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人sTRAIL基因的克隆、表达纯化及对人A549细胞的抗肿瘤活性作用 被引量:8
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作者 范清林 魏伟 +1 位作者 邹文艺 宋礼华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期228-233,共6页
目的人TRAIL基因胞外区片段(114-281氨基酸残基,sTRAIL)的克隆、表达、纯化及对人肺腺癌A549细胞的抗肿瘤活性研究。方法采用PCR技术从人胎盘和肺cD-NA文库中扩增出全长人TRAIL基因,克隆到pUC19质粒载体上进行测序。然后再采用PCR技术,... 目的人TRAIL基因胞外区片段(114-281氨基酸残基,sTRAIL)的克隆、表达、纯化及对人肺腺癌A549细胞的抗肿瘤活性研究。方法采用PCR技术从人胎盘和肺cD-NA文库中扩增出全长人TRAIL基因,克隆到pUC19质粒载体上进行测序。然后再采用PCR技术,以全长人TRAIL基因为模板,扩增出sTRAIL基因片段并定向克隆到pET-11 a表达载体中,转化大肠杆菌BL21进行表达。表达后的产物经变性、复性和分离纯化,纯化后的sTRAIL用结晶紫染色法和流式细胞仪法测定其对人肺癌细胞A549的细胞毒性作用。结果从人胎盘和肺cDNA文库中都能扩增出全长人TRAIL基因,经测序表明与已发表的人TRAIL基因序列一致。扩增出的人sTRAIL基因克隆到表达质粒载体pET-11a,经IPTG诱导表达,表达量占细菌全菌蛋白的50%,纯化后的sTRAIL纯度大于98%,结晶紫法测定对人A549肺癌细胞的细胞毒性作用的IC50为(24±5.2)μg.L-1,流式细胞仪法测定对人A549肺癌细胞的细胞毒性具有明显的效应-时间依赖关系。结论本实验成功地克隆了人sTRAIL基因并实现其高表达,摸索出包涵体sTRAIL的变性、复性及其纯化方法,纯化后的sTRAIL蛋白对人A549肺癌细胞具有明显的细胞毒性作用,为进一步研究其功能与临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 strail基因 克隆 表达 细胞毒性 A549细胞
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基因治疗药物rAAV2-sTRAIL在小鼠体内生物分布研究 被引量:1
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作者 王欣 李伟 +6 位作者 郑德先 王超 苗玉发 周晓冰 王三龙 李波 霍艳 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第13期1076-1082,共7页
目的开展基因治疗药物rAAV2-sTRAIL在正常鼠和荷瘤鼠2种小鼠体内的生物分布研究。方法BALB/c小鼠随机分成3组,包括溶媒对照组,每性别8只动物;低(每只1.5×10^(9)vg)、高(每只1.5×10^(10)vg)剂量组,每组每性别20只动物。采用肌... 目的开展基因治疗药物rAAV2-sTRAIL在正常鼠和荷瘤鼠2种小鼠体内的生物分布研究。方法BALB/c小鼠随机分成3组,包括溶媒对照组,每性别8只动物;低(每只1.5×10^(9)vg)、高(每只1.5×10^(10)vg)剂量组,每组每性别20只动物。采用肌肉注射给药,给药1次。每天观察动物临床症状,分别在给药后24 h,2,4,12周解剖动物。BALB/c裸鼠在右前肢腋窝皮下接种肿瘤细胞ACC-2,肿瘤造模成功后,按照瘤体体积将动物随机分成3组。包括溶媒对照组,每性别4只动物;低(每只1.5×10^(9)vg)、高(每只1.5×10^(10)vg)剂量组,每组每性别10只动物。采用瘤内注射给药,给药1次。每天观察动物临床症状,分别在给药后24 h,2周解剖动物。每只动物采集组织脏器包括血液、睾丸/子宫、附睾/卵巢、肾脏、脾脏、小肠、肠系膜淋巴结、肝脏、胃、肺、心脏、脑、注射部位(肌肉或肿瘤)、骨髓。对组织样本提取DNA后,采用qPCR技术,Taqman外标绝对定量方法对样本进行测定,检测受试物在各组织器官中拷贝数。结果正常小鼠试验结果显示,受试物分布靶器官是脾脏、小肠、肠系膜淋巴结、肝脏、肺、注射部位(肌肉)、骨髓、血液,主要富集于脾脏、肝脏和注射部位。随着时间延长药物逐渐被清除,不会在体内蓄积。荷瘤小鼠试验结果显示,受试物体内分布靶器官和代谢消除趋势,与正常小鼠生物分布特征一致。并且,未见受试物在肿瘤组织和其他靶器官中可复制性增长。结论采用正常小鼠和荷瘤小鼠分别进行基因治疗药物rAAV2-sTRAIL体内生物分布研究,受试物在两种模型中分布特征一致,均无可复制性和体内蓄积性。本实验初步预测了受试物临床使用安全性,为临床试验设计提供了参考信息。 展开更多
关键词 rAAV2-strail 荧光定量PCR 实时定量核酸扩增 生物分布 安全性评价
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pEgr-sTRAIL体外转染联合^(60)Co γ射线照射诱导肿瘤细胞凋亡及Caspase-3活化 被引量:1
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作者 田梅 郭志英 +2 位作者 赵宝锋 阮建磊 苏旭 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期295-299,共5页
为探讨Egr-1启动子调控TRAIL基因表达的辐射增敏作用及其作用机制,采用体外瞬时转染pEgr-sTRAIL辐射诱导表达载体联合不同剂量60Coγ射线照射,观察其诱导肿瘤细胞凋亡的作用及其与凋亡执行分子Caspase-3活化的关系。结果表明重组质粒体... 为探讨Egr-1启动子调控TRAIL基因表达的辐射增敏作用及其作用机制,采用体外瞬时转染pEgr-sTRAIL辐射诱导表达载体联合不同剂量60Coγ射线照射,观察其诱导肿瘤细胞凋亡的作用及其与凋亡执行分子Caspase-3活化的关系。结果表明重组质粒体外瞬时转染联合不同剂量60Coγ射线照射可诱导肿瘤细胞凋亡,并具有随剂量增高而增加的趋势。Western blot及分光光度法检测Capase-3活性均显示转染重组质粒pEgr-sTRAIL接受不同剂量γ射线照射后,其Caspase-3活性明显增高,亦有随着剂量增高而增高的趋势。提示γ射线可通过激活Egr-1启动子增加TRAIL诱导凋亡及活化Caspase-3的作用从而提高肿瘤细胞的辐射敏感性。 展开更多
关键词 pEgr-strail Γ射线 辐射敏感性 细胞凋亡 CASPASE-3
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乙型肝炎患者血清sTRAIL水平与肝损伤的相关性研究 被引量:2
4
作者 岳凤娥 刘典勇 +1 位作者 宋静 张利宁 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第14期13-14,共2页
目的探讨可溶性肿瘤细胞坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)在乙型肝炎(下称乙肝)发病机制中的作用。方法采用ELISA法检测了112例乙肝患者血清sTRAIL水平,将其与肝功能相关指标进行相关性分析。结果乙肝患者发病期血清sTRAIL水平显著高... 目的探讨可溶性肿瘤细胞坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)在乙型肝炎(下称乙肝)发病机制中的作用。方法采用ELISA法检测了112例乙肝患者血清sTRAIL水平,将其与肝功能相关指标进行相关性分析。结果乙肝患者发病期血清sTRAIL水平显著高于正常对照组;恢复期血清sTRAIL水平接近正常;急、慢性乙肝患者血清sTRAIL水平与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和血清总胆红素(TBIL)均呈显著负相关,与血清白蛋白(ALB)水平呈显著正相关。结论sTRAIL诱导细胞凋亡是肝细胞损伤的机制之一。 展开更多
关键词 strail 乙型肝炎患者 相关性研究 水平 丙氨酸氨基转移酶(ALT) 肝损伤 门冬氨酸氨基转移酶 相关凋亡诱导配体 肿瘤细胞坏死因子 ELISA法检测 慢性乙肝患者 血清总胆红素 诱导细胞凋亡 相关性分析 正常对照组 血清白蛋白
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原发性胆汁性肝硬化患者检测可溶性肿瘤坏死因子sTRAIL的意义 被引量:1
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作者 陈燕 周晔 +1 位作者 仲人前 邓安梅 《临床军医杂志》 CAS 2010年第4期555-557,共3页
目的探讨PBC患者中的肿瘤坏死因子sTRAIL的表达情况。方法采用双抗体夹心法来检测60例PBC患者血清中的sTRAIL,并以60例自身免疫病患者(40例系统性红斑狼疮患者,8例类风湿性关节炎,12例强直性脊柱炎)、60例健康体检者为对照组。检测ALP、... 目的探讨PBC患者中的肿瘤坏死因子sTRAIL的表达情况。方法采用双抗体夹心法来检测60例PBC患者血清中的sTRAIL,并以60例自身免疫病患者(40例系统性红斑狼疮患者,8例类风湿性关节炎,12例强直性脊柱炎)、60例健康体检者为对照组。检测ALP、GGT、IgM与sTRAIL的相关性。结果 PBC患者血清中的sTRAIL的浓度显著低于健康体检者(P<0.05),并根据临床不同分期检测后发现,PBC患者血清中sTRAILⅢ期、Ⅳ期低于Ⅰ期、Ⅱ期结果(P<0.05),表明血清中sTRAIL在PBC患者中的检测有一定的显著意义,并与病情程度存在一定的相关性。并且sTRAIL与ALP、GGT、IgM均呈负相关(r=-0.4335,P<0.01、r=-0.6502,P<0.01、r=-0.5610,P<0.01)。结论 PBC患者血清中的sTRAIL浓度变化与原发性胆汁性肝硬化的病程呈一定的相关性,对于临床观察病情的发展,指导临床医生的诊断提供一些辅助的参考。 展开更多
关键词 原发性胆汁性肝硬化 肝硬化患者 分期检测 可溶性肿瘤坏死因子 strail primary BILIARY cirrhosis 患者血清 健康体检者 系统性红斑狼疮 类风湿性关节炎 双抗体夹心法 强直性脊柱炎 临床医生 自身免疫病 浓度变化 临床观察 结果 病情程度 负相关 对照组
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丁苯酞对缺血性脑卒中患者的疗效及对血清中sTRAIL、HMGB1和IL-23的影响 被引量:1
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作者 谢映红 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2014年第6期164-166,共3页
目的探讨丁苯酞治疗缺血性脑卒中的临床疗效,关注治疗对血清中可溶性相关凋亡诱导配体(sTRAIL)、高迁移率族蛋白B(HMGB1)和白细胞介素-23(IL-23)的影响。方法对本院收治的178例缺血性脑卒中患者进行观察,按入院顺序分为两组,对照组89例... 目的探讨丁苯酞治疗缺血性脑卒中的临床疗效,关注治疗对血清中可溶性相关凋亡诱导配体(sTRAIL)、高迁移率族蛋白B(HMGB1)和白细胞介素-23(IL-23)的影响。方法对本院收治的178例缺血性脑卒中患者进行观察,按入院顺序分为两组,对照组89例,应用常规治疗;观察组89例,在常规基础上加用丁苯酞治疗,同时抽取患者治疗前后的空腹静脉血,应用ELISA法检测两组患者治疗前后血清中sTRAIL、HMGB1和IL-23的影响。结果治疗3周后,观察组患者的总有效率明显高于对照组,两组患者治疗后血清中sTRAIL、HMGB1和IL-23的表达均下降,但观察组下降值明显高于对照组。结论丁苯酞对缺血性脑卒中患者的疗效明显,且能有效下调血清中sTRAIL、HMGB1和IL-23的含量,减少由于炎性细胞因子增高引起的神经细胞损伤。 展开更多
关键词 丁苯酞 缺血性脑卒中 strail HMGB1 IL-23
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急性髓系白血病患者血清中sTRAIL及VEGF水平的表达 被引量:3
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作者 张纯 李萌 +3 位作者 董航 赵悦荣 姜姗 白文月 《黑龙江医药科学》 2018年第2期31-32,35,共3页
目的:通过检测患者血清中可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡配体(sTRAIL)与血管内皮生长因子(VEGF)的浓度,探讨二者与急性髓系白血病(AML)的进展预后的关系。方法:选取2015-10~2017-10份就诊于佳木斯大学附属第一医院的22例初发的AML患者作为... 目的:通过检测患者血清中可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡配体(sTRAIL)与血管内皮生长因子(VEGF)的浓度,探讨二者与急性髓系白血病(AML)的进展预后的关系。方法:选取2015-10~2017-10份就诊于佳木斯大学附属第一医院的22例初发的AML患者作为初治组,17例完全缓解作为完全缓解组,5例未缓解作为未缓解组。同期选取20例我院体检中心健康体检者作为健康对照组。采用酶联免疫法(ELISA)检测所有实验对象血清中sTRAIL及VEGF的表达水平。结果:健康成人及新诊断的AML患者血清中均可以检测到sTRAIL及VEGF表达。(1)与对照组相比初治组患者血清中sTRAIL水平无明显差异(P>0.05),经过一个疗程的诱导化疗后完全缓解组患者血清中sTRAIL水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而未完全缓解组患者血清中sTRAIL水平显著升高,与初治组相比差异有统计学意义(P<0.05);(2)与对照组相比初治组中VEGF的水平增高明显,且差异有统计学意义(P<0.05),经过一个疗程的化疗后完全缓解组患者血清中VEGF水平较初治组降低明显(P<0.05)。结论:患者血清中低浓度的sTRAIL及高浓度的VEGF,可能与AML的进展及不良预后相关。因此联合检测sTRAIL及VEGF对预测AML患者的预后具有一定意义。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病 strail VEGF 免疫酶联
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融合受体eDR4/iFas提高sTRAIL对HT-29细胞凋亡的敏感性
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作者 李招发 王从阳 +1 位作者 邓小英 惠二京 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2014年第9期966-972,共7页
目的:探讨sTRAIL联合融合受体eDR4/iFas对HT-29细胞的凋亡作用。方法:采用PCR方法分别扩增eDR4和iFas,通过重叠PCR将两者连接起来组成融合受体基因eDR4/iFas,将其克隆到带Survivin启动子的表达载体上,另外采用组成型启动子CAG调控sTRAI... 目的:探讨sTRAIL联合融合受体eDR4/iFas对HT-29细胞的凋亡作用。方法:采用PCR方法分别扩增eDR4和iFas,通过重叠PCR将两者连接起来组成融合受体基因eDR4/iFas,将其克隆到带Survivin启动子的表达载体上,另外采用组成型启动子CAG调控sTRAIL表达。体外转染结直肠癌细胞株HT-29和人胚肾细胞HEK293,MTT法检测两种细胞的存活率,RTPCR和Western Blot检测目的蛋白的表达,Hoechst染色进一步分析eDR4/iFas联合sTRAIL对HT-29细胞的凋亡效果。结果:在HT-29细胞中,sTRAIL组的细胞存活率为40.9%±18.7%,而eDR4/iFas+sTRAIL组的细胞存活率为21.6%±9.1%,两者间存在统计学差异(P<0.05)。结论:eDR4/iFas能提高sTRAIL对HT-29细胞凋亡的敏感性,而对正常细胞HEK293没有毒副作用。 展开更多
关键词 strail 融合受体 eDR4/iFas Sur-vivin启动子 结直肠癌细胞株HT-29
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^(131)I-血管抑素联合PcDNA-sTRAIL在荷瘤小鼠模型肿瘤靶向治疗的研究
9
作者 张弦 田琼 +3 位作者 魏龙晓 周润锁 徐海峰 袁梦辉 《陕西医学杂志》 CAS 2012年第3期265-268,共4页
目的构建PcDNA-sTRAIL真核表达载体并进行扩增、纯化,采用131I标记血管抑素(AS)并完成了PcDNA-sTRAIL与131I-AS在荷瘤裸鼠体内的联合抑瘤试验。方法;通过PCR扩增和定向克隆技术成功构建PcDNA-sTRAIL真核表达载体,采用131I标记血管抑素,... 目的构建PcDNA-sTRAIL真核表达载体并进行扩增、纯化,采用131I标记血管抑素(AS)并完成了PcDNA-sTRAIL与131I-AS在荷瘤裸鼠体内的联合抑瘤试验。方法;通过PCR扩增和定向克隆技术成功构建PcDNA-sTRAIL真核表达载体,采用131I标记血管抑素,标记率达85%且体外稳定性好,成功构建了荷瘤裸鼠模型,并进行了荷瘤小鼠联合治疗后SPECT显像和病理结果,完成PcDNA-sTRAIL与131I-AS在荷瘤裸鼠体内的联合抑瘤试验。结果:荷瘤小鼠PcD-NA-sTRAIL与131I-AS联合用药治疗期间肿瘤平均体积较其他单独治疗组增长缓慢。结论:本研究将抑制肿瘤血管生成、促肿瘤细胞凋亡和放射性核素的内照射三重作用相结合并用于抗肿瘤治疗,期望不仅能充分发挥三者的优势,又能为核素内照射与免疫治疗的结合提供有力的实验证据。 展开更多
关键词 @PcDNA-strail @血管抑素 细胞凋亡 碘放射性同位素 肿瘤治疗方案
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子痫前期患者血浆中sTRAIL、胎盘组织TRAIL及TRAIL受体的变化及意义 被引量:3
10
作者 牟纯玮 芮塬 +3 位作者 谢晓珍 周尚谦 李雪媛 王志坚 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2016年第12期895-899,共5页
目的:研究子痫前期(PE)患者血浆s TRAIL及胎盘滋养细胞上TRAIL/TRAIL-Rs的变化及其与PE发病的关系。方法:选取56例PE患者为研究对象,其中符合重度PE诊断标准者31例(研究组1),未及重度PE 25例(研究组2)。选取同期正常妊娠妇女为对照组,其... 目的:研究子痫前期(PE)患者血浆s TRAIL及胎盘滋养细胞上TRAIL/TRAIL-Rs的变化及其与PE发病的关系。方法:选取56例PE患者为研究对象,其中符合重度PE诊断标准者31例(研究组1),未及重度PE 25例(研究组2)。选取同期正常妊娠妇女为对照组,其中28~36周30例(对照组1)、36^(+1)~38周30例(对照组2),因胎膜早破、早产等于28~36周分娩者27例(对照组3),36^(+1)~38周分娩者30例(对照组4)。研究组孕妇留取静脉血及胎盘组织,对照组1、2留取静脉血,对照组3、4留取胎盘组织。ELISA法检测血浆中TRAIL含量,免疫组化法检测胎盘组织中TRAIL和TRAIL-Rs(DR4、DR5、DcR1、DcR2)含量。结果:研究组血浆中sTRAIL含量明显低于对照组(研究组1 vs对照组1,P<0.001;研究组2 vs对照组2,P<0.005);随着病情加重,s TRAIL含量明显下降(P<0.05)。研究组胎盘组织中TRAIL表达明显减少,随着病情加重而加重。研究组中死亡受体DR4、DR5的含量明显高于对照组,而诱骗受体DcR1、DcR2含量明显低于对照组。PE重度组中DR4、DR5含量高于轻度组(P<0.05),DcR1和DcR2含量则无显著差异。结论:PE患者血浆中sTRAIL及胎盘组织中TRAIL/TRAIL-Rs含量发生了明显变化,TRAIL/TRAIL-Rs的不平衡性参与了PE的病理过程。 展开更多
关键词 子痫前期 血浆strail 胎盘TRAIL TRAIL-Rs
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重组人RGD-sTRAIL的表达、纯化及抗肿瘤活性研究 被引量:2
11
作者 赵丽红 范清林 +1 位作者 邹文艺 宋礼华 《生物技术通讯》 CAS 2004年第3期226-230,共5页
利用PCR技术构建RGD短肽与人肿瘤坏死因子凋亡配体穴胞外区114~281雪的融合基因,将该DNA片段克隆到原核表达载体pET-11a中。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后可表达相对分子质量约为20000的目的蛋白,占菌体蛋白的20%左右,且... 利用PCR技术构建RGD短肽与人肿瘤坏死因子凋亡配体穴胞外区114~281雪的融合基因,将该DNA片段克隆到原核表达载体pET-11a中。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后可表达相对分子质量约为20000的目的蛋白,占菌体蛋白的20%左右,且大多数重组蛋白以不溶的包涵体形式存在。Western印迹表明目的蛋白具有人sTRAIL的抗原性。表达产物经变性、复性、离子交换层析和分子筛等步骤,可以得到纯度大于95%的RGD-sTRAIL重组蛋白。肿瘤细胞体外实验发现,纯化后的RGD-sTRAIL重组蛋白能明显抑制人肺癌细胞A549生长,并呈剂量依赖性。研究结果表明,通过复性,包涵体中的RGD-sTRAIL蛋白得到正确的折叠,并在体外具有杀伤肿瘤细胞的活性,从而为进一步研究体内靶向性杀伤肿瘤细胞奠定了基础。 展开更多
关键词 重组 RGD-strail 表达 纯化 细胞凋亡 抗肿瘤活性
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pAAV-PEG3-sTRAIL质粒的构建及表达研究
12
作者 蒋祥龙 彭炬 +1 位作者 潘艺 卢光琇 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期481-484,489,共5页
目的构建pAAV-PEG3-sTRAIL质粒并检测其诱导细胞凋亡的作用。方法从大鼠尾巴中提取gDNA,PCR扩增PEG3启动子,测序后定向替代pAAV载体中的CAG启动子。从培养的NTERA-2细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增sTRAIL基因(编码氨基酸序列114-281),测序... 目的构建pAAV-PEG3-sTRAIL质粒并检测其诱导细胞凋亡的作用。方法从大鼠尾巴中提取gDNA,PCR扩增PEG3启动子,测序后定向替代pAAV载体中的CAG启动子。从培养的NTERA-2细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增sTRAIL基因(编码氨基酸序列114-281),测序后定向插入至pAAV-PEG3质粒的多克隆位点。用pAAV-PEG3-sTRAIL质粒FUGENE HD转染人hSF、NTERA-2和hES细胞,用半定量RT-PCR和流式细胞仪分别检测sTRAIL基因的表达和细胞的早期凋亡。结果限制性内切酶酶切和测序分析证实,本文成功地获得了PEG3启动子和sTRAIL基因片断,并将PEG3和sTRAIL准确插入了pAAVL质粒。转染hSF、NTERA-2和人胚胎干细胞(hES)后,检测到sTRAIL基因的表达及其引起的肿瘤细胞NTER-A-2的早期凋亡。结论成功构建了pAAV-PEG3-sTRAIL质粒,并有可能用于肿瘤的基因治疗。 展开更多
关键词 PEG3 strail 凋亡 胚胎干细胞 NTERA-2
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丁苯酞注射液治疗急性脑梗死的疗效及对血清sTRAIL OPG TNF-α的影响 被引量:10
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作者 许云鹤 刘永刚 +1 位作者 赵小妹 董辉 《中国实用神经疾病杂志》 2016年第13期3-4,共2页
目的研究丁苯酞注射液治疗急性脑梗死的疗效及对血清肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(sTRAIL)、骨保护素(OPG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法选取2014-03—2015-03我院收治的急性脑梗死患者140例,按照随机数字表法将患者分为研... 目的研究丁苯酞注射液治疗急性脑梗死的疗效及对血清肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(sTRAIL)、骨保护素(OPG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法选取2014-03—2015-03我院收治的急性脑梗死患者140例,按照随机数字表法将患者分为研究组和对照组,每组70例,对照组给予常规治疗方法,研究组在对照组的基础上加用丁苯酞注射液治疗,应用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评价治疗效果,并比较治疗前后2组血清sTRAIL、OPG和TNF-α水平。结果 2组治疗前NIHSS评分比较并异无统计学意义(P>0.05),2组治疗后NIHSS评分均显著降低,且研究组显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);2组治疗前sTRAIL、OPG和TNF-α比较差异无统计学意义(P>0.05),2组治疗后sTRAIL、OPG和TNF-α均显著降低,且研究组显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论丁苯酞注射液治疗急性脑梗死具有较好的临床疗效,能降低血清sTRAIL、OPG和TNF-α水平。 展开更多
关键词 急性脑梗死 丁苯酞注射液 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 骨保护素 肿瘤坏死因子-Α
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sTRAIL基因引起人恶性畸胎瘤细胞与人胚胎干细胞凋亡比较
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作者 蒋祥龙 潘艺 卢光琇 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第3期401-403,共3页
目的:评估sTRAIL基因引起人胚胎干细胞[human embryonic stem(hES)cells]和人恶性畸胎瘤(human malignant teratoma)细胞NTERA-2凋亡的作用。方法:本室已构建的pAAV-PEG3-sTRAIL质粒,转染NTERA-2和hES细胞,用流式细胞仪和定量PCR检测NTE... 目的:评估sTRAIL基因引起人胚胎干细胞[human embryonic stem(hES)cells]和人恶性畸胎瘤(human malignant teratoma)细胞NTERA-2凋亡的作用。方法:本室已构建的pAAV-PEG3-sTRAIL质粒,转染NTERA-2和hES细胞,用流式细胞仪和定量PCR检测NTERA-2和hES细胞的早期凋亡及sTRAIL基因的受体的表达。结果:NTERA-2细胞经瞬时转染pAAV-PEG3-sTRAIL质粒后,早期凋亡比例达24.4%±2.1%,sTRAIL的死亡受体DR4、和DR5的表达分别上升2和3倍,而hES细胞转染pAAV-PEG3-sTRAIL质粒后,早期凋亡比例仅2.3%±1.2%,受体DR4、DR5、DcR1和DcR2的表达未有明显变化。结论:pAAV-PEG3-sTRAIL质粒可有效地引起人恶性畸胎瘤细胞NTERA-2的凋亡,但是对人胚胎干细胞尚未发现可见的细胞凋亡现象。 展开更多
关键词 strail 凋亡 胚胎干细胞 NTERA-2
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人sTRAIL基因载体构建及其在真皮干细胞的表达
15
作者 缪殿南 梁宇佳 +3 位作者 闫国和 董世武 戴晓天 熊玮 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第27期5071-5074,共4页
背景:基于肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)可溶性相关凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTRAIL)抗瘤的生物特性,克隆sTRAIL基因,构建其真核表达载体,为肿瘤细胞凋亡的实验研究奠定基础。目的:构建真... 背景:基于肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)可溶性相关凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTRAIL)抗瘤的生物特性,克隆sTRAIL基因,构建其真核表达载体,为肿瘤细胞凋亡的实验研究奠定基础。目的:构建真核表达载体pEGFP-N1/sTRAIL,并转染真皮干细胞,以探究sTRAIL基因导入真皮干细胞的表达情况。方法:采用RT-PCR二步法,以人胎盘组织总RNA为模板,扩增sTRAIL的cDNA序列,将其克隆入pMD18-T载体,随后亚克隆入载体pEGFP-N1中,构建其真核瞬时表达载体pEGFP-N1/sTRAIL,以Fugene6转染技术,将sTRAIL基因导入真皮干细胞。倒置显微镜下观测转染后真皮干细胞生长变化及sTRAIL在其中的表达等情况。RT-PCR法对目的基因转染的真皮干细胞进行鉴定。结果与结论:克隆到sTRAIL基因的cDNA序列,成功构建了其真核表达载体,该真核表达载体能携带sTRAIL基因在真皮干细胞中正常表达。倒置显微镜下观测到转染后真皮干细胞生长状态与未转染的真皮干细胞无差异。以经sTRAIL基因转染的真皮干细胞该基因组DNA为模板,用RT-PCR法能扩增到sTRAIL基因cDNA序列。 展开更多
关键词 strail基因 克隆 真核表达载体 真皮干细胞 绿色荧光
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核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者血清sTRAIL水平变化及意义 被引量:1
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作者 魏屏 王华 +1 位作者 曾令兰 朱励 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期174-177,共4页
目的:探索核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者(CHB)血清sTRAIL水平变化及意义。方法:60例CHB均接受核苷类似物抗病毒药物治疗(拉米夫定或替比夫定),根据治疗24周末HBVDNA水平将患者分为完全病毒学应答组、部分病毒学应答组、无... 目的:探索核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者(CHB)血清sTRAIL水平变化及意义。方法:60例CHB均接受核苷类似物抗病毒药物治疗(拉米夫定或替比夫定),根据治疗24周末HBVDNA水平将患者分为完全病毒学应答组、部分病毒学应答组、无病毒学应答组,设正常对照组。采集治疗前、治疗4、12、24周末患者的血清,检测血清sTRAIL水平,同时检测IFN-γ、ALT水平。结果:患者治疗前sTRAIL、IFN-γ及ALT水平均较正常对照组升高(P<0.05或P<0.01)。sTRAIL水平在完全应答组治疗4周末、部分应答组治疗12周末下降。与治疗前比,差异均有统计学意义(P<0.05),在治疗4周末完全应答组sTRAIL水平低于同期部分应答组(P<0.05)。IFN-γ水平在完全应答组治疗4周末、部分应答组治疗12周末升高,与治疗前比差异均有统计学意义(P<0.05),但完全应答组IFN-γ水平在治疗4周末与同期部分应答组差异无统计学意义。ALT水平在三组的治疗过程中均逐步下降,各时间点间差异均有统计学意义(p<0.05)。完全应答组治疗前sTRAIL水平与IFN-γ水平、ALT水平呈正相关(P<0.01),治疗后sTRAIL水平与IFN-γ水平呈负相关(P<0.05)。结论:CHB血清sTRAIL水平升高;核苷类似物抗病毒治疗早期病毒学应答者血清sTRAIL水平下降,尤其是完全应答者在疗程的第4周就有明显的变化。sTRAIL在CHB免疫损伤中起重要作用,在其核苷类似物抗病毒治疗免疫恢复中也起重要作用,可作为核苷类似物治疗CHB早期应答指标预测远期疗效。 展开更多
关键词 TRAIL 慢性乙型肝炎 核苷类似物 早期应答
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sTRAIL、PCT、ALB在重症肝病合并感染患者外周血中的表达及临床意义 被引量:5
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作者 徐萍 伍廷平 +3 位作者 夏红 时志鹏 杨强 刘荷蕾 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第6期746-750,共5页
目的探究可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)、降钙素原(PCT)、白蛋白(ALB)在重症肝病合并感染患者外周血中的表达及临床意义。方法选取本院2017年5月至2019年8月收治的重症肝病患者159例,根据是否合并感染分为合并感染患者55... 目的探究可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)、降钙素原(PCT)、白蛋白(ALB)在重症肝病合并感染患者外周血中的表达及临床意义。方法选取本院2017年5月至2019年8月收治的重症肝病患者159例,根据是否合并感染分为合并感染患者55例(观察组),未合并感染患者104例(对照组)。检测两组不同治疗结局患者血清s TRAIL、PCT、ALB水平及肝功能指标[总胆红素(TBiL)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)],分析血清sTRAIL、PCT、ALB与肝功能的关系,评价三者对治疗结局的预测价值。结果观察组血清sTRAIL、PCT水平高于对照组,ALB水平低于对照组(P<0.05);观察组血清TBiL、AST、ALT水平高于对照组(P<0.05);Pearson相关性分析,血清sTRAIL、PCT与TBiL、AST、ALT呈正相关,ALB与TBiL、AST、ALT呈负相关(P<0.05);治疗有效者治疗第7、14 d血清sTRAIL、PCT、ALB水平较治疗前显著降低,且均低于同期治疗无效者(P<0.05);ROC曲线分析,治疗第14 d血清TBiL、AST、ALT联合预测AUC为0.881,大于三者治疗第7、14 d单独预测价值。结论 s TRAIL、PCT、ALB在重症肝病合并感染患者外周血中异常表达,与肝功能密切相关,且联合检测有助于预测治疗结局。 展开更多
关键词 重症肝病 感染 strail PCT ALB 相关性
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醒脑静佐治老年脑梗死患者的临床疗效及对血清MMP-2、MMP-9、sTRAIL的影响 被引量:3
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作者 柴丽丽 赵立军 《癫痫与神经电生理学杂志》 2015年第6期331-334,共4页
目的:探究老年脑梗死患者使用醒脑静注射液治疗对血清基质金属蛋白酶(MMP)、可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)的影响及其临床疗效观察,企为临床老年脑梗死患者的治疗提供更为有效的手段和方法。方法:从2013年2月~201... 目的:探究老年脑梗死患者使用醒脑静注射液治疗对血清基质金属蛋白酶(MMP)、可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)的影响及其临床疗效观察,企为临床老年脑梗死患者的治疗提供更为有效的手段和方法。方法:从2013年2月~2014年10月于我院诊治的老年脑梗死患者中选择116例作为研究对象,并随机分为两组,即对照组和醒脑静治疗组,每组患者各58例。对照组患者仅给予脑梗死常规基础性治疗,醒脑静组在与对照组同等治疗的基础上,再给予醒脑静注射液进行治疗。治疗2周后分别观察两组患者的临床疗效,并比较治疗前后患者血清MMP-2、MMP-9及sTRAII。水平的变化情况。结果:在治疗2周后,醒脑静组患者治疗的总有效率为91%,显著高于对照组的76%(P=0.024);治疗后两组患者血清MMP-2、MMP9及sTRAIL水平均较治疗前显著下降(P〈0.001),且醒脑静组患者较对照组患者下降更显著(P=0.0t3、0.023、0.002)。结论:对于老年脑梗死患者,醒脑静注射液能有效降低其血清MMP-2、MMP-9及sTRAIL水平,改善患者机体内环境,并显著改善患者相关体征和临床症状,提高临床疗效和患者生活品质。 展开更多
关键词 醒脑静注射液 脑梗死 基质金属蛋白酶(MMP) 可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配 体(strail)
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含uPA裂解位点的人sTrail融合基因的构建及其原核蛋白表达与纯化 被引量:4
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作者 梁宇佳 缪殿南 +2 位作者 闫国和 戴晓天 熊玮 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期789-792,共4页
目的构建含尿激酶纤溶酶原激活剂(urokinase plasminogen activator,uPA)裂解位点的人可溶性凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTrail)基因的原核载体,表达并纯化其融合蛋白sTrail-uPA。方法 RT-PCR法克隆sTrai... 目的构建含尿激酶纤溶酶原激活剂(urokinase plasminogen activator,uPA)裂解位点的人可溶性凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTrail)基因的原核载体,表达并纯化其融合蛋白sTrail-uPA。方法 RT-PCR法克隆sTrail基因后,经引物延伸法构建his-uPA-sTrail融合基因并亚克隆至原核表达载体pET-32a中,诱导其表达蛋白并将其纯化,肠肽酶(enterokinase,EK)切与再次纯化回收该蛋白,Western blot检测其抗原性。结果表达载体经诱导成功获约38×103含载体表达标签(Trx)的融合蛋白,EK酶切该蛋白获约19.5×103的目的蛋白uPA-sTrail。检测表明,该目的蛋白具人Trail抗原性。结论成功克隆uPA-sTrail融合基因并构建至原核表达载体,并获约19.5×103的融合蛋白,且该蛋白具人Trail抗原性。 展开更多
关键词 克隆 融合基因 融合蛋白 抗原性
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肿瘤及血液病患者血清sTRAIL表达及与IL-6和Hepcidin水平的相关性研究 被引量:4
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作者 王秋云 严敏 +1 位作者 程珍 潘湘涛 《现代检验医学杂志》 CAS 2021年第1期58-60,64,共4页
目的研究肿瘤及血液病患者血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)表达,以及与白介素-6(IL-6)和铁调素(Hepc)表达的相关性及临床意义。方法2018年8月~2019年6月住院患者34例(18例肿瘤和16例血液病)及17例健康志愿者分别应用酶... 目的研究肿瘤及血液病患者血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)表达,以及与白介素-6(IL-6)和铁调素(Hepc)表达的相关性及临床意义。方法2018年8月~2019年6月住院患者34例(18例肿瘤和16例血液病)及17例健康志愿者分别应用酶联免疫吸附法检测血清sTRAIL和Hepc,应用电化学发光法检测血清IL-6和SF,并分析其表达特点和相关关系。结果①肿瘤组和血液病组的sTRAIL水平分别为357.97±101.9 pg/ml和297.44±78.7pg/ml,均明显高于对照组的150.74±43.1pg/ml(F=31.53,P<0.01);Hepc分别为61.16±19.6μg/L和67.54±19.5μg/L,均明显高于对照组的34.78±11.9μg/L(F=16.74,P<0.01);IL-6分别为4.60±3.14mg/ml和12.49±11.69mg/ml,均明显高于对照组的1.66±0.28mg/ml(F=5.69,P<0.01)。②肿瘤组和血液病组的Hb分别为112.72±20.4g/L和76.31±27.4g/L,均明显低于对照组的138.00±10.5g/L(F=37.71,P<0.01);而SF分别为530.5±381.91 ng/ml和807.44±543.1 ng/ml,均明显高于对照组的104.06±112.2 ng/ml(F=14.10,P<0.01)。③51例研究对象的Hb与SF,Hepc及sTRAIL水平均呈负相关(r=-0.487,-0.379和-0.308,均P<0.05)。④SF与Hepc和sTRAIL呈正相关(r=0.350,0.544,均P<0.01),sTRAIL与Hepc呈正相关(r=0.321,P<0.05)。结论肿瘤及血液病患者血清sTRAIL高表达,sTRAIL与Hepc和IL-6均呈正相关。sTRAIL对肿瘤和血液病患者的Hb水平有负调控作用。 展开更多
关键词 肿瘤 血液病 可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 白介素-6 铁调素
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