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马铃薯StCHS4和StCHS5表达载体构建及功能分析
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作者 王童童 王文静 +7 位作者 董欣宇 宋家凤 盛苏奥 程洁蓝 郑婷婷 吕钊彦 朱晓彪 侯华兰 《华北农学报》 北大核心 2025年第1期74-83,共10页
查尔酮合酶(CHS)是调控植物类黄酮通路早期生物合成的重要结构基因,在植物生长发育和逆境响应中发挥作用。前期通过表达量分析,在马铃薯CHS家族中筛选到花青素生物合成关键基因StCHS4和StCHS5。为进一步探究马铃薯StCHS4和StCHS5在类黄... 查尔酮合酶(CHS)是调控植物类黄酮通路早期生物合成的重要结构基因,在植物生长发育和逆境响应中发挥作用。前期通过表达量分析,在马铃薯CHS家族中筛选到花青素生物合成关键基因StCHS4和StCHS5。为进一步探究马铃薯StCHS4和StCHS5在类黄酮和花青素生物合成中的功能,首先利用在线网站分析StCHS4和StCHS5蛋白结构,之后以pRI101双元表达载体为基础,通过同源重组法构建35S∷StCHS4-GFP和35S∷StCHS5-GFP植物过表达载体,并将重组载体转化至农杆菌GV3101菌株中。利用本氏烟草进行瞬时转化,明确StCHS4和StCHS5蛋白亚细胞定位情况。以红花烟草为试验材料,分别进行瞬时超表达和稳定遗传转化,分析StCHS4和StCHS5基因过表达后总类黄酮和总花青素的含量变化。结果表明:StCHS4和StCHS5蛋白二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,StCHS4为不稳定的亲水蛋白,StCHS5为稳定的亲水蛋白。StCHS4和StCHS5分别与辣椒CHS和番茄CHS1亲缘关系较近。亚细胞定位结果显示,StCHS4和StCHS5蛋白均在细胞质和细胞膜中表达。烟草瞬时超表达中,StCHS4和StCHS5基因在注射3~5 d显著促进花青素累积。分别获得3个阳性烟草转基因株系,与野生型相比,转基因植株中StCHS4和StCHS5显著高表达,总类黄酮和总花青素含量均高于野生型。StCHS4-OE3和StCHS5-OE1转基因植株中的总类黄酮含量显著提升,StCHS5-OE1和StCHS5-OE2中花青素含量分别提高89%,131%。上述结果表明,StCHS4和StCHS5是马铃薯类黄酮通路中关键CHS基因,过表达可促进花青素与类黄酮生物合成。 展开更多
关键词 马铃薯 stchS4 stchS5 类黄酮 花青素 遗传转化 亚细胞定位 功能分析
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利用酵母双杂交技术筛选鉴定STCH与RanBP9的相互作用 被引量:2
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作者 吕立夏 李学礼 +3 位作者 谷辉杰 郑莉 李静琪 徐磊 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期48-52,共5页
以人应激和分子伴侣蛋白(STCH)为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术在高严格条件下筛选人脑cDNA文库。在SD/-4培养基上共获得156个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,潜在的与STCH相互作用的蛋... 以人应激和分子伴侣蛋白(STCH)为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术在高严格条件下筛选人脑cDNA文库。在SD/-4培养基上共获得156个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,潜在的与STCH相互作用的蛋白有:VDAC、MBP2、ZNF251、RanBP9、Phosophate glycolase、β-tubulin、up1、up2和WW adaptor蛋白。基于各候选蛋白与神经系统疾病的关系,选择RanBP9作进一步验证实验。经体外GST-Pulldown和体内免疫共沉淀实验证实RanBP9和STCH能够相互作用,明确RanBP9的羧基端为相互作用的最小功能域。此结果为我们进一步揭示STCH作用的分子机制提供了线索。 展开更多
关键词 酵母双杂交 stch 人脑
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猪STCH基因的Bi-PASA遗传标记及多态性研究 被引量:2
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作者 史宪伟 魏麟 韩洪金 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期76-81,共6页
微粒体应激 70蛋白三磷酸腺苷酶 (STCH)基因属于应激 70蛋白基因伴侣家族 ,在机体免疫反应和疾病抵抗力等方面起重要作用。根据人和小鼠STCH基因的保守序列设计引物 ,PCR扩增到猪STCH基因第5外显子 4 4 5bp片段。序列测定显示 ,猪STCH... 微粒体应激 70蛋白三磷酸腺苷酶 (STCH)基因属于应激 70蛋白基因伴侣家族 ,在机体免疫反应和疾病抵抗力等方面起重要作用。根据人和小鼠STCH基因的保守序列设计引物 ,PCR扩增到猪STCH基因第5外显子 4 4 5bp片段。序列测定显示 ,猪STCH基因与人和小鼠STCH基因分别具有 87 13%和 80 4 5 %的同源性。通过测定和比较中国梅山猪、欧洲约克夏猪及PIC商品猪的STCH基因序列 ,发现在猪STCH基因编码区第 5外显子 10 5 0位点上存在一个单碱基突变位点。利用双向特定等位基因PCR扩增法 (Bi PASA)建立了检测猪STCH基因变异的遗传标记 ,并用该标记分析了STCH基因在中国家猪 (梅山猪、荣昌猪和金华猪 )、欧洲家猪 (约克夏猪、大白猪 )、商品猪 (PIC合成系 )以及欧洲野猪的基因频率和多态性。本研究建立的Bi PASA遗传标记和基因变异信息 ,将为进一步分析猪STCH基因变异与经济性状的相关分析提供基础资料。 展开更多
关键词 stch基因 Bi-PASA 遗传多态性 遗传标记 微粒体应激70蛋白三磷酸腺苷酶 经济性状
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Study on Genetic Marker Bi-PASA of Porcine STCH Gene 被引量:1
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作者 Nunu SUN Shuren SI 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2019年第6期6-8,14,共4页
[Objectives] This study was conducted to establish the genetic marker Bi-PASA of STCH gene in Jinfen white pig and New Shanxi black pig. [Methods] The polymorphism of STCH gene was detected in Jinfen white pig and New... [Objectives] This study was conducted to establish the genetic marker Bi-PASA of STCH gene in Jinfen white pig and New Shanxi black pig. [Methods] The polymorphism of STCH gene was detected in Jinfen white pig and New Shanxi black pig by bidirectional PCR amplification of specific alleles. [Results] There were two alleles(A, B) and three genotypes(AA, AB and BB) in Jinfen white pig and New Shanxi black pig. The PopGene32 analysis showed that the polymorphic site of STCH gene in Jinfen white pig accorded with the Hardy-Weinberg equilibrium(P>0.05), while that of new Shanxi black pig did not meet the Hardy-Weinberg equilibrium(P<0.01). The results of chi-square test showed that the polymorphic site of STCH gene was significantly different in genotype distribution between the two pig breeds(P<0.01). [Conclusions] The establishment of the genetic marker Bi-PASA of STCH gene in Jinfen white pig and new Shanxi black pig could provide basic biological data for improving disease resistance of pigs and establishing disease-resistant populations. 展开更多
关键词 stch Jinfen white pig New Shanxi black pig Bi-PASA POLYMORPHISM
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肖噪STCH TA625C音箱
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《音响世界》 2002年第10期149-149,共1页
关键词 肖嗓公司 stch TA625C音箱
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白血病患者血浆胆固醇水平的观察
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作者 吴东 赵小英 王世泂 《浙江实用医学》 1998年第3期26-27,共2页
胆固醇是细胞膜的重要组成成份,白血病患者胆固醇代谢异常,表现为低胆固醇血症已有报道。本文检测了初发和缓解期白血病患者血浆总胆固醇浓度(Serum total cholesterol,STCH),并将该结果做一初步探讨。 1 材料和方法 1.1 对象 初发白... 胆固醇是细胞膜的重要组成成份,白血病患者胆固醇代谢异常,表现为低胆固醇血症已有报道。本文检测了初发和缓解期白血病患者血浆总胆固醇浓度(Serum total cholesterol,STCH),并将该结果做一初步探讨。 1 材料和方法 1.1 对象 初发白血病75例。 展开更多
关键词 白血病 血浆 胆固醇 stch
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