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疏肝补肾祛痰法对PCOS大鼠TGF-β1及其受体与信号蛋白Smad4/7表达水平的影响
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作者 黄碧琴 张迎春 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第7期1263-1266,共4页
目的 在前期实验的基础上观察疏肝补肾祛痰法对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢TGF-β1及其受体TGFR-β1与信号蛋白Smad4、Smad7在TGF-β/Smads通路中的表达变化及意义,探讨其抗卵巢纤维化的效果和作用机理。方法 选取6周龄SD雌性大鼠建立... 目的 在前期实验的基础上观察疏肝补肾祛痰法对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢TGF-β1及其受体TGFR-β1与信号蛋白Smad4、Smad7在TGF-β/Smads通路中的表达变化及意义,探讨其抗卵巢纤维化的效果和作用机理。方法 选取6周龄SD雌性大鼠建立PCOS模型,随机分为正常组、模型组、西药阳性组、中药治疗低、中、高剂量组,每组15只。通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠卵巢中TGF-β1/TGFR-β1及信号蛋白Smad4、Smad7的表达量。结果 模型组中TGF-β1、TGFR-β1表达增高(P<0.01),各治疗组中TGF-β1、TGFR-β1的表达降低(P<0.01),西药组与中药低、中剂量组的表达无明显差异性(P>0.05);模型组中Smad4表达增高,Smad7蛋白表达显著降低有显著性差异(P<0.01);各治疗组Smad7均有所升高(P<0.01),中药中剂量组、西药组Smad7无显著性差异(P>0.05);西药组及中药中、高剂量组中Smad4的表达降低(P<0.01),且西药组与中药中、高组表达无差异(P>0.05)。结论 疏肝补肾祛痰法可用于治疗多囊卵巢综合征而其抗纤维化作用可能部分是通过调节TGF-β1/TGFR-β1及信号蛋白Smad4/7的表达,进而调控卵巢TGF-β/Smads信号通路的激活来实现的。 展开更多
关键词 大鼠卵巢纤维化 多囊卵巢综合征 疏肝补肾祛痰法 TGF-β1/TGFR-β1受体 smad4蛋白 SMAD7蛋白
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SMAD4、SOX2、P53在宫颈癌组织中的变化及其临床意义 被引量:1
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作者 施稳稳 王准证 《承德医学院学报》 2025年第3期196-200,共5页
目的探究Smad同源物4(SMAD4)、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、P53基因(P53)在宫颈癌(CCA)患者癌组织中的表达变化及其对预后的预测价值。方法回顾性选取2021年1月~2022年1月漯河市中心医院收治的CCA患者82例为观察组,另选取良性肿瘤患者82... 目的探究Smad同源物4(SMAD4)、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、P53基因(P53)在宫颈癌(CCA)患者癌组织中的表达变化及其对预后的预测价值。方法回顾性选取2021年1月~2022年1月漯河市中心医院收治的CCA患者82例为观察组,另选取良性肿瘤患者82例为对照组,对比2组不同病理特征下SMAD4、SOX2、P53的表达,分析各指标与CCA病理特征的相关性,并探讨其与CCA患者预后的关系。结果观察组SOX2、P53表达情况高于对照组,SMAD4表达情况低于对照组(P<0.05);Ⅰ~Ⅱ期患者SOX2、P53表达情况低于Ⅲ~Ⅳ期,高分化患者低于中、低分化,SMAD4表达情况高于Ⅲ~Ⅳ期,高分化患者高于中、低分化(P<0.05);CCA患者SOX2、P53表达情况与TNM分期呈正相关,与分化程度呈负相关,SMAD4表达情况与TNM分期呈负相关,与分化程度呈正相关(P<0.05);SOX2、P53表达阳性患者2年生存率低于阴性患者,SMAD4表达阳性患者2年生存率高于阴性患者(P<0.05)。结论CCA组织中SOX2、P53表达异常升高,SMAD4表达异常降低,三项指标与CCA发生、TNM分期、分化程度密切相关,可为临床预后预测提供有效参考。 展开更多
关键词 宫颈癌 smad4 SOX2 P53 预后
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ATF3与Smad4在翼状胬肉中的表达及相互作用
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作者 华耘 韩欢欢 +2 位作者 陈冬梅 刘佳琳 赵新荣 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1068-1073,共6页
目的初步探究转录激活因子3(ATF3)与Smad家族成员4(Smad4)在翼状胬肉中的表达及其相互作用。方法通过生物信息学方法来分析NCBI数据库中的两套数据集GSE51995和GSE2513,筛选出以正常结膜作为对照时,翼状胬肉的关键差异表达基因ATF3。并... 目的初步探究转录激活因子3(ATF3)与Smad家族成员4(Smad4)在翼状胬肉中的表达及其相互作用。方法通过生物信息学方法来分析NCBI数据库中的两套数据集GSE51995和GSE2513,筛选出以正常结膜作为对照时,翼状胬肉的关键差异表达基因ATF3。并通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)进一步检测生物信息学分析找出的差异基因。最后结合文献查找并通过基因转录调控数据库(GTRD)预测是否存在可能与目标基因结合的靶基因Smad4,RT-qPCR验证Smad4在正常结膜与翼状胬肉组织中的表达情况,并通过免疫共沉淀(Co-IP)探究ATF3与Smad4蛋白在翼状胬肉中是否存在相互作用。结果生物信息学分析结果显示,以正常结膜组织为对照,翼状胬肉组织中存在有显著性差异的低表达基因ATF3(P<0.05)。RT-qPCR实验显示,与正常结膜组织相比,ATF3在翼状胬肉组织中低表达(P<0.001)。数据库(GTRD)中检索出Smad4基因与ATF3有两个结合位点,提示可能与ATF3存在相互作用。与正常结膜相比,RT-qPCR显示翼状胬肉组织中Smad4表达下调(P<0.01),Co-IP结果显示,在使用ATF3抗体进行免疫沉淀时,翼状胬肉组织中Smad4结合量增加(P<0.05)。结论ATF3与Smad4在翼状胬肉中存在相互作用,二者在翼状胬肉组织中的低表达及其相互作用可能与翼状胬肉的发病相关。 展开更多
关键词 翼状胬肉 ATF3 smad4 相互作用 初步探究
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结直肠癌SMAD4基因突变的临床意义
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作者 张海明 王伟杰 +5 位作者 张娜 王文静 马世虎 苏进达 赵少辉 谢小亮 《宁夏医科大学学报》 2025年第1期31-39,共9页
目的 探讨SMAD4基因突变与结直肠癌关键基因突变、临床病理特征的关系以及SMAD4蛋白在结直肠癌组织及癌旁组织表达的差异,分析其与结直肠癌发生和发展的关系及临床意义。方法 运用二代基因测序技术(NGS)检测310例结直肠癌组织中包括SMAD... 目的 探讨SMAD4基因突变与结直肠癌关键基因突变、临床病理特征的关系以及SMAD4蛋白在结直肠癌组织及癌旁组织表达的差异,分析其与结直肠癌发生和发展的关系及临床意义。方法 运用二代基因测序技术(NGS)检测310例结直肠癌组织中包括SMAD4基因在内的多种基因的突变情况。采用免疫组织化学技术分别检测SMAD4突变组和野生组的癌组织及癌旁组织的SMAD4蛋白表达水平。分别使用CD34、D2-40、S100标记结直肠癌组织的血管、淋巴管及神经组织,显微镜下观察肿瘤细胞浸润周围血管、淋巴管及神经情况。结果 310例结直肠癌组织中,50例结直肠癌发生SMAD4突变,突变率为16.1%,突变位点主要位于MH2结构域。SMAD4基因突变与患者的分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平相关(P均<0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、浸润深度、表皮生长因子(EGFR)表达及错配修复(MMR)等均无关(P均>0.05);SMAD4突变与KRAS、BRAF突变相关(P均<0.01),而与TP53、APC、PIK3CA、FBXW7、PTEN等基因突变不相关(P均>0.05)。SMAD4蛋白在突变组的表达低于野生组,且在癌组织的表达两组均低于癌旁组织(P均<0.05);在SMAD4突变组中,癌组织的SMAD4蛋白表达与患者的分化程度、淋巴结转移、TNM分期、血管浸润及淋巴管浸润均相关(P均<0.05);在SMAD4野生组中,癌组织的SMAD4蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、血管浸润、淋巴管浸润及神经浸润均不相关(P均>0.05)。结论 SMAD4基因突变伴随着SMAD4蛋白表达下降,促进肿瘤发生血管、淋巴管浸润,SMAD4基因可能成为结直肠癌精准治疗潜在的新靶点。 展开更多
关键词 结直肠癌 smad4基因 二代基因测序 血管浸润 淋巴管浸润
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Smad4-miR-128a-Bmi-1调控轴在肺腺癌A549细胞中的作用机制
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作者 李荟 武迎澳 +2 位作者 高雨欣 赵宝霞 孟秀香 《实用癌症杂志》 2025年第5期730-737,共8页
目的探讨Bmi-1是否可与Smad4和miR-128a形成Smad4-miR-128a-Bmi-1调控轴,并在人肺腺癌细胞株-A549中发挥调节作用,分析其作用机制。方法通过生物信息学技术、测序、染色质免疫共沉淀实验和Western Blot技术确定筛选的转录因子与miR-128... 目的探讨Bmi-1是否可与Smad4和miR-128a形成Smad4-miR-128a-Bmi-1调控轴,并在人肺腺癌细胞株-A549中发挥调节作用,分析其作用机制。方法通过生物信息学技术、测序、染色质免疫共沉淀实验和Western Blot技术确定筛选的转录因子与miR-128a之间的结合和调控关系,并通过5'Race实验明确miR-128a的转录起始位点;应用肿瘤免疫评估数据库和人类蛋白质图谱等数据库分析Smad4基因在肺腺癌中的表达情况,并在细胞水平验证Smad4、miR-128a和Bmi-1 mRNA和蛋白的表达情况;利用质粒构建过表达载体Smad4、敲减Bmi-1及化学合成miR-128a mimic,瞬时转染到A549细胞中,进一步验证转染效率;过表达Smad4、过表达miR-128a mimic和敲减Bmi-1后,验证Smad4、miR-128a和Bmi-1三者间的调控关系;分别共转染miR-128a mimic+Bmi-1及Smad4+miR-128a mimic,通过qRT-PCR实验反向验证Smad4、miR-128a和Bmi-1三者间的调控关系。结果经筛选确定与miR-128a可能存在结合和调控关系的候选转录因子为Smad3和Smad4。与对照组相比,在A549细胞中,Smad4和miR-128a表达水平低(P<0.01),而Bmi-1表达水平高(P<0.01)。在A549细胞中分别过表达Smad4、miR-128a和敲减Bmi-1后,可发现Smad4、miR-128a和Bmi-1之间存在调控关系,经共转染反向验证也可得到相同结果。结论转录因子Smad4可通过调节磷酸化Smad3进而调控miR-128a的表达,且miR-128a的转录起始位点位于其上游278bp的A碱基处;Smad4、miR-128a和Bmi-1可形成调控轴Smad4-miR-128a-Bmi-1,并在人肺腺癌细胞株-A549中发挥作用。 展开更多
关键词 smad4 miR-128a BMI-1 肺肿瘤 人肺腺癌细胞株-A549
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miR-130b-3p靶向调控Smad4在体外非酒精性脂肪性肝病细胞模型脂代谢中的作用
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作者 刘华梅 张鑫 孙家敏 《中国卫生标准管理》 2025年第13期170-174,共5页
目的探讨微小核糖核酸(microRNA,miR)-130b-3p和Smad4(mothers against decapentaplegic homolog 4)在非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型中的表达特征,并阐明2者在脂代谢中的靶向调控机制。方法应... 目的探讨微小核糖核酸(microRNA,miR)-130b-3p和Smad4(mothers against decapentaplegic homolog 4)在非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型中的表达特征,并阐明2者在脂代谢中的靶向调控机制。方法应用棕榈酸与肝细胞共孵育24 h,构建NAFLD细胞模型,并分为正常对照组、模型组、miR-130b-3p mimic组及mimic NC组。采用定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测各组细胞中miR-130b-3p和Smad4 mRNA的表达水平。将miR-130b-3p模拟物和对照模拟物转染至NAFLD细胞模型中,通过油红O染色检测细胞内脂质蓄积,Western blot法检测细胞内甘油三酯脂酶蛋白和Smad4蛋白的表达。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-130b-3p与Smad4的靶向关系。结果模型组甘油三酯脂酶蛋白表达高于正常对照组,miR-130b-3p表达水平、Smad4 mRNA、Smad4蛋白表达水平低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-130b-3p mimic组的Smad4 mRNA、Smad4蛋白表达及甘油三酯脂酶蛋白表达高于模型组、mimic NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶向抑制miR-130b-3p下调Smad4表达,能影响体外诱导的非酒精性脂肪性肝病细胞模型脂代谢,有望成为NAFLD的新治疗靶点。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 miR-130b-3p smad4 脂质代谢 棕榈酸 甘油三酯
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富血小板血浆对难治性溃疡创面肉芽组织TGF-β_(1)/Smad4水平的影响及意义
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作者 李忠兴 王嘉欣 +4 位作者 何金凤 张亚辉 付永峰 任娟 单楠 《中国实验诊断学》 2025年第2期180-183,共4页
目的观察富血小板血浆(PRP)对难治性溃疡的临床效果及其对创面肉芽组织TGF-β_(1)/Smad4表达的影响和意义。方法选取2019年1月1日至2021年12月31日在秦皇岛市第一医院住院的难治性皮肤溃疡患者116例,随机分为对照组和观察组,每组58例。... 目的观察富血小板血浆(PRP)对难治性溃疡的临床效果及其对创面肉芽组织TGF-β_(1)/Smad4表达的影响和意义。方法选取2019年1月1日至2021年12月31日在秦皇岛市第一医院住院的难治性皮肤溃疡患者116例,随机分为对照组和观察组,每组58例。于创面进入红色期时,对照组予以常规清创与敷料换药治疗,观察组在创面加用PRP伤口内注射与PRP凝胶覆盖。红色期第7d、第14d取两组创面肉芽组织,采用ELISA实验检测TGF-β_(1)和Smad4的水平;12W后评估疗效,并记录创面愈合时间和用药期间的不良反应发生情况。结果创面进入红色期时,两组患者肉芽组织的TGF-β_(1)和Smad4水平比较无显著性差异(P>0.05);红色期第7d,两组患者肉芽组织中TGF-β_(1)、Smad4水平较之前明显升高,且观察组高于对照组(P<0.05);红色期第14d,对照组的TGF-β_(1)、Smad4水平与红色期7d相比差异不大,观察组的TGF-β_(1)、Smad4水平仍有持续升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。观察组临床有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);红色期第14d的TGF-β_(1)、Smad4水平对临床疗效有较好的预测价值(P<0.05)。观察组溃疡面愈合时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);红色期第14d的TGF-β_(1)、Smad4水平与愈合时间呈现出高度负相关性(r=-0.774、-0.805,P<0.05)。结论PRP能够提高肉芽组织中TGF-β_(1)、Smad4分泌水平,促进组织修复。 展开更多
关键词 富血小板血浆 难治性溃疡 转化生长因子(TGF-β_(1)) smad4
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SMAD4基因缺失在胰腺癌细胞对吉西他滨耐药中的作用研究
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作者 吴博雅 安倩 +1 位作者 曹睿 陈静 《中国现代应用药学》 北大核心 2025年第6期879-889,共11页
目的 探究SMAD4基因与胰腺癌细胞对吉西他滨耐药性的关系,为胰腺癌的个体化医疗提供新的研究思路。方法 生物信息学分析SMAD4基因在胰腺癌细胞中的表达水平,高通量测序检测AsPC-1与MIA-PaCa2基因序列,CCK8法与台盼蓝染色实验检测不同浓... 目的 探究SMAD4基因与胰腺癌细胞对吉西他滨耐药性的关系,为胰腺癌的个体化医疗提供新的研究思路。方法 生物信息学分析SMAD4基因在胰腺癌细胞中的表达水平,高通量测序检测AsPC-1与MIA-PaCa2基因序列,CCK8法与台盼蓝染色实验检测不同浓度吉西他滨对胰腺癌细胞的毒性作用,进而选取最佳作用浓度与时间,实时荧光定量PCR和Western blotting试验检测SMAD4基因的mRNA和蛋白水平的表达,划痕试验和Transwell试验检测沉默或过表达SMAD4基因在吉西他滨共同作用下对细胞迁移、侵袭能力的影响。结果 cBioPortal数据库分析有33%胰腺癌患者发生SMAD4基因突变,且突变多为缺失、错义突变和截断突变;高通量测序分析、实时荧光定量PCR及Western blotting证明SMAD4基因在MIA PaCa-2细胞的mRNA与蛋白水平的表达量均明显高于AsPC-1细胞,吉西他滨作用于AsPC-1细胞的最佳浓度为10^(-5) mol·L^(-1)、最佳作用时间是48 h,吉西他滨作用MIA PaCa-2细胞的最佳浓度为10^(-7) mol·L^(-1)、最佳作用时间是48 h。与对照组相比,沉默SMAD4基因后吉西他滨作用MIA PaCa-2细胞的存活率明显上升;与PBS组相比,加药组细胞迁移和侵袭的细胞数明显降低,但转染组相较于无转染组的迁移侵袭的细胞数明显上调。过表达SMAD4基因后,吉西他滨作用于转染组细胞的存活率明显低于对照组,且转染质粒加药组的细胞划痕面积减少最慢,通过小室的侵袭细胞数明显减少。结论 SMAD4基因在AsPC-1细胞和MIA PaCa-2细胞中存在明显差异。SMAD4基因缺失与胰腺癌细胞对吉西他滨耐药性相关。SMAD4基因作为一种抑癌基因,能增强吉西他滨抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的能力,有望成为解决胰腺癌耐药性问题的新靶点。 展开更多
关键词 胰腺癌 smad4 吉西他滨 耐药性
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SMAD4对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的调控作用
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作者 董安琪 郑金丹 +1 位作者 于晓萌 刘丽丽 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第3期223-227,共5页
目的探讨SMAD4对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法脱氢表雄酮(DHEA)法构建PCOS大鼠模型,体外提取并培养颗粒细胞。实时定量PCR、Western blotting检测大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平。SMAD4-siRNA转染PCO... 目的探讨SMAD4对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法脱氢表雄酮(DHEA)法构建PCOS大鼠模型,体外提取并培养颗粒细胞。实时定量PCR、Western blotting检测大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平。SMAD4-siRNA转染PCOS大鼠卵巢颗粒细胞,实时定量PCR检测转染后细胞中SMAD4 mRNA水平,Western blotting检测转染后细胞中SMAD4、PCNA、BAX、BCL-2蛋白表达水平。CCK-8法检测siRNA干扰PCOS大鼠卵巢颗粒细胞后细胞生长情况。结果HE染色显示,PCOS组大鼠卵巢卵泡空泡增多,颗粒细胞层数和黄体数明显减少,造模成功。FSHR阳性率大于95%。与对照组相比,PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平升高(P<0.05)。siRNA可显著降低PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平(P<0.01),并可促进颗粒细胞增殖、抑制凋亡。结论PCOS大鼠卵巢颗粒细胞发育障碍可能与SMAD4基因过表达有关,SMAD4有望成为治疗PCOS患者排卵障碍的潜在靶点。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 颗粒细胞 smad4
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人胰腺癌组织中DPC4/Smad4、p21^(wafI)、p16蛋白表达的检测 被引量:4
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作者 谷丽君 陈杰 +3 位作者 卢朝晖 李理 周炜洵 罗玉凤 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期132-137,共6页
背景与目的:近一半的胰腺癌存在DPC4/Smad4失活,使肿瘤细胞增殖的抑制作用丧失;p21waf1是Smad4调控的下游靶基因,而DPC4和p16基因在胰腺癌的发生中可能有协同作用。本研究拟通过研究DPC4/Smad4、p21wafI、p16蛋白在人胰腺癌中的表达情况... 背景与目的:近一半的胰腺癌存在DPC4/Smad4失活,使肿瘤细胞增殖的抑制作用丧失;p21waf1是Smad4调控的下游靶基因,而DPC4和p16基因在胰腺癌的发生中可能有协同作用。本研究拟通过研究DPC4/Smad4、p21wafI、p16蛋白在人胰腺癌中的表达情况,探讨三者之间的关系及它们在胰腺癌中的可能作用机制。方法:用免疫组化技术检测56例石蜡包埋人胰腺癌组织Smad4、p21wafI、p16的蛋白表达情况;用原位杂交、免疫组化技术、Westernblot检测5株人胰腺腺癌细胞系中DPC4/Smad4的mRNA和蛋白表达情况。结果:石蜡包埋人胰腺癌组织免疫组化显示Smad4、p21wafI和p16阳性率分别为58.93%、48.21%和42.86%,对应癌旁非癌胰腺组织阳性率分别为89.29%、87.5%和76.79%;P3、P4、P7人胰腺腺癌细胞系DPC4/Smad4的原位杂交、免疫组化及Westernblot均为阳性,而P1、P2均为阴性。统计学分析显示胰腺癌及癌旁非癌胰腺之间3种蛋白表达均有显著性差异(P<0.05),胰腺癌中Smad4与p21wafI表达之间有一定相关性(P<0.05),Smad4与p16表达之间有一定相关性(P<0.05),但p21wafI与p16表达之间无显著相关(P>0.05)。结论:胰腺癌与正常胰腺相比,Smad4、p21wafI、p16蛋白表达明显下降,其改变在胰腺癌的发生发展中可能起重要作用。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 基因表达 smad4 p21^wafI p16 DPC4/smad4 基因表达 检测
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补肾中药成分配伍对成骨细胞成骨活性及Smad4 mRNA表达的影响 被引量:5
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作者 贾英民 李瑞玉 +3 位作者 武密山 霍瑞楼 李彬 郭雅静 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第33期5289-5294,共6页
背景:补肾中药对动物及细胞实验研究提示具有防治骨质疏松及改善骨代谢作用,但补肾中药的配伍研究较少且复杂,且有效作用成分之间的相互作用及药物物质基础尚不确定,筛选最佳配伍困难。目的:通过采用不同补肾中药成分配伍,对新生SD大鼠... 背景:补肾中药对动物及细胞实验研究提示具有防治骨质疏松及改善骨代谢作用,但补肾中药的配伍研究较少且复杂,且有效作用成分之间的相互作用及药物物质基础尚不确定,筛选最佳配伍困难。目的:通过采用不同补肾中药成分配伍,对新生SD大鼠成骨细胞进行干预性培养,并对其增殖、分化、Smad4m RNA表达进行测定,从而筛选并确定补肾中药的最佳配伍。方法:第5代成骨细胞分为5组:淫羊藿苷组细胞中加入1×10-5mol/L的淫羊藿苷;淫羊藿苷+柚皮苷组细胞中加入1×10-5mol/L淫羊藿苷+1×10-5mol/L柚皮苷;淫羊藿苷+薯蓣皂苷元组细胞中加入1×10-5mol/L淫羊藿苷+1×10-5mol/L薯蓣皂苷元;淫羊藿苷+梓醇组细胞中加入1×10-5mol/L淫羊藿苷+1×10-5mol/L梓醇;对照组细胞中加入10μL生理盐水。每组6个复孔。结果与结论:与对照组相比,淫羊藿苷+柚皮苷组和淫羊藿苷+薯蓣皂苷元组成骨细胞增殖能力及Smad4m RNA表达水平增加,且培养72 h时,淫羊藿苷+柚皮苷组成骨细胞增殖能力最强。48 h时,淫羊藿苷+柚皮苷组和淫羊藿苷+薯蓣皂苷元组成骨细胞碱性磷酸酶活性高于对照组;72 h,淫羊藿苷+柚皮苷组和淫羊藿苷+梓醇组成骨细胞碱性磷酸酶活性高于对照组。提示淫羊藿苷等补肾中药成分配伍可以影响成骨细胞的成骨活性,且其中以淫羊藿苷配伍柚皮苷的作用最强。 展开更多
关键词 成骨细胞 淫羊藿属 smad4蛋白质 碱性磷酸酶 组织工程 补肾中药 骨质疏松症 淫羊藿苷 配伍 有效成分 增殖 分化 转化生长因子β smad4
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黑色素瘤组织中Runx3与Smad4蛋白表达及其临床意义
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作者 刘柔嘉 周君 孙欢 《中外医学研究》 2025年第10期57-60,共4页
目的:分析Runx3、Smad4蛋白表达与黑色素瘤侵袭能力及预后的相关性。方法:通过免疫组化化学法测定2021年1月—2023年4月于莆田学院附属医院手术切除、病理确诊的72例恶性黑色素瘤组织(后文简称“瘤组织”)、40例正常皮肤组织中Runx3、Sm... 目的:分析Runx3、Smad4蛋白表达与黑色素瘤侵袭能力及预后的相关性。方法:通过免疫组化化学法测定2021年1月—2023年4月于莆田学院附属医院手术切除、病理确诊的72例恶性黑色素瘤组织(后文简称“瘤组织”)、40例正常皮肤组织中Runx3、Smad4蛋白表达,Spearman相关性分析黑色素瘤Runx3与Smad4蛋白的相关性,并分析其与恶性黑色素瘤病理特征及预后的关系。结果:瘤组织Runx3、Smad4蛋白阳性表达率(30.56%、37.50%),均显著低于正常皮肤组织(90.00%、95.00%),差异有统计学意义(P<0.05);黑色素瘤组织Runx3蛋白与Smad4蛋白表达呈正相关(P<0.05);Clark分级Ⅰ~Ⅲ级、原位黑色素瘤、无淋巴结转移患者Runx3、Smad4蛋白阳性表达率分别显著高于Clark分级Ⅳ级、Ⅴ级,侵袭性黑色素瘤、淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05);Runx3、Smad4阳性表达患者1年预后不良率均低于Runx3、Smad4阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黑色素瘤组织Runx3、Smad4蛋白低表达,参与其侵袭转移,阴性表达患者预后不良可能性更大。 展开更多
关键词 RUNX3 smad4 黑色素瘤 侵袭能力 预后
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BMP4/SMAD4通过下调GJA 1基因表达影响绵羊卵巢颗粒间隙连接活性
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作者 何雨 王翔宇 +2 位作者 狄冉 储明星 梁琛 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期679-688,共10页
旨在探索骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)对绵羊卵巢颗粒细胞中间隙连接蛋白基因(gap junction protein alpha 1,GJA 1)表达的影响及其分子调控机制。本研究利用廊坊市屠宰场收集的2~4岁健康绵羊卵巢分离颗粒细胞,... 旨在探索骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)对绵羊卵巢颗粒细胞中间隙连接蛋白基因(gap junction protein alpha 1,GJA 1)表达的影响及其分子调控机制。本研究利用廊坊市屠宰场收集的2~4岁健康绵羊卵巢分离颗粒细胞,采用免疫荧光染色技术定位GJA1在颗粒细胞中的分布。将细胞随机分为4组,分别添加0、10、50和100 ng·mL^(-1)浓度的重组BMP4蛋白,每组3个重复,培养24 h,利用CCK-8法评估细胞活性,RT-qPCR和Western blot研究BMP4对GJA 1的mRNA和蛋白表达水平的影响。为探究BMP4调控GJA 1表达的潜在机制,将细胞随机分为3组,每组3个重复,除对照组外分别添加10μmol·L^(-1)BMP I型受体抑制剂(Dorsomorphin)和干扰小RNA敲除SMAD家族蛋白4(SMAD family member 4,SMAD 4),均添加100 ng·mL^(-1)的BMP4处理细胞24 h,RT-qPCR检测GJA 1和SMAD 4表达量,Western blot分析测定GJA1和SMAD4表达水平以及SMAD1/5/8的磷酸化水平,最后利用划痕染料示踪试验检测绵羊卵巢颗粒细胞之间的间隙连接活性。结果显示,BMP4显著抑制了绵羊卵巢颗粒细胞中GJA 1表达和间隙连接活性(P<0.05),此抑制效应在添加Dorsomorphin和敲除SMAD 4后显著减弱(P<0.05),同时,BMP4处理显著增加了SMAD1/5/8的磷酸化水平(P<0.05)。综上,BMP4通过SMAD1/5/8-SMAD4信号转导调控GJA 1表达进而影响颗粒细胞间隙连接活性,本结果增加了对绵羊BMP/SMAD通路调控颗粒细胞间隙连接活性的了解,为改进体外卵泡成熟方法和高繁母羊的分子育种提供了基础。 展开更多
关键词 绵羊 卵巢颗粒细胞 BMP4 间隙连接 GJA1 SMAD 4
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Smad4蛋白在胆道癌中的表达与意义
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作者 施红旗 刘庆伟 +1 位作者 楼善贤 朱寿田 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2006年第1期35-36,共2页
关键词 smad4蛋白 胆道癌 生物学行为特点 carcinoma 候选抑癌基因 smad4基因 免疫组化方法 早期诊断 tract 高度侵袭性
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miR-145-5p通过SMAD4基因对食管鳞状细胞癌细胞增殖与凋亡影响
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作者 赵红丹 郭康 +1 位作者 宋士军 高明 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2022年第4期577-583,共7页
目的探究miR-145-5p靶向调控SMAD4基因对食管鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法收集68例食管鳞状细胞癌病人癌组织及其癌旁正常组织,采用免疫组织化学方法检测SMAD4蛋白阳性表达率,应用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术... 目的探究miR-145-5p靶向调控SMAD4基因对食管鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法收集68例食管鳞状细胞癌病人癌组织及其癌旁正常组织,采用免疫组织化学方法检测SMAD4蛋白阳性表达率,应用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测食管鳞状细胞癌及其癌旁正常组织中miR-145-5p和SMAD4表达水平。筛选合适食管鳞状细胞癌细胞株分为Blank组、NC组、miR-145-5pmimic组、miR-145-5pinhibitor组、siRNA-SMAD4组和miR-145-5pinhibitor+siRNA-SMAD4组。生物学网站和双荧光素酶实验验证miR-145-5p和SMAD4的靶向关系。qRT-PCR检测miR-145-5p、SMAD4、TGF-β、Bcl-2和Bax的mRNA表达水平,WesternBlot分别检测SMAD4、TGF-β、Bcl-2和Bax的蛋白的表达水平。CCK8方法检测细胞增殖活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果免疫组织化学检测显示,SMAD4阳性颗粒主要表达于细胞浆或细胞核,且与癌旁正常组织相比,食管鳞状细胞癌组织中SMAD4阳性率明显升高( χ^(2)=14.251,P<0.05);而qRT-PCR显示miR-145-5p表达水平显著降低(t=109.800,P<0.05)。相比其他细胞株,ECA-109细胞中的miR-145-5p表达量最低(F=48.000,P<0.05),选用于后续实验。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-145-5p可靶向调控SMAD4(t=21.820,P<0.05)。与Blank组相比,NC组的各项指标无显著差异(P均>0.05);与Blank组和NC组相比,miR-145-5pmimic组miR-145-5p和Bax表达增加,SMAD4、TGF-β和Bcl-2表达降低,细胞增殖能力明显下降,细胞凋亡率显著上升(P均<0.05);siRNA-SMAD4组miR-145-5p表达无明显变化,Bax表达增加,SMAD4、TGF-β和Bcl-2表达降低,细胞增殖能力明显下降,细胞凋亡率显著上升(P均<0.05);miR-145-5pinhibitor组miR-145-5p和Bax表达降低,SMAD4、TGF-β和Bcl-2表达上升,细胞增殖能力明显上升,细胞凋亡率显著下降(P均<0.05);而miR-145-5pinhibitor+siRNA-SMAD4组与Blank组和NC组相比组间差异无显著性(P均>0.05)。结论miR-145-5p高表达可通过靶向抑制SMAD4基因表达,抑制TGF-β/Smad4信号通路的激活,抑制食管鳞状细胞癌细胞增殖并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管鳞癌 微RNAS smad4蛋白质 TGF-β/smad4信号通路 细胞增殖 细胞凋亡
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抑癌基因Smad4与胃肠道肿瘤 被引量:1
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作者 李冬妹 杨磊 《国外医学(消化系疾病分册)》 2005年第4期254-255,244,共3页
Smad4是一种肿瘤抑制基因,其编码的蛋白是转化生长因子-β(TGF-β)超家族细胞内信号转导和调节的中心分子。Smad4突变失活引起的TGF-β信号转导紊乱,导致肿瘤细胞对TGF-β的生长抑制作用逃逸,与胃肠道肿瘤的发生发展存在一定关系。突变... Smad4是一种肿瘤抑制基因,其编码的蛋白是转化生长因子-β(TGF-β)超家族细胞内信号转导和调节的中心分子。Smad4突变失活引起的TGF-β信号转导紊乱,导致肿瘤细胞对TGF-β的生长抑制作用逃逸,与胃肠道肿瘤的发生发展存在一定关系。突变的Smad4蛋白较野生型更易被泛素介导的蛋白酶体降解。 展开更多
关键词 smad4 胃肠道肿瘤 肿瘤抑制基因 TGF-β信号转导 smad4蛋白 转化生长因子-β(TGF-β) 抑癌基因 细胞内信号转导 生长抑制作用 蛋白酶体
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SMAD4蛋白免疫组织化学反映幼年性息肉病综合征遗传状态
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作者 阿茹晗 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2012年第7期795-795,共1页
幼年性息肉综合征(JPS)可能由SMAD4基因的生殖缺陷导致。研究者利用SMAD4蛋白的免疫组织化学方法研究了20例有SMAD4生殖缺陷的息肉,并采用38例无生殖缺陷息肉作对照。20例中有9例为SMAD4基因表达缺失,有5例为SMAD4基因的杂合性缺失,
关键词 smad4蛋白 免疫组织化学方法 息肉病综合征 幼年性 smad4基因 状态 遗传 基因表达缺失
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磁共振成像联合血清SLIT3、Smad4在膝关节退行性骨关节炎患者关节损伤程度中的评估价值
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作者 朱洁 闫苗苗 +2 位作者 王剑 刘荣 崔涛涛 《中国CT和MRI杂志》 2025年第11期173-176,共4页
目的探究磁共振成像(MRI)联合血清神经轴突生长因子3(SLIT3)、Smad同源物4(Smad4)在膝关节退行性骨关节炎(OA)患者关节损伤程度中的评估价值。方法选取本院2021年9月至2023年9月收治的膝关节退行性OA患者180例作为观察对象,所有患者均进... 目的探究磁共振成像(MRI)联合血清神经轴突生长因子3(SLIT3)、Smad同源物4(Smad4)在膝关节退行性骨关节炎(OA)患者关节损伤程度中的评估价值。方法选取本院2021年9月至2023年9月收治的膝关节退行性OA患者180例作为观察对象,所有患者均进行MRI检查;血清SLIT3、Smad4采用ELISA检测,以关节镜为金标准,采用四格表分析MRI对关节软骨损伤以及膝关节退行性OA患者关节损伤程度的诊断价值。绘制ROC曲线分析MRI、血清SLIT3、Smad4对膝关节退行性OA患者关节中重度损伤的评估价值。结果MRI和关节镜对关节炎症状的检出率比较无差异(P>0.05)。MRI检测出现膝关节退行性OA患者关节损伤轻度136例,中度35例,重度9例,其诊断轻度的准确度98.89%,中度的准确度96.67%,重度的准确度97.78%。轻度、中度和重度组血清SLIT3、Smad4水平依次降低(P<0.05)。根据ROC曲线得知,MRI、血清SLIT3、Smad4评估膝关节退行性OA患者关节中重度损伤的AUC为0.911、0.875、0.825,三者联合评估膝关节退行性OA患者关节中重度损伤的AUC为0.978,三者联合优于各自单独预测(_(Z联合vs MRI)=2.553,Z_(联合vs SLIT3)=2.586,Z_(联合vs Smad4)=2.567,P均<0.05)。结论膝关节退行性OA患者中血清SLIT3、Smad4水平随着关节损伤程度的升高而降低,MRI诊断膝关节退行性OA患者关节损伤程度的准确度较高,MRI联合血清SLIT3、Smad4可提高对膝关节退行性OA患者关节损伤程度的评估价值。 展开更多
关键词 磁共振成像 神经轴突生长因子3 Smad同源物4 膝关节退行性骨关节炎 损伤程度
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胃癌组织TGF-βRII、Smad4、Smad7的表达及其与临床病理特征和生存的关系 被引量:16
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作者 陆斌 周永宁 +5 位作者 李强 吴正奇 张志镒 姬瑞 郭庆红 刘伟 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第5期538-542,共5页
背景与目的:目前研究认为,TGF-β/Smads信号通路在恶性肿瘤的发生发展过程中起到重要的作用,并可能与胃癌等恶性肿瘤的生物学行为密切相关。本研究通过探讨TGF-βRⅡ、Smad4和Smad7在胃癌组织的表达及其意义,分析它们与临床病理特征及... 背景与目的:目前研究认为,TGF-β/Smads信号通路在恶性肿瘤的发生发展过程中起到重要的作用,并可能与胃癌等恶性肿瘤的生物学行为密切相关。本研究通过探讨TGF-βRⅡ、Smad4和Smad7在胃癌组织的表达及其意义,分析它们与临床病理特征及患者生存之间的关系。方法:应用组织芯片技术和免疫组化SABC法检测200例胃癌组织及56例癌旁组织TGF-βRⅡ、Smad4和Smad7蛋白的表达。结果:胃癌组织中TGF-βRⅡ、Smad4和Smad7的阳性率分别为25.5%、67.0%和47.0%。TGF-βRⅡ表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、分化程度和Lauren分型密切相关(分别χ2=6.214,χ2=11.308,χ2=14.633和χ2=8.216,均P<0.05);Smad4表达与胃癌分化程度及Lauren分型密切相关(分别χ2=16.162和χ2=13.100,均P<0.05);Smad7表达与胃癌分化程度及Lauren分型密切相关(分别χ2=4.710和χ2=5.297,均P<0.05);Smad4与TGF-βRⅡ表达呈正相关(r=0.191,P=0.007);Smad4表达与患者生存密切相关(χ2=4.090,P=0.043)。结论:胃癌组织中广泛存在TGFβ-Smad信号通路相关分子TGF-βRⅡ、Smad4和Smad7表达异常。胃癌中Smad4蛋白阳性患者其预后优于阴性者。 展开更多
关键词 胃肿瘤 TGF-βRⅡ smad4 SMAD7 临床病理学 生存期
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左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠肾脏TGF-β_1/Smad4 mRNA表达的影响 被引量:27
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作者 任艳玲 李娅玲 +3 位作者 吕海波 刘立萍 赵金茹 王良辰 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第10期190-194,共5页
目的:研究左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用及其机制。方法:SD雌性大鼠分为正常组,假手术组,模型组,左归丸高、中、低剂量组,及尼尔雌醇组,采用去卵巢的方法建立绝经后骨质疏松症模型,术后21 d开始给药:正常组,假手术组ig生理盐水... 目的:研究左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用及其机制。方法:SD雌性大鼠分为正常组,假手术组,模型组,左归丸高、中、低剂量组,及尼尔雌醇组,采用去卵巢的方法建立绝经后骨质疏松症模型,术后21 d开始给药:正常组,假手术组ig生理盐水;左归丸高、中、低剂量组分别ig 6.4,3.2,1.6 g·kg-1,1次/d;尼尔雌醇组ig 0.021 g·kg-1,1次/周,连续60d。取大鼠左后肢股骨远端1/3做病理切片,光镜下观察骨组织形态学变化,测定骨小梁面积百分比(Tb.Ar);采用双能X射线骨密度仪测定右后肢离体股骨近端1/3及股骨整体的骨密度(BMD);采用RT-PCR法检测大鼠肾髓质的转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad4 mRNA表达。结果:与模型组比较,左归丸高、中剂量组骨小梁面积百分率(Tb.Ar)显著升高(P<0.05),左归丸高、中剂量组的股骨的骨密度显著升高(P<0.05);各组肾脏组织病理形态学未见明显病理变化;与正常组相比,模型空白组TGF-β1,Smad4 mRNA水平过高表达(P<0.05);与模型组相比,各给药组肾组织中TGF-β1,Smad4 mRNA表达均显著下调(P<0.05),且左归丸各剂量组的下调力度均强于尼尔雌醇组,但以左归丸低剂量组下调最为显著。结论:左归丸能有效防治绝经后骨质疏松症,其作用机制之一可能与其干预肾组织中TGF-β1/Smad4的信号转导通路有关。 展开更多
关键词 左归丸 绝经后骨质疏松症 转化生长因子-Β1 smad4
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