目的在“骨肉不相亲”理论指导下,比较废用性骨质疏松症大鼠股骨、腓肠肌中果蝇母本抗生存因子蛋白2/3(small mother against decapentaplegic 2/3,Smad2/3)、特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)表达在中医不同治法下的影响,分析...目的在“骨肉不相亲”理论指导下,比较废用性骨质疏松症大鼠股骨、腓肠肌中果蝇母本抗生存因子蛋白2/3(small mother against decapentaplegic 2/3,Smad2/3)、特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)表达在中医不同治法下的影响,分析中医药对其的防治机制。方法将60只大鼠随机分为正常组、模型组、补肾组、健脾组、补肾健脾组、西药组6组,并适应性喂养1周,造模组采用尾吊法建立模型,5周后取大鼠的腹主动脉血清、股骨及腓肠肌。通过骨密度检测和对股骨远端横断面处的骨形态进行三维重建观察比较各组大鼠股骨组织结构变化,评估骨质流失情况。采用HE染色和Masson染色观察大鼠腓肠肌组织的形态学变化。采用ELISA法检测各组大鼠血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)水平和股骨、腓肠肌中Smad2/3、SP1蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠股骨骨密度显著降低(P<0.01),骨微结构破坏明显;腓肠肌肌纤维萎缩,排列疏松;血清ALP水平显著降低、TRACP水平显著升高(P<0.01);股骨与腓肠肌中Smad2/3、SP1蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组股骨骨密度明显升高(P<0.05),骨微结构修复明显;腓肠肌肌纤维增粗,肌间隙减小;ALP水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,补肾健脾组和西药组TRACP水平降低最显著(P<0.01),其次是补肾组(P<0.05);各给药组股骨与腓肠肌中Smad2/3、SP1蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论废用性骨质疏松症的发生、发展可能与骨骼及肌肉中Smad2/3、SP1蛋白表达的升高有关,二者的高表达可能会导致骨-肌失衡。各中医治法对废用性骨质疏松症的防治作用可能与降低骨骼与肌肉中Smad2/3、SP1蛋白表达有关。展开更多
SMAD家族成员2(SMAD Family Member 2,SMAD2)基因是SMADs家族的一员,也是转化生长因子-β(Transforming Growth Factor Betas,TGF-β)细胞内信号转导通路中重要的介导因子,近年发现其在多种动物中可以影响卵泡颗粒细胞的发育,而在鸡上...SMAD家族成员2(SMAD Family Member 2,SMAD2)基因是SMADs家族的一员,也是转化生长因子-β(Transforming Growth Factor Betas,TGF-β)细胞内信号转导通路中重要的介导因子,近年发现其在多种动物中可以影响卵泡颗粒细胞的发育,而在鸡上尚未发现有相关研究。本研究利用荧光定量PCR(qPCR)探究SMAD2基因在黄羽胡须母鸡卵泡发育过程中的表达规律,通过免疫荧光试验鉴定分离的小黄卵泡颗粒细胞,并检测SMAD2基因过表达情况。结果发现SMAD2在选择前卵泡中表达量较低,且随卵泡发育表达量逐级增加,在F5卵泡中表达量显著升高,随着卵泡的发育,SMAD2基因的表达量逐渐降低。将构建成功的过表达载体pcDNA3.1-SMAD2-EGFP转染至颗粒细胞中,结果发现抗缪勒氏管激素(Anti-Mullerian Hormone,AMH)的相对表达量极显著降低,推测SMAD2通过降低卵泡颗粒细胞AMH表达量来影响卵泡发育。本研究为进一步研究鸡SMAD2基因的功能提供参考依据,也为研究蛋鸡卵巢卵泡发育提供了理论基础。展开更多
文摘SMAD家族成员2(SMAD Family Member 2,SMAD2)基因是SMADs家族的一员,也是转化生长因子-β(Transforming Growth Factor Betas,TGF-β)细胞内信号转导通路中重要的介导因子,近年发现其在多种动物中可以影响卵泡颗粒细胞的发育,而在鸡上尚未发现有相关研究。本研究利用荧光定量PCR(qPCR)探究SMAD2基因在黄羽胡须母鸡卵泡发育过程中的表达规律,通过免疫荧光试验鉴定分离的小黄卵泡颗粒细胞,并检测SMAD2基因过表达情况。结果发现SMAD2在选择前卵泡中表达量较低,且随卵泡发育表达量逐级增加,在F5卵泡中表达量显著升高,随着卵泡的发育,SMAD2基因的表达量逐渐降低。将构建成功的过表达载体pcDNA3.1-SMAD2-EGFP转染至颗粒细胞中,结果发现抗缪勒氏管激素(Anti-Mullerian Hormone,AMH)的相对表达量极显著降低,推测SMAD2通过降低卵泡颗粒细胞AMH表达量来影响卵泡发育。本研究为进一步研究鸡SMAD2基因的功能提供参考依据,也为研究蛋鸡卵巢卵泡发育提供了理论基础。
