus, SVCV)感染提供新思路。【方法】采用PCR技术、生物信息学分析和实时荧光定量PCR方法,对鲤RNF14基因功能进行初步分析,研究其在病毒刺激后的表达规律。【结果】鲤RNF14基因编码区全长1 362 bp,编码453个氨基酸;鲤RNF14与犀角金线鲃亲缘关系较近,与原鸽亲缘关系较远;该蛋白属酸性不稳定亲水性蛋白;功能结构域预测显示该蛋白为典型的RBR E3s;泛素化底物分析结果显示,该蛋白与RBCK1、Nedd4l、Notch1a等蛋白相互作用的置信度较高。组织表达谱分析表明,鲤RNF14基因在各组织或器官中广泛表达,以心脏中相对表达量最高。与对照组相比,高剂量SVCV在体感染鲤24 h后,RNF14基因的mRNA表达水平在肌肉中显著升高;多肌胞苷酸(polyinosinic acid-polycytidylic acid,ploy(I:C))在体刺激鲤24 h后,RNF14基因的mRNA表达水平在肾脏和头肾中显著升高。与对照组相比,低剂量SVCV和poly(I:C)离体刺激下,鲤RNF14基因mRNA表达水平在各取样时间点均极显著升高。在体和离体病原刺激结果表明,鲤RNF14基因参与了病原刺激后的免疫应答过程,提示鲤RNF14基因可能是阻断SVCV感染的潜在靶点。【结论】成功克隆了鲤RNF14基因的基因编码区,揭示了鲤RNF14基因在SVCV和poly(I:C)刺激下免疫响应规律。 展开更多
关键词 环指蛋白14 生物信息学 鲤春季病毒血症病毒 多肌胞苷酸 病原刺激 免疫响应
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一株鲤春病毒血症病毒的初步分离及鉴定 被引量:3
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作者 安伟 肖雨 +2 位作者 张崇文 张明辉 何正侃 《水产科技情报》 北大核心 2014年第1期32-34,38,共4页
为了检测上海市某鲤鱼养殖场的疑似患病鲤鱼是否携带鲤春病毒血症病毒(SVCV),采用鲤鱼表皮瘤细胞系(EPC)进行病毒分离和分子PCR方法对SVCV的糖蛋白基因保守区域进行扩增。试验结果:被病毒感染的EPC细胞呈现细胞圆缩、颗粒增多、大量脱... 为了检测上海市某鲤鱼养殖场的疑似患病鲤鱼是否携带鲤春病毒血症病毒(SVCV),采用鲤鱼表皮瘤细胞系(EPC)进行病毒分离和分子PCR方法对SVCV的糖蛋白基因保守区域进行扩增。试验结果:被病毒感染的EPC细胞呈现细胞圆缩、颗粒增多、大量脱落等病变特征,且该株病毒毒力较强,其病毒滴度TCID50/0.1 mL为105.76。分子方法扩增出714 bp和606 bp的SVCV的保守片段。试验采用细胞培养技术和分子PCR方法检测样品是否携带病毒性病原,建立了一种较为简捷高效的检测方法。该方法适合在短时间内完成大量样品的病原学诊断及检疫任务,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 鲤春病毒血症病毒(svcv) 细胞分离 PCR检测
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三重实时荧光RT-PCR检测三种鱼类弹状病毒的研究 被引量:11
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作者 许建明 段向英 +2 位作者 张念之 蒋一男 张利峰 《检验检疫科学》 2009年第1期5-10,共6页
鱼传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus IHNV)、鱼病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)和鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus SVCV)是同属弹状病毒科(Rhabdov... 鱼传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus IHNV)、鱼病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)和鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus SVCV)是同属弹状病毒科(Rhabdoviridae)的3种鱼类病毒,也是影响水产养殖业的3种重要病毒。通过对这3种病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守区域,设计了3条分别针对这3种病毒的Taqman MGB探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记。以此为基础建立针对该3种病毒的三重实时荧光RT-PCR的检测方法。通过反应条件的优化,该三重实时荧光RT-PCR最低可检测至102拷贝/反应的病毒量。同时,该方法还对病毒混合感染EPC细胞(Epithelioma papulosum cyprini)和攻毒斑马鱼进行了检测。实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的病毒检测方法。 展开更多
关键词 IHNV VHSV svcv TAQMAN MGB探针 三重实时荧光RT-PCR
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应用原位杂交技术检测感染鲤鱼体内的鲤春病毒
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作者 吴斌 王红 +1 位作者 张琳 肇慧君 《水产研究》 2017年第3期92-98,共7页
鲤春病毒(Spring Viremia of Carp Virus, SVCV)是一种弹状病毒,主要发生于春季,它能引起鲤科鱼类的鱼苗或成鱼大规模暴发鲤春病毒血症(SVC)。体外扩增的SVCV经人工方法感染健康鲤鱼,运用原位杂交技术(ISH),对感染后出现明显症状并经PC... 鲤春病毒(Spring Viremia of Carp Virus, SVCV)是一种弹状病毒,主要发生于春季,它能引起鲤科鱼类的鱼苗或成鱼大规模暴发鲤春病毒血症(SVC)。体外扩增的SVCV经人工方法感染健康鲤鱼,运用原位杂交技术(ISH),对感染后出现明显症状并经PCR鉴定阳性的病鱼,取其头部、内脏等组织切片进行SVCV分子定位和检测。结果显示,病鱼体内检出病毒,其中脑部和内脏含量较高。本文建立的SVCV原位杂交法,可初步确定SVCV在病鱼体内不同组织的分布情况。 展开更多
关键词 鲤春病毒(svcv) 鲤春病毒血症(SVC) 鲤鱼 人工感染 原位杂交(ISH)
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鲤春病毒RT-POR检测方法的建立与应用
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作者 吴斌 赵娜 +1 位作者 张琳 肇慧君 《兽医导刊》 2017年第16期221-222,共2页
本文根据鲤春病毒糖蛋白设计并合成引物,对SVCV进行扩增鉴定,对所建立的RT-PCR方法进行灵敏度和特异性实验,实验结果表明,只有SVCV能够扩增出特异性片段,大小为714bp,对照组核酸均没有扩增,表明所设计的引物具有良好的特异性,... 本文根据鲤春病毒糖蛋白设计并合成引物,对SVCV进行扩增鉴定,对所建立的RT-PCR方法进行灵敏度和特异性实验,实验结果表明,只有SVCV能够扩增出特异性片段,大小为714bp,对照组核酸均没有扩增,表明所设计的引物具有良好的特异性,方法的灵敏度为10。利用建立的方法对人工感染SVCV的鲤鱼进行检测,实验结果表明,2个感染样品中均检出SVCV病毒。本实验建立的RT—PCR为SVCV检测诊断提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 鲤春病毒(svcv) RT—PCR 特异性 灵敏度 人工感染
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青鱼Viperin是一种抗病毒蛋白质(英文) 被引量:2
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作者 田彧 陈慧 +3 位作者 周旻昱 李俊 肖俊 冯浩 《生命科学研究》 CAS CSCD 2018年第4期259-270,共12页
在脊椎动物中viperin已被证明是一种能抵御大多数DNA和RNA病毒的抗病毒蛋白质。本文克隆及鉴定了青鱼viperin。青鱼viperin(bc Viperin)的c DNA由1 828个核苷酸组成,编码360个氨基酸。预测的bc Viperin蛋白包含N端低保守的两性α-螺旋... 在脊椎动物中viperin已被证明是一种能抵御大多数DNA和RNA病毒的抗病毒蛋白质。本文克隆及鉴定了青鱼viperin。青鱼viperin(bc Viperin)的c DNA由1 828个核苷酸组成,编码360个氨基酸。预测的bc Viperin蛋白包含N端低保守的两性α-螺旋结构域、中间自由基S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)结构域及高保守C端结构域。bc Viperin m RNA在青鱼心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠、肌肉、皮肤和鳃等组织中均有表达。在草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)和鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)感染后,bc Viperin m RNA在上述组织中的表达水平提高。在青鱼尾鳍(Mylopharyngodon piceus fin,MPF)细胞中,bc Viperin m RNA表达水平同样会在GCRV和SVCV感染后发生上升。蛋白质免疫印迹表明bc Viperin蛋白的相对分子质量约为42 k D;He La和EPC细胞中的免疫荧光染色实验表明bc Viperin是细胞质蛋白。编码bc Viperin的质粒在EPC细胞中过表达后能够显著提高细胞抵御SVCV和GCRV的抗病毒能力。以上研究表明bc Viperin是青鱼天然免疫过程中重要的抗病毒蛋白质。 展开更多
关键词 青鱼 viperin 天然免疫 鲤春病毒血症病毒(svcv) 草鱼呼肠孤病毒(GCRV)
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