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Sp1翻译后修饰在动脉粥样硬化中的作用
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作者 周淇 孙许涛 +2 位作者 吴思雨 瞿瑛 宋运佳 《基础医学与临床》 2026年第1期134-138,共5页
特异性蛋白(Sp)是一个著名的转录因子家族。特异性蛋白1(Sp1)作为关键转录因子,通过翻译后修饰(PTMs)调控动脉粥样硬化(AS)的病理进程。其磷酸化和乙酰化修饰通过调节DNA结合能力与转录活性,影响脂质代谢、斑块稳定性、血管平滑肌细胞(V... 特异性蛋白(Sp)是一个著名的转录因子家族。特异性蛋白1(Sp1)作为关键转录因子,通过翻译后修饰(PTMs)调控动脉粥样硬化(AS)的病理进程。其磷酸化和乙酰化修饰通过调节DNA结合能力与转录活性,影响脂质代谢、斑块稳定性、血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及内皮功能障碍。磷酸化Sp1增强与ABCA1和LDLR启动子的结合,促进胆固醇外流;乙酰化Sp1通过招募p300上调SR-BⅠ表达,抑制脂质蓄积。褪黑激素通过Akt/Sp1通路促进胶原沉积,阿托伐他汀抑制Sp1与TLR2结合,减少炎性因子释放。AngⅡ/PKC-ζ通路驱动PDGF-D表达促进内膜增厚,而FGF-2/ERK通路通过Sp1磷酸化抑制PDGFR-α转录,延缓斑块进展。S-巯基化和泛素化修饰通过稳定Sp1并增强其与VEGFR-2结合,改善血管舒张和氧化应激。本文解析Sp1 PTMs在AS中的调控网络,并提出靶向修饰位点(如Thr453/Ser702)及天然化合物(如Cy3G、山奈酚)的潜在治疗策略,为AS精准干预提供理论依据。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 特异性蛋白1(sp1) 翻译后修饰 细胞信号传导 作用机制
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过表达HDAC1通过诱导SP1去乙酰化改善类固醇诱导的小鼠骨细胞凋亡
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作者 张申尧 卢敏 +3 位作者 邝高艳 许晓彤 付俊 曾楚然 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第1期10-17,共8页
目的探究组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)通过特异性蛋白1(SP1)调控激素性股骨头坏死(SONFH)的作用机制。方法将小鼠骨样细胞MLY-O4分为对照组、曲古抑菌素(TSA)组、类固醇组、类固醇+oe-NC组、类固醇+oe-HDAC1组、oe-NC组、oe-HDAC1组。对照... 目的探究组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)通过特异性蛋白1(SP1)调控激素性股骨头坏死(SONFH)的作用机制。方法将小鼠骨样细胞MLY-O4分为对照组、曲古抑菌素(TSA)组、类固醇组、类固醇+oe-NC组、类固醇+oe-HDAC1组、oe-NC组、oe-HDAC1组。对照组细胞正常培养,不接受试剂诱导及细胞转染;TSA组细胞接受400 nmol/L TSA处理24 h;类固醇组接受1μmol/L地塞米松诱导24 h;类固醇+oe-NC组或类固醇+oe-HDAC1组接受oe-NC或oe-HDAC1转染,通过LipoHigh脂质体高效转染试剂行细胞转染,转染48 h后进行类固醇诱导。oe-NC组或oe-HDAC1组接受oe-NC或oe-HDAC1转染。观察各组细胞在HDAC、HDAC1蛋白、SP1蛋白、凋亡相关蛋白(裂解capase-3及Bax)、乙酰化水平、细胞增殖、细胞凋亡方面的差异,采用通过免疫共沉淀验证HDAC1与SP1的相互作用。结果类固醇组与对照组相比细胞凋亡率升高,HDAC1下调,裂解caspase-3及Bax上调,细胞增殖显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。TSA组、类固醇组与对照组相比,乙酰化水平显著升高,SP1蛋白显著上调,类固醇+oc-HDAC1组与类固醇+oe-NC组相比,乙酰化水平降低,HDAC1上调,SP1、裂解caspase-3、Bax下调,细胞增殖增强,细胞凋亡降低(P<0.05)。oe-NC组及oe-HDAC1组Input样本存在HDAC1蛋白条带,表明两组样本均可表达HDAC1,两组IgG抗体上并未检测出HDAC1蛋白,而两组SP1抗体上均存在HDAC1,表明HDAC1可与SP1相互作用。结论HDAC1通过介导去乙酰化修饰抑制SP1表达,从而抑制类固醇诱导的骨细胞凋亡,并促进骨细胞增殖。 展开更多
关键词 激素性股骨头坏死 sp1 HDAC1 去乙酰化
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SP1和UBE2C在食管鳞癌中的表达与临床病理特征的相关性研究
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作者 姜海斌 吴建龙 +6 位作者 张冰心 宋晶晶 初晓燕 玄小玉 王爱民 李建辉 王建祥 《河北医学》 2025年第11期1919-1924,共6页
目的:探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中SP1、UBE2C表达水平与患者临床病理参数的相关性,评估其对预后的预测价值。方法:选取2019年1月至2022年1承德市中心医院行手术治疗的ESCC患者127例的癌组织,同时选取癌旁正常鳞状上皮组织65例及选... 目的:探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中SP1、UBE2C表达水平与患者临床病理参数的相关性,评估其对预后的预测价值。方法:选取2019年1月至2022年1承德市中心医院行手术治疗的ESCC患者127例的癌组织,同时选取癌旁正常鳞状上皮组织65例及选取58例食管鳞状上皮乳头状瘤组织。采用免疫组化(Envision法)及实时定量PCR(RT-PCR)法测定观察组及对照组中SP1和UBE2C的表达水平,观察二者在ESCC组织、鳞状上皮乳头状瘤及癌旁正常食管黏膜组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果:试验组的SP1、UBE2C mRNA表达水平均高于对照组(均P<0.05),免疫组织化学染色结果也提示试验组的SP1、UBE2C的表达均高于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。ESCC组织中SP1和UBE2C表达水平与患者性别、年龄无关(P>0.05),与吸烟史、饮酒史、分化程度、TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论:SP1和UBE2C的阳性表达可能与ESCC发生及发展相关,因此,SP1和UBE2C有可能作为新的潜在治疗靶点,为ESCC患者的个体化治疗提供新的方向。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 鳞状上皮乳头状瘤 sp1 UBE2C 临床病理特征
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基于“骨肉不相亲”理论由Smad2/3、SP1蛋白表达探讨中医不同治法对DOP大鼠骨-肌影响 被引量:1
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作者 杨蓝鑫 杨芳 +3 位作者 李俊儒 付夜平 刘彤 王致远 《辽宁中医药大学学报》 2025年第3期11-16,共6页
目的在“骨肉不相亲”理论指导下,比较废用性骨质疏松症大鼠股骨、腓肠肌中果蝇母本抗生存因子蛋白2/3(small mother against decapentaplegic 2/3,Smad2/3)、特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)表达在中医不同治法下的影响,分析... 目的在“骨肉不相亲”理论指导下,比较废用性骨质疏松症大鼠股骨、腓肠肌中果蝇母本抗生存因子蛋白2/3(small mother against decapentaplegic 2/3,Smad2/3)、特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)表达在中医不同治法下的影响,分析中医药对其的防治机制。方法将60只大鼠随机分为正常组、模型组、补肾组、健脾组、补肾健脾组、西药组6组,并适应性喂养1周,造模组采用尾吊法建立模型,5周后取大鼠的腹主动脉血清、股骨及腓肠肌。通过骨密度检测和对股骨远端横断面处的骨形态进行三维重建观察比较各组大鼠股骨组织结构变化,评估骨质流失情况。采用HE染色和Masson染色观察大鼠腓肠肌组织的形态学变化。采用ELISA法检测各组大鼠血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)水平和股骨、腓肠肌中Smad2/3、SP1蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠股骨骨密度显著降低(P<0.01),骨微结构破坏明显;腓肠肌肌纤维萎缩,排列疏松;血清ALP水平显著降低、TRACP水平显著升高(P<0.01);股骨与腓肠肌中Smad2/3、SP1蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组股骨骨密度明显升高(P<0.05),骨微结构修复明显;腓肠肌肌纤维增粗,肌间隙减小;ALP水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,补肾健脾组和西药组TRACP水平降低最显著(P<0.01),其次是补肾组(P<0.05);各给药组股骨与腓肠肌中Smad2/3、SP1蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论废用性骨质疏松症的发生、发展可能与骨骼及肌肉中Smad2/3、SP1蛋白表达的升高有关,二者的高表达可能会导致骨-肌失衡。各中医治法对废用性骨质疏松症的防治作用可能与降低骨骼与肌肉中Smad2/3、SP1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 废用性骨质疏松症 骨肉不相亲 sp1 SMAD2/3 中医治法
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猪源转录因子SP1 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 沈奇 虞凌雪 +6 位作者 高飞 刘长龙 周艳君 李国新 童光志 李丽薇 姜一峰 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第3期91-97,共7页
SP1作为MHCⅡ类分子反式激活因子CⅡTA的关键上游转录调控因子,在抗原递呈细胞的分化成熟和功能实现过程中发挥着至关重要的作用。本研究建立了一种高效检测猪源转录因子SP1的方法,提取猪骨髓细胞的RNA反转录成cDNA,以其为模板克隆到SP... SP1作为MHCⅡ类分子反式激活因子CⅡTA的关键上游转录调控因子,在抗原递呈细胞的分化成熟和功能实现过程中发挥着至关重要的作用。本研究建立了一种高效检测猪源转录因子SP1的方法,提取猪骨髓细胞的RNA反转录成cDNA,以其为模板克隆到SP1的片段并连接到Pcaggs载体上,得到重组质粒Pcaggs-SP1。测得质粒浓度并根据公式计算拷贝数,稀释成10^(1)^(1)0^(8) copies/μL的标准品质粒,从而建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。试验结果表明:该方法在10^(1)^(1)0^(8) copies/μL范围内呈现出良好的线性关系;与常规PCR相比,敏感性提高了1000倍;该方法仅能够检测到猪源细胞中的SP1基因,与其他物种细胞无交叉反应;组内和组间变异系数均小于1%,重复性好。利用该方法对PRRSV接毒的PAM细胞样品进行检测,结果显示SP1转录水平被下调。本研究建立的猪源转录因子SP1 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于猪源SP1基因的定量检测,为进一步研究猪病病原微生物在感染过程中的免疫逃逸机制提供了准确有效的工具。 展开更多
关键词 猪源sp1 荧光定量PCR SYBR GreenⅠ
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SP1/IGF2BP3轴对猪骨骼肌卫星细胞增殖的调控作用
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作者 黄雨馨 王伟 +1 位作者 李一星 唐中林 《河南农业科学》 北大核心 2025年第3期129-138,共10页
为了探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)对猪骨骼肌生长发育的影响,并解析其生物学功能和表达调控机制,为猪的遗传改良提供理论依据和候选基因,以猪骨骼肌卫星细胞为试验材料,通过RT-qPCR和蛋白质印迹检测细胞增殖标志基因P... 为了探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)对猪骨骼肌生长发育的影响,并解析其生物学功能和表达调控机制,为猪的遗传改良提供理论依据和候选基因,以猪骨骼肌卫星细胞为试验材料,通过RT-qPCR和蛋白质印迹检测细胞增殖标志基因PCNA、CDK4、Cyclin A2和MKI67的表达,采用EdU和CCK-8检测细胞增殖活力和速率,通过突变IGF2BP3基因启动子区SP1结合位点的双荧光素酶试验和ChIP试验探索转录因子SP1对IGF2BP3基因的表达调控机制。结果表明,在猪骨骼肌卫星细胞中敲低IGF2BP3后,细胞增殖标志基因的表达均明显上调,EdU阳性细胞比例增加,细胞增殖速率在48、72 h均明显提高。SP1结合位点的突变使双荧光素酶活性明显降低,而过表达SP1使双荧光素酶活性明显增强。SP1可与IGF2BP3基因启动子区结合。干扰SP1后IGF2BP3表达降低,而过表达SP1后IGF2BP3表达增加。过表达SP1能部分消除敲低IGF2BP3促进猪骨骼肌卫星细胞增殖的表型。综上,转录因子SP1与IGF2BP3基因相互作用,共同调控猪骨骼肌卫星细胞增殖。 展开更多
关键词 骨骼肌 IGF2BP3 sp1 猪骨骼肌卫星细胞 增殖
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鲤科鱼类SP1密码子的偏好性与进化
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作者 何志敏 朱肖霞 +6 位作者 余清婷 曾子豪 肖阳 钟高德 李当 唐建洲 刘臻 《水产学报》 北大核心 2025年第2期49-60,共12页
【目的】特异性蛋白1(SP1)是Sp/KLF蛋白家族成员之一,是最早被发现的转录因子,参与基因的转录调控。本研究目的是为了解鲤科鱼类SP 1在进化过程中形成的密码子使用模式及其与不同物种之间的亲缘关系,为实现鲤科鱼类异源高效表达提供理... 【目的】特异性蛋白1(SP1)是Sp/KLF蛋白家族成员之一,是最早被发现的转录因子,参与基因的转录调控。本研究目的是为了解鲤科鱼类SP 1在进化过程中形成的密码子使用模式及其与不同物种之间的亲缘关系,为实现鲤科鱼类异源高效表达提供理论依据。【方法】本研究运用Codon W、Clustal X、MEGA 4.0及SPSS软件,对4种鲤科鱼类与其他10个不同物种的SP 1序列进行密码子偏好性和进化分析。【结果】4种鲤科鱼类SP 1编码亮氨酸和异亮氨酸时分别对CUG和AUC密码子具有较强的偏好性。14个物种SP 1的ENC平均值为50.57,CAI值介于0.184~0.379,均远小于1,表明该基因密码子偏好性较弱。4个鲤科鱼类SP 1均表现出相似的密码子偏好性。ENC-plot分析发现SP 1密码子偏好性主要受自然选择的影响。基于SP 1序列的系统进化分析与相对同义密码子使用度RSCU聚类分析结果差异较小。大肠杆菌是草鱼SP 1最佳的外源表达系统,模式动物斑马鱼、小鼠均可作为草鱼SP 1的遗传转化受体。【结论】CUG和AUC为4个鲤科鱼类SP 1最优密码子,物种之间密码子偏好性存在差异,自然选择是导致14个物种SP 1密码子偏好性的主要影响因素。本研究为鲤科鱼类SP1的分类、演化与表达提供了理论依据。 展开更多
关键词 鲤科 sp1 密码子偏好性 分子进化 聚类分析
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黄芪-白花蛇舌草调控Sp1-miR-582-3p-p27轴抑制肺腺癌增殖分子机制
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作者 孙海鹏 许露凡 +1 位作者 刘学 刘思远 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第4期116-124,共9页
目的:从细胞水平探讨特异性蛋白1(Sp1)-微RNA-582-3p(miR-582-3p)-细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(p27)轴过度激活对A549肺腺癌细胞周期、增殖影响,以研究黄芪-白花蛇舌草可能调控该轴抑制A549增殖的相关机制。方法:采用慢病毒质粒转染技... 目的:从细胞水平探讨特异性蛋白1(Sp1)-微RNA-582-3p(miR-582-3p)-细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(p27)轴过度激活对A549肺腺癌细胞周期、增殖影响,以研究黄芪-白花蛇舌草可能调控该轴抑制A549增殖的相关机制。方法:采用慢病毒质粒转染技术,获得sh RNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic、sh RNA-Sp1+LV-m NC、sh RNA-NC+LV-miR-582-3p mimic、sh RNA-NC+LV-m NC的A5494组稳转株。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Sp1对A549肺腺癌细胞miR-582-3p表达影响;细胞增殖与活性检测法(CCK-8)、平板克隆形成实验检测Sp1通过miR-582-3p对A549肺腺癌细胞增殖影响;流式细胞术检测Sp1通过miR-582-3p对A549肺腺癌细胞周期影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Sp1通过miR-582-3p对A549肺腺癌细胞周期蛋白的影响。CCK-8检测5%、10%、20%、40%、80%黄芪-白花蛇舌草含药血清对A549细胞活力影响,并筛选出最佳浓度用于后续机制探究。上述转染技术构建oe-Sp1稳转株及对照株oe-NC,Real-time PCR检测黄芪-白花蛇舌草对A549肺腺癌细胞miR-582-3p表达影响;Western blot检测黄芪-白花蛇舌草对A549肺腺癌细胞Sp1、细胞周期依赖性激酶特异性抑制蛋白p27表达影响。结果:与sh RNA-NC+LV-m NC组比较,sh RNA-Sp1+LV-m NC组miR-582-3p表达显著降低(P<0.01);与sh RNA-Sp1+LV-m NC组比较,sh RNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic组显著逆转miR-582-3p表达(P<0.01),提示Sp1对miR-582-3p具有调控作用。与sh RNA-Sp1+LV-m NC组比较,sh RNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic组显著逆转细胞增殖(P<0.01),提示miR-582-3p可部分逆转Sp1对A549肺腺癌增殖作用;与sh RNA-Sp1+LV-m NC组比较,sh RNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic组G_(0)/G_(1)期比例显著降低,S期、G_(2)/M期比例显著升高(P<0.01),提示miR-582-3p可部分逆转Sp1对A549细胞周期影响;与sh RNA-Sp1+LV-m NC组比较,sh RNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic组显著逆转各蛋白水平,即p27的下降与细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白E(Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白(p-Rb)、E2F转录因子3(E2F3)的上调(P<0.01),提示,miR-582-3p可部分逆转Sp1对A549肺腺癌细胞周期影响。与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草含药血清明显抑制A549细胞活力,且呈浓度依赖性,故选用10%黄芪-白花蛇舌草血清干预24 h进行后续机制实验。发现,与黄芪-白花蛇舌草+oe-Vector组比较,黄芪-白花蛇舌草+oe-Sp1组显著逆转Sp1、miR-582-3p的下调与p27的上调(P<0.01),提示Sp1可部分逆转黄芪-白花蛇舌草对A549肺腺癌miR-582-3p、p27水平。结论:Sp1-miR-582-3p-p27轴过度激活显著促进A549肺腺癌细胞增殖,且黄芪-白花蛇舌草对A549肺腺癌细胞增殖的抑制作用,潜在机制可能与其抑制Sp1-miR-582-3p-p27轴过度兴奋有关。 展开更多
关键词 黄芪-白花蛇舌草 sp1-miR-582-3p-p27轴 A549肺腺癌细胞 周期 增殖
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酸枣仁汤调控SP1/SK1/S1PR1信号通路改善抑郁模型大鼠海马神经炎症和突触可塑性的作用机制
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作者 冯建宇 王文华 +2 位作者 汪尤文 谈滢 田旭升 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第21期1-10,共10页
目的:通过重塑炎症微环境并介导海马突触可塑性的改变,来评估酸枣仁汤对孤养联合慢性不可预见性温和应激(CUMS)法建立的抑郁大鼠模型的抗抑郁效果。方法:采用随机数字表法将72只雄性SD大鼠分为6组:空白组,模型组,氟西汀组(0.003 6 g... 目的:通过重塑炎症微环境并介导海马突触可塑性的改变,来评估酸枣仁汤对孤养联合慢性不可预见性温和应激(CUMS)法建立的抑郁大鼠模型的抗抑郁效果。方法:采用随机数字表法将72只雄性SD大鼠分为6组:空白组,模型组,氟西汀组(0.003 6 g·kg^(-1)),酸枣仁汤高、中、低剂量组(10、5、2.5 g·kg^(-1)),每组12只。使用孤养联合CUMS的方式对大鼠进行造模,观察各组大鼠的糖水偏好率和旷场实验得分并进行评估;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)分析特异性蛋白1(SP1)/鞘氨醇激酶1(SK1)/鞘氨醇1磷酸酯受体1(S1PR1)信号通路的关键蛋白及海马突触素Ⅰ(SYNⅠ)、突触后密度蛋白-95(PSD-95)、序列相似的家族19成员A5(FAM19A5)的蛋白表达;免疫组化法(IHC)分析SP1、PSD-95、SYNⅠ、白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-6(IL-6)的阳性表达情况;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测SP1和S1PR1 mRNA的表达;采用结合透射电镜观察海马突触超微结构变化。结果:与空白组比较,模型组大鼠的糖水偏好率、旷场实验总分显著下降(P<0.01),表明孤养联合CUMS成功诱导了抑郁样行为;与空白组比较,模型组海马区域中突触囊泡数量显著减少(P<0.01),且SP1、SK1、S1PR1与IL-6蛋白的表达水平显著提高(P<0.01),SYNⅠ、PSD-95、FAM19A5、IL-10表达显著下降(P<0.01)。与模型组比较,酸枣仁汤高、中剂量组和氟西汀组糖水偏好率和旷场实验总分均显著上升(P<0.01),酸枣仁汤高、中、低剂量组及氟西汀组大鼠SP1、SK1、S1PR、IL-6蛋白表达均明显下降(P<0.05,P<0.01),SYNⅠ、PSD-95、FAM19A5、IL-10表达明显上升(P<0.05,P<0.01),大鼠海马突触囊泡明显增多(P<0.05,P<0.01)。结论:酸枣仁汤可调控抑郁模型大鼠FAM19A5、SYNⅠ、PSD-95、IL-10、IL-6、SP1/SK1/S1PR1在海马中的表达,其抗抑郁机制可能与改善神经炎症与重塑突触可塑性有关。 展开更多
关键词 序列相似的家族19成员A5(FAM19A5) 抑郁症 特异性蛋白1(sp1)/鞘氨醇激酶1(SK1)/受体1-磷酸鞘氨醇受体1(S1PR1)信号通路 突触可塑性 神经炎症
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黄芪多糖调控SP1/Wnt/β-catenin信号轴抑制骨肉瘤增殖和转移能力的作用机制研究 被引量:1
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作者 李瑞忠 林雁鸿 +3 位作者 梁超华 马鑫雨 赵省省 梁道臣 《现代检验医学杂志》 2025年第3期37-41,46,共6页
目的研究黄芪多糖(APS)抑制骨肉瘤细胞增殖和转移能力的作用机制。方法细胞计数实验(CCK8)检测APS抑制骨肉瘤细胞U2OS,HOS,MG63和成骨细胞hFOB1.19的增殖能力,选择APS对骨肉瘤细胞抑制作用最显著的细胞株进行后续实验;将骨肉瘤细胞分为... 目的研究黄芪多糖(APS)抑制骨肉瘤细胞增殖和转移能力的作用机制。方法细胞计数实验(CCK8)检测APS抑制骨肉瘤细胞U2OS,HOS,MG63和成骨细胞hFOB1.19的增殖能力,选择APS对骨肉瘤细胞抑制作用最显著的细胞株进行后续实验;将骨肉瘤细胞分为对照组(NC组)、APS组、APS与转染SP1敲减质粒共处理组(APS+sh-SP1)和APS与转染SP1过表达质粒共处理组(APS+oe-SP1组),蛋白质免疫印迹(Western Blotting)法检测各组细胞SP1蛋白的表达水平;CCK8实验检测各组细胞增殖能力。Transwell实验检测各组细胞转移能力;TOP/FOP Flash实验检测各组细胞Wnt/β-catenin信号通路活性;Western Blotting法检测各组细胞Wnt3a,β-catenin,细胞周期蛋白(CyclinD1)、cMYC,基质金属蛋白酶2(MMP2)和Snail蛋白表达。结果骨肉瘤细胞U2OS,HOS,MG63和成骨细胞hFOB1.19经APS处理48h后,细胞增殖抑制率分别为62.93%±4.79%,20.66%±1.10%,39.31%±3.20%和5.97%±0.72%,与成骨细胞hFOB1.19相比,APS显著抑制骨肉瘤细胞的增殖能力,差异具有统计学意义(F=208.400,P<0.001),且对骨肉瘤细胞U2OS的抑制作用最显著(t=20.380,P<0.001)。与NC组相比,APS组SP1蛋白表达、细胞增殖能力、穿膜细胞数、细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性及Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白Wnt3a,β-catenin,下游增殖相关蛋白CyclinD1,cMYC,下游转移相关蛋白MMP2,Snail表达均降低,差异具有统计学意义(t=9.740~90.780,均P<0.05)。与APS组相比,APS+sh-SP1组细胞中SP1蛋白表达、细胞增殖能力、穿膜细胞数、细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达进一步降低,差异具有统计学意义(t=3.032~12.940,均P<0.05);而APS+oe-SP1组细胞中SP1蛋白表达、细胞增殖能力、穿膜细胞数、细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性及细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达增加,差异具有统计学意义(t=3.350~22.450,均P<0.05)。结论APS靶向负调控SP1/Wnt/β-catenin信号轴抑制骨肉瘤细胞增殖和转移能力。 展开更多
关键词 骨肉瘤 黄芪多糖 细胞增殖 细胞转移 sp1/Wnt/β-catenin信号轴
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circ_001146通过miR-1200/SP1轴减轻脊髓损伤炎症并促进神经功能恢复
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作者 李名武 秦书超 +3 位作者 平炜楠 张诚诚 段军 李静静 《四川大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第6期1591-1602,共12页
目的探讨环状RNA circ_001146调控miR-1200/特异性蛋白1(SP1)轴在脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)中的作用机制。方法动物模型中,选取8周龄、体质量220~250 g的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为5组(每组5只),包括假手术组、SCI组... 目的探讨环状RNA circ_001146调控miR-1200/特异性蛋白1(SP1)轴在脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)中的作用机制。方法动物模型中,选取8周龄、体质量220~250 g的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为5组(每组5只),包括假手术组、SCI组、circ_0011462敲低组(sh-circ_0011462)、sh-circ_0011462联合空载质粒对照组(NC)、shcirc_0011462联合SP1过表达组(过表达SP1)。评估各组大鼠在不同时间点的运动功能,包括Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分、甩尾潜伏期(TFL)及网格行走(Gridwalk)测试。尼氏染色测定脊髓前角运动神经元数量,免疫组化检测脊髓组织中神经丝蛋白(pNF)和突触素的表达。免疫多重染色检测M1型小胶质细胞数量。ELISA检测各组外周血中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。在细胞实验中,运用qPCR检测circ_0011462、miR-1200及SP1的mRNA表达,Western blot检测SP1、Bcl-2和Caspase-3蛋白水平,流式细胞术分析细胞凋亡率,相差显微镜观察细胞形态变化。结果动物实验结果显示,术后21 d和28 d,sh-circ_0011462组的BBB评分(7.00±1.20、10.00±2.21)和TFL评分(1.21±0.41、1.19±0.31)高于过表达SP1组(BBB:5.00±0.60、6.00±0.80;TFL:0.80±0.25、0.70±0.20)及SCI组(BBB:4.00±0.60、5.00±0.70;TFL:0.60±0.21、0.50±0.18),而Gridwalk评分(1.38±0.31、1.22±0.33)则低于上述两组(均P<0.05)。术后28 d,假手术组的炎性因子水平低于其他各组(P<0.05)。SCI组与过表达SP1组的炎性因子水平均高于sh-circ_0011462组(P<0.05)。此外,sh-circ_0011462组的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)阳性细胞数少于SCI组和过表达SP1组(P<0.05),同时脊髓前角运动神经元数量、轴突长度及突触形成程度提高(均P<0.05)。细胞实验结果显示,敲低circ_0011462可上调miR-1200表达,下调SP1 mRNA和蛋白水平,降低Caspase-3蛋白表达,上调Bcl-2蛋白,减少PC12细胞凋亡率,并促进神经元轴突生长。转染miR-1200抑制物或SP1过表达质粒可逆转上述效应。双萤光素酶报告实验进一步证实,miR-1200可直接靶向circ_0011462与SP1。结论circ_001146可能通过靶向调控miR-1200/SP1轴来改善SCI的病理状况,包括降低炎症反应、抑制神经细胞凋亡并促进神经再生。 展开更多
关键词 环状RNA_001146 微小RNA-1200 特异性蛋白1 脊髓损伤
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转录因子Sp1与肿瘤关系研究的新进展 被引量:23
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作者 白雪 邓红 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期215-220,共6页
Sp1参与了细胞的生长和分化等重要的生命过程,是目前研究极为广泛和系统的转录因子之一。在肿瘤的生长和转移过程中,Sp1可以通过调控癌基因、抑癌基因、细胞周期调控分子和生长相关信号转导通路、血管生成相关因子和细胞的凋亡过程,对... Sp1参与了细胞的生长和分化等重要的生命过程,是目前研究极为广泛和系统的转录因子之一。在肿瘤的生长和转移过程中,Sp1可以通过调控癌基因、抑癌基因、细胞周期调控分子和生长相关信号转导通路、血管生成相关因子和细胞的凋亡过程,对各型肿瘤细胞产生重要影响。Sp1的表达水平和活性均受到严格的调控,具体机制包括对Sp1蛋白本身的修饰以及其它分子对Sp1的调控作用等。以Sp1作为靶点的新的肿瘤治疗方法,将会对临床肿瘤化疗策略产生深远的影响。 展开更多
关键词 肿瘤 转录因子 sp1 sp1 综述[文献类型]
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转录因子SP1调控蛛网膜下腔出血后早期脑损伤铁死亡的机制研究
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作者 汤其凯 周晓明 +5 位作者 张冰涛 马晨峰 吴琪 陈姝娟 吴伟 张鑫 《局解手术学杂志》 2025年第12期1069-1076,共8页
目的探讨转录因子SP1在蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤中的表达及其对神经元铁死亡的调控作用。方法构建小鼠SAH模型及体外原代神经元OxyHb刺激模型,通过Western blot、qPCR、免疫组化染色及免疫荧光染色检测SP1的表达变化。通过体外... 目的探讨转录因子SP1在蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤中的表达及其对神经元铁死亡的调控作用。方法构建小鼠SAH模型及体外原代神经元OxyHb刺激模型,通过Western blot、qPCR、免疫组化染色及免疫荧光染色检测SP1的表达变化。通过体外敲低和过表达SP1,检测SP1蛋白表达、细胞活性、乳酸脱氢酶(LDH)水平及丙二醛(MDA)、4-羟基壬烯醛(4-HNE)、谷胱甘肽(GSH)、Fe2+铁死亡相关指标,并在不同细胞死亡抑制剂处理后检测敲低SP1的细胞活性变化。在体内过表达SP1后,通过尼氏染色、脑水肿程度、改良Garcia评分、平衡木实验、水迷宫实验评估其对神经功能的保护作用。通过双荧光素酶报告基因实验及分子检测验证SP1对GPX4表达的转录调控作用。结果在SAH后早期,SP1的表达显著下调。在体外敲低SP1后,神经元中MDA、4-HNE及Fe^(2+)水平升高(P<0.05),GSH水平下降(P<0.05),而过表达SP1则逆转了上述变化。铁死亡抑制剂干预能够提高敲低SP1后的细胞活性,而其他抑制剂处理后细胞活性无显著变化。体内过表达SP1后,小鼠脑水肿程度改善,神经认知功能恢复。SP1通过结合GPX4启动子区域正向调控其表达,发挥抑制神经元铁死亡作用。结论在SAH早期,过表达SP1可转录激活GPX4抑制神经元铁死亡,具有显著的神经保护作用,为SAH后的干预治疗提供了潜在分子靶点。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 sp1 铁死亡 GPX4 早期脑损伤
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Sp1与突变型p53协同促进三阴性乳腺癌肿瘤细胞的增殖转移
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作者 李莉 赵苑池 +3 位作者 卢珮 黄伟 宁贻崇 陆满群 《中国医药科学》 2025年第21期30-34,共5页
目的体外探讨构成性转录因子(Sp1)与突变型p53(mtp53)是否协同调控三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖转移。方法选取TNBC细胞MDA-MB-231构建单/共干扰和MDA-MB-157细胞构建单/共过表达Sp1/mtp53稳定细胞株,运用MTT、克隆形成实验分析细胞增殖... 目的体外探讨构成性转录因子(Sp1)与突变型p53(mtp53)是否协同调控三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖转移。方法选取TNBC细胞MDA-MB-231构建单/共干扰和MDA-MB-157细胞构建单/共过表达Sp1/mtp53稳定细胞株,运用MTT、克隆形成实验分析细胞增殖,划痕和侵袭实验检测细胞转移能力,蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR检测Bcl-2关联X蛋白(Bax)/基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的转录和表达。结果单干扰稳定细胞珠相比对照组抑制了细胞的增殖和转移,提高了Bax的转录和表达,抑制了MMP-9的转录和表达;共干扰细胞株相比单干扰细胞株抑制效果更显著;而单/共过表达Sp1/mtp53的稳定细胞株表现出相反的作用。结论研究结果提示Sp1与mtp53在TNBC中协同调控基因的转录和表达,从而促进TNBC细胞的增殖转移;本研究为TNBC的诊断、治疗提供分子理论基础。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 sp1 突变型P53 增殖 转移
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Sp1在肝脏疾病中的作用 被引量:1
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作者 冯洁 余永胜 臧国庆 《临床肝胆病杂志》 CAS 2007年第6期460-462,共3页
关键词 肝脏疾病 转录因子sp1 sp1 信号转导通路 生物学效应 细胞癌变 细胞内 新生物
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槲皮素对前列腺癌细胞增殖及转录因子Sp1功能的抑制作用 被引量:21
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作者 苑辉卿 杨玲玲 +3 位作者 姜安丽 孔峰 张建业 Charles YF YOUNG 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期673-678,共6页
雄激素受体(androgenreceptor,AR)作为核转录因子,其高表达、基因突变以及AR辅激活因子的过表达等造成AR的异常激活与前列腺癌细胞的增殖、恶化转移、多药耐药等密切相关.天然黄酮槲皮素(quercetin),是一很有潜力的预防和治疗前列腺肿... 雄激素受体(androgenreceptor,AR)作为核转录因子,其高表达、基因突变以及AR辅激活因子的过表达等造成AR的异常激活与前列腺癌细胞的增殖、恶化转移、多药耐药等密切相关.天然黄酮槲皮素(quercetin),是一很有潜力的预防和治疗前列腺肿瘤的化合物.槲皮素不仅抑制前列腺癌细胞LNCaP的增殖,并呈剂量依赖性,而且下调前列腺癌中AR的表达、抑制AR的转录激活功能.GCbox是AR核心启动子的主要正调控元件,是转录因子Sp1的结合位点.细胞转染结果表明,槲皮素能抑制Sp1蛋白对AR启动子的激活作用,可能是槲皮素下调AR表达的机理之一.进一步研究显示,槲皮素还能明显抑制Sp1蛋白对AR转录激活功能的增强作用.Western印迹结果显示,槲皮素对Sp1蛋白表达无明显影响,但能够诱导c-Jun的高表达,而高表达的c-Jun蛋白能逆转Sp1蛋白对AR的转录激活作用,由此推测,槲皮素可能通过介导c-Jun与Sp1的蛋白质相互作用,抑制Sp1的功能,进而起到抑制AR表达和功能的作用.免疫沉淀结果又进一步证实了Sp1与c-Jun二者的相互作用.因此,槲皮素可能通过抑制前列腺癌细胞中AR的表达和功能抑制了细胞的增殖,其分子机理可能与槲皮素诱导的c-Jun与Sp1蛋白相互作用、降低Sp1对AR的转录激活作用有关. 展开更多
关键词 槲皮素 细胞增殖 sp1 前列腺癌细胞 抑制作用
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ERα与Sp1相互作用激活LRP16启动子转录活性 被引量:15
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作者 赵亚力 韩为东 +7 位作者 母义明 李琦 李雪 宋海静 卢学春 于力 陆菊明 潘长玉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期363-369,共7页
根据已报道的LRP1 6启动子序列 (2 6kb) ,采用PCR反应获得 6个启动子 5′删除突变体 ,分别插入pGL3 Basic载体 ,构建 6种 5′缺失报告基因表达载体 (pS1 ~pS6) .分别与ERα真核表达载体共转染MCF 7细胞 .用双荧光素酶报告系统测定荧... 根据已报道的LRP1 6启动子序列 (2 6kb) ,采用PCR反应获得 6个启动子 5′删除突变体 ,分别插入pGL3 Basic载体 ,构建 6种 5′缺失报告基因表达载体 (pS1 ~pS6) .分别与ERα真核表达载体共转染MCF 7细胞 .用双荧光素酶报告系统测定荧光素酶活性 ,以明确LRP1 6基因上游启动子区域中的雌激素反应序列 .结果显示 ,pS1 ~pS6均有雌二醇反应性 .进而对pS5的 3′端缺失分析发现LRP1 6基因翻译起始位点上游 - 2 1 4至 - 2 5 1位置的序列具有雌激素应答 ,序列分析发现该片段序列中包含了一个供转录因子Sp1结合的GC富含位点和一个ERα反应元件的半位点 (1 2ERE Sp1 ) ,进一步突变分析显示这两个元件均为雌激素反应性所必需 .以含这两个顺式元件的序列 (- 2 5 3bp至 - 2 2 4bp)作为探针 ,超级迁移凝胶电泳试验结果表明了ERα和Sp1蛋白均可以和探针结合 .研究发现了雌激素上调LRP1 6基因表达的一个增强子元件— 1 2ERE Sp1 ,ERα和Sp1蛋白需要与DNA结合形成复合体 。 展开更多
关键词 雌激素 雌激素受体Α LRP16 sp1
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Sp1和Sp3介导的转录调控 被引量:10
18
作者 薛丽香 翁默 +2 位作者 吴军峰 张宗玉 童坦君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期106-110,共5页
基本转录因子Sp1和Sp3对转录调控区GC盒有很强的亲和力,参与几乎所有细胞功能,包括细胞增殖、凋亡、分化和新生物的转化.但在同一细胞中Sp1和Sp3对不同基因的作用并不相同,二者对基因特异性的转录调控是Sp1和Sp3研究领域的重要问题.近... 基本转录因子Sp1和Sp3对转录调控区GC盒有很强的亲和力,参与几乎所有细胞功能,包括细胞增殖、凋亡、分化和新生物的转化.但在同一细胞中Sp1和Sp3对不同基因的作用并不相同,二者对基因特异性的转录调控是Sp1和Sp3研究领域的重要问题.近年来发现,Sp1和Sp3自身表达水平、结合的靶序列、磷酸化、糖基化等翻译后修饰,其他蛋白质的结合以及染色质结构与修饰等方面均可影响Sp1和Sp3的转录活性.本文从Sp1和Sp3蛋白参与转录调节的机制以及影响其基因特异性转录活性的诸方面因素这两大侧面,介绍了近年来的最新进展. 展开更多
关键词 sp1 SP3 GC盒 转录调节
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太空搭载胡芦巴SP1代生物效应研究 被引量:11
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作者 徐荣 刘友刚 +4 位作者 孙素琴 于晶 徐江 周峰 陈君 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期262-265,共4页
以阿联酋胡芦巴种质为材料,经"实践八号"返回式卫星搭载进行空间诱变,回收后,与留地面未经搭载的对照在相同环境下同时播种,对诱变后代(SP1代)的主要农艺性状和品质性状进行研究。结果显示,与对照相比,空间诱变对胡芦巴种子... 以阿联酋胡芦巴种质为材料,经"实践八号"返回式卫星搭载进行空间诱变,回收后,与留地面未经搭载的对照在相同环境下同时播种,对诱变后代(SP1代)的主要农艺性状和品质性状进行研究。结果显示,与对照相比,空间诱变对胡芦巴种子发芽和初期幼苗生长势有一定的抑制作用,但生长一定时间后,植株长势强。空间诱变处理后,果荚由多数单荚变为多数双荚,分枝数、单株粒重以及单株荚数均显著增加。傅里叶红外光谱法对SP1代葫芦巴种子的品质分析表明,空间诱变并没有对胡芦巴的化学成分产生影响。本研究结果表明,空间诱变可诱发胡芦巴产生一定的变异,这些变异对获得有价值的高产胡芦巴新种质具有重要意义。 展开更多
关键词 胡芦巴 空间诱变 sp1 品质 红外光谱
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阻塞性肝胆汁淤积下转录因子NR5A2和SP1、胆酸转运蛋白MRP3与肝脏损伤的相关性 被引量:7
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作者 何孝崇 柴进 +2 位作者 何宇 王槐志 陈文生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期2474-2478,共5页
目的研究阻塞性胆汁淤积下肝脏中转录因子NR5A2、SP1表达是否上调,以及其表达上调与胆酸转运蛋白MRP3基因的表达是否密切相关;MRP3表达上调是否具有减轻阻塞性胆汁淤积肝脏损伤的作用。方法收集阻塞性胆汁淤积组(胆结石或肝内胆管结石... 目的研究阻塞性胆汁淤积下肝脏中转录因子NR5A2、SP1表达是否上调,以及其表达上调与胆酸转运蛋白MRP3基因的表达是否密切相关;MRP3表达上调是否具有减轻阻塞性胆汁淤积肝脏损伤的作用。方法收集阻塞性胆汁淤积组(胆结石或肝内胆管结石引起的黄疸患者手术切除的肝脏)和正常对照组(排除肝脏疾病的活检肝组织及肝转移癌无黄疸的患者肝脏)肝脏样品各15例。采用半定量PCR和免疫荧光方法检测NR5A2、SP1基因的表达,利用独立样品t检验和线性回归分析阻塞性胆汁淤积肝组织样品中MRP3 mRNA表达上调是否与NR5A2或SP1呈正相关,以及MRP3表达上调与反映肝脏损伤的指标ALT、AST是否存在负相关性。HE染色观察胆汁淤积组肝细胞坏死程度和MRP3蛋白表达高低的关系。结果阻塞性胆汁淤积肝脏中NR5A2和SP1 mRNA表达显著上调,其中NR5A2 mRNA增高3.7倍(P<0.01),SP1 mRNA上升3.2倍(P<0.01)。免疫荧光结果表明,阻塞性胆汁淤积组NR5A2和SP1蛋白表达也显著增加,NR5A2或SP1蛋白与胆酸转运蛋白MRP3 mRNA表达呈显著正相关(分别为r2=0.47,P<0.05和r2=0.51,P<0.01);MRP3蛋白表达与肝细胞坏死程度存在密切相关,并且MRP3蛋白表达量与ALT和AST均呈显著负相关(分别为r2=0.52,P<0.01和r2=0.39,P<0.05)。结论人阻塞性胆汁淤积下NR5A2和SP1表达上调,可诱导胆酸转运蛋白MRP3的表达,而MRP3表达上调可能有减轻肝脏损伤的作用。 展开更多
关键词 转录因子 NR5A2 sp1 MRP3 胆汁淤积
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