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LCWE诱导的小鼠川崎病模型中sEPCR、vWF、α-SMA、SM22α的表达与冠状动脉病变的观察
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作者 庞现勇 钱翠平 +2 位作者 郑丽云 王琼琼 赵胜 《临床医学进展》 2025年第6期1639-1645,共7页
目的:观察LCWE诱导川崎病模型小鼠血浆中可溶性内皮细胞蛋白C受体(Soluble endothelial cell protein C receptor, sEPCR)、血管性血友病因子(von Willebrand factor, vWF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、平滑... 目的:观察LCWE诱导川崎病模型小鼠血浆中可溶性内皮细胞蛋白C受体(Soluble endothelial cell protein C receptor, sEPCR)、血管性血友病因子(von Willebrand factor, vWF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、平滑肌22α (smooth muscle 22α, SM22α)的表达水平及与炎症反应和冠状动脉病变的关系。方法:4~6周龄C57BL/6雄性小鼠16只,分为模型组和对照组。模型组分为大、中、小三个剂量组,三组分别单次腹腔注射三种浓度(0.25 mg/ml, 0.5 mg/ml, 1.0 mg/ml)的干酪乳杆菌细胞壁提取物(Lactobacillus casei cell wall extract, LCWE) 1 ml来制备川崎病模型小鼠,对照组注射等容量PBS缓冲液。注射14 d后,采用ELISA方法检测4组小鼠血浆sEPCR、vWF、α-SMA、SM22α表达水平。采用苏木精–伊红染色法(HE染色法)检查冠状动脉及周围心肌组织、腹主动脉的病理变化。结果:与对照组相比,模型组小鼠冠状动脉及周围心肌组织、腹主动脉组织出现病理改变,且随着LCWE注射剂量的增加,浸润冠状动脉及周围心肌组织、腹主动脉组织的炎性细胞数量明显增加;炎症评分随着LCWE注射剂量的升高而升高;模型组小鼠血浆中sEPCR、vWF含量较对照组升高(P < 0.05),LCWE注射剂量越大则升高越明显;α-SMA、SM22α含量较对照组明显降低(P < 0.05) LCWE注射剂量越大则降低越明显。将四组小鼠的炎症评分与血浆中四种生物标志物含量进行相关性分析发现:炎症评分与血浆中sEPCR、vWF的含量呈正相关,与α-SMA、SM22α的含量呈负相关。结论:LCWE可以诱发小鼠腹主动脉和心肌损伤,并可能诱发小鼠动脉平滑肌细胞由收缩型向合成型转换,小鼠血浆中sEPCR、vWF、α-SMA、SM22α的表达水平与LCWE注射剂量存在相关性。 展开更多
关键词 川崎病 血管炎 冠状动脉损伤 小鼠 sEPCR VWF Α-SMA sm22α
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子宫平滑肌细胞SM22-α基因的pEGFP-C3载体构建及siRNA筛选 被引量:1
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作者 胡灵玉 周昌菊 +4 位作者 谷永红 杨益民 丁小凤 周芳亮 贺琼芝 《生命科学研究》 CAS CSCD 2010年第2期146-149,共4页
为研究SM22-α基因在子宫平滑肌中作用机制提供实验基础,通过筛查siRNA有效序列,来构建含SM22-α基因的pEGFP-C3-SM22-α载体.首先构建含有SM22-α基因的pEGFP-C3载体;其次利用FT293细胞并采用Western-bolt检测SM22-α蛋白表达的改变,... 为研究SM22-α基因在子宫平滑肌中作用机制提供实验基础,通过筛查siRNA有效序列,来构建含SM22-α基因的pEGFP-C3-SM22-α载体.首先构建含有SM22-α基因的pEGFP-C3载体;其次利用FT293细胞并采用Western-bolt检测SM22-α蛋白表达的改变,筛查到siRNA有效序列;得到含SM22-α基因pEGFP-C3-SM22-α载体和干扰SM22-α表达蛋白的siRNA有效片段,成功干扰SM22-α蛋白在子宫平滑肌中的表达. 展开更多
关键词 子宫平滑肌细胞 sm22-α基因 pEGFP-C3-sm22-α载体 SIRNA
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SM22启动SCAP真核表达质粒的构建及其在CHO细胞中的表达 被引量:3
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作者 王媛媛 胡接力 +3 位作者 崔静 黄爱龙 阮雄中 陈压西 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期114-120,共7页
为建立平滑肌特异的固醇调节元件结合蛋白(SREBP)的裂解激活蛋白(SCAP)超表达的转基因小鼠,深入探讨SCAP的功能,本实验构建了由平滑肌特异蛋白SM22启动子(pSM22)启动仓鼠SCAP443位点突变体——SCAP(D443N)的真核表达质粒,并在仓鼠卵巢细... 为建立平滑肌特异的固醇调节元件结合蛋白(SREBP)的裂解激活蛋白(SCAP)超表达的转基因小鼠,深入探讨SCAP的功能,本实验构建了由平滑肌特异蛋白SM22启动子(pSM22)启动仓鼠SCAP443位点突变体——SCAP(D443N)的真核表达质粒,并在仓鼠卵巢细胞(CHO)验证其表达。利用巢式PCR从小鼠肝脏组织提取的基因组中扩增得到pSM22基因。先将其插入pMD-T载体,构建T-SM22,对pSM22测序后,通过双酶切将pSM22克隆到pGL3-control-Luc中,成为pGL3-SM22-Luc。转染pGL3-SM22-Luc到血管平滑肌(VSMCs)中,通过检测荧光素酶(Luc)值观察pSM22在VSMCs内的启动活性。利用PCR从pTK-HSV-SCAP(D443N)质粒中扩增出SCAP(D443N)后克隆入pGL3-control中,成为pGL3-SCAP。然后再将pSM22克隆入pGL3-SCAP中,成为表达质粒pGL3-SM22-SCAP(D443N)。转染表达质粒到CHO细胞,用real-timePCR和Western blotting验证SCAP(D443N)的表达。结果证实pSM22在体外VSMCs中能启动Luc的表达;表达质粒pGL3-SM22-SCAP(D443N)酶切及测序结果正确;将其转染到CHO细胞后,与转染pGL3-control的对照细胞相比SCAP(D443)mRNA和蛋白表达显著增强。 展开更多
关键词 sm22 启动子 SREBP裂解激活蛋白 质粒构建 基因表达 转染
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SM22α在细胞骨架组构及血管重塑中的作用 被引量:10
4
作者 史建红 温进坤 韩梅 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期211-215,共5页
血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化是动脉粥样硬化、高血压和血管成形术后再狭窄等血管重塑性疾病的共同病理生理过程。VSMC表型转化过程中平滑肌特异基因的表达变化和细胞骨架的组构是当前研究的热点问题之一。平滑肌22α(SM22α)是近年发... 血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化是动脉粥样硬化、高血压和血管成形术后再狭窄等血管重塑性疾病的共同病理生理过程。VSMC表型转化过程中平滑肌特异基因的表达变化和细胞骨架的组构是当前研究的热点问题之一。平滑肌22α(SM22α)是近年发现的一种VSMC分化标志物,其表达具有平滑肌组织特异性和细胞表型特异性,该蛋白作为一种肌动蛋白细胞骨架相关蛋白参与VSMC骨架组构和收缩调节。本文就SM22α的结构特征及其在VSMC骨架组构和血管重塑中的作用机制进行综述。 展开更多
关键词 sm22α 细胞骨架 血管重塑 平滑肌细胞表型
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SM22α:血管平滑肌细胞分化的分子标志 被引量:14
5
作者 程云会 韩梅 温进坤 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期281-284,共4页
SM22α是一种分化型血管平滑肌细胞(VSMC)的标志基因,编码一种22 kDa的收缩调节蛋白。由于SM22α基因结构短小,表达具有VSMC特异性、调控机制较为清楚,因而被广泛用于VSMC发育分化的研究。利用该基因的表达调控特征,设计可在VSMC中高表... SM22α是一种分化型血管平滑肌细胞(VSMC)的标志基因,编码一种22 kDa的收缩调节蛋白。由于SM22α基因结构短小,表达具有VSMC特异性、调控机制较为清楚,因而被广泛用于VSMC发育分化的研究。利用该基因的表达调控特征,设计可在VSMC中高表达目的蛋白的人工启动子,是心血管病基因治疗的新策略。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 分化 分子标志 sm22α 收缩调节蛋白
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异牛肝菌素通过阻断SM22α泛素化降解抑制血管平滑肌细胞表型转化 被引量:4
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作者 吕品 范素芳 +4 位作者 宋楠 王璐琪 孙勇 赵俊霞 张岩 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第15期208-214,共7页
从黄乳粘盖牛肝菌(Suillus flavus)中分离得到的异牛肝菌素(iso-suillin)具有显著的抗肿瘤活性,但其在心血管系统的功效尚不明确。本研究用不同浓度的异牛肝菌素预处理原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)24 h或48 h... 从黄乳粘盖牛肝菌(Suillus flavus)中分离得到的异牛肝菌素(iso-suillin)具有显著的抗肿瘤活性,但其在心血管系统的功效尚不明确。本研究用不同浓度的异牛肝菌素预处理原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)24 h或48 h后,再采用血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)-BB处理细胞,细胞计数法检测VSMC增殖活性;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blot分析检测蛋白表达情况;免疫沉淀检测平滑肌22 alpha(smooth muscle 22 alpha,SM22α)磷酸化和泛素化水平。结果显示,异牛肝菌素显著抑制PDGF-BB引发的VSMC增殖;上调分化标志蛋白SM22α表达,下调增殖相关蛋白PCNA表达;抑制SM22α磷酸化及其泛素化降解,且该过程可能与其阻断蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)δ的活性有关。通过以上结果推测,异牛肝菌素通过抑制PKCδ的活性,降低SM22α磷酸化水平,阻止SM22α泛素化降解,进而抑制VSMC表型转化,发挥血管保护的功能。 展开更多
关键词 异牛肝菌素 血管平滑肌细胞 表型转化 平滑肌22α(sm22α)
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重组SM22α C端肽段促进细胞骨架重构 被引量:3
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作者 史建红 郑斌 +2 位作者 孟芳 温进坤 韩梅 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期370-374,共5页
目的:探讨SM22αC端功能域肽段与细胞骨架F-actin聚合的关系,明确SM22α在血管平滑肌细胞(VSMC)骨架重构中的作用。方法:构建GST-SM22αC端功能域融合蛋白原核表达质粒pGEX3X-SM22α,诱导E coli高效表达可溶性GST-SM22α融合蛋白,制备抗... 目的:探讨SM22αC端功能域肽段与细胞骨架F-actin聚合的关系,明确SM22α在血管平滑肌细胞(VSMC)骨架重构中的作用。方法:构建GST-SM22αC端功能域融合蛋白原核表达质粒pGEX3X-SM22α,诱导E coli高效表达可溶性GST-SM22α融合蛋白,制备抗SM22α抗体,VSMC蛋白分步提取及Western blot检测F-actin/G-actin中SM22α的含量变化,GST-pull down分析和免疫共沉淀检测SM22α与actin的相互作用,细胞免疫双荧光染色观察SM22α和actin在VSMC中的定位关系。结果:所构建的pGEX3X-SM22α原核表达质粒,在0.5mmol/LIPTG,30℃诱导6h条件下,表达可溶性GST-SM22α融合蛋白的水平最高,用纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔获得的抗血清效价为1∶16。免疫双荧光染色和蛋白分步提取分析结果表明,在VSMC再分析过程中,SM22α与F-actin共定位,GSTpull down分析和免疫共沉淀结果均显示,SM22α通过C端功能域与F-actin相互作用而参与细胞骨架的重构;但是,SM22α与G-actin的结合能力较弱。结论:本研究重组得到的SM22αC端功能域具有与F-actin结合的活性,SM22α通过该区域与actin相互作用而参与细胞骨架重构。 展开更多
关键词 sm22α 可溶性表达 细胞骨架 血管平滑肌
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哈萨克族食管鳞癌组织中SM22α的表达及其临床意义 被引量:2
8
作者 董娟娟 苗娜 +6 位作者 汪慧 王维娜 张艳 张亚楼 杨立 严媚 陈晓 《新疆医科大学学报》 CAS 2017年第3期396-398,404,共4页
目的探讨哈萨克族食管鳞癌组织中SM22α的表达情况及其临床意义。方法用免疫组织化学技术对筛选出的食管鳞癌组织中的差异蛋白SM22α进行验证,并结合临床病理参数对162例石蜡包埋食管鳞癌组织及50例食管黏膜正常组织中SM22α表达情况进... 目的探讨哈萨克族食管鳞癌组织中SM22α的表达情况及其临床意义。方法用免疫组织化学技术对筛选出的食管鳞癌组织中的差异蛋白SM22α进行验证,并结合临床病理参数对162例石蜡包埋食管鳞癌组织及50例食管黏膜正常组织中SM22α表达情况进行分析。结果SM22α在食管鳞癌组织中的阳性表达率(87.0%)高于食管正常黏膜组织(36.0%),差异有统计学意义(P<0.05);浸润深度(χ~2=8.078,P=0.044)、淋巴结是否转移(χ~2=6.420,P=0.012)与SM22α在食管鳞状细胞癌肿瘤组织中阳性表达存在相关性(P<0.05)。结论 SM22α可能参与了食管鳞状细胞癌的发生、发展。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 淋巴结转移 sm22α
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采用SM22启动子调节荧光蛋白的策略分选和鉴定人前列腺平滑肌细胞与成纤维细胞 被引量:1
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作者 王春雨 周颖 +4 位作者 张智松 阎春和 吴荃 石建党 张琚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期74-79,共6页
平滑肌细胞的数量、表型以及在间质细胞中所占的比例在前列腺间质增生的发生和发展中占有重要的地位.获得纯的平滑肌细胞和成纤维细胞,研究它们基因表达的差异,有助于进一步揭示前列腺增生的分子病因学.构建不同长度的SM22启动子,测定... 平滑肌细胞的数量、表型以及在间质细胞中所占的比例在前列腺间质增生的发生和发展中占有重要的地位.获得纯的平滑肌细胞和成纤维细胞,研究它们基因表达的差异,有助于进一步揭示前列腺增生的分子病因学.构建不同长度的SM22启动子,测定荧光素酶活性.采用了基于启动子特异性激活红绿色荧光蛋白表达结合流式细胞分选的策略,体外分离纯的平滑肌细胞和成纤维细胞.启动子活性实验结果表明,1396bp的人SM22启动子具有平滑肌细胞特异性和较高的相对活性.构建了红绿荧光蛋白的表达载体pDual-color,在此载体中,RFP的表达受1396bp的SM22启动子调控,GFP的组成型表达受CMV启动子控制.用流式细胞仪分选GFP+/RFP+和GFP+/RFP-细胞,提取总RNA,进行实时定量RT-PCR.结果显示,在分选获得的GFP+/RFP+细胞比GFP+/RFP-细胞的SM22和SMMHC表达水平高10倍以上.提示,基于启动子特异性可以在体外分离纯的平滑肌细胞和成纤维细胞. 展开更多
关键词 前列腺增生 平滑肌细胞 成纤维细胞 sm22启动子
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细胞骨架相关蛋白SM22α与肿瘤 被引量:2
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作者 史建红 崔乃鹏 石少慧 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期204-206,共3页
平滑肌22α(smooth muscle 22 alpha,SM22α)蛋白是一种细胞骨架相关蛋白,其在种属间的高度同源性和进化上的高度保守性提示了其重要的生物学意义。最新研究发现,SM22α在多种肿瘤组织中表达异常,该蛋白除可通过与肌动蛋白相互作用参与... 平滑肌22α(smooth muscle 22 alpha,SM22α)蛋白是一种细胞骨架相关蛋白,其在种属间的高度同源性和进化上的高度保守性提示了其重要的生物学意义。最新研究发现,SM22α在多种肿瘤组织中表达异常,该蛋白除可通过与肌动蛋白相互作用参与细胞骨架重构外,还可作为信号分子参与细胞生长,细胞外基质降解和血管生成。其作为一种新型抑癌基因,在肿瘤发生、发展中的作用日益成为人们关注的焦点。本文就SM22α的结构特征、表达特点及其与肿瘤的关系进行综述。 展开更多
关键词 sm22α蛋白 细胞骨架相关蛋白 肿瘤 抑癌基因
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SM22α在血管平滑肌细胞中的作用 被引量:2
11
作者 侯乐伟 廖明芳 景在平 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第23期4553-4555,共3页
平滑肌22α(SM22α)是平滑肌细胞(VSMC)骨架相关蛋白,通过与肌动蛋白的作用参与VSMC骨架重构,是近年发现的一种VSMC分化标志物,其表达具有平滑肌组织特异性和细胞表型特异性。血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化是动脉粥样硬化、高血压等血... 平滑肌22α(SM22α)是平滑肌细胞(VSMC)骨架相关蛋白,通过与肌动蛋白的作用参与VSMC骨架重构,是近年发现的一种VSMC分化标志物,其表达具有平滑肌组织特异性和细胞表型特异性。血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化是动脉粥样硬化、高血压等血管重塑性疾病的共同病理生理过程。VSMC表型转化过程中平滑肌特异基因的表达变化和细胞骨架的重构是当前研究的热点问题之一。本文就SM22α的结构特征及其在VSMC中的作用机制进行综述。 展开更多
关键词 sm22α 血管平滑肌细胞表型 细胞骨架
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SM22α基因启动子区低甲基化与胃癌发生发展的相关性研究 被引量:1
12
作者 马国明 左卫微 +5 位作者 梁磊 贾纯亮 张磊 刘远廷 李景武 赵辉 《河北医药》 CAS 2020年第10期1563-1565,1571,共4页
目的探讨平滑肌蛋白22α(SM22α)基因启动子区甲基化状态及mRNA表达在胃癌发生中的作用,为胃癌早期诊断和治疗寻找新的靶点。方法甲基化特异性聚合酶链反应检测56例胃癌及其对应的正常癌旁组织中SM22α基因启动子区甲基化状态;荧光实时... 目的探讨平滑肌蛋白22α(SM22α)基因启动子区甲基化状态及mRNA表达在胃癌发生中的作用,为胃癌早期诊断和治疗寻找新的靶点。方法甲基化特异性聚合酶链反应检测56例胃癌及其对应的正常癌旁组织中SM22α基因启动子区甲基化状态;荧光实时定量PCR技术检测胃癌组织及正常癌旁组织中SM22α基因mRNA的表达。比较胃癌组织和正常癌旁组织中SM22α基因启动子区甲基化状态及mRNA表达的差异情况,并分析它们与胃癌患者临床病理特征之间的关系。结果胃癌组织中SM22α基因启动子区甲基化率显著低于正常癌旁组织(P<0.05),其mRNA表达水平显著高于正常癌旁组织(P<0.05),且甲基化阳性的胃癌组织中SM22α基因mRNA表达量显著低于甲基化阴性的胃癌组织(P<0.05)。胃癌组织中SM22α基因启动子区甲基化状态及、mRNA表达水平与胃癌患者的淋巴结转移呈显著相关(P<0.05)。结论SM22α基因启动子区的低甲基化导致其表达升高可能在胃癌发生、发展中起重要作用,SM22α有可能成为胃癌分子诊断和治疗的重要靶点。 展开更多
关键词 胃癌 甲基化 sm22α MSP
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腹主动脉瘤组织中SM22α与骨桥蛋白以及细胞骨架蛋白表达的改变 被引量:2
13
作者 温世奇 陈泉 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期731-735,共5页
目的:探讨SM22α与骨桥蛋白(OPN)以及细胞骨架蛋白α-SMA,β-tubulin,desmin在腹主动脉瘤(AAA)组织中的表达改变。方法:采集正常人腹主动脉壁和AAA动脉壁组织,分别采用real-time PCR与免疫组织化学法检测两种组织中SM22α,OPN,α-SMA,β... 目的:探讨SM22α与骨桥蛋白(OPN)以及细胞骨架蛋白α-SMA,β-tubulin,desmin在腹主动脉瘤(AAA)组织中的表达改变。方法:采集正常人腹主动脉壁和AAA动脉壁组织,分别采用real-time PCR与免疫组织化学法检测两种组织中SM22α,OPN,α-SMA,β-tubulin和desmin的mRNA与蛋白表达水平。结果:与正常腹主动脉壁组织比较,AAA组织中的SM22α,α-SMA,β-tubulin和desmin的mRNA与蛋白水平均明显降低,且SM22α表达降低最为明显,而OPN的mRNA与蛋白的表达明显升高(均P<0.05)。结论:在AAA组织中,SM22α与细胞骨架蛋白表达降低,OPN升高,这些改变与AAA的发生可能有密切关系。 展开更多
关键词 主动脉瘤 sm22α 骨桥蛋白质 细胞骨架
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SM22α抑制球囊损伤诱导的新生内膜形成 被引量:1
14
作者 苗穗兵 董丽华 +1 位作者 温进坤 韩梅 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2010年第4期541-545,共5页
观察外源性SM22α对球囊损伤诱导的大鼠颈总动脉新生内膜形成的影响,并探讨其机制。雄性SD大鼠经球囊剥脱颈总动脉内皮后随机分为3组:未感染组、pAd组和pAd-SM22α组。术后14天取颈总动脉标本,HE染色观察血管内膜增生情况,用Western blo... 观察外源性SM22α对球囊损伤诱导的大鼠颈总动脉新生内膜形成的影响,并探讨其机制。雄性SD大鼠经球囊剥脱颈总动脉内皮后随机分为3组:未感染组、pAd组和pAd-SM22α组。术后14天取颈总动脉标本,HE染色观察血管内膜增生情况,用Western blot和免疫组化方法检测外源性SM22α、PCNA和p27在血管壁中的表达水平,以及Raf-1、MEK1/2和ERK1/2的磷酸化水平。实验结果显示,外源性SM22α在血管壁中得到稳定表达;过表达SM22α可显著抑制球囊损伤诱导的血管新生内膜的增厚,与pAd组比较,内膜/中膜比值(I/M)降低70%;Western blot结果显示,在pAd-SM22α组中增殖标志物PCNA表达水平降低(P<0.05),而增殖抑制蛋白p27表达水平增高(P<0.05),同时伴有增殖相关信号转导分子Raf-1、MEK1/2和ERK1/2的磷酸化水平降低(P<0.05)。结果提示,过表达SM22α可抑制球囊损伤诱导的血管内膜增生,其机制可能与阻断Raf-1-MEK1/2-ERK1/2通路的级联活化有关。 展开更多
关键词 sm22α 在体感染 球囊损伤 新生内膜
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SM22α、α-SMA、OPN在人胸主动脉夹层中的表达及血管平滑肌细胞表型的变化 被引量:2
15
作者 温世奇 狐鸣 +2 位作者 陈泉 高瑞玉 彭彩丽 《甘肃医药》 2013年第8期577-579,共3页
目的:探讨平滑肌22α(SM22α)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、骨桥蛋白(OPN)在人胸主动脉夹层中的表达及血管平滑肌细胞(VSMC)表型的变化。方法:收集人胸主动脉夹层(TAD)动脉壁组织和正常人胸主动脉壁组织标本,采用免疫组化方法观察SM22α、... 目的:探讨平滑肌22α(SM22α)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、骨桥蛋白(OPN)在人胸主动脉夹层中的表达及血管平滑肌细胞(VSMC)表型的变化。方法:收集人胸主动脉夹层(TAD)动脉壁组织和正常人胸主动脉壁组织标本,采用免疫组化方法观察SM22α、α-SMA、OPN的表达。结果:与正常主动脉组相比,TAD组SM22α、α-SMA表达水平显著降低,OPN表达显著增高。结论:TAD主动脉壁VSMC表型由收缩型转变为增殖型为主,从而导致血管壁中膜性状改变,最终导致主动脉夹层病变。 展开更多
关键词 sm22a Α-SMA OPN 血管平滑肌细胞 人胸主动脉夹层
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利用RT-PCR检测SM22基因在胃癌及正常组织中表达差异的生物学意义
16
作者 吕中全 闫晓红 +1 位作者 李文梅 吕有勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期1186-1188,共3页
目的:检测SM22(smoothmuscle22)mRNA在人胃癌及正常组织中的表达水平,探讨SM22基因与胃癌发生的关系,为进一步鉴定胃癌早期诊断筛查的标志物提供理论依据。方法:应用半定量RT-PCR检测42例胃癌组织及14例胃正常组织中SM22mRNA的表达水平... 目的:检测SM22(smoothmuscle22)mRNA在人胃癌及正常组织中的表达水平,探讨SM22基因与胃癌发生的关系,为进一步鉴定胃癌早期诊断筛查的标志物提供理论依据。方法:应用半定量RT-PCR检测42例胃癌组织及14例胃正常组织中SM22mRNA的表达水平并比较其差异。结果:在胃癌组织SM22mRNA的阳性表达率为92.86%(39/42),在正常组织中的阳性表达率为71.43%(10/14),差异无统计学意义(P>0.05)。半定量光密度计数后SM22mRNA表达量在胃癌组织和正常组织中分别为0.86±0.14和0.32±0.22,差异有统计学意义(P<0.01)。在14对胃癌与正常配对标本中,有10对胃癌及正常组织中SM22mRNA均表达阳性而且在肿瘤组织中表达量明显高于正常组织,有4对标本中SM22mRNA只在胃癌组织中表达而在正常组织中表达阴性。结论:SM22mRNA在胃癌组织中的表达量高于正常组织,提示其在胃癌发生发展中可能起一定作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤 sm22 RT—PCR
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miR-342-3p抑制SM22α启动子的转录活性
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作者 尚丹 李美红 +2 位作者 许馨 曹山虎 孙绍光 《中国医药导报》 CAS 2016年第24期12-15,20,共5页
目的探究miR-342-3p是否通过作用于SM22α启动子,从转录水平调控SM22α的表达。方法通过软件RNAhybrid分析发现,大鼠SM22α启动子中存在一个miR-342-3p的识别位点。将miR-342-3p mimics与报告基因载体p GL3-SM22α-Promoter共转染293A细... 目的探究miR-342-3p是否通过作用于SM22α启动子,从转录水平调控SM22α的表达。方法通过软件RNAhybrid分析发现,大鼠SM22α启动子中存在一个miR-342-3p的识别位点。将miR-342-3p mimics与报告基因载体p GL3-SM22α-Promoter共转染293A细胞,通过检测荧光素酶活性来分析miR-342-3p对SM22α启动子转录活性的影响。将miR-342-3p mimics转染血管平滑肌细胞,采用q RT-PCR和Western blot分别检测SM22αm RNA和蛋白质水平,分析miR-342-3p对血管平滑肌细胞中SM22α表达的影响。结果与miR-control相比,miR-342-3p能够使SM22α启动子转录活性降低(0.54±0.03)倍,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-control相比,miR-342-3p能够使血管平滑肌细胞中SM22αm RNA水平降低(0.45±0.04)倍,SM22α蛋白质水平下降(0.41±0.05)倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-342-3p通过抑制SM22α启动子活性,从转录水平降低SM22α的表达,为miRNA调控血管平滑肌细胞表型转化研究提供了新角度。 展开更多
关键词 MICRORNA miR-342-3p sm22α 启动子
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SM22α启动子慢病毒载体的构建及感染研究
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作者 胡少勃 宋自芳 +5 位作者 郑启昌 李伟 胡青钢 熊俊 张勇 尚丹 《临床外科杂志》 2009年第10期662-664,共3页
目的 构建以SM22α启动子驱动EGFP表达的慢病毒载体,研究此载体在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)中表达的效率和特异性.方法 从小鼠的基因组中采用PCR扩增SM22α启动子,将目的基因连接至T载体,并进行测序鉴定,... 目的 构建以SM22α启动子驱动EGFP表达的慢病毒载体,研究此载体在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)中表达的效率和特异性.方法 从小鼠的基因组中采用PCR扩增SM22α启动子,将目的基因连接至T载体,并进行测序鉴定,将目的基因重组至pGC-FU载体,三质粒系统采用脂质体介导转染293T细胞进行病毒包装,体外感染VSMCs,大鼠动脉内皮细胞,人乳腺癌细胞系SK-BR-3,荧光显微镜观察EGFP的表达情况.结果 PCR扩增得到的SM22α启动子经测序证实正确;成功构建了SM22α启动子驱动EGFP的慢病毒载体LV-SM22α-EGFP,SM22α启动子能调控EGFP在VSMCs中高效表达,感染效率在95%以上,在血管内皮细胞和人乳腺癌细胞系SK-BR-3中不表达,对照慢病毒组EGFP在三种细胞中均表达,在VSMCs的感染效率在30%左右,且表达较低.结论 SM22α启动子能够特异性驱动EGFP在VSMCs中表达,LV-SM22α-EGFP能作为研究血管疾病的良好基因转移载体. 展开更多
关键词 sm22α启动子 慢病毒 血管平滑肌细胞 聚合酶链式反应
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SM22α启动子及增强子应用于冠状动脉旁路移植血管防治再狭窄的效应
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作者 陈丽 邓勇志 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期919-922,共4页
背景:大隐静脉是冠状动脉旁路移植术最常用的血管材料,但移植血管新生内膜增生和随后发生的粥样硬化所致的移植血管狭窄严重影响远期疗效。目的:综合分析移植血管狭窄的病理生理及其机制,平滑肌细胞特异性SM22α启动子、SMHC增强子的构... 背景:大隐静脉是冠状动脉旁路移植术最常用的血管材料,但移植血管新生内膜增生和随后发生的粥样硬化所致的移植血管狭窄严重影响远期疗效。目的:综合分析移植血管狭窄的病理生理及其机制,平滑肌细胞特异性SM22α启动子、SMHC增强子的构建和应用等。方法:以SM22α promoter,SMHC enhancer,stenosis,Pi3k,RNAi/RNA interference为检索词,检索PubMed数据库、HighWire数据库和CNKI数据库(1981-01/2009-10)。文献检索语种限制为英文和中文。纳入与移植血管狭窄,血管平滑肌特异性SM22α启动子及其增强子相关的文献。排除综述文献,重复研究类文献。以血管平滑肌细胞的增殖和凋亡,移植血管新生内膜的增生情况,以及移植血管血栓形成的程度为评价指标。结果与结论:计算机初检得到8730篇文献,根据纳入排除标准,对SM22α启动子及移植血管狭窄进行分析。冠状动脉旁路移植后新生内膜增生和血栓形成严重影响远期疗效。PI3K-Akt-mTOR信号通路是调节细胞增殖、迁移和生存的关键通路。局部shRNA干扰靶向沉默Pik3cb可下调PI3K信号通路,有效防治移植血管新生内膜增生。采用血管平滑肌细胞特异性SM22α启动子构建靶向大鼠Pik3cb基因的干扰RNA真核表达载体,既可抑制新生内膜增生,又可防治血栓的形成。利用血管平滑肌细胞特异性的SM22α基因,将SM22α启动子/增强子应用于移植血管,为防治移植血管狭窄和血栓形成提供新的思路。 展开更多
关键词 新生内膜增生 血管平滑肌细胞 sm22α启动子 冠状动脉旁路移植 再狭窄
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SM22-α蛋白结构与功能的生物信息学分析
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作者 门杰 李昊 +6 位作者 许婷 姚思羽 刘致宇 邹双玲 马佳 相晨敏 王文娟 《生物技术》 CAS 2022年第6期684-692,共9页
[目的]通过生物信息学分析手段对SM22-α蛋白结构与作用进行系统性分析。[方法]从NCBI数据库中获取SM22-α蛋白的基本信息,应用NCBI GenBank、ExPAsy、TMHMM Server v.2.0、NetPhos 3.1 Server、IEDB、SIGNALP 5.0 Server等生物信息学... [目的]通过生物信息学分析手段对SM22-α蛋白结构与作用进行系统性分析。[方法]从NCBI数据库中获取SM22-α蛋白的基本信息,应用NCBI GenBank、ExPAsy、TMHMM Server v.2.0、NetPhos 3.1 Server、IEDB、SIGNALP 5.0 Server等生物信息学分析软件对SM22-α蛋白的氨基酸序列、理化性质、跨膜结构、亲水/疏水性、功能位点、信号肽、序列同源性、糖基化和磷酸化位点、空间结构以及抗原表位进行分析。[结果]SM22-α蛋白编码201个氨基酸,为碱性蛋白,其等电点为8.85,不稳定指数为31.85,并将其归为稳定蛋白。其平均亲水系数为-0.607,为亲水性蛋白。根据IEDB在线软件发现SM22-α蛋白序列的第4-31、39-50、70-89、105-111、116-122、138-197存在B细胞抗原表位。利用HLA-A*0.2:0.1算法预测SM22-α蛋白序列第61和130位序列表面存在2个T细胞抗原表位;若利用HLA-DRBI*0401算法预测则第142位序列存在1个T细胞抗原表位。SM22-α蛋白的二级结构中α螺旋占46.77%,延伸链占6.47%,β-转角占4.48%,无规则卷曲占42.29%。且通过生物信息学分析可知SM22-α蛋白在不同物种之间的同源性为97.0%~68.7%。[结论]SM22-α为碱性、稳定、亲水性胞外蛋白,且蛋白表面含有T、B细胞抗原表位,可为其抗原性药物研究提供理论参考。 展开更多
关键词 sm22-α蛋白 动脉粥样硬化 生物信息学分析 理化性质
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