目的探讨反义Stathmin基因的核酸(antisense of stathmin ologodeoxynucleotides,ASODN)对人胃癌细胞系生长的影响及对裸鼠体内肿瘤生长的作用。方法免疫组化检测2010-01-2013-06山东省千佛山医院40例胃癌标本中癌组织及癌旁组织中Stath...目的探讨反义Stathmin基因的核酸(antisense of stathmin ologodeoxynucleotides,ASODN)对人胃癌细胞系生长的影响及对裸鼠体内肿瘤生长的作用。方法免疫组化检测2010-01-2013-06山东省千佛山医院40例胃癌标本中癌组织及癌旁组织中Stathmin的表达;以人胃癌MCG803细胞系为靶细胞,分为ASODN转染细胞组、SODN转染组及未转染组3组,ASODN为阻断剂,观察ASODN对胃癌细胞的增殖的影响;40只腹腔种植胃癌细胞的裸鼠随机分为2组,观察转染ASODN在裸鼠体内对肿瘤生长的影响。结果Stathmin在胃癌组织中的阳性表达率为77.5%(32/40),显著高于癌旁组织的32.5%(13/40),差异有统计学意义,P<0.001;未转染组及SODN转染组胃癌细胞倍增时间(20h)明显短于ASODN转染组(27h);随时间进展,ASODN转染组细胞增殖能力均受抑制,差异有统计学意义,P<0.001;转染ASODN胃癌细胞裸鼠的肿瘤组织体积平为(2.98±0.12)mm3,小于未转染ASODN组肿瘤组织(7.61±0.21)mm3,P=0.036。结论 ASODN对胃癌细胞的生长有抑制的作用,有望成为胃癌治疗的新靶点,以提高胃癌患者的生存时间。展开更多
目的探讨以RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术靶向stathmin和mdr1基因逆转卵巢癌细胞紫杉醇耐药的可行性。方法分别构建靶向stathmin和mdr1基因的质粒:pGU6-GFP-neo-ST-MN1和pGU6-GFP-neo-MDR1;将质粒转染到卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV...目的探讨以RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术靶向stathmin和mdr1基因逆转卵巢癌细胞紫杉醇耐药的可行性。方法分别构建靶向stathmin和mdr1基因的质粒:pGU6-GFP-neo-ST-MN1和pGU6-GFP-neo-MDR1;将质粒转染到卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV3/TAX。Real-ti me RT-PCR检测stathminm和mdr1的mRNA变化;Western blot检测其蛋白表达变化;荧光显微镜检测细胞凋亡情况;CCK-8法分析细胞对紫杉醇的敏感度。结果 Real-ti me RT-PCR及Western blot显示pGU6-GFP-neo-MDR1质粒对mdr1基因,pGU6-GFP-STMN1-294shRNA质粒对stathmin基因在mR-NA水平和蛋白水平均有明显抑制(P<0.05),荧光显微镜下共转染组细胞凋亡增多,CCK-8示共转染组逆转紫杉醇耐药效果最明显。结论体外RNAi可有效沉默卵巢癌紫杉醇耐药株SKOV3/TAX细胞内stathmin基因和mdr1基因,逆转其紫杉醇耐药。展开更多
文摘目的探讨反义Stathmin基因的核酸(antisense of stathmin ologodeoxynucleotides,ASODN)对人胃癌细胞系生长的影响及对裸鼠体内肿瘤生长的作用。方法免疫组化检测2010-01-2013-06山东省千佛山医院40例胃癌标本中癌组织及癌旁组织中Stathmin的表达;以人胃癌MCG803细胞系为靶细胞,分为ASODN转染细胞组、SODN转染组及未转染组3组,ASODN为阻断剂,观察ASODN对胃癌细胞的增殖的影响;40只腹腔种植胃癌细胞的裸鼠随机分为2组,观察转染ASODN在裸鼠体内对肿瘤生长的影响。结果Stathmin在胃癌组织中的阳性表达率为77.5%(32/40),显著高于癌旁组织的32.5%(13/40),差异有统计学意义,P<0.001;未转染组及SODN转染组胃癌细胞倍增时间(20h)明显短于ASODN转染组(27h);随时间进展,ASODN转染组细胞增殖能力均受抑制,差异有统计学意义,P<0.001;转染ASODN胃癌细胞裸鼠的肿瘤组织体积平为(2.98±0.12)mm3,小于未转染ASODN组肿瘤组织(7.61±0.21)mm3,P=0.036。结论 ASODN对胃癌细胞的生长有抑制的作用,有望成为胃癌治疗的新靶点,以提高胃癌患者的生存时间。
文摘目的探讨以RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术靶向stathmin和mdr1基因逆转卵巢癌细胞紫杉醇耐药的可行性。方法分别构建靶向stathmin和mdr1基因的质粒:pGU6-GFP-neo-ST-MN1和pGU6-GFP-neo-MDR1;将质粒转染到卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV3/TAX。Real-ti me RT-PCR检测stathminm和mdr1的mRNA变化;Western blot检测其蛋白表达变化;荧光显微镜检测细胞凋亡情况;CCK-8法分析细胞对紫杉醇的敏感度。结果 Real-ti me RT-PCR及Western blot显示pGU6-GFP-neo-MDR1质粒对mdr1基因,pGU6-GFP-STMN1-294shRNA质粒对stathmin基因在mR-NA水平和蛋白水平均有明显抑制(P<0.05),荧光显微镜下共转染组细胞凋亡增多,CCK-8示共转染组逆转紫杉醇耐药效果最明显。结论体外RNAi可有效沉默卵巢癌紫杉醇耐药株SKOV3/TAX细胞内stathmin基因和mdr1基因,逆转其紫杉醇耐药。
