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脑缺血激活N-SMase诱导IL-1β释放的相关研究
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作者 顾丽泽 黄佳瑜 +2 位作者 胡玥 茅希颖 郭军 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第13期2450-2452,共3页
目的:探讨脑缺血再灌中性鞘磷脂酶(N-SMase)活性变化及其对IL-1β的调节作用。方法:采用成年清洁级雄性SD大鼠,建立四动脉阻断前脑缺血模型,缺血再灌注不同时间(0.5,1,6,12,24 h)。观察N-SMase和A-SMase活性变化。侧脑室给予N-SMase活... 目的:探讨脑缺血再灌中性鞘磷脂酶(N-SMase)活性变化及其对IL-1β的调节作用。方法:采用成年清洁级雄性SD大鼠,建立四动脉阻断前脑缺血模型,缺血再灌注不同时间(0.5,1,6,12,24 h)。观察N-SMase和A-SMase活性变化。侧脑室给予N-SMase活性抑制剂GW4869(10,20μM),实时定量PCR(Real-time PCR)检测IL-1β的mRNA水平变化。结果:(1)缺血再灌注30 min,N-SMase活性开始升高(P<0.05),而A-SMase活性没有明显变化(P>0.05);(2)缺血再灌注30 min,给予GW4869能够显著抑制IL-1β的mRNA水平(P<0.05)。结论:缺血再灌注能诱导N-SMase而不是A-SMase活性升高,通过生成神经酰胺刺激IL-1β的转录合成,参与了缺血后神经细胞损伤调控。 展开更多
关键词 前脑缺血 N-smase A-smase IL-1Β
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中性鞘磷脂酶-2(Neutral sphingomyelin-2 N-SMase2)对大鼠脑缺血再灌注损伤中IL-6、IL-1β、TNF-α炎性因子的影响 被引量:11
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作者 王喜丰 汪敏 +4 位作者 李刚 张静 肖瑶 王岚 沈伟 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2018年第4期310-313,共4页
目的研究中性鞘磷脂酶-2(Neutral sphingomyelin-2 N-SMase2)对大鼠脑缺血再灌注损伤中IL-6、IL-1β、TNF-α炎性因子的影响。方法采用线栓法制作SD大鼠大脑中动脉缺血再灌注(ischemia reperfusion I/R)损伤模型,侧脑室注射N-SMase2激活... 目的研究中性鞘磷脂酶-2(Neutral sphingomyelin-2 N-SMase2)对大鼠脑缺血再灌注损伤中IL-6、IL-1β、TNF-α炎性因子的影响。方法采用线栓法制作SD大鼠大脑中动脉缺血再灌注(ischemia reperfusion I/R)损伤模型,侧脑室注射N-SMase2激活剂(daunorubicin DNR)或抑制剂GW4869,免疫组织化学技术检测蛋白神经酰胺(Ceramide Cera)和N-SMase2的表达,RT-PCR技术检测IL-6、IL-1β、TNF-α等炎性因子的mRNA表达水平。结果与对照组相比,再灌注组(I/R)大鼠脑组织Ceramide和N-SMase2的蛋白表达阳性细胞较对照组增多(P<0.05),IL-6、IL-1β、TNF-α炎性因子的mRNA表达水平升高(P<0.05),侧脑室注射GW4869可显著降低IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA水平(P<0.05)。结论脑缺血再灌注模型中,N-SMase/Cera通路激活,参与调控神经细胞再灌注损伤,而N-SMase2抑制剂GW4869可明显降低IL-6、IL-1β、TNF-α炎性因子的表达。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 N-smase GW4869 炎性因子
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Alk-SMase基因敲除小鼠的饲养繁殖及鉴定 被引量:1
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作者 陈橼 吴金东 +6 位作者 钱俊 朱顺星 邵冰峰 张素青 何向锋 杨俐萍 张一心 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期183-187,共5页
目的 :为了繁育和鉴定碱性鞘磷脂酶(Alkaline sphingomyelinase,alk-SMase)基因敲除小鼠,将引进的基因敲除小鼠进行饲养繁殖,杂合子、纯合子用于继续保种。方法:对其幼鼠剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定;取alkSMase表达组... 目的 :为了繁育和鉴定碱性鞘磷脂酶(Alkaline sphingomyelinase,alk-SMase)基因敲除小鼠,将引进的基因敲除小鼠进行饲养繁殖,杂合子、纯合子用于继续保种。方法:对其幼鼠剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定;取alkSMase表达组织做HE染色进行形态学比较。结果 :对引进小鼠已成功饲养和繁殖,并得到纯合alk-SMase基因缺失型小鼠。结论:正确的饲养、繁殖及基因鉴定方法对于基因敲除小鼠的获得和保种具有重要的意义。 展开更多
关键词 alk-smase 基因敲除小鼠 PCR
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碱性鞘磷脂酶基因剔除鼠的基因型和表型特征 被引量:1
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作者 杨俐萍 朱顺星 +8 位作者 闵娅兰 刘焕良 钱红燕 陈橼 朱菁烨 邵晶晶 雒润华 李静 段瑞冬 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期495-499,共5页
目的为研究alk-SMase在结肠癌发生发展中的作用提供动物模型的实验数据。方法将野生型(WT,+/+)、杂合子(+/-)、纯合子(KO,-/-)alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鉴定;取其肝肠组织进行HE染色、激光共聚焦分析以及质谱仪检... 目的为研究alk-SMase在结肠癌发生发展中的作用提供动物模型的实验数据。方法将野生型(WT,+/+)、杂合子(+/-)、纯合子(KO,-/-)alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鉴定;取其肝肠组织进行HE染色、激光共聚焦分析以及质谱仪检测,观察和分析不同基因型鼠的表型特征。结果与WT和杂合子比较,KO鼠显示:外观和体重无明显区别;基因型鉴定出现一个条带,其分子量为247 bp;小肠黏膜明显增厚,但alk-SMase表达减弱;质谱分析显示在肠道和肝脏中的鞘磷脂含量增高,1-磷酸鞘氨醇含量增加,而神经酰胺含量降低。结论 alk-SMase KO鼠有明显特征,但其外观和体重与其他基因型比较没有明显区别,为研究alk-SMase的生物功能提供了一个理想的动物模型。 展开更多
关键词 碱性鞘磷脂酶 基因剔除小鼠 基因型 表型
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鞘磷脂酶通路与紫外线诱导的细胞凋亡 被引量:1
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作者 邢雁霞 王春波 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期193-197,共5页
紫外线是一种重要的环境因素,对人类日常生活起着广泛的影响效应。大量的非保护的日光暴露不仅可以导致皮肤炎症、过度老化甚至皮肤癌症的发生,而且还能够诱导多种细胞凋亡。鞘磷脂酶-神经酰胺信号通路的激活与细胞凋亡关系密切,本文旨... 紫外线是一种重要的环境因素,对人类日常生活起着广泛的影响效应。大量的非保护的日光暴露不仅可以导致皮肤炎症、过度老化甚至皮肤癌症的发生,而且还能够诱导多种细胞凋亡。鞘磷脂酶-神经酰胺信号通路的激活与细胞凋亡关系密切,本文旨在探讨该通路在介导紫外线诱导细胞凋亡中的地位,重点描述了第二信使神经酰胺代谢的研究进展、鞘磷脂酶通路参与紫外线诱导细胞凋亡的机制。深入了解和研究紫外线诱导细胞凋亡的过程及其相关信号转导途径,有助于指导紫外线辐射的防护,开发新的治疗策略。 展开更多
关键词 鞘磷脂酶 神经酰胺 紫外线 细胞凋亡
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碱性鞘磷脂酶对Caco-2细胞胆固醇吸收的影响及机制研究 被引量:2
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作者 邹军 冯丹 +2 位作者 吕小飞 苏东房 凌文华 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期19-22,共4页
目的探讨碱性鞘磷脂酶(Alk-SMase)对Caco-2细胞胆固醇吸收的影响以及可能机制。方法建立Caco-2细胞单层模型,用100 units/L Alk-SMase孵育细胞24 h后,再用[14C]-胆固醇微胶溶液孵育细胞2 h。用液闪计数仪(LSC)检测细胞胆固醇吸收量,薄... 目的探讨碱性鞘磷脂酶(Alk-SMase)对Caco-2细胞胆固醇吸收的影响以及可能机制。方法建立Caco-2细胞单层模型,用100 units/L Alk-SMase孵育细胞24 h后,再用[14C]-胆固醇微胶溶液孵育细胞2 h。用液闪计数仪(LSC)检测细胞胆固醇吸收量,薄层层析法分离膜磷脂、LSC检测细胞膜[14C]-鞘磷脂含量。结果 [14C]-胆固醇在Caco-2细胞中的吸收呈时间依赖性增加。Alk-SMase能够明显降低Caco-2细胞胆固醇吸收,并减少Caco-2细胞膜鞘磷脂含量,100 mu/ml Alk-SMase能够引起80%[14C]-标记的膜鞘磷脂水解。结论 Alk-SMase能够抑制Caco-2细胞胆固醇吸收,这可能与其水解膜鞘磷脂有关。 展开更多
关键词 碱性鞘磷脂酶 鞘磷脂 胆固醇 CACO-2细胞
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基于结构的虚拟筛选预测斜蛛属蜘蛛毒液天然抑制剂
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作者 Haitham Ahmed Al-Madhagi 《Digital Chinese Medicine》 CSCD 2023年第1期67-72,共6页
目的世界范围内斜蛛属蜘蛛咬伤事故不断增多,急需探索天然抑制剂来抑制最显著的鞘磷脂酶D和透明质酸酶。方法通过DrugRep服务器使用中药抗鞘磷脂酶D(PDB ID:2F9R)和透明质酸酶进行虚拟筛选。通过同一服务器预测吸收、分布、代谢和排泄(A... 目的世界范围内斜蛛属蜘蛛咬伤事故不断增多,急需探索天然抑制剂来抑制最显著的鞘磷脂酶D和透明质酸酶。方法通过DrugRep服务器使用中药抗鞘磷脂酶D(PDB ID:2F9R)和透明质酸酶进行虚拟筛选。通过同一服务器预测吸收、分布、代谢和排泄(ADME)参数。此外,使用CABS-flex 2.0工具进行分子动力学模拟,确定潜在最佳天然抑制剂的优先次序。结果从分子对接和ADME参数来看,中药抑制抗鞘磷脂酶D和透明质酸酶的天然抑制剂中,Tiliroside和Digitoxin表现最佳。而洋地黄毒苷和β-胡萝卜素是对透明质酸酶最有效的抑制剂。分子动力学模拟证明了对接复合物的稳定性。结论通过中药对斜蛛属蜘蛛毒液酶的计算机模拟抑制得到证明,值得开展湿实验分析。 展开更多
关键词 斜蛛属蜘蛛 鞘磷脂酶D 中医药 分子对接 分子动力学模拟 吸收、分布、代谢与排泄(ADME)
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Real-Time and Spatial Electroanalysis of Biomolecules in One Living Cell Using Liquid-Phase Modified Nanopipette 被引量:1
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作者 Kang Liu Rujia Liu +3 位作者 Dengchao Wang Rongrong Pan Hong-Yuan Chen Dechen Jiang 《CCS Chemistry》 CSCD 2023年第6期1285-1292,共8页
The well-developed solid-phase modified strategy at the electrode has enabled the preparation of biosensors for the detection of multiple analytes,even in single living cells.However,limited assay elements can be modi... The well-developed solid-phase modified strategy at the electrode has enabled the preparation of biosensors for the detection of multiple analytes,even in single living cells.However,limited assay elements can be modified at the solid surface,restricting the types of molecules that can be analyzed and the sensitivity of detection.Here,a novel liquid-phase modified strategy at the tip of a nanopipette is designed to realize real-time and local analysis of biomolecules inside the cell that are barely detectable using solid-phase modified nanoelectrodes.This design utilizes the nanotip structure at a platinized carbon open nanopipette to stably retain a nanodroplet that contains the required reagents with high reactivity for the assay of the target analyte.The generated hydrogen peroxide is electrochemically quantified at the Pt layer to carry out the real-time measurement in a living cell with a spatial resolution of 70 nm.Taking advantage of highly spatial and real-time detection,uneven distribution of sphingomyelinase(SMase)in the living CT26 cell is unprecedentedly shown to exhibit the significance in the establishment of liquid-phase modified nanopipette.This new modification strategy opens up a new direction for sensor design and consequently advances the development of biosensors in the chemical and biological research. 展开更多
关键词 liquid-phase modified nanoelectrode local analysis of biomolecules NANODROPLET spatial information of smase
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