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电针对溃疡性结肠炎模型小鼠IL-4/STAT6/SPDEF通路相关蛋白表达的影响
1
作者 胡晓妹 易细芹 +4 位作者 展立芬 李芊 丁强盛 邓石峰 张泓 《中国中医药信息杂志》 2025年第3期112-118,共7页
目的观察电针对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠IL-4/STAT6/SPDEF通路相关蛋白表达的影响,探讨其改善肠黏液屏障的作用机制。方法48只BALB/c小鼠随机分为空白组12只和造模组36只,造模组采用3%葡聚糖硫酸钠自由饮用建立UC模型,造模成功后随机... 目的观察电针对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠IL-4/STAT6/SPDEF通路相关蛋白表达的影响,探讨其改善肠黏液屏障的作用机制。方法48只BALB/c小鼠随机分为空白组12只和造模组36只,造模组采用3%葡聚糖硫酸钠自由饮用建立UC模型,造模成功后随机分为模型组、电针组、柳氮磺吡啶(SASP)组,每组12只。电针组针刺“关元”“天枢”“足三里”“上巨虚”,每日20 min,SASP组每日予SASP混悬液(500 mg/kg)灌胃,空白组不干预,模型组仅捆绑,连续7 d。观察小鼠一般状况并进行疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织形态,进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分,AB-PAS染色观察结肠组织杯状细胞数量,免疫荧光染色检测结肠组织黏蛋白2(MUC2)蛋白表达,ELISA测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)含量,Western blot检测结肠组织白细胞介素(IL)-4、信号转导与转录激活因子(STAT)6、上皮特异性ETs转录因子(SPDEF)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠出现黏液便、便血,饮食饮水量减少,体质量下降,DAI、CMDI评分明显升高(P<0.01),肠绒毛脱落坏死,结肠隐窝-绒毛结构破坏,伴有严重中性粒细胞浸润,黏液层变薄,杯状细胞萎缩、数量减少(P<0.01),结肠组织MUC2表达明显降低(P<0.01),血清TNF-α、INF-γ含量明显升高(P<0.01),结肠组织IL-4、STAT6、SPDEF蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,电针组与SASP组小鼠黏液便、便血减轻,体质量升高,DAI、CMDI评分明显降低(P<0.05),肠上皮形态基本正常,腺体结构改善,少量炎性细胞浸润和轻微水肿,黏液层厚度有所恢复,杯状细胞萎缩减轻、数量增加(P<0.05),结肠组织MUC2表达明显升高(P<0.05),血清TNF-α、IFN-γ含量明显降低(P<0.05),结肠组织IL-4、STAT6、SPDEF蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论电针可促进UC模型小鼠肠黏液屏障修复,其机制可能与激活IL-4/STAT6/SPDEF通路相关蛋白表达有关。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 电针 黏液屏障 IL-4/STAT6/spdef通路 杯状细胞 小鼠
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白细胞介素-13对人支气管上皮细胞SPDEF表达的影响及SPDEF在哮喘气道黏液高分泌中的作用 被引量：13
2
作者 程丹 陈恒睿 +3 位作者 王梦玫 李晓尘 王涛 胡克 《临床内科杂志》 CAS 2020年第1期53-56,共4页
目的探讨白细胞介素(IL)-13对人支气管上皮细胞SPDEF表达的影响及SPDEF在哮喘气道黏液高分泌中的作用。方法将人原代支气管上皮细胞(NHBE细胞)分为对照组、IL-13组及IL-13+SPDEF siRNA组。培养28天后,收集NHBE细胞并提取总RNA,采用实时... 目的探讨白细胞介素(IL)-13对人支气管上皮细胞SPDEF表达的影响及SPDEF在哮喘气道黏液高分泌中的作用。方法将人原代支气管上皮细胞(NHBE细胞)分为对照组、IL-13组及IL-13+SPDEF siRNA组。培养28天后,收集NHBE细胞并提取总RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测NHBE细胞SPDEF、粘蛋白MUC5AC及MUC5B mRNA的表达水平,流式细胞术检测MUC5AC阳性细胞数量和免疫荧光强度,免疫荧光染色检测粘蛋白MUC5AC和MUC5B的表达水平。结果IL-13组NHBE细胞SPDEF和MUC5AC mRNA的表达水平、MUC5AC阳性细胞数量和免疫荧光强度均明显高于对照组(P<0.001),而MUC5B mRNA的表达水平明显低于对照组(P<0.05);IL-13+SPDEF siRNA组NHBE细胞SPDEF和MUC5AC mRNA的表达水平、MUC5AC阳性细胞数量和免疫荧光强度均明显低于IL-13组(P<0.001);IL-13+SPDEF siRNA组MUC5B mRNA的表达水平明显低于对照组(P<0.05)。IL-13组NHBE细胞MUC5AC的表达水平明显高于对照组和IL-13+SPDEF siRNA组,而MUC5B的表达水平低于对照组。结论IL-13可能通过诱导人支气管上皮细胞SPDEF上调,促进气道粘蛋白MUC5AC的高表达,引起哮喘气道黏液高分泌。 展开更多
关键词 哮喘 白细胞介素-13 spdef 黏液分泌
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撒坝猪SPDEF基因克隆及其生物信息学分析 被引量：3
3
作者 袁荷梅 李明丽 +7 位作者 马黎 兰国湘 崔艺佳 周晓霞 曾韦植 严达伟 鲁绍雄 董新星 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期1263-1272,共10页
为明确猪SPDEF基因的遗传特性,试验对不同猪种SPDEF基因的CDS区进行序列扩增、测序、拼接,并对撒坝猪SPDEF基因CDS序列进行生物信息学分析。采用PCR直接测序法测定猪SPDEF基因外显子序列,运用SeqMan进行序列拼接。采用生物信息学软件分... 为明确猪SPDEF基因的遗传特性,试验对不同猪种SPDEF基因的CDS区进行序列扩增、测序、拼接,并对撒坝猪SPDEF基因CDS序列进行生物信息学分析。采用PCR直接测序法测定猪SPDEF基因外显子序列,运用SeqMan进行序列拼接。采用生物信息学软件分析撒坝猪SPDEF基因开放阅读框及其编码蛋白的基本理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、亚细胞定位、磷酸化位点、糖基化位点、二级结构、三级结构、功能结构域,并构建系统进化树。结果表明,各猪种SPDEF基因编码区仅在外显子1、2分别检测到1个同义突变(C13971T、C16541T),表明该基因编码区在所检测的猪群中高度保守。生物信息学分析发现,该基因有1个长1 092 bp的完整开放阅读框;SPDEF蛋白中丝氨酸(Ser)含量最高(10.7%),体外理论半衰期为30 h,属于不稳定的亲水性蛋白;该蛋白不存在信号肽及跨膜结构,存在39个潜在的磷酸化位点和1个糖基化位点,亚细胞定位于细胞质;二级结构预测中,参与无规则卷曲的氨基酸最多(55.10%),其次是α-螺旋(28.37%);功能结构域预测发现,该蛋白存在1个ETS功能结构域和1个SAM-PNT功能结构域。系统进化树结果显示,撒坝猪与牛、绵羊和山羊的亲缘关系较近。本研究为进一步分析撒坝猪SPDEF基因的功能奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 撒坝猪 spdef基因 克隆 生物信息学分析
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SPDEF与恶性肿瘤关系的研究进展 被引量：2
4
作者 林玉华 倪振华 +2 位作者 孙亦鹏 毕俊杰(综述) 王雄彪(审校) 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2020年第2期185-188,共4页
含SAM尖端结构域的E26转化特异性因子(SAM pointed domain cintaining Ets transcription factor,SPDEF)是Ets转录因子家族的成员之一。SPDEF又称为前列腺源性Ets因子(Prostate-derived Ets factor,PDEF),最初在前列腺癌中发现,在前列... 含SAM尖端结构域的E26转化特异性因子(SAM pointed domain cintaining Ets transcription factor,SPDEF)是Ets转录因子家族的成员之一。SPDEF又称为前列腺源性Ets因子(Prostate-derived Ets factor,PDEF),最初在前列腺癌中发现,在前列腺癌进展过程中发挥重要作用,作为前列腺特异性抗原基因(PSA)启动子的非雄激素依赖性转录激活因子。目前研究发现SPDEF在前列腺癌、乳腺癌和肺癌等不同组织中发挥抑制肿瘤或促进肿瘤的作用,但其具体机制仍未完全阐明。本文主要介绍SPDEF的结构和SPDEF在不同肿瘤中的调控机制,预期SPDEF在肿瘤中的重要作用,为相关肿瘤的防治提供了新思路。 展开更多
关键词 spdef 恶性肿瘤 调控机制
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SPDEF在气道上皮杯状细胞化生中的作用 被引量：2
5
作者 仲秀华 曾晓宁 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期614-618,共5页
含SAM尖端结构域的E26转化特异性因子(SAM pointed domain containing E26 transformation-specific transcription factor,SPDEF)是ETS转录因子家族的重要成员。最初认为,作为前列腺上皮特异性转录因子,SPDEF调控了前列腺的发育与前列... 含SAM尖端结构域的E26转化特异性因子(SAM pointed domain containing E26 transformation-specific transcription factor,SPDEF)是ETS转录因子家族的重要成员。最初认为,作为前列腺上皮特异性转录因子,SPDEF调控了前列腺的发育与前列腺癌的发生发展。然而,新近研究发现呼吸系统也存在SPDEF表达,对气道上皮的分化起核心作用,尤其是杯状细胞的增生与化生。鉴于杯状细胞对于气道内环境的稳定至关重要,深入理解SPDEF如何参与调控杯状细胞化生,不仅有助于深化对气道异常分泌不同机制的认识,还可为相关呼吸系统疾病的诊治提供新思路。本文通过对近年来SPDEF调控杯状细胞功能的系列研究进行综述,为调控气道分泌新药的研发提供新思路。 展开更多
关键词 杯状细胞 spdef 化生 黏蛋白 异常分泌
原文传递
SPDEF调控小鼠成釉细胞MMP-20基因表达的分子机制研究
6
作者 纪虹利 杜森 +3 位作者 董超 张世龙 靖旭 高玉光 《潍坊医学院学报》 2013年第1期18-21,共4页
目的通过克隆转录因子SPDEF以及其真核表达载体的构建,分析该基因对成釉细胞MMP-20基因表达的影响,为进一步研究转录因子SPDEF在牙釉质形成中发挥的作用奠定基础。方法利用RT-PCR技术从小鼠成釉细胞中获得SPDEF基因,测序正确后克隆至pcD... 目的通过克隆转录因子SPDEF以及其真核表达载体的构建,分析该基因对成釉细胞MMP-20基因表达的影响,为进一步研究转录因子SPDEF在牙釉质形成中发挥的作用奠定基础。方法利用RT-PCR技术从小鼠成釉细胞中获得SPDEF基因,测序正确后克隆至pcDNA3.1/myc-HisA载体中,将重组质粒瞬时转染成釉细胞,并用双荧光素酶报告基因系统检测技术来检测MMP-20启动子区域的转录活性。结果①SPDEF基因经过RT-PCR扩增得到的产物与预期片段978bp相符,将所获得的目的基因与GenBank提供的已知序列(NM:013891.4)完全一致。②重组质粒pcDNA3.1/myc-HisA-SPDEF转染成釉细胞后,用荧光素酶分析系统检测显示MMP-20启动子转录活性升高。结论成功构建了SPDEF真核表达载体,初步研究证明SPDEF可能与MMP-20特征性序列结合从而上调MMP-20的表达。 展开更多
关键词 转录因if-spdef 金属机制蛋白 -20 RT—PCR 双荧光素酶报告基因检测
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结膜杯状细胞特性与眼表健康相关性的研究进展 被引量：3
7
作者 钟煜 朱继开 +1 位作者 王璐璇 徐敬东 《国际眼科杂志》 CAS 2017年第9期1667-1670,共4页
结膜杯状细胞散在分布于复层上皮中,可分泌黏蛋白来维持眼表环境稳定。有研究证明结膜杯状细胞具有分泌黏液、眼表废物清除以及免疫调节功能。本文着重阐述结膜杯状细胞的生物学特性以及对其分化起调节作用的关键性因子SPDEF(SAM pointe... 结膜杯状细胞散在分布于复层上皮中,可分泌黏蛋白来维持眼表环境稳定。有研究证明结膜杯状细胞具有分泌黏液、眼表废物清除以及免疫调节功能。本文着重阐述结膜杯状细胞的生物学特性以及对其分化起调节作用的关键性因子SPDEF(SAM pointed domain Ets factor)对该细胞功能的影响,进一步明确杯状细胞与眼健康的相关性。 展开更多
关键词 结膜杯状细胞 spdef 眼表功能 调节 干眼症
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基于肺脾同治法探讨四君子汤合三子养亲汤对COPD小鼠气道黏液高分泌的影响 被引量：9
8
作者 李雅兰 马建岭 +6 位作者 李渊 史利卿 郝素英 季坤 王丽云 罗景舒 郭兆迪 《中国中医急症》 2023年第5期777-780,800,共5页
目的 基于肺脾同治法探讨四君子汤合三子养亲汤改善慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠气道黏液高分泌的作用机制。方法 将40只C57BL/6N雄性小鼠随机分为空白组、模型组、西药组(盐酸氨溴索)、中药组(四君子汤合三子养亲汤),每组10只,采用烟熏... 目的 基于肺脾同治法探讨四君子汤合三子养亲汤改善慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠气道黏液高分泌的作用机制。方法 将40只C57BL/6N雄性小鼠随机分为空白组、模型组、西药组(盐酸氨溴索)、中药组(四君子汤合三子养亲汤),每组10只,采用烟熏联合脂多糖的方法建立COPD小鼠模型。酶联免疫吸附测定法检测血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-13(IL-13)水平;HE染色观察肺组织病理学变化;蛋白免疫印迹法检测肺组织STAT6、SPDEF、FOXA2蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应检测肺组织STAT6、Muc5ac mRNA水平。结果 与空白组比较,模型组血清中IL-4、IL-8、IL-13水平,肺组织STAT6、SPDEF蛋白表达水平,STAT6、Muc5ac mRNA显著升高(P <0.01);FOXA2蛋白表达水平显著下降(P <0.01)。与模型组比较,中药组血清中IL-4、IL-8、IL-13和西药组血清中IL-4、IL-13水平明显下降(P <0.05或P <0.01),西药组血清中IL-8水平下降不明显(P> 0.05);与模型组比较,用药组STAT6、SPDEF蛋白表达水平,STAT6、Muc5ac mRNA较模型组显著下降(P <0.01),FOXA2蛋白表达水平升高(P <0.01)。结论 四君子汤合三子养亲汤可能通过抑制STAT6-SPDEF-MUC5AC信号通路的活性改善COPD小鼠气道黏液高分泌。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 气道黏液高分泌 四君子汤 三子养亲汤 肺脾同治法 STAT6-spdef-MUC5AC信号通路 小鼠
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