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鸡STIM1蛋白的序列特征、表达模式及功能研究
1
作者 董南希 崔厚雪 +2 位作者 向仲芳 牛冬 刘璐 《中国家禽》 北大核心 2025年第11期17-26,共10页
研究旨在对鸡STIM1(Stromal interaction molecule 1)蛋白进行生物信息学分析,构建STIM1组织表达谱,并探究其对鸡原代肝细胞脂质代谢的影响。研究利用生物信息学方法解析STIM1蛋白氨基酸序列特征、筛选互作蛋白并进行功能富集分析;利用... 研究旨在对鸡STIM1(Stromal interaction molecule 1)蛋白进行生物信息学分析,构建STIM1组织表达谱,并探究其对鸡原代肝细胞脂质代谢的影响。研究利用生物信息学方法解析STIM1蛋白氨基酸序列特征、筛选互作蛋白并进行功能富集分析;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫荧光染色检测STIM1在不同组织中的mRNA和蛋白表达情况;在鸡原代肝细胞过表达STIM1基因,利用qRT-PCR评估STIM1基因对脂肪代谢关键基因PPARα表达的影响。结果显示:STIM1基因CDS区编码676个氨基酸,具有70个磷酸化位点和3个N-糖基化位点,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。STIM1蛋白主要定位于内质网,具有信号序列,可与STIM2、ORAI和TRPC等家族蛋白存在互作,维持细胞Ca2+稳态。qRT-PCR和免疫荧光染色结果均表明,STIM1在肝脏组织表达量显著高于肌肉和脂肪组织(P<0.05)。体外试验结果显示,过表达STIM1基因可通过上调PCNA和CCND1基因表达(P<0.05或P<0.01),促进细胞增殖;同时提高PPARα、CPT1A以及SREBP1-c基因表达(P<0.05),调节脂肪生成与分解之间的动态平衡。研究表明,鸡STIM1蛋白属于内质网膜蛋白,其编码基因与蛋白主要在肝脏组织表达;过表达STIM1基因可通过促进细胞增殖,调节脂肪生成与分解之间的动态平衡,参与鸡原代肝细胞内的脂质代谢稳态调控。 展开更多
关键词 鸡 stim1基因 生物信息学分析 组织表达
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食管鳞状细胞癌中miR-4687-5P及STIM1的表达及调控机制 被引量：3
2
作者 郭艳丽 牛云峰 +5 位作者 杨柳 邝钢 郭炜 董稚明 沈素朋 梁佳 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期133-138,共6页
目的检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)细胞株及组织中miR-4687-5P及STIM1基因的表达及STIM1基因启动子区的甲基化状况,进一步探讨miR-4687-5P与STIM1基因表达的相关性以及两者是否具有共同的表达调控机制。方... 目的检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)细胞株及组织中miR-4687-5P及STIM1基因的表达及STIM1基因启动子区的甲基化状况,进一步探讨miR-4687-5P与STIM1基因表达的相关性以及两者是否具有共同的表达调控机制。方法应用qRT-PCR及甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法检测ESCC细胞株(TE13、KYSE150、T.Tn)及89例ESCC及相应癌旁非肿瘤组织中miR-4687-5P及STIM1基因的表达及甲基化情况,并分析其相关性。结果 ESCC组织中miR-4687-5P与STIM1基因表达均明显下调,且表达具有一致性。miR-4687-5P与STIM1基因在3株ESCC细胞系中表达较弱,应用甲基化抑制剂5-aza-2’-deoxycytidine(5-Aza-Dc)处理细胞株后两基因表达均明显增强,而甲基化条带明显减弱或消失; ESCC组织中,STIM1基因启动子区呈高甲基化状态,且其甲基化频率与STIM1及miR-4687-5P的表达均相关(P <0. 01)。结论 ESCC中miR-4687-5P与STIM1基因表达均下调; miR-4687-5P表达可能受宿主基因STIM1启动子的调控,其启动子区的高甲基化状态可能是引起miR-4687-5P与STIM1基因在ESCC中表达下调的共同机制之一。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞癌 miR-4687-5P stim1基因 甲基化
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STIM1基因干扰对人直肠癌SW837细胞生物学功能的影响
3
作者 朱文博 佘明金 +4 位作者 李桂芝 胡宏霞 段婷梅 程蒙蒙 简晓红 《肿瘤药学》 CAS 2018年第1期35-39,共5页
目的研究STIM1基因干扰对人直肠癌SW837细胞增殖、凋亡及体外迁移的影响,以期为直肠癌临床防治及药物研发提供新的靶点。方法采用STIM1干扰慢病毒转染人直肠癌SW837细胞,实时定量PCR(q RT-PCR)和Western blot验证STIM1的干扰效果,分别采... 目的研究STIM1基因干扰对人直肠癌SW837细胞增殖、凋亡及体外迁移的影响,以期为直肠癌临床防治及药物研发提供新的靶点。方法采用STIM1干扰慢病毒转染人直肠癌SW837细胞,实时定量PCR(q RT-PCR)和Western blot验证STIM1的干扰效果,分别采用MTT法和划痕试验检测细胞增殖及迁移情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 STIM1干扰慢病毒转染后,干扰组SW837细胞STIM1基因m RNA和蛋白表达均明显减少(P<0.05)。与对照组比较,干扰组细胞增殖、体外迁移能力均显著减弱(P<0.05);干扰组SW837细胞凋亡率较对照组显著升高(P<0.05),STIM1干扰促进SW837细胞凋亡与上调caspase-3、Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白表达水平有关。结论STIM1基因干扰可抑制人直肠癌SW837细胞的增殖活性和体外迁移能力,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 人直肠癌细胞 stim1基因 细胞增殖 凋亡 迁移
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人STIM1基因真核表达载体的构建及其在肝细胞中的表达 被引量：1
4
作者 张振亚 张宗明 潘丽洁 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第15期1489-1492,共4页
目的:构建人STIM1基因真核表达载体,并观察其在人肝细胞株(HL-7702)中的表达.方法:提取HL-7702细胞总RNA,RT-PCR扩增,经纯化回收后将片段克隆至pGM-T载体,酶切琼脂糖凝胶电泳分析鉴定并测序,最后用重组质粒转染HL-7702细胞,通过PCR-电泳... 目的:构建人STIM1基因真核表达载体,并观察其在人肝细胞株(HL-7702)中的表达.方法:提取HL-7702细胞总RNA,RT-PCR扩增,经纯化回收后将片段克隆至pGM-T载体,酶切琼脂糖凝胶电泳分析鉴定并测序,最后用重组质粒转染HL-7702细胞,通过PCR-电泳和Western blot法检测STIM1基因的表达.结果:PCR扩增的片段长度为342bp,测序结果以及重组质粒pGM-T-STIM1的酶切琼脂糖凝胶电泳鉴定结果均证明STIM1基因成功克隆到真核表达载体中.PCR-电泳和Western blot实验结果分别显示转染重组质粒后的HL-7702细胞在基因与蛋白水平表达STIM1均有所增强.结论:成功构建了人STIM1基因的真核表达载体pGM-T-STIM1,并在人肝细胞株HL-7702中稳定表达,为研究STIM1蛋白在人肝细胞内Ca2+浓度调控方面及其对人肝细胞分泌功能的影响奠定了良好的实验基础. 展开更多
关键词 stim1 真核表达载体 人肝细胞株HL-7702 基因表达
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STIM1基因与头颈部肿瘤关系的研究进展 被引量：1
5
作者 宋来小 崔晓波 《内蒙古医学杂志》 2018年第3期291-293,共3页
钙信号在多种肿瘤细胞的代谢中起重要作用,钙库操纵性钙离子内流(SOCE)是非兴奋性细胞中Ca2+内流的主要机制,维持细胞内钙离子稳态。基质相互作用分子1(STIM1)为SOCE的核心蛋白之一,有着内质网钙离子感受器和细胞内SOCE激发器双重作用... 钙信号在多种肿瘤细胞的代谢中起重要作用,钙库操纵性钙离子内流(SOCE)是非兴奋性细胞中Ca2+内流的主要机制,维持细胞内钙离子稳态。基质相互作用分子1(STIM1)为SOCE的核心蛋白之一,有着内质网钙离子感受器和细胞内SOCE激发器双重作用。大量国内外文献报道,STIM1基因表达异常与人类多种肿瘤的发生、发展、侵袭、预后等多项病理指标有很高的相关性,本文复习了相关文献,对STIM1的结构功能及与头颈部肿瘤的相关研究进行综述。 展开更多
关键词 肿瘤 头颈部肿瘤 stim1基因 研究进展
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STIM1基因在人下咽癌细胞系FaDu中的表达及对细胞凋亡的影响分析
6
作者 孙源昊 李文龙 +2 位作者 代兵 于慧媛 常江 《系统医学》 2022年第24期46-49,共4页
目的分析人下咽癌细胞系FaDu中STIM1基因对细胞表达及凋亡的影响。方法随机选取2020年3月—2022年3月期间深圳市萨米医疗中心耳鼻咽喉科收取的40份咽癌患者细胞作为培养对象。经STIM1-siRNA病毒感染的下咽癌细胞为STIM1基因组,经阴性慢... 目的分析人下咽癌细胞系FaDu中STIM1基因对细胞表达及凋亡的影响。方法随机选取2020年3月—2022年3月期间深圳市萨米医疗中心耳鼻咽喉科收取的40份咽癌患者细胞作为培养对象。经STIM1-siRNA病毒感染的下咽癌细胞为STIM1基因组,经阴性慢病毒感染的下咽癌细胞为对照组,各20份。比较两组病毒感染后蛋白水平表达及细胞凋亡、增殖、生长能力。结果STIM1基因组细胞蛋白水平表达(0.75±0.23)低于对照组(0.96±0.21),差异有统计学意义(t=3.015,P=0.005);STIM1组细胞凋亡情况高于对照组,差异有统计学意义(t=13.287,P<0.05);STIM1基因组细胞数高于对照组,差异有统计学意义(t=8.207,P<0.05)。结论在人下咽癌细胞系FaDu中,STIM1基因使下咽癌细胞的增殖及细胞数提升,蛋白水平、增殖倍数被抑制,说明STIM1是调控下咽癌发生发展的关键因子,可作为下咽癌治疗中全新切入点。 展开更多
关键词 FaDu stim1基因 人下咽癌 细胞凋亡 蛋白水平表达
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APETx2腹腔注射对感染后肠易激综合征小鼠内脏敏感性的影响及其机制
7
作者 张洁 闫波 +4 位作者 赵昊赟 蔡洁 彭启迪 张冬冬 袁丽萍 《山东医药》 2025年第2期11-15,共5页
目的观察酸敏感离子通道3特异性拮抗剂APETx2对感染后肠易激综合征(PI-IBS)小鼠内脏敏感性的影响,并探讨其机制。方法健康雄性NIH小鼠18只,随机分为对照组、模型组、实验组,每组6只。实验组和模型组采用旋毛虫感染NIH小鼠建立PI-IBS模型... 目的观察酸敏感离子通道3特异性拮抗剂APETx2对感染后肠易激综合征(PI-IBS)小鼠内脏敏感性的影响,并探讨其机制。方法健康雄性NIH小鼠18只,随机分为对照组、模型组、实验组,每组6只。实验组和模型组采用旋毛虫感染NIH小鼠建立PI-IBS模型,对照组不予造模;造模成功后,实验组给予120µg/kg的APETx2腹腔注射,模型组和对照组给予等量0.9%氯化钠溶液腹腔注射,每天1次、共7 d。采用腹壁撤退反射(AWR)评分评估小鼠内脏敏感性;采用免疫组化法检测小鼠小肠组织中的酪氨酸激酶受体(c-Kit)蛋白;取小鼠小肠组织,分离Cajal间质细胞(ICC),采用实时定量PCR法检测ICC中的基质相互作用分子1(STIM1)、钙库操纵性Ca2+内流相关调节因子(SARAF)、钙释放-激活钙通道蛋白1(Orai1)、c-Kit mRNA。结果与对照组相比,模型组AWR评分升高,小肠组织中c-Kit蛋白表达增加,ICC中SARAF、Orai1、c-Kit mRNA表达增高(P均<0.05);与模型组相比,实验组AWR评分降低,小肠组织中c-Kit蛋白表达降低,ICC中SARAF、Orai1 mRNA表达降低(P均<0.05)。结论APETx2腹腔注射可改善PI-IBS小鼠的内脏敏感性,其机制可能与调控ICC中STIM1、SARAF、Orai1基因表达有关。 展开更多
关键词 肠易激综合征 酸敏感离子通道3特异性拮抗剂 内脏敏感性 stim1基因 SARAF基因 Orai1基因
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儿童杆状体肌病临床与基因表型分析 被引量：1
8
作者 郝京霞 张英谦 《中国优生与遗传杂志》 2022年第1期25-28,共4页
目的探讨杆状体肌病的临床特点、肌肉病理改变和基因突变特点。方法收集2例儿童杆状体肌病先证者临床资料,包括病史、体格检查、基因分析及肌肉病理、肌电图检查,并对其进行家系调查分析。结果此2例杆状体肌病为同一家系,为家系中哥哥... 目的探讨杆状体肌病的临床特点、肌肉病理改变和基因突变特点。方法收集2例儿童杆状体肌病先证者临床资料,包括病史、体格检查、基因分析及肌肉病理、肌电图检查,并对其进行家系调查分析。结果此2例杆状体肌病为同一家系,为家系中哥哥和弟弟,发病年龄均为2岁,就诊时均出现不同程度的体格和智力、运动发育落后,心肌酶均异常升高,智力测试均属于边缘水平,肌电图结果一致,均显示上、下肢肌源性损害可能性大。肌肉病理均可见到杆状体结构。此家系父亲身材矮小,母亲未患病,哥哥基因检测显示STIM1基因杂合变异,c.286C>G(p.L96V),父亲及弟弟均携带c.286C>G(p.L96V)杂合变异。结论此家系中哥哥为STIM1基因杂合变异,弟弟为携带STIM1基因杂合变异,哥哥和弟弟临床表型一致,肌电图与肌肉病理结构与基因诊断一致。父亲临床表型为身材矮小,患病基因来源于父亲。肌肉病理和基因是诊断杆状体肌病的重要依据。 展开更多
关键词 杆状体肌病 基因 stim1 家系 遗传
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STIM1 RNA干扰对人喉癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：5
9
作者 冶娟 解静 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2017年第11期844-848,共5页
目的:研究STIM1RNA干扰对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡、体外侵袭及迁移的影响。方法:采用STIM1干扰慢病毒转染人喉癌Hep-2细胞,实时定量PCR和Western blot验证STIM1干扰效果,CCK-8法分析细胞增殖情况,分别使用Transwell小室侵袭、划痕实... 目的:研究STIM1RNA干扰对人喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡、体外侵袭及迁移的影响。方法:采用STIM1干扰慢病毒转染人喉癌Hep-2细胞,实时定量PCR和Western blot验证STIM1干扰效果,CCK-8法分析细胞增殖情况,分别使用Transwell小室侵袭、划痕实验检测细胞体外侵袭和迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot分析caspase-3、Bax、Bcl-2、MMP9、VEGF蛋白表达水平。结果:人喉癌Hep-2细胞STIM1干扰慢病毒转染后,干扰组STIM1基因mRNA和蛋白表达均明显减少。与对照组比较,STIM1干扰后,细胞增殖、体外侵袭、迁移能力均明显减弱(均P<0.05);STIM1干扰后Hep-2细胞凋亡率相比对照组显著增大,STIM1干扰促进Hep-2细胞凋亡与上调caspase-3、Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达水平有关;STIM1干扰抑制Hep-2细胞侵袭迁移与下调MMP9、VEGF蛋白表达有关。结论:STIM1RNA干扰可抑制人喉癌Hep-2细胞增殖活性和体外侵袭、迁移能力,且促进喉癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 人喉癌细胞 stim1基因 细胞增殖 细胞凋亡 侵袭 迁移
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