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应用SSP-PCR/SSO方法进行中国辽宁汉族人HLA-DRB1基因的遗传多态性研究 被引量:8
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作者 刘利民 梁健 +1 位作者 宋芳吉 贾静涛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期20-24,共5页
对159名中国辽宁汉族个体的基因组DNA进行分析,共检出42种等位基因,其中以DRB109012(12.8%)、0701(10.7%)、1501(10.4%)最为常见,其次为DRB11201(79%)、1... 对159名中国辽宁汉族个体的基因组DNA进行分析,共检出42种等位基因,其中以DRB109012(12.8%)、0701(10.7%)、1501(10.4%)最为常见,其次为DRB11201(79%)、1202(75%)、1101(66%)、0301(5.0%)。并发现辽宁汉族人DRB1等位基因频率与白种人间存在明显差异,揭示不同人种有其自己的主要等位基因。 展开更多
关键词 HLA-DRB1 基因分型 ssp-pcr 遗传多态性
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SSP-PCR方法检测HLA-B27基因在AS早期诊断中的临床应用
2
作者 郭华 王涛 +5 位作者 张海祥 赵院利 张小艳 刘杨 刘宗智 胡军 《现代检验医学杂志》 CAS 2014年第4期27-29,共3页
目的 验证分子学方法序列特异引物聚合酶链反应(SSP-PCR)在强制性脊柱炎(AS)早期诊断中的临床应用.方法 收集陕西省人民医院2013年1月~12月疑似强直性脊柱炎患者135例,分别采用SSP PCR方法检测全血人类白细胞抗原B27位点(HLA-B27... 目的 验证分子学方法序列特异引物聚合酶链反应(SSP-PCR)在强制性脊柱炎(AS)早期诊断中的临床应用.方法 收集陕西省人民医院2013年1月~12月疑似强直性脊柱炎患者135例,分别采用SSP PCR方法检测全血人类白细胞抗原B27位点(HLA-B27)和进行影像学骨盆、骶髂关节的X线、CT或者MRI检查,比较SSP PCR方法和影像学方法诊断的一致性及差异性.结果 疑似患者用SSP PCR方法检测HLA-B27的阳性检出率为37.0%,而影像学方法的诊断异常率为23.7%,SSP-PCR方法的阳性率较影像学方法高出13.3%.经配对X2检验,X2=9.529,P=0.003,<0.01,两种方法阳性检出率差异具有统计学意义.结论 分子学方法检测HLA-B27基因能够用于早期预测AS的发生. 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 人类白细胞抗原B27位点(HLA-B27) 序列特异引物聚合酶链反应(ssp-pcr) 早期诊断
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玉米S组CMS胞质与正常胞质育性相关基因基于SSP-PCR的遗传多型性研究
3
作者 李镭 郑用琏 张方东 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期681-686,共6页
利用 SSP- PCR技术对 S组 CMS与正常胞质线粒体胞质育性相关基因 cox ,cox 的 5′上游、 3′下游以及基因编码区与正常 N胞质进行了遗传多型性的比较研究。结果表明在所选用的 (特异引物 +随机引物 )的引物组合中 ,未能在 cox 基因的 ... 利用 SSP- PCR技术对 S组 CMS与正常胞质线粒体胞质育性相关基因 cox ,cox 的 5′上游、 3′下游以及基因编码区与正常 N胞质进行了遗传多型性的比较研究。结果表明在所选用的 (特异引物 +随机引物 )的引物组合中 ,未能在 cox 基因的 5′上游和 3′下游区发现变异 ,但其基因内含子中存在基于 SSP- PCR的遗传多型性。在 S组不育系的 cox 基因 5′上游调控区内 ,由于复杂的重组事件而导致翻译起始密码 ATG和富含 AT的核糖体结合区域的缺失。讨论了 SSP- PCR技术作为揭示和分析某一目的基因的遗传变异的有效性与准确性 ,以及 cox 基因在表达水平上的变异可能与玉米 展开更多
关键词 玉米 CMS COX ssp-pcr 遗传多型性
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SSP-PCR方法中两种不同引物检测人类白细胞抗原B27的比较研究 被引量:1
4
作者 周华蓉 陈勇 《福建医药杂志》 CAS 2009年第6期97-98,共2页
目的用序列特异引物聚合酶链反应(SSP-PCR)方法检测人类白细胞抗原B27(HLA-B27)表达情况,探讨使用不同引物检测HLA-B27用于强直性脊柱炎鉴别诊断的敏感性及特异性。方法使用两种不同特异性引物测定强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27,比较其... 目的用序列特异引物聚合酶链反应(SSP-PCR)方法检测人类白细胞抗原B27(HLA-B27)表达情况,探讨使用不同引物检测HLA-B27用于强直性脊柱炎鉴别诊断的敏感性及特异性。方法使用两种不同特异性引物测定强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27,比较其检测的阳性率,结合临床诊断判断准确性。结果HLA-B27新引物应用检测的敏感性、特异性均高于原引物。结论新设计序列特异性引物的应用更适宜于临床检验和研究工作。 展开更多
关键词 HLA-B27 序列特异性聚合酶链反应 强直性脊柱炎
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江苏地区献血人群Mur血型抗原的筛查研究 被引量:1
5
作者 邵雷 刘太香 +3 位作者 马玲 赵芳 张若洋 林红 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第4期1150-1154,共5页
目的:了解江苏地区献血人群中Mur血型抗原的分布情况。方法:提取江苏地区1114例献血者全血基因组DNA,使用PCR-SSP法扩增GYP.Mur,利用直接测序法对PCR产物进行基因分析,计算GP.Mur在江苏献血人群中的频率。结果:在随机挑选的1114例献血... 目的:了解江苏地区献血人群中Mur血型抗原的分布情况。方法:提取江苏地区1114例献血者全血基因组DNA,使用PCR-SSP法扩增GYP.Mur,利用直接测序法对PCR产物进行基因分析,计算GP.Mur在江苏献血人群中的频率。结果:在随机挑选的1114例献血者标本中扩增出11例阳性条带,通过直接测序分析发现,11例阳性标本中有4例基因型为纯合GYP.Mur,3例为杂合GYP.Mur,其余4例为GYP.HF。结论:本研究分析了Mur血型抗原的分布情况,初步获得了GP.Mur抗原在江苏献血人群中的频率,对该血型的进一步深入研究有利于更好地指导临床用血以及保障输血安全。 展开更多
关键词 献血者 GP.Mur抗原 PCR-SSP 输血安全
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PCR-SSP技术联合抗人球蛋白卡式法在ABO和RhD血型鉴定困难患者中的应用 被引量:1
6
作者 向健 王晶 +1 位作者 王俊 田文武 《中南医学科学杂志》 2024年第6期972-975,共4页
目的探究聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术联合抗人球蛋白卡式法在ABO和RhD血型鉴定困难患者中的应用。方法选取118例ABO与RhD血型鉴定困难患者血型标本,分别应用PCR-SSP技术、抗人球蛋白卡式法分析患者血型情况。结果118例血... 目的探究聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术联合抗人球蛋白卡式法在ABO和RhD血型鉴定困难患者中的应用。方法选取118例ABO与RhD血型鉴定困难患者血型标本,分别应用PCR-SSP技术、抗人球蛋白卡式法分析患者血型情况。结果118例血型鉴定困难者采用抗人球蛋白卡式法联合PCR-SSP技术明确检出ABO血型113例,同时应用PCR-SSP可以确定ABO亚型,5例未检出血型的样品经PCR-SSP测序发现,基因分型分别为BO02、A205O01、A102B01、A201B01、B01B01,分别出现第7外显子640A>G杂合突变、第7外显子1009A>G杂合突变、第3外显子150G>C杂合突变、第6外显子240T>C、第7外显子431G>T杂合突变;采用抗人球蛋白卡式法联合PCR-SSP检出RhD血型114例,未检出的4例进行测序,1例显示为RhD weak D 779A/G突变;3例为RhD weak D type 4.0(包括602C/G、667T/G以及819G/A突变)。结论ABO和RhD血型鉴定困难患者应用PCR-SSP技术联合抗人球蛋白卡式法进行鉴定可以准确鉴定血型,并发现血型具体亚型,保证输血安全。 展开更多
关键词 PCR-SSP技术 抗人球蛋白卡式法 ABO血型 RHD血型 血型鉴定困难
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应用Q-PCR定性检测KIR基因有无方法的建立
7
作者 李宇楠 甄建新 +2 位作者 梁爽 喻琼 邓志辉 《中国输血杂志》 CAS 2024年第6期660-665,共6页
目的建立定性检测KIR基因有无的Q-PCR方法。方法根据高分辨水平中国人群KIR等位基因的多态性,并参考国际IPD-KIR数据库,针对16种KIR基因及2DS4-Normal、2DS4-Deleted两种亚型,设计KIR基因特异性引物用于Q-PCR扩增反应;同时设置一孔阴性... 目的建立定性检测KIR基因有无的Q-PCR方法。方法根据高分辨水平中国人群KIR等位基因的多态性,并参考国际IPD-KIR数据库,针对16种KIR基因及2DS4-Normal、2DS4-Deleted两种亚型,设计KIR基因特异性引物用于Q-PCR扩增反应;同时设置一孔阴性对照、一孔阳性对照(特异性扩增人体生长激素HGH基因片段),以监控假阳性、假阴性的结果。为验证Q-PCR方法的可靠性,随机选择302份已采用KIR PCR-SSP商品化试剂盒检测的标本,采用Q-PCR方法盲检和对比。结果300人份的Q-PCR检测结果与已知的PCR-SSP检测结果相符,有2份标本结果不一致,其中1例标本的2DS5基因Q-PCR检测结果为阴性,而PCR-SSP检测结果为阳性;另一例标本2DS1基因Q-PCR检测结果为阳性,而PCR-SSP检测结果为阴性。对2份标本分别进行2DS5、2DS1基因测序分型,证实Q-PCR定性检测结果正确。结论本文建立的KIR Q-PCR方法结果准确、可靠,可用于KIR基因有无的定性检测。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR) KIR基因有无 实时荧光定量-PCR 序列特异性引物-PCR 测序分型
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启动子克隆方法研究进展 被引量:20
8
作者 李姗姗 迟彦 +4 位作者 李凌飞 马玺 平文祥 于冲 周东坡 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期9-16,共8页
启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要组成部分。启动子的克隆对于构建基因工程载体,表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多,从常用的利用启动子探针型载体筛选启动子到PCR方法的应用,此后... 启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要组成部分。启动子的克隆对于构建基因工程载体,表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多,从常用的利用启动子探针型载体筛选启动子到PCR方法的应用,此后相继问世的一些基于PCR法的克隆启动子技术,像I-PCR、P-PCR、SSP-PCR、YADE、TAIL-PCR等,为克隆启动子提供了更可靠,更合理的方法。对这几种方法进行了简要综述,比较了不同方法的优缺点,并展望了今后的研究前景。 展开更多
关键词 研究进展 克隆方法 启动子探针型载体 TAIL-PCR ssp-pcr 基因表达调控 基因工程载体 启动子克隆 PCR方法 顺式元件 组成部分 表达载体 目的蛋白 PCR法 研究前景 优缺点
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在中国人群中首次发现1例Rh血型弱D12型 被引量:16
9
作者 孙国栋 景海珍 +8 位作者 熊文 张彦平 尹志柱 牛小利 邵超鹏 李艳凤 段现民 赵有良 牛海江 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2006年第1期14-17,共4页
目的分析鉴定1名RhD抗原弱阳性个体的血型血清学表型及分子背景。方法采用常规血型血清学技术检测Rh D、C、c、E、e抗原表型;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(SSP-PCR)方法同时检测RHD基因和RHCE基因,并测序分析RHD基因全长编码区序列... 目的分析鉴定1名RhD抗原弱阳性个体的血型血清学表型及分子背景。方法采用常规血型血清学技术检测Rh D、C、c、E、e抗原表型;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(SSP-PCR)方法同时检测RHD基因和RHCE基因,并测序分析RHD基因全长编码区序列;同时通过特异性PCR技术测定RHD合子型或RHD基因数目。结果血型血清学试验证实该标本为D抗原弱阳性表型,与相应Rh抗血清反应为C-c+E+e+;SSP-PCR检测显示RhCcEe基因定型结果与血型血清学完全一致,且有完整的RHD基因;但RHD基因全长编码区序列分析发现该标本的RHD第6外显子存在1处碱基突变:830G>A,编码区序列其它部分与正常RHD序列相同;RHD杂合性试验鉴定显示为RHD+/RHD-杂合型,推测该个体基因型可能为DcE/dce。结论对照国内外文献报道和GenBank记录的基因序列,该个例为在中国人群中首次发现的弱D12型。 展开更多
关键词 RH血型 弱D型 RHD基因 RHCE基因 基因突变 序列分析 ssp-pcr
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家蚕微粒子病原虫(Nosema bombycis)小亚基核糖体RNA全基因的克隆及其二级结构的构建 被引量:15
10
作者 王见杨 黄可威 陆长德 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期290-295,共6页
在用PCR技术扩增、克隆、测序了家蚕微粒子病原虫Nosemabombycis (镇江株 )小亚基核糖体RNA基因核心序列(5′ 端起 12 0 0bp)的基础上 ,用SSP PCR技术克隆了核心序列 3′ 端下游序列 ,从而获得了家蚕微粒子病原虫小亚基核糖体RNA基因的... 在用PCR技术扩增、克隆、测序了家蚕微粒子病原虫Nosemabombycis (镇江株 )小亚基核糖体RNA基因核心序列(5′ 端起 12 0 0bp)的基础上 ,用SSP PCR技术克隆了核心序列 3′ 端下游序列 ,从而获得了家蚕微粒子病原虫小亚基核糖体RNA基因的全序列共 12 33bp。用RnaViz、Forcon、DCSE等生物软件构建了家蚕微粒子病原虫小亚基核糖体RNA的二级结构 ,与其它微孢子虫及真核生物小亚基核糖体RNA的二级结构相比 ,该二级结构缺乏螺旋 10、E10 1、 11、 18、E2 3 n和43。 展开更多
关键词 家蚕微粒子病原虫 ssp-pcr 小亚基核糖体RNA SSUrRNA 全基因 二级结构 螺旋
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IL-10基因启动子区G-1082A及C-592A多态性与IgA肾病相关性研究 被引量:6
11
作者 王牡丹 许菲菲 +2 位作者 章建娜 陈必成 董芍芍 《中国中西医结合肾病杂志》 2008年第9期782-784,共3页
目的:探讨IL-10基因启动子区域G-1082A、C-592A多态性与汉族人群IgA肾病(IgAN)发病间关系。方法:用SSP-PCR方法对180例IgA肾病(IgAN)患者和163例健康对照组IL-10基因启动子区域-1082、-592位点单核苷酸多态性进行分析。结果:-108... 目的:探讨IL-10基因启动子区域G-1082A、C-592A多态性与汉族人群IgA肾病(IgAN)发病间关系。方法:用SSP-PCR方法对180例IgA肾病(IgAN)患者和163例健康对照组IL-10基因启动子区域-1082、-592位点单核苷酸多态性进行分析。结果:-1082位点IgA肾病患者AG/GG基因型频率显著高于正常对照组(为21.0% vs 11.7%,P〈0.05);-1082位点G等位基因频率显著高于正常对照组(为11.0% vs 6.4%,P〈0.01);携带有G等位基因者患IgA肾病危险性是携带有A等位基因者1.8倍,95%CI为1.12-3.20。-592位点IgA肾病患者AA、CA、CC基因型与正常对照组相比,无统计学差异(11.11% vs 16.56%;46.67% vs 51.53%;42.22% vs 31.90%,P〉0.05);-592位点C等位基因频率与正常对照组相比,无统计学差异(32.21% vs 32.50%,P〉0.05)。结论:IL-10基因G-1082A是中国汉族人群IgA肾病患者的易感基因,携带G等位基因者患IgA肾病的危险性是携带A等位基因者的1.8倍。 展开更多
关键词 IGA肾病 白细胞介素-10 基因多态性 ssp-pcr
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118例汉族人群IAT检测RhD阴性个体RHD基因多态性分析 被引量:5
12
作者 孙国栋 尹志柱 +3 位作者 张彦平 牛小利 王晓平 王学刚 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2007年第4期292-294,共3页
目的观察汉族人群IAT检测RhD阴性个体RHD基因多态性。方法采用常规血清学技术检测RhD、C、c、E、e抗原表型;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法同时检测RHD基因和RHCE基因。结果抗球蛋白试验(IAT)证实的118例RhD阴性个体中,P... 目的观察汉族人群IAT检测RhD阴性个体RHD基因多态性。方法采用常规血清学技术检测RhD、C、c、E、e抗原表型;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法同时检测RHD基因和RHCE基因。结果抗球蛋白试验(IAT)证实的118例RhD阴性个体中,PCR-SSP方法检测RHD基因结果有28例Del表型个体(23.7%)。在余下的90份真正RhD阴性标本中,有69份标本(76.7%)RHD基因完全缺失;21份标本带有不表达RHD基因。Del表型个体均带有C抗原,带有不表达RHD基因的真正RhD阴性个体大多表现为RhC阳性。结论汉族人群IAT证实的RhD阴性个体呈现RHD基因结构多态性,不表达RHD基因主要以RHD-CE(2-9)-D2为主。 展开更多
关键词 RHD基因 RHCE基因 Del基因 不表达基因 ssp-pcr
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广西壮族慢性乙型病毒性肝炎与HLA-DQA1基因相关性研究 被引量:3
13
作者 韦康来 陈智平 +1 位作者 秦雪 李山 《标记免疫分析与临床》 CAS 2009年第4期230-233,共4页
探讨人类白细胞抗原Ⅱ类分子HLA-DQA1基因与广西地区壮族人群乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性。采用序列特异性引物-聚合酶链式反应(ssp-PCR)法检测30名壮族健康人和90例壮族慢性乙型病毒性肝炎患者HLA-DQA1等位点进行基因分析研究。结... 探讨人类白细胞抗原Ⅱ类分子HLA-DQA1基因与广西地区壮族人群乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性。采用序列特异性引物-聚合酶链式反应(ssp-PCR)法检测30名壮族健康人和90例壮族慢性乙型病毒性肝炎患者HLA-DQA1等位点进行基因分析研究。结果显示,HLA-DQA1*0103等位基因的频率较正常对照组明显升高(P<0.05);而HLA-DQA1*0102等位基因的频率较正常对照组明显降低(P<0.01)。结论:DQA1*0103可能是广西壮族慢性乙型病毒性肝炎患者易感基因,DQA1*0102可能是保护基因。 展开更多
关键词 慢性乙型病毒性肝炎 人类白细胞抗原 ssp-pcr 壮族
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山西省部分地区汉族人群血小板特异性抗原基因多态性研究 被引量:4
14
作者 李超 周永安 +5 位作者 贾彩虹 刘志鹏 刘培贤 李敏 田树雄 侯霞 《中国优生与遗传杂志》 2017年第4期23-25,共3页
目的研究山西省汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性分布特点,丰富血小板人类遗传学资料,同时为山西地区患者血小板配型提供参考依据。方法本研究使用序列特异性引物-聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法,对山西150例汉族成年人进行血小... 目的研究山西省汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性分布特点,丰富血小板人类遗传学资料,同时为山西地区患者血小板配型提供参考依据。方法本研究使用序列特异性引物-聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法,对山西150例汉族成年人进行血小板特异性抗原基因分型检测。结果山西汉族人群血小板特异性抗原HPA 1-17位点中,HPA 1-6,157个位点呈现多态性,基因频率分别是1a 0.997、1b 0.003、2a 0.980、2b 0.020、3a 0.563、3b 0.437、4a0.997、4b 0.003、5a 0.960、5b 0.040、6a 0.970、6b 0.030、15a 0.490、15b 0.510。结论山西省汉族人群血小板特异性抗原有其特有的地域特点,人类血小板特异性抗原基因有明显的地域种族多态性分布规律。 展开更多
关键词 血小板特异性抗原 ssp-pcr 基因多态性
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寡核苷酸DNA Microarray用于HLA DRB1基因分型的研究 被引量:17
15
作者 陈君男 李瑶 +5 位作者 李亚莉 秦红友 李荣宇 曹慧敏 谢毅 毛裕民 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期887-894,共8页
对寡核苷酸DNAMicroarray用于HLADRB1基因分型的技术进行研究。常规的酚 /氯仿法提取标准血样基因组DNA ,在DRB1的exon 2区域设计一对引物 ,经PCR扩增基因组相应区段并用Cy5 dCTP进行标记。设计寡核苷酸分型探针 ,将探针固定在APS PDC... 对寡核苷酸DNAMicroarray用于HLADRB1基因分型的技术进行研究。常规的酚 /氯仿法提取标准血样基因组DNA ,在DRB1的exon 2区域设计一对引物 ,经PCR扩增基因组相应区段并用Cy5 dCTP进行标记。设计寡核苷酸分型探针 ,将探针固定在APS PDC法制作的DNAMicroarray上 ,用标记的PCR产物与之杂交 ,扫描仪对杂交结果进行扫描 ,Imagene软件对杂交图象进行分析。共检测了 33例标准血样的HLADRB1基因型。检测结果证明研制的DNAMicroarray准确、灵敏。DNAMicroarray技术可以有效地检测DRB1等位基因 ,对比常规的PCR SSP和PCR SSO方法、分型基因芯片方法更为直观 。 展开更多
关键词 HLA DRB1 等位基因 基因分型 寡核苷酸DNA微阵列 PCR-SSP PCR-SSO 基因分型
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抗癫痫药物等引发药疹与人类白细胞抗原基因的相关性研究 被引量:14
16
作者 吴培培 李奕 +2 位作者 杨飞 乔海灵 杨静 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期113-117,共5页
目的探讨抗癫痫药物等引发药疹与HLA基因多态性的相关性,以期为药疹的预防和治疗提供依据。方法收集48例药疹患者,采用PCR-SSP方法检测HLA-B*1502、HLA-A*0206、HLA-A*3101、HLA-A*1101、HLA-B*5901、HLA-Cw*0704、HLA-Cw*0801、HLA-DRB... 目的探讨抗癫痫药物等引发药疹与HLA基因多态性的相关性,以期为药疹的预防和治疗提供依据。方法收集48例药疹患者,采用PCR-SSP方法检测HLA-B*1502、HLA-A*0206、HLA-A*3101、HLA-A*1101、HLA-B*5901、HLA-Cw*0704、HLA-Cw*0801、HLA-DRB1*1202等8个等位基因。采用RT-PCR检测HLA-B*1502基因阳性者中mRNA表达水平。结果药物引发的药疹可能与HLA-B*1502、HLA-Cw*0801、HLA-A*0206和HLA-Cw*0704等位基因相关(P<0.05);其中抗癫痫药物引发的重症药疹与HLA-B*1502等位基因的相关性最强(P<0.01);且抗癫痫药物引发的重症药疹HLA-B*1502 mRNA的表达水平明显高于耐受组及对照组(P<0.01)。结论抗癫痫药物引发的重症药疹与HLA-B*1502等位基因密切相关。HLA-B*1502mRNA表达水平可以作为预测抗癫痫药物诱发重症药疹的重要指标。 展开更多
关键词 药疹 基因多态性 抗癫痫药物 HLA PCR-SSP RT—PCR
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先天性脊柱骨骺发育不良的产前快速分子诊断 被引量:14
17
作者 崔英霞 夏欣一 +6 位作者 杨滨 卢洪涌 史轶超 梁泉 姚兵 李晓军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2008年第10期1049-1052,共4页
目的:对先天性脊柱骨骺发育不良提供1种快速分子产前诊断技术。方法:对该患者于孕14周进行羊膜囊穿刺,获取羊水20 ml,提取羊水细胞基因组DNA。选用3个短串连重复(STR)序列位点,进行荧光PCR检测,以排除母源细胞污染。在此基础上,对COL2A... 目的:对先天性脊柱骨骺发育不良提供1种快速分子产前诊断技术。方法:对该患者于孕14周进行羊膜囊穿刺,获取羊水20 ml,提取羊水细胞基因组DNA。选用3个短串连重复(STR)序列位点,进行荧光PCR检测,以排除母源细胞污染。在此基础上,对COL2A1基因的第23外显子进行扩增,并以此为模板,针对COL2A1基因的第23外显子1510G→A的突变进行SSP-PCR。根据是否存在特异性的扩增条带进行判断,对初次扩增的产物测序,以证实巢式SSP-PCR的结果。结果:对D13S 317、D18S51和D21S11位点的STR检测结果排除母源细胞的污染。羊水样本仅在野生型反应管中有扩增产物,表明胎儿是COL2A1基因的第23外显子1510 G的纯合子,未带COL2A1基因的第23外显子1510G→A的突变。测序结果与SSP-PCR结果一致。结论:SSP-PCR技术快速简便、敏感特异,可作为该突变的快速分子诊断。其他已知点突变遗传病的快速分子诊断也可以考虑使用SSP-PCR技术进行。 展开更多
关键词 先天性脊柱骨骺发育不良 快速分子诊断 产前 COL2A1基因 巢式序列特异引物扩增 序列分析
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别嘌醇引发严重皮肤不良反应标志基因HLA-B*5801的检测方法研究 被引量:7
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作者 曾大勇 王长连 +2 位作者 黄品芳 刘亦伟 陈丹丹 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2015年第6期700-704,共5页
目的建立准确、快速、经济的别嘌醇引发严重皮肤不良反应标志基因HLA-B*5801检测方法。方法收集2012年1月—2014年12月福建汉族人群中服用单一别嘌醇致严重皮肤不良反应患者血清样本14例,并随机抽取同期服用别嘌醇14 d未出现皮肤不良反... 目的建立准确、快速、经济的别嘌醇引发严重皮肤不良反应标志基因HLA-B*5801检测方法。方法收集2012年1月—2014年12月福建汉族人群中服用单一别嘌醇致严重皮肤不良反应患者血清样本14例,并随机抽取同期服用别嘌醇14 d未出现皮肤不良反应的患者30例。入组患者DNA分别用聚合酶链-顺序特异性引物反应法(PCR-SSP)、聚合酶链-限制性长度多态性法(PCR-RFLP)和聚合酶链-直接测序法(PCR-SBT)检测HLA-B*5801基因。对检测结果的准确性,方法的操作性及经济性等进行比较分析。结果 3种方法取得一致的检测结果,别嘌醇重症药疹患者100%(14/14)携带HLA-B*5801基因,而别嘌醇耐受患者23.33%(7/30)携带该基因(OR=90.87,敏感度=100%,专属性=76.67%)。结论PCR-SSP法和PCR-RFLP法均能筛检HLA-B*5801,都属于快速、经济,特异性高、操作简便、实验条件稳定的检测方法,非常适合于一般条件的临床推广使用,具有一定应用价值。 展开更多
关键词 别嘌醇 严重皮肤不良反应 HLA-B*5801 聚合酶链-顺序特异性引物反应法 聚合酶链-限制性长度多态性法
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PCR-SSP法检测A^(1,2)BO^(1,2)血型基因型 被引量:21
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作者 朱发明 傅启华 +1 位作者 金蕾 严力行 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期267-269,共3页
目的 为了建立A1,2 BO1,2 血型系统基因分型的方法 ,以检测人群中A1、A2 、B、O1、O2 基因的频率。方法 采用盐析法进行样品DNA的抽提 ,采用PCR SSP法进行A1,2 BO1,2 血型基因分型。结果  15 8例中A1,2 BO1,2 系统基因频率分别是A1为... 目的 为了建立A1,2 BO1,2 血型系统基因分型的方法 ,以检测人群中A1、A2 、B、O1、O2 基因的频率。方法 采用盐析法进行样品DNA的抽提 ,采用PCR SSP法进行A1,2 BO1,2 血型基因分型。结果  15 8例中A1,2 BO1,2 系统基因频率分别是A1为 18 7% ,A2 为 0 6 % ,B为 17 4% ,O1为 6 2 3% ,O2 为 0 9%。结论 该方法可鉴定出A1,2 BO1,2 血型系统基因 ,中国人群中存在O2 基因。 展开更多
关键词 ABO血型 O^2亚型 PCR-SSP法 基因分型
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一种新的HLA─Ⅱ类基因分型方法——PCR/SSP技术的建立 被引量:41
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作者 熊平 扬颖 龚非力 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期258-261,共4页
PCR/SSP(Sequencespecificprimer,序列特异性引物)是一种新的基因多态性分析技术,可用于HLA复合体及其他具有多态性特点的基因分型。我室于1993年建立这种方法,并对正常人、重症肌无力患者、... PCR/SSP(Sequencespecificprimer,序列特异性引物)是一种新的基因多态性分析技术,可用于HLA复合体及其他具有多态性特点的基因分型。我室于1993年建立这种方法,并对正常人、重症肌无力患者、全身性红斑狼疮患者、骨髓移植供/受者进行了HLA-DRB1、-DQB1基因型别分析。与其它HLA基因分型方法相比,PCR/SSP具有简便、快速、准确及重复性好等特点。本文介绍PCR/SSP技术的原理、方法、特点以及常见问题的处理。 展开更多
关键词 PCR/SSP HLA分型 HLA-DRB1 基因分型
暂未订购
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